对虾白斑综合症病毒病

（） ｃ注意
向排水中泼洒上述消毒剂． 并且充分搅拌 水体。 考虑到养殖后的水体中可能存在大量 的
有机物质需要消耗大量 的氯制剂 ． 以． 所 要将
消毒 剂 的药物 浓 度达 到 １． ｐ 为宜 。 ５ ｐｍ Ｏ
（） 意 ｃ注
氯制剂对皮肤 的刺激和腐蚀性 比较强 ， 因 此 ， 消 毒操 作过 程 中 ， 者 必须 带好 口罩 、 在 操作 手 套 、 睛 和适 宜 的劳 保 服 ， 免 将 药 物 溅 到 眼 避 身上。 丢弃消毒液废液时 。 必须在适宜的容器内 中和 以后再 排 水 。 以采 用市 售检 查 管道 水用 可
暂曝晒 ， 覆盖土工膜 ， 进行下造养殖 。 这样既可
隔离 底 层 还原 环境 ． 可 防止 虾 池返 酸 。 在 又 清 理 过 的虾 池 中施 用 生 石 灰 １０公 斤庙 ， ５ 如
带水消毒每立方米水体用 １２公斤生石灰 ， － 也
可使用漂白粉 ４ｐ ｍ 有效氯 ≥３％） 茶籽饼 ０ｐ （ ０ 。
氧气 ， 并且还会产生硫化氢、 氨氮等有毒物质 ，
解氧不足 ． 如果虾以前 已感染 了病毒 ， 很快会
因溶 氧不 足 而 引发 病 毒病 的暴 发 ． 成全 池 虾 造 养 殖 失败 。 ３ 暴 雨 或 阴天 。在 阴 天 或暴 雨 天 气 里 ， ． 下 由于 阳光 不 足 ， 植 物 光 合 作 用 不 强 ， 容 浮游 很 易 造 成 水 中 溶解 氧不 足 ， 果 碰 到 下 雨 ． 如 由于 雨 水 的 盐 分低 ， 酸 度 高 ， 以 引 起 藻 类 的 大 含 可 量 死 亡 ， 溶 氧不 足 ， 加 上 下 雨 引 起 水 质 造成 再 因 子 的改 变 ． 身 感染 病 毒 的虾 由于体 质 弱 很 本 容 易 引起 大规 模 的 发病 死 亡 。

１ ０ ． ９ ｋ Ｄ ａ ． 转 录 时相 分析 表 明 ｗ ｓ ｖ Ｏ ０ ９属 于早 期基 因． 本研 究通过 Ｐ Ｃ Ｒ扩 增 获得 了该 全长基 因 ， 成功
构 建 了重组 质粒 ｐ Ｅ Ｔ — Ｈ ｉ ｓ ． ｖ ｐ ｌ ２ ． 将 该 质粒 转化 到 Ｅ ． ｃ ｏ ｌ ｉ Ｂ Ｌ ２ １中表 达 并 纯化 了重组 Ｖ Ｐ １ ２蛋 白 ， 用该
中 图分 类 号 ： Ｐ ７ ３ ５
文献标识码 ： Ａ
文章编号 ： ２ ０ ９ ５ ４９ － ７ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４ － ０ ５ １ ７ － ０ ７
对 虾 白斑 综 合 症 病 毒 （ ｗ ｈ ｉ ｔ ｅ ｓ ｐ ｏ ｔ ｓ ｙ ｎ ｄ ｒ ｏ ｍ ｅ ｖ ｉ —
（ ２ ０ ０ ９ ） 利 用酵 母 双 杂 交 和 Ｆ ａ ｒ — Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ等 方 法 发 现
离心 ， 仅用 几 步普 通 的差 速 离 心 便 可 以 获得 大 量 的
病 粒子囊 膜 结 构 均完 整 ． 在此 基础 上 ， 通 过广 泛应用 蛋 白质组 学
该病 毒 是 一 种 纺 锤 状 ， 不 形 成 包 涵 体 的 环 状 双 链 Ｄ Ｎ Ａ病 毒 ． 该 病 毒 的基 因组 约 ３ ０ ５ ｋ ｂ ＿ ３ ， 具有 潜 在 的５ ３ １个 Ｏ Ｒ Ｆ ， 其中 １ ８ １个 Ｏ Ｒ Ｆ可能 具备 编 码功 能 蛋 白的功 能 ． 本实验 室 于 ２ ０ ０ ５年报 道 了一种 简单 有 效 的从感 染螯 虾 的组织 中提 取 大量完 整病 毒粒 子 的 方法 ＿ ６ Ｊ ． 此 方法 过程 中不包 括 复 杂 的 密 度梯 度 超 速
Ｃ 一 末端 能 够 与 Ｖ Ｐ ２ ４ 发 生 相 互 作 用 １ ｏ ｌ ； Ｘ ｉ ｅ等 （ ２ ０ ０ ５ ） 发现 Ｖ Ｐ ２ ６能 够 与 宿 主 细 胞 的 ａ ｃ ｔ ｉ ｎ相 互 作 用， 并且利用免疫共沉淀和 Ｆ ａ ｒ － Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ发 现 Ｖ Ｐ ２ ８ 能够 分 别 与 Ｖ Ｐ ２ ６和 Ｖ Ｐ ２ ４有 相 互 作 用 ， 并 且 认 为

