水稻粒长基因的研究进展

水稻粒长基因的研究进展

作者：郑跃滨 杨琬祺 赵海燕 王兰

来源：《安徽农业科学》2020年第15期

摘要粒长是水稻重要的农艺性状之一，既影响水稻产量，又影响稻米品质。水稻的粒长是数量性状，遗传机理复杂。对控制水稻粒长基因的QTL定位、粒长基因的克隆与功能分析、粒长基因的相互作用及粒长基因在分子育种上的应用等方面进行综述，旨在为水稻的粒形育种与品质改良提供参考。

关键词水稻;粒长基因;QTL;克隆

中图分类号S511文献标识码A

文章编号0517-6611（2020）15-0004-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.15.002

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Research Advances of Genes on Controlling Rice Grain Length

ZHENG Yuebin1，YANG Wanqi2，ZHAO Haiyan1 et al

（1.College of Agriculture，South China Agricultural University，Key Laboratory of

Molecular Breeding in Guangdong Province，Guangzhou，Guangdong ;510642;2.College of Physics

and Electronic Engineering，Harbin Normal University，Harbin，Heilongjiang 150042）

AbstractGrain length is one of the important agronomic traits of rice，which affects both rice

yield and rice quality.Grain length of rice is a quantitative trait and its genetic mechanism is very

complex.The paper summarized the research results of QTLs mapping，gene cloning and functional

analysis，and genes interactions of rice grain length genes，the application of grain length genes in

molecular breeding，in order to provide reference for grain shape breeding and quality improvement

of rice.

Key wordsRice;Grain length genes;QTL;Cloning

基金項目广东省教育厅科技创新项目（2013KJCX0035）。

作者简介郑跃滨（1995—），男，河北抚宁人，硕士研究生，研究方向：水稻遗传育种。*通信作者，副教授，博士，从事水稻分子遗传研究。

收稿日期2020-02-27;修回日期2020-04-20

粒长（grain length，GL）是水稻粒形的三大构成因素（粒长、粒宽、粒厚）之一。粒长、粒宽和粒厚对粒重的总影响力达94.4%，直接影响水稻的单产[1]，其中粒长对水稻粒重的贡献

更大[2]。研究表明，粒形细长的品种米质较好[3-4]。进行品质改良时，选育的稻米要求粒形较长、宽度较小、长宽比适中。因此，粒长也是稻米品质的一个重要指标。

从20世纪30年代开始，日本就开始对粳稻品种的矮化进行研究[5]，水稻矮秆基因及杂种优势的利用，实现了水稻产量的两次跨越[6]。但随着耕地面积的减少，人民生活水平的提高，现有的水稻单产与品质已不能满足人民生活的需求。改变水稻籽粒的形状，不仅能增加水稻的产量，还能提高稻米的品质。近年来，随着分子生物技术及测序技术的发展，通过改变水稻粒形来育种已越来越受到水稻育种家的重视。通过BSA重测序定位及KASP精细定位来定位水稻粒长基因，进而克隆该粒长基因，再通过基因编辑技术来改良籽粒形状，提高水稻产量，成为最新克隆基因的热点。研究表明，水稻谷粒粒形受多基因控制，属于数量遗传性状，遗传基础很复杂[7]，并且粒长基因以加性效应为主，同时还存在显性作用[8]。笔者对控制水稻粒长基因的QTL定位进行总结，并对已克隆粒长基因进行功能分析，以及已克隆粒长基因的相互作用和在当代分子育种上的应用进行深入探讨，以期为水稻粒形的分子育种提供帮助。

1控制粒长相关基因的QTL定位

随着水稻功能基因组学和重测序技术的快速发展，对粒长基因的定位越来越多。据不完全统计，目前已定位到与粒长相关的 QTLs 达120 个，以 3、2、1 和 10 号染色体上最多。赵明富等[9]对BC;3F;2进行QTL定位，结果发现控制粒长QTL（暂定名GL2（t））位于第2染色体，与RM530 连锁，遗传距离为4.1 cM，是个尚未报道的粒长显性主效QTL。高虹等[10]用小粒水稻材料“日本小黑稻”和大粒水稻材料“80018-TR161-2-1”及其F;2和F;2∶3家系检测到谷粒长度受1对隐性核基因控制，命名为GL3。将该基因定位在水稻第3号染色体上SSR标记PSM379和RM16之间，它们的遗传距离分别为4.0和11.2 cM。Shao等[11]利用粳稻品种D50和籼稻品种HB27构建的重组自交系，定位到粒长QTL qGL7-2，在InDel1和RM21945这2个标记之间278 kb的物理范围内。Bai等[12]用籼稻品种南阳占和粳稻品种川7构建的F;7∶8重组自交系群体RIL，发现4个影响粒长的QTL，分别定位于第3、7、10号染色体，其中一个微效QTL，qGL7被定位到一个InDel标记RID711和RM6389之间258 kb的范围内（以日本晴基因组序列为参照），且基因与InDel标记RID710和RID76共分离。曾瑞珍等[13]利用单片段代换系定位发现粒长QTL gl-3被定位于第3号染色体的SSR标记RM6146和PSM377之间，遗传距离分别为1.5和11.0 cM[14]。笔者利用小粒矮秆野生稻品系S18和长粒栽培稻品系KJ01组配定位群体F2，也定位了一个新的主效QTL，位于3号染色体上（结果未发表）。

