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C18萃取小柱使用说明书

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C18萃取小柱使用说明
书
-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1
C18萃取小柱使用说明书
C18小柱使用方便、可再生使用，是一种样品处理的固相萃取装置，本小柱是美国通过GMP和ISO9002认证的WATRES公司生产，是一流的药物萃取装置。

一、介绍
此使用手册简单介绍小柱的使用和维护
C18小柱有五种型号供萃取使用，包括：Plus、Light、Classic、Vac和Vac Rc 五种柱型。

C18吸附剂包括c18\+c18\c8\+c2
二、固相萃取技术
样品处理是分析中最常用的步骤，C18小柱可减少样品处理时间，可做如下使用：
纯化：固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。

这样，当样品流出时，所选择的化合物（包括杂质）被留在萃取柱上。

微量萃取或浓缩：当分析物量在方法限量之下时，可浓缩分析物。

分离：依据样品不同极性进行梯度洗脱、提取样品、增加样品浓度。

溶解交换：如果样品难溶，可用合适的溶剂通过小柱吸附和洗提分析物。

三、C18萃取小柱的使用
下列是小柱使用的五个步骤，每一步不同但并非必须。

步骤1：准备样品——样品既可以是液相也可以是气相，如果是固相，样品上柱前必须溶解或提取。

步骤2：柱的活化或平衡——对于反相柱如C18来说，活化是必须的，先使用强溶剂润湿小柱固定相，再用弱溶剂平衡、活化小柱。

步骤3：上样——将样品装入萃取柱，此时，固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。

这样，当样品流出时，所选择的化合物（包括杂质）被留在萃取柱上。

步骤4：冲洗——用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。

步骤5：洗脱感兴趣的化合物——用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。

四、影响分离的因素
样品分离效果与流速和上载有关，下列是好的建议：
小柱的流速——如果样品流速太快，有效成分可能没留在吸附剂中，所以活化小柱时流速为5~10ml/分钟，使用型号为Light、Vac 1 cc和 Vac 3 cc 200mg和其它的离子交换柱上载和洗提样品时，采用流速为~1ml/分钟，其它小柱采用流速为2~10ml/分钟。

样品上载——小柱的上样量依赖于：样品结构、溶液体积、溶剂极性、吸附剂种类和数量以及样品的吸附性能。

五、小柱的贮存
小柱保存在密封塑料袋中可放置很长的时间，未使用的小柱如放于打开的塑料袋中，须将袋中的空气排掉，将袋口扎紧两次，用封口带密封，贮存于干燥器中。

六、其它
下列表格可作为不同萃取装置的溶剂强弱选择：
表1 固相萃取洗提溶剂
分离模式典型非极性溶剂典型极性溶剂
反相水或缓冲液，用有机溶剂如乙腈、甲醇或水/有机混溶剂
甲醇、乙腈可允许低浓缩。

正相正己烷二氯甲烷、甲醇。

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C18柱使用注意事项

C18柱使用注意事项

C18柱使用说明
1.先用乙腈流通清洗整个系统。

2.按色谱柱标明方向接上色谱柱，
(1)乙腈-水（95：5）冲10倍柱体积。

（流速可从0.1ml/min逐渐调大至
1.0ml/min）
(2)逐渐减小流速，暂停系统，换上做实验使用的流动相，起初速度也是0.1-0.2ml/min,逐渐增大至1.0ml/min,所需试剂为10倍柱体积。

（3）当系统平衡，基线平稳后，开始工作。

根据使用的流动相不同，平衡系统所需要的流动相体积为10-30倍柱体积。

【注：如果流动相中有缓冲盐，要记得在（2）之后，用乙腈-水（5：95）冲10倍柱体积，再进行第（3）步骤。

】
3.当工作结束后，要对色谱柱进行冲洗，方法如下：
乙腈-水（5：95）冲10倍柱体积（如果流动相不含缓冲盐此步骤可省略）梯度到乙腈-水（95：5）冲10倍柱体积。