病 耆 磅 ％
《 水产养殖｝００ ２ １ 年第 ｌ 期 ０
南美白又 虾白斑综合征ｌ Ｓ 硇预防控制技术和搽 习 ＷＳ ）
周 晓东 ， 陈文怡 ， 张茂友 ， 张元柱 ， 顾建 华 ， 徐 峥
（ 州 市 水 生动 物 疫 病 预 防控 制 中心 ， 苏 江苏 苏 州 ２ ５０ ） １Ｏ ６
动物携带病毒等的主要传播途径。无论是亲虾 、 苗 种、 水体或饵料等 ， 如被该病毒污染后都可能成为 传播源 。为杜绝传播源 ， 养成时首先要控制虾苗不
携 带病 毒 ， 次要 控制好 养 成期 的水体 、 其 饵料 、 底泥
等传 播 源。 １１ 轮 虫传 播 ．
三个方面综合考虑， 采取切实有效的防治措施。
疗方 法 ， 因此早期 预 防就显 得极 为重要 。病 原体 、 虾
１ ＷＳ Ｖ在 南美 白对 虾淡水 养殖 过程 中传 Ｓ 播 途 径
白斑病病毒传播途径主要 是以水平方式传播
的， 确认 了幼 苗带 病 毒 和水 中浮 游 动物 、 塘水 生 池
体和环境是产生虾病的重要 因素 ， 三者相互作用的 影响 ， 是虾病产生与否的基础。因此我们应当从这
２３ 放 苗控 制 ．
溶 氧 ≥５ｍｇ ｐ ／、Ｈ值 在 ７８ ９之 问 、 氮＜ ． ｍ ／、 ｔ ．～ 氨 ０５ ｇＩ 亚 硝基 氮 ＜ ． ／、 化氧 ＜ ．１ ／。 用 生物 、 ００ ｍｇ 硫 ５ Ｌ Ｏ０ Ｌ 运 ｍｇ
对 虾 白 斑 综 合 征 病 毒 （ ｈｔ ｓｏ ｓｎ ｒｍ ｗ ｉ ｐｔ ｙｄｏ ｅ ｅ ｖｕ ， Ｓ 是迄 今 为止危 害 最为 严重 的一 种 对 虾 ｉ ｓＷＳＶ） ｒ 病毒 之一 ， 病对 虾死亡 率可达 到 １０ 该 病典 型 发 ％。 ０ 症状 是 对虾 甲壳 内侧 出现 ０５ ２ ． ． ｍｍ大小 不 等 的 ０

具体的样品采集方法参照SC/T 7202.1—2007《斑节对虾杆状 病毒诊断规程 第1部分：压片显微镜检查法）》附录B的规定或者 按照OIE《水生动物疾病诊断手册》(2011年版)中的要求进行。
（3）组织和病理学检查：依据前述病虾的组织病理特征对该病作 出诊断。该方法适用于桃拉综合征的急性期、过渡期和慢性期患 病对虾的确诊和对桃拉综合征的筛查，不适用于对潜伏性感染或 非感染性携带病毒标本进行疾病诊断。过渡期病虾角质层上皮多 处出现不规则黑化斑，血细胞聚集，软壳及虾红素不明显。慢性 期一般无明显临床症状。
【流行特点】 该病主要侵害凡纳滨对虾和细角对虾，对虾科滨对虾属所有
成员均对本病易感，中国明对虾也对本病易感；凡纳滨对虾除卵 、受精卵和虾蚴外，仔虾、幼虾及成虾等各期均对本病易感，主 要感染14~40日龄、体重0.05~5 g以下的仔虾，部分稚虾或成虾也 容易被感染。对虾科其他属成员经直接攻毒也可感染，但一般不 表现症状。细角对虾选择系对TSV（基因1型或A抗原型）有抵抗 力。
甲壳类病毒性疾病防治学
甲壳类病毒性疾病目录
1. 白斑综合征 2. 桃拉综合征 3. 黄头病 4. 传染性皮下和造血组织坏死病
对虾白斑综合症
白斑综合征俗称“白斑病”，是对虾的严重传染性疫病， 20世纪90年代以来一直严重威胁着全世界对虾的养殖安全。 该病的特点是感染率高、发病急、死亡率高、死亡速度快。 2008年《中华人民共和国农业部公告》第1125号将其列为 一类动物疫病，2011年版世界动物卫生组织(OIE)《水生动 物健康法典》将其列为必须申报的疾病。
（4）实验室诊断和病原学鉴定 ① 生物诊断法：采用SPF凡纳滨对虾幼虾作为桃拉综合征病毒指 示器，对疑似感染虾进行生物检测，具体方法有口服法和注射法 。口服法：该法比较容易操作，可用较小的SPF凡纳滨对虾幼虾 进行试验。指示虾随机分为两组，其中感染组以剁碎的疑似感染 虾样品饲喂，对照组以正常饲料饲喂，然后对两组虾进行临床观 察和大体病理、组织病理学诊断。注射法：将采集的可疑虾头或 全虾样品与TN缓冲液或2%的无菌生理盐水按1∶2或1∶3混合匀浆 ，离心取上清作为接种物，对指示虾进行肌内注射，然后进行临 床观察和外观症状、组织病理学诊断。注射接种法宜采用较大的 指示虾进行。