由于不同亲本构建的不同群体以及环境的影响，被定位的这些QTLs，有些可能是同一位点。由于粒长基因遗传机制复杂，定位的QTLs很多，但迄今为止，已克隆和进行功能研究的QTLs不多。

2粒长相关基因克隆及功能分析

目前，已定位的这些QTLs中，其中有12个粒长基因进行了深入的功能研究，这些基因调控籽粒长度的机制不同（表1）。

尉鑫等[28]通过总结认为在内外颖过量表达PGL1，增加水稻谷粒的长度和重量，是一种结合DNA 的典型bHLH的抑制子。在内外颖过量表达PGL2 也同样可以使水稻谷粒的长度和重量增加[15]，对粒长的调控是与基因的表达水平相关。

GS2在显性QTL中，被定位到2号染色体上7.4 kb区间内部，编码生长调节因子（OsGRF4）。OsGRF4为一种转录调节因子，可能作为转录激活剂，增强转录活性。GS2被定位于细胞核表达，同时GS2中的一个突变位点使microRNA、OsmiR396c发生改变，导致表达量升高，GS2表达使细胞增大增多，从而使籽粒变长[17]。

GS3编码一个跨膜蛋白[29]，在长粒品种中第二个外显子处有一个碱基C突变为A，产生终止突变。为了证实GS3功能区是否在氨基端，即在OSR区，利用结构域缺失的方法，在水稻明恢63中，转入不同的缺失结构域，结果发现转化后植株粒形都变短，而没转化植株粒形无变化;同样，验证羧基端的功能，发现OSR的功能也会受到2个缺失结构域的抑制影响，转化到明恢63后粒形同样变短[30]。证实GS3对粒长负调控的功能，并且证明OSR是控制粒形的关键结构域，阐述了GS3基因不同结构域的功能与粒形自然变异之间的关联[19]。

qGL3在3号染色体上被用简单重复序列（SSR）标记定位到RM15551和RM15578之间，且95.57%的表型变异在N411×93-11 BC;2F;2群体之中，经过BC;2F;2群体的4个杂合单株筛选得到2 968个单株，在BC;2F;3的2 968个体之中，将区段定位缩小到插入缺失标记（InDel）XJ39与XJ26之间的46.6 kb之间。在该区域内有5个预测ORFs，并通过RT-PCR，发现仅表达ORF3和ORF4，而ORF1和ORF2编码反转录转座子蛋白，编码转座子的ORF5在水稻中不表达。并发现ORF4中存在的4个SNPs，其中前2个SNPs发生在第10个和第11个外显子上，从而导致从天冬氨酸变为谷氨酸和组氨酸变为酪氨酸。ORF4很可能是qGL3的候选基因，该ORF4编码的PP2A，因此被命名为OsPPKL1，属于一个小基因家族成员[20]。

GL3.2是利用大粒品种“南洋占”和小粒品种“川7”为亲本，并构建重组自交系群体，定位到一个主效QTL，发现这个主效QTL可以同时影响粒长与粒重。通过群体构建，相关的遗传分析及图位克隆，确定了候选基因GL3.2。由于GL3.2（X）-RNAi的存在，可以使候选基因GL3.2的表达得以抑制，将GL3.2（X）-RNAi转入到小粒材料中，发现转基因后的材料（6.3

mm）粒长比小粒材料（6.0 mm）长0.3 mm，并通过测序发现，致使2种粒型差异是由一个关键的SNP，转录提前终止所导致[21]。

Yu等[22]从504份栽培稻品种（Oryza ativa;L.）中筛选出了99个粒长QTL，其中13个经4个连锁引物验证，92个为新的粒长位点。克隆了一个新基因OsLG3，位于3号染色体上，它可以作为水稻籽粒長度的正调节因子，在不影响稻米品质的前提下提高水稻产量。并对283份地理范围的水稻材料启动子区进行序列分析，发现4个单倍型似乎与籽粒长度有关。进一步分

析表明，籼稻和粳稻中OsLG3等位基因的进化独立于不同的祖先和低的核苷酸多样性。系统发育分析表明，OsLG3在提高粳稻育种籽粒长度方面具有很大的潜在价值。OsLG3是一种很有前途的基因，可用于水稻品种改良的基因组DEP 1和GGC 2分别或与Gβ蛋白Rgb 1相互作用，使籽粒长度增加。

qTGW3控制水稻的粒长和重量。qTGW3通过编码OsSK41（也称为OsGSK5），GLYCOGEN SYNTHASE KINASE的成员，增加水稻籽粒长度和重量。OsSK41与AUXIN相互作用，使其磷酸化，从而形成OsARF4。OsSK41与OsARF4的共表达使OsARF4的积累增加，OsARF4存在水稻原生质体中，由于OsARF4的功能丧失导致籽粒增大。 分析表明，OsARF4和OsSK41还共同抑制了一组下游控制水稻籽粒发育过程的基因，包括一些生长素的响应基因，也会造成粒形的改变。因此，研究揭示了OsSK41在水稻籽粒中的重要作用，开发并提供新的候选基因，用于遗传改良水稻的产量并也可能应用在其他谷类作物中[23]。