如果无梯度功能系统，中间增加5倍柱体积的乙腈：水（50：50）冲洗步骤。

C18柱可储存在纯乙腈中，如果长时间不用，最好是有水存在，保存在乙腈-水（95：5）中，防止长时间不用，有机溶剂挥发严重，损害柱子。

SPEIC-C18柱的再次活化使用

SPEIC-C18柱的再次活化使用

一、SPEIC-C18柱的活化使用：
1.首先用注射器抽取3—5ml分析纯甲醇，连接C18柱，缓慢推注使甲醇连续滴出，甲醇回收可重复利用。

2.再用注射器抽取高纯水10ml，连接C18柱，缓慢推注使水连续滴出后，放置约2min；采用注射器，多次将C18柱中的水吹出，待用。

3.用注射器抽取样品约5ml，连接C18柱，及0.22um针筒过滤器，缓慢推注使样品连续滴出，开始约2ml样品弃去不用，收集后续样品至清洁容器中，待用。

注样检测。

二、SPEIC-C18柱的再次活化使用：
1.再次活化使用甲醇为首次活化的2至3倍量，约8—10ml；
2.使用高纯水的量为首次活化量的2至3倍；
3.活化放置时间约首次的2至3倍（5—6min）；
4.采用注射器，多次将C18柱中的水吹出，待用。

C柱使用指南

C柱使用指南

C18柱使用指南1、新柱在使用前需用纯有机试剂（如甲醇、乙腈）低流速冲洗，冲洗体积以20倍柱体积为宜，以便固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到巅峰状态；
2、使用时需在每日实验结束后冲洗色谱柱，尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积；
3、长期保存前要将色谱柱彻底冲洗，建议冲洗3-4小时以上，最后保存在纯有机试剂或高
比例的有机试剂溶液（如90%
甲醇水）中；
4、日常保存溶剂（即第二天需继续使用）尽量与3中相同；
5、由于C18柱（极性改性处理的除外）的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响，（Diamonsil2）由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%
6、色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效；
7、色谱柱压力骤升：通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲醇水低流速冲洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲醇或10%
甲醇水为流动相反冲色谱柱（将色谱柱反接，不接检测器），若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。

色谱柱再生程序：
按照下列次序冲洗色谱柱，冲洗体积均为20倍柱体积：
10%甲醇水→甲醇→异丙醇（或氯仿）→甲醇→10%甲醇水（步骤3选用异丙醇时，由于异丙醇粘度较大，需适当降低流速，建议流速设为0.2-0.3ml/min）
体积计算表：。

c18反相柱色谱过柱

c18反相柱色谱过柱

C18反相柱色谱过柱技术是一种常用的分离方法，广泛应用于化学、制药、环境等领域。

本文将详细介绍C18反相柱色谱过柱的原理、操作步骤以及应用案例。

一、C18反相柱色谱过柱原理C18反相柱是一种基于亲水性原理的柱层材料，其表面被涂覆上疏水性的C18链状碳链。

它能够通过样品中溶质与固定相之间的亲疏水作用力来进行分离。

当样品进入柱中时，极性较小的溶质会迅速与柱内的疏水相互作用，而极性较大的溶质则会较慢地与疏水相互作用。

通过控制移动相的性质和流速，可以实现对不同化合物的选择性分离。

二、C18反相柱色谱过柱操作步骤1. 准备工作：检查仪器设备是否正常运行，确保柱子处于良好状态。

准备好所需的溶剂和移动相。

2. 样品制备：将待测样品溶解于适当的溶剂中，并进行必要的预处理，如过滤、离心等。

3. 柱子装填：将C18反相柱装入色谱柱架中，连接好进样系统和检测器。

4. 初始条件设置：设置移动相组成和流速，一般采用梯度洗脱方法，即开始时使用较弱的极性溶剂，逐渐改变为较强的极性溶剂。

5. 进样：将样品通过进样系统注入柱中，注意保持稳定的进样流速。

6. 色谱分离：开始进行色谱分离，根据需求调整流速和梯度条件，使不同组分得到有效分离。

7. 数据采集和解析：利用检测器对柱出口的化合物进行检测和记录，获取相应的色谱图。

8. 结果分析：根据色谱图进行结果分析，确定目标化合物的峰位置、峰高、峰面积等参数。

三、C18反相柱色谱过柱应用案例1. 药物分析：C18反相柱色谱过柱广泛应用于药物分析领域，可以用于分离和鉴定药物中的杂质、代谢产物等。

通过优化移动相的组成和流速，可以实现对复杂药物样品的高效分离。

2. 环境监测：C18反相柱色谱过柱也可用于环境样品中有机污染物的分析。

比如水样中的农药残留、土壤中的有机污染物等。

通过该技术，可以对这些污染物进行快速、准确的分离和定量。

3. 食品安全：C18反相柱色谱过柱可应用于食品中有害物质的检测，如农药残留、食品添加剂等。