对虾常见病害及防治一、生物性病害生物性病害亦称为生物因子致病，其致 病生物包括病毒、细菌、-部分真菌和原生动 物。

此外，还有捕食生物引起的生物性敌害。

在养殖过程中虾池可能会出现捕食性敌害生 物，其中危害性最大的是甲壳类中的背尾白虾 和鱼类。

一旦发现养殖池中有捕食性敌害生物， 应立即进行清除。

(一）病毒性疾病该病是因病毒感染而引起的疾病。

病毒 病一旦发生，将给养殖带来严重的危害，必须 要加强预防。

下面对日本对虾常见的病毒性病 害予以介绍。

1.对虾中肠腺坏死杆状病毒病。

中肠腺 坏死杆状病毒，属杆状病毒科，无包涵体，肠 感染病毒。

病虾中肠腺白浊，活力差，漂浮在 水面。

该病毒可以随死亡的上皮细胞破碎后放 出病毒粒子，感染其他上皮细胞，在病虾晚期 肉眼可见其肝胰腺变白，被感染的病虾苗从腹 部可见到肝胰腺和中肠腺变白混浊。

同时可能 有革兰氏阴性菌并发感染，其对成虾的危害相 对较小。

一般用显微镜采用"暗视野观察法” 来诊断此病。

该病目前尚无特效药物可医治， 必须采取预防措施。

2.肠呼吸道病毒病。

肠呼吸道病毒病也 称为类呼肠孤病毒，常与别的病原（病毒、真 菌或细菌）并发，造成综合症状。

病虾厌食、 嗜睡、活动能力差，体表与鳃的附着物增多， 腹部肌肉混浊，常并发细菌感染。

肝胰腺变白、 萎缩或坏死，但不是其特有症状防治方法：对亲虾必须严格进行检疫， 以防带进病原，对已被感染的病虾要进行清除，降低养殖密度，对养殖池及T .具必预进行消毒。

该病主要以防为主,至今未有有效的治疗药物。

3.传染性皮下及造血组织坏死病。

传染性皮下及造血组织坏死病毒，属细小病毒科，该病毒感染外胚层组织，如鳃、表皮、前肠和 后肠上皮细胞、神经索、神经节和中胚层器官， 如造血组织、触角腺、性腺、淋巴器官、结缔 组织、横纹肌，在宿主细胞核内形成包涵体。

该病毒病是一种慢性病，病虾身体变形。

成虾个体大小悬殊，有许多虾体很小，但死亡 率不高，养不大，损失比虾死亡还大，因病虾 一直要吃饲料，同时也浪费水电及人力等，如 发现，应当机立断及早处理。

第29卷第6期2008年12月衡阳师范学院学报Jo ur nal of Hengya ng Normal Univer sity No.6Vol.29Dec .2008凡纳滨对虾在不同实验条件下感染白斑综合症的研究潘忠诚1,2,王芳宇3,何建国2,赵志英2,翁少萍2,付小哲2,陈国良4(11哈尔滨工程大学化工学院环境工程系,黑龙江哈尔滨　150001;21中山大学生命科学院,广东广州　510275;31衡阳师范学院生命科学系,湖南衡阳　421008;41广东湛江海茂公司,广东湛江　524001)摘　要:本研究目的是探讨在不同实验条件下的凡纳滨对虾人工感染白斑病毒(White Spot Syndrome Virus ,WSSV)的死亡率变化。

研究结果如下,当凡纳滨对虾感染10-3、10-4、10-5WSSV (每尾注射剂量011mL ),15天后的死亡率分别为(100±0)%,(78±213)%,(21±114)%。

当养殖在高(100尾/m 3)、中(50尾/m 3)和低密度组(25尾/m 3)的凡纳滨对虾感染10-4WSSV ,15天后的死亡率分别为(91±217)%、(78±113)%、(63±119)%。

在相同养殖密度下的凡纳滨对虾感染10-4WSSV ,雌虾组和雄虾组15天后的死亡率分别为(6713±1183)%,(51±211)%(p <0105),白天的死亡率比晚上的低,差异显著(p <0105)。

另外,凡纳滨对虾注射感染的死亡率与投喂感染的死亡率比较,差异不显著(p >0105)。

关键词:凡纳滨对虾;WSSV ;巢式PCR ;死亡率;人工感染中图分类号:X17文献标识码:A文章编号:1673—0313(2008)06—0063—05 凡纳滨对虾是世界人工养殖的三大对虾品种之一[1]。

当今,凡纳滨对虾在中国的人工养殖,大都从原来的土池养殖经过改造成地膜养殖[2]或高位池养殖模式[3],这种养殖模式不但提高单位面积的对虾产量,同时节约养殖资源,但高位池养殖系统也具有易暴发细菌和病毒性疾病,同时高位池养殖系统的养殖废水未经处理直接排放到邻近的海域,势必给近海环境造成污染。

对 虾 白斑 综 合 症 病 毒 核 衣 壳 蛋 白 ＷＳ ３ ８的鉴 定 Ｖ０
吴成林 ， 杨 丰
（ 国家海洋局第三海洋研究所 ， 福建 厦门 ３ １０ ） ６０ ５
摘要： 结合 Ｓ ＳＰ Ｇ 电泳和 质谱 分析 ， 现 了一 分 子 量为 ５ ｋ ａ的 蛋 白， Ｄ —Ａ Ｅ 发 １Ｄ 它是 对虾
ｐ 舢 Ｊ
．
分类委员会（ｎｅ ａ ｏａ Ｃｍ ｉｅ ｏ ａｏｏ ｙｏ Ｖｒｓ ＩＴ ） Ｉ ｒ ｔｎｌ ｏ ｍ ｔｅ ｎＴｘｎｍ ｉ ｅ Ｃ Ｖ） 分类为 Ｎｍ ｖｉ ｅ ｈ — ｔｎ ｉ ｔ ｆ ｕ ｓ（ ｉａｉｄ ｉ ｒａ Ｗ ｓ 目前对 该病 毒 的 主要 工作 集 中在对 其功 能基 因组 的研究 ． ＷＳＶ是至今发现的最大的病毒之一 ， Ｓ 但对其繁殖及生理活性研究 的欠缺 ， 防治该病毒至
实验 和免疫 电镜定 位 ， 了解该 蛋 白在完 整病 毒颗粒 上 的确切 定位 ．
１ 材料和方法
收 稿 日期 ，０ ６０ －０ ２ ０ －３２
基金项 目： 国家“ ６ ” 目（０ ３ Ａ ２ ０ ０ ； ８３ 项 ２ ０ Ａ ６ ６ ２ ） 福建省 重大项 目（０ ３ ０ １ ２０Ｆ０ ）
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第２ ６卷 第 １ 期 ２０ ０７年 ２月
台
湾
海
峡
Ｖｏ ＲＮＡＬ ＯＦ ０Ｃ Ｎ０ＧＲＡ ＨＹ Ｎ Ｔ Ｗ ＡＮ Ｓ ＲＡＩ ＥＡ Ｐ Ｉ Ａ１ Ｔ Ｔ
白斑 综合症 病毒 基 因 Ｏ Ｆｗｖ０ Ｒ ｓ３８的表 达 产 物． ｗｖ０ 将 ｓ ８克隆 到 ｐ ＴＨｓ 达 载体 ， ３ Ｅ — ｉ表 以 Ｅ ｃｌＢ２１ 宿 主茵 ， ．ｏ Ｉ 为 ｉ 成功表 达 并纯化 目的蛋 白后 制备 抗 体． ｓ ｒ ｌ 实验 中 Ｗｅｔ ｂ ｔ ｅ ｏ ｎ

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此 ， 对 白斑 病 的预 防工 作尤 为重 要 。 首 先要做好养殖池塘 的清淤 、 消毒及培水 工 作 。 其次要选 择健 康无病毒 的虾池进 行放养 。 第三 ， 饲养管理 过程 中要 注意 水质及各种理 化 因子 的变化 ， 保持水体 的相对稳 定 。 第 四 ， 投 喂 营养全 面 的颗 粒饲料 。 第五 ， 坚持巡 塘 ， 定期检查 ， 正 确诊 断 ， 积 极 治疗 。 养殖 过 程 中一 般 采用 益水宝 、 高能氧 、 亚 硝酸盐 降解灵 等 。 保持水体 的对稳 定 ， 采用 二 溴海 因 、 强 克 10 1等进行池 塘消毒 ， 杀灭 抑 制水体 中病原 微 生 物 的发生 、 发 展 。 饲 料 中添 加维 C 、 免疫 多糖 、 生 物 酶添 加
2 ． 改 变投 饵 方 法 。 改水 中投 饵 为岸 上 投饵 ， 以 免水 中投 饵沉 入 水 底 ， 龟捡 食不干净 ， 造成浪费并污染水质 ， 危害 龟 的健康。 把饵料投在岸上 ， 让龟爬上 岸采食 ， 有利于饲养人 员观察 了解龟 的 采食食 陛和采食量 ， 既不 污 染水质 ， 又 不 浪费饵料 ， 形成省料省水 、 省药物 的 良型 循 环 ， 可 节 省饵料 投资5 ％ ～ 15 ％ 。
剂等提 高虾体 的免疫力 ， 改善
肠 胃的微循环 ， 同时添 加对 虾
病毒净 、 中鱼 尼 考等抗 菌 、 抑
毒药物控制体 内病原 微 生 物 的
发生 、 发展 。
治 疗 2
．
。
发病虾池 的控制ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
方法 ： 首先采用高能氧全池泼
洒 ，
其用 量 为0
1—
．
0
2
．
毫 克 ／公
斤 ， 2 d, 时后 采用 强克 10 1进 行全 池泼

第３ ２卷
第 １ 期
应 用 海 洋 学 学 报
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ａｐ ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ Ｏｃ ｅ ａ ｎ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ
Ｖｏｌ ＿ ３ ２ ．Ｎｏ ．ห้องสมุดไป่ตู้１ Ｆｅ ｂ．， ２ ０１ ３
２ ０１ ３年 ２月
温 度 影 响对 虾 白斑 综 合 症 病 毒 增 殖 机 制 的研 究
病¨ ． 但 是 目前关 于 温 度影 响 ＷＳ Ｓ Ｖ 在 宿 主 中增
殖 的 机制 报 道 还 很 少 ． 本实验通 过荧光定量 Ｐ Ｃ Ｒ、 逆转录 Ｐ Ｃ Ｒ及 激 光 共 聚焦 显 微 观 察 的方 法 分 别 从
已成 功对 病 毒进行 了全基 因组 测序 并且 预测 了大 部 分基 因的功 能 ７ Ｊ ． ＷＳ Ｓ Ｖ在 自然 中具有 广 泛 的宿 主 ，
目前 仍是 引起 对虾 大规 模死 亡 的主要 病 害之一 ． 病毒 的 大量增 殖 以及 大规 模爆 发受 到 了许多 因
基 因组 复制 、 转 录及 病 毒 对 宿 主 细胞 的入 侵 三 个 方
面揭示 温度 影 响 ＷＳ Ｓ Ｖ增殖 的机 制 ．
素， 包括 传播 媒 介 、 宿 主 种 类 以及 外 界 环 境 等 的 影
李 侃 ， 罗淑娅 ， 徐 丽美
（ 国家海洋局第三海洋研 究所 、 国家海洋局 海洋生物遗传资源重点 实验 室 ， 福建 厦 门 ３ ６ １ ０ ０ ５ ）
摘要 ： 已有 文 献报道 温 度是 影响 虾 类感 染对虾 白斑 综合 症病 毒 （ ＷＳ Ｓ Ｖ） 的 重要 因素但 并 不 清楚 其机 制． 在本 实验 中我 们 通过 定 量检 测病 毒拷 贝数后 发现 环境 温度 与 病毒 增 殖速度 有相 关性 ． 当温度在

刀额新对虾原代淋巴细胞培养及其感染白斑综合征病毒(WSSV)的病理特征国子娟;王印庚;荣小军;廖梅杰;郭华荣;韩倩【摘要】为深入了解对虾白斑综合征病毒(WSSV)的致病机理和体外培养的对虾细胞对WSSV的敏感性,实验以1.5 ×L-15培养基培养刀额新对虾原代淋巴细胞,待细胞形成单层后接种WSSV,通过倒置显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜观察接种病毒后细胞的病理变化.结果显示,使用1.5 ×L-15培养基培养对虾淋巴组织,3h 后可观察到有细胞迁出,并能迅速形成单层,36 h后细胞的迁出汇合率可达80％,且能存活20 d以上.接种WSSV 24 h后,出现病变的细胞变圆、漂浮,细胞之间的网状结构消失,最后细胞破碎、溶解;接种WSSV 48 h后Hoechst 33342染色结果显示,感染的细胞核深染,且变形、膨大;电镜下,细胞核内含大量成簇分布的杆状病毒,细胞器被挤向细胞边缘,细胞膜轮廓模糊.研究表明,纯化的病毒粒子接种体外培养的淋巴细胞,能够使其产生明显病理变化,证明了WSSV对体外培养的淋巴细胞具有感染力,并且可在淋巴细胞中增殖.【期刊名称】《水产学报》【年(卷),期】2014(038)004【总页数】9页(P584-592)【关键词】刀额新对虾;白斑综合征病毒(WSSV);淋巴组织;原代细胞培养;感染;病理【作者】国子娟;王印庚;荣小军;廖梅杰;郭华荣;韩倩【作者单位】中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东青岛266071;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东青岛266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东青岛266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东青岛266071;中国海洋大学生命学院,山东青岛266003;中国海洋大学生命学院,山东青岛266003【正文语种】中文【中图分类】S941.41随着我国改革开放,对虾养殖业在20世纪80年代得到了快速发展,成为我国沿海农村经济的支柱产业之一。

水 温 直 接 影 响 鳖 的 生 长 速 度 及 成 活 率 。鳖 在 自然 条 沙 中避 暑 ， １ ５ ℃ 以下 则 开 始 冬 眠 ， １ ０ ℃以下深度 冬眠 ，
件 下 ，是生 活在热 带亚 热带地 区 ，３ ５ ℃ 以上 时潜伏 于泥 加 注新 水 。 （ 二 ）及 时按 规 格 分 池 养 殖 ，避 免 出现 “ 老 头 ” 鳖 和 规 格 不 均 现 象。
时 ，每 天 巾午打开 大棚 出入 口 （ 或窗户 ）通 风半小 时左
左右 。
５ ｇ ／ 只的佛罗里达 鳖苗５ ３ ０ 只 ，养殖池 面积为 １ ５ ｍ ，水 深 右 ，并在 大棚 上方搭设 遮阳网降低温度 ，保持水温在３ ０ ￣ Ｃ １
四 、病害防治
鳖一般较少患病 ，但在高密度养殖条件 下易患肠炎、
（ 四）做好 防逃 、防盗 ，避 免损失。
（ 五 ）认 真 做 好 养 殖记 录 。
六 结果
２ ０ １ ２ 年７ 月４日，大 兴 区魏 善 庄 养殖 户 放 养 规格 为 ３ ０ ｃ ｍ～４ ０ ｃ ｍ，池底铺设２ ０ ｃ ｍ￣ ｍ 沙的水泥池 中 ，至２ ０ １ ２ 年 １ １ 月２ ４日，平均规格达ｇ Ｊ ｉ ５ ２ Ｏ ｇ ／ 只 ，最大个 体为６ １ ５ ｇ ／ 只， 最小个体为３ ２ ４ ｇ ／ 只 ，成活率９ ０ ％。 矿
２ ７ ￣ Ｃ～３ １ ℃之 间为鳖 的最佳生长温度 。
在 北 方 地 区养 殖 佛 罗里 达 鳖 ，关 键要 做 好 冬 天 保 暖 和
（ 三 ） 发现 病 鳖及 时隔 离治 疗 ，避 免病 情 蔓延 。
夏天散热工作 。到 十月 中旬 ，水 温低 于２ ５ ℃时 ，开始在棚 顶加盖两层塑料薄膜 ，室内同时开始 自制水暧增加水温 ， 入冬 后要 增加水 暧 的量 。夏季 天气炎 热 ，水温高 于３ ３ ℃

存在于正常 虾体 中使对虾终生带毒而不发生病毒病 ，因此检测到病毒也不 能就一定推 断成对
虾发生 了病 毒病 。
第一作者简介：郑天伦 （ ７ － ，男 ．硕士生 ，主要从事水产动物病害研究 。 １ ９） ９ 收稿 日期 ：２ ０ ．】 ４ ０ １１． ２
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０ ６ ｍｏ Ｌ和 ８ ． Ｉ ／ ，可作 为斑节对虾感染 ＷＳ Ｖ后 出现 白斑 病的主要血 清生化特 征 。 ．ｍ ｌ ６ ／ ２ ６Ｕ Ｌ ３ Ｓ 可见 ，通过某些特定生化物质 的
５ 免疫 学 方法
免疫学检 测技术建立 在抗 原抗 体反应 的基础 之上 ，检 测策 略灵 活性很 大 ，某些 方 法在 快速鉴定应用方面有很大的优势 。
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海 洋 湖 沼 通 报
２０ ２ 矩 ０ Ｔｒ ｎｓ ｃ ｉ ｎｓｏｆＯｃ ａ ｏｌ ｇｙ ａ ｄ Ｌｉ ｎ ｏ ａ ａ ｔｏ ｅ ｎ ｏ ｎ ｍ ｏｌ ｇｙ № ３
文章 编 号 ： ｌ ０ － ６ ８ （ ０ ２）Ｏ —ｏ ６ —ｏ ３－４２ ２０ ０ ３ ０５ ６
对虾 白斑综合症病 毒 （ ｉ ｐ ｔＳ ｎ ｒｍｅＶ ｒｓ Ｗｈｔ Ｓ ｏ ｙ ｄｏ ｉ ，ＷＳ Ｖ） 叫 白斑综 合症杆 状病毒 ｅ ｕ Ｓ 也 （ Ｂ 、系统外胚层 和 中胚层杆状 病毒 （ Ｅ Ｖ） ＷＳ Ｖ） Ｓ ＭＢ 、日本 对虾杆状 核病毒 （ Ｖ Ｐ ） Ｒ ．Ｊ 、对 虾杆状 Ｄ ＮＡ病毒 （ Ｒ Ｖ） Ｐ Ｄ 、皮下及造 血组织坏死杆状病毒 （ ＮＢ 、中国对虾杆状 病毒 ＨＨ Ｖ） （ Ｃ Ｖ）淋 巴样细胞核性杆状病毒 （ Ｎ Ｖ） 陈秀男 等 ， ９ ４ Ｗｏ ｇ ｅａｕ ａ ａ ， ９ ５ ＰＢ 、 Ｌ Ｂ （ １９ ； ｎ ｔ ｒ ｐｕ 等 １９ ； ｅ ｓ Ｉｏ ｙ ｎ ｕｅ等 ，１９ 、１９ ；黄 健等 ，１９ ａ ９４ ９６ ９ ５ ；战 文斌等 ，１９ ；陈细法等 ，ｌ９ ，是全球 对 ９５ ９ ７） 虾养殖业危害性最大 的病毒之一 。 自 １９ ９ ２年 ＷＳ Ｖ暴发性 流行 以来 ，造成 了对 虾养殖业的 Ｓ 严重萎缩 。鉴 于 ＷＳ Ｖ 尚未有有效 的治疗方法 ，快 速准确 的病 原分离检 测技 术 已成 为各 国 Ｓ 学者研究的焦点之一 。

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白斑 综合 症病 毒 的 生物学 特性
Ｂｌ ０Ｌ０Ｇｌ ＣＡＬ Ｃ丑＿ＲＡＣＴ Ａ ＥＲＳ ０Ｆ Ⅵ ｍ 雹 Ｓ ｐ０Ｔ Ｓ ＹＮＤＲｏＭ匮 ＶＩ ＲＵＳ
（ Ｓ Ｖ） Ｗ Ｓ
雷质文
黄 健
梁成珠
俞开康
战文斌
（青岛出入境检验检疫局 ２ Ｏ２ 。 ６ Ｏ） ６ （ 中国水产科学研究院黄海水产研究 所 青岛 ２６７ ） ６０ １ （青岛海洋大学水产学院 ２６０ ３ ６６０ ）
病理特征 、 流行特征上 的相 似性 ， 可以看出 １９ 年 的报 道将 其命名 为 日本对虾 棒状 细胞棱病毒 临床症状 、 ９６
（ ＶＰ ＝Ｐ Ｐ ． ｎｔ ｒ ｕａ １９ 年的报道将其 不同地域不 同宿主 的病毒 分离株舶基 因组序 列有 很 Ｒ－ Ｊ ｖ Ｄ） Ｗｏｇ ｅ ｓｐ 等 ９ ５ ｅａ 命名为系统性外胚层 和 中胚层杆状病毒 （Ｅ Ｂ Ｓ Ｍ Ｖ＝ 大的同源性。这样看来 ， 时赋予不 同分 离株统一命 暂 ｊ ｅ 等在 １９ ９６年的著 作中建议 Ｐ Ｎ ＢⅢ） ａｇ １９ 年 的报道将其命 名为白斑 名是完 垒可以的。ｌ ｍ ｔ ｍｏ ，Ｗ ｎ 等 ９５
７ ４ 分离的 ｗｓｖＢ Ａ 发现 Ｐ Ｒ产物只 ６ ｓ Ｎ， Ｅ 不同 分离株 不同的命名 ：黄使等 １ ５ ９ 年的报道将其 卡罗来纳 ９－ ） ９ 有少许差别旺 ¨。根据 以上研究结果 ， 结台染毒 对虾在 命名为皮下 与造血组织坏死 病毒 （ Ｈ Ｂ Ｊ ｔ ｙ 等 Ｈ Ｎ ｖ Ｉ ｅ ｍｕ
自 １９ 年 以来 ， ９３ 不同研究者根 据所分离病毒株的 品店 ９ －１） 淡水小龙虾 （ ｒ ｎｃ ｕｃｍ ｄ ｓ 美 ６１５ 、 Ｏｃ ｅ ｏ ￣ｐ ｎｔ ｏｕ ）（ ／
７ ）南美 白对虾 （ ２ 泰国 ９ － ， 国南 ５６美 ４ 地域 分布 、 始宿主 、 态发生以及主要病理症状 ． 原 形 给 国国家动物园 ９－５ 、

基金项 目： 国家 自然科 学基金 资助项 目（ ４ ０ ９ ７ ６ １ ０ ０ ） ； 国家 ９ ７ ３计划 资助项 目（ ２ ０ １ ２ Ｃ Ｂ １ １ ４ ４ ０ １ ）； 国家海洋局第 三海洋研究所 基本科研 业务费
专项资金资助项 目（ 海三科 ２ ０ ０ ９ ０ ４ ４ ）
作者简介 ： 邬君君（ １ ９ ８ ７一） ， 女， 硕士研究 生； Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｍｉ ｌ ｅ ｙ ｌ ｏ ｖ ｅ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ 通讯作者 ： 李钫 ， 女， 副研究 员； Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｌ ｉ ｆ ａ ｎ ｇ ． ＿ ８ ７ ＠１ ６ ３ ． ｅ ｏ ｍ
围广 、 传 染力 强 、 致死率高 ， 是 目前 危 害 对虾 养 殖 业 最 主要 的病原 体 … ． ＷＳ Ｓ Ｖ粒 子 呈 杆状 ， 长约 ２ １ ０～
３ ８ ０ ｎ ｍ， 宽约 ７ ０～１ ６ ７ ｎ ｍ． 主要 由囊 膜 、 被 膜 和核 衣
定 效果 进行 评估 ， 以获得 最优 的 ＷＳ Ｓ Ｖ固定方 法 ． 实 验 表 明经过 固定 的病 毒粒 子对 电镜 制样 等操作 的 耐 受 性有 所提 高 ， 可 以较好地 维 持病毒 粒子 的完 整性 ， 为研究 病毒 粒子 的形 态结 构奠 定基础 ．
下 研究 者是 用悬 滴法 将纯 化 的病毒 粒子 吸 附在铜 网
之上 ， 经过 负 染 色 之 后 再 进 行 电镜 分 析 Ｊ ． 然 而 我 们 在实 验 中发现 这 一 方法 的效 果 并 不 稳定 ， 经 常 出
碳 支持膜 购 自中镜 科 仪 公 司 ； 山羊 血 清购 自博 士 德 公司； 鼠抗 Ｖ Ｐ ２ ８单 克 隆抗 体 与 小 鼠免疫 前 血 清 为

随着 ＷＳ Ｖ基 因组 测 序 的完 成 ， 究 的方 向转 Ｓ 研
移 到病 毒 编 码 蛋 白 的 功 能 研 究 中 ， 其 是 病 毒 的 尤
结 构 蛋 白． Ｐ ５是 ＷＳ Ｖ 核 衣壳 上 的一 个结 构 蛋 Ｖ １ Ｓ 白 ， 是 一个 强 碱 性 蛋 白 ， 有 ８个 潜 在 的磷 酸 它 具
毒 防治 具有 重要 的意 义．
关键词： 洋生物 学 ； 海 对虾 白斑 综合 症 ； Ｎ 结合蛋 白； ｌ Ｄ Ａ ｖ ５基 因； Ｎ 干扰 ｐ ＲＡ
ＤＯＩ１ ． ９ ９ Ｊ ＩＳ １ ０ —１ ０ ２ １ ． １ ０ ７ ：０ ３ ６ ／ ．Ｓ Ｎ． ０ ０８ ６ ． ０ ２ ０ ． ０
本 实验所 用 淡 水 克 氏原螯 虾 （ ｒｃｍ ａｕ ｃ — Ｐｏａ ｂｒｓ ｌ ａ ｋ ） ｉ 购于厦 门市第八 市场 ； Ｎ ａ Ｒ Ａ体 外转 录试 剂 盒
Ｒ ｂ Ｍ Ｘ Ｅ ｐｅｓＲ Ａ ｙｔｍ Ｋ ｔ 于 Ｐｏ ｇ ｉｏ Ａ ｘ ｒｓ Ｎ ｉ ｓ ｉ购 Ｓ ｅ ｒｍｅａ公
中图分类号 ：７５ Ｐ ３
文献标识码 ： Ａ
文章编 号 ：００８６ （０２ ０ －０ ７０ １０ —１０ ２ １ ） １０４ — ６
对虾 白斑 综合症 自 １９ ９ ３年爆 发 以来 ¨ 给虾养 ，
殖业 带来 巨大 的 经 济 损 失 ． 造 成 这 个 病 害 的 而 罪魁 祸首 就 是 对 虾 白斑综 合 症 病 毒 （ Ｓ ， 病 ＷＳ Ｖ） 该
第３ １卷
第 １ 期
台
湾
海
峡
Ｖｏ． １ ３１． ．１ Ｎｏ Ｆ ｂ．． ０１ ｅ ２ ２
２１ ０ ２年 ２月
Ｊ ＵＲＮＡＬ Ｆ Ｏ Ｏ ＯＣ ＮＯＧＲ ＨＹ Ｎ Ｔ Ｗ ＡＮ Ｔ Ｉ ＥＡ ＡＰ Ｉ ＡＩ Ｓ ＲＡ Ｔ

《 河北 渔业 ）０ ０年 第 ８期 （ ） １ ２ 总第 ２ ０期 ） ０
ｏ检验 与检 测
ｄ ｉ１ ．９ ９ ｊｉ ｎ １ ０ —６ ５ ．０ ．８ ０ ５ ｏｉ ０ ３ ６ ／． ｓ ． ０ ４ ７ ５ ２ １ ０ ． ０ ｓ ０
利 用试 剂 盒 检 测 对 虾 白斑 综 合 症 病 毒
１ ０ ／ ｉ离 心 机 再 次 离 心 ３ ， 加 样 枪 弃 ００ ０ｒｒ ｎ ａ ０ｓ用
掉 上清液 。
对 降低养 殖风 险 ， 高 养 殖效 益 起 着 至关 重 要 的 提 作 用 。近年来 ， 随着 科 学 技术 的发 展 和检 测 手段 的不 断完善 ， 们 利 用 试 剂 盒对 ＷＳＶ进 行 分 析 我 Ｓ 检 测 ， 得 了较 为理 想 的检 测 效果 。现就 试 剂 盒 取
② 用 １３ ０ ｒｒｉ ０ ／ ｎ离 心 机离 心 ３ｍｉ ａ ｎ后 ， 将 上清 液转 移至新 管 内 ， 管加 ２ Ｌ吸附液 ， 每 Ｏ 置于 室 内常温 下 ３ ｉ ～５ｒ ｎ摇动 ， ａ 如有沉 淀 ， 前摇匀 。 用 ③ 用 １ ０ ／ ｎ离心机 离心 ３ ， 加样 ００ ０ｒ ｍｉ ０ｓ用 枪 吸去上 清液 ， 加入 ２ ０ Ｌ洗 涤 液进 行 沉 淀 ， 再 ０
合， 点样 。 ⑨ 用 １ ０ｖ电泳仪 电泳 ３ ｎ后 观察结 果 ， ０ ５ｍｉ 阳标 在 ２ ５ ｂ ３ ｐ处 有 无 阳性 带 。如 果 样 品 在 ２ ５ ３ ｂ ｐ处有 带 ， 即为 有 病 毒 感 染 ， 则 ， 为 元 病 毒 否 即
感染 。
２ 操 作 步骤
① 首先取对 虾 待检样 品 的鳃丝 、 皮或肌 肉 上 组织 １ ～ １ Ｏ ５ｍｇ放 于 １ ５ｍＬ的灭 菌 离 心管 内 ， ．

氯浓度需保证足够高确保 杀死所 有漂浮 状态 的病 毒 ，但如 水源充满 感染 ＷＳＶ Ｓ
、
虾苗挑选
首 先，谨慎挑选虾苗 。查验虾苗场
是否具 备 Ｓ Ｆ（ Ｐ 无特 定病原 ）虾苗供 应
缺 乏生物安全且非封闭 的环境中 ，该方 法的实际效果值得怀疑。
简而言之 ，请勿购买 Ｐ Ｒ检测呈阳 Ｃ
管 ，造成严重的发炎反应 。 肝胰腺小管 上皮细胞退化后 ，他们
的细胞核开始肿大。严重时 ，在脱落的
因研究 ，但至今未取得突破 『 生进展。
已有 的 研究 表 明，曾暴 发 了 Ｅ ＭＳ
的池塘 使用 的饲料和 感染了 Ｅ ＭＳ的对 虾冰冻样 品 ，都不会对健康的虾 造成 类 似病变 。 另外 ，一种投苗前广泛使用的 白斑 病载 体杀 虫剂 也被 证实 不是造 成 Ｅ ＭＳ
活动状态对挑选苗种是有意义的 ，但在
控 条件 下，病原媒介物传染能 力只能维
持 较短 时间。随后在普通商业养殖条件
下 ，发现 通过养殖过程 常规控 制亦降低
ＷＳＶ对虾养殖的潜在威胁。 Ｓ
一
浓度至少达 到 ２ ｍ。注意这里所指不 ５ｐ ｐ 是氯含量 ６％的药物浓度达到 ２ ｍ ５ ５ｐ 。 ｐ
１刚 甜 ．
ｍ 协 ｛ ｓ ｈ ｝ ｛ｃ ｒ ＿ ＿
在一 些问题严重 的池塘 中，死 亡率 可高达 １０ ，此时病虾往往表现 出昏沉 ０￣ ， ４ 和绝食。同时 ，病虾的肝胰腺严重缩小 ， 并 出现黑 白相 间的条纹 。甲壳的质地变 软 ，黑色的色斑富集其上。
分泌细胞进一步退化并结成团状 ，从肝 胰腺小管 的基膜上分离 ，脱落后进入肝
胰腺小管腔 。
报道 中 ，黄曲霉毒素 Ｂ１ 和能够抑 制有 丝 分裂 的苯 菌灵都 可 以给 肝胰 腺造 成