下载文档原格式
doi:10.3969/j.issn.l004-2091.2021.04.003对虾白便综合征的研究进展王雪芹",阳涛"(1.水产健康养殖四川省重点实验室，四川成都610041;2.通动物保健研究所，四川成都610041)摘要：简述了对虾白便综合征(white feces syndrome,WFS)的发病症状、流行特点和危害。
分析了对虾白便综合征的病因,包括:肝胰腺和肠道病变、弧菌感染、肝肠T虫感染、消化系统微生物结构变化和其他因素。
从种苗、水质、饲料和管理等方面提出了对虾白便综合征的防治措施。
关键词：对虾t白便综合征;发病症状;流行特点；病因研究；防治措施中图分类号:S&56文献标志码:A文章编号:1004-2091(2021)04-0010-06水产养殖业作为人类动物蛋白质的第三大来源，占全球人口蛋白质消耗量的17%叫太平洋白虾〈Pacific white shrimp)和凡纳滨对虾(.Litop e naeus van-namei)是对虾养殖业最大产量的代表(2019年，全球产量达到4.1X1061,价值超过240亿美元)[2]o对虾作为重要的和贸易岀口水产品之一，越来越受到水产养殖行业的重视。
而近年来，随着养殖水的养殖的高的，对虾产受的，期E(EMS)>3]、急性肝胰腺坏死病(AHPND)>4]、肝胰腺坏死综合征(HPNS》51、白便综合征(WFS)[6-7]，来虾产量的，其中WFS害最为严重，。
现针对WFS的发病症状、流行害、病因研究、防治措施等5个方行。
1对虾白便综合征的发病症状和流行特点患WFS的虾体主要表现症状为:虾体出现空肠，，大,严重者对虾的白，，水面，期大量会散发恶臭。
初期，对虾表无明显病变，食欲减退。
随着病情加重，逐渐岀现吃料慢甚至不吃料或虾身瘦弱(壳肉分离)，检查病虾可看见其肠道饱满，G”象，脏开始萎缩、变小，观模糊，部分病虾红须、红腿道变粗，水漂的白便也增多。
进入梅雨季节，天气闷热，连续阴天、暴雨，池中浮游生物大量死亡,浮游动物如轮虫等大批滋生，精养池因停电或机械故障而终止增氧，从而诱发白斑病。
一、白斑病发病主要症状：患此病的虾厌食，死虾空胃，反应迟钝,弹跳无力，不合群，在池边打圈，异常行为可在几小时内重复出现，直到最后无力活动。
病虾体色正常或变红（多为并发病），大多数病虾头胸甲膨大，且易被剥开，腹部容易揭开而不连真皮，鳃发黄、肿胀、肝胰腺肿大、颜色变淡、糜烂易碎。
发病后期虾体皮下、甲壳及附肢出现白色斑点，以头胸甲处最为显著，严重者白点连成斑。
二、预防措施白斑症病毒病目前尚无有效的防治药物，根本措施是强化饲养管理，进行全面综合预防。
（1）增强对虾体质，提高对虾抗病能力。
增强对虾体质的途径有两条：一是供给优质的饵料，准确计算用量；二是加强水质管理，为对虾创造一个优良的环境条件。
（2）调整养殖模式。
养殖中因地制宜，打破单一养殖模式，探索混养模式。
利用虾、鱼、蟹、藻对空间水质的不同要求及虾、鱼、贝的不同食性开展虾池立体综合养殖，以改善虾池生态环境，预防虾病。
（3）放养健康、优质的种苗。
种苗是健康养殖的关键环节，选择健康、优质的种苗可以从源头上切断白斑综合症病毒的传播链。
（4）控制合理的放苗密度。
放养量不宜过多，放养密度过大，虾体互相刺伤，病原更易入侵虾体；此外大量的排泄物、残饵和虾壳、浮游生物的尸体等不能及时分解和转化，产生非离子氨、硫化氢等有毒物质，使溶解氧不足，虾体体质下降，抵抗病害能力减弱。
（5）药物防治。
经常使用微生态制剂改良水质，选用维生素或中草药免疫增强剂添加到饲料中内服，增强对虾免疫力，常用含碘、含氯消毒剂进行消毒。
感谢您关注米来Milai•山东特比特水产科技有限公司创办的《米来Milai资讯》微信公众平台。
主办单位：米来Milai协办单位：水产药品加工厂群微信公众平台号：milai222。
白对虾病害防治论文（共5篇）第一篇：白对虾病害防治论文一、常见病毒发生的特点(一)白斑杆状病毒病相对于桃拉病毒而言，白斑杆状病毒病主要针对是幼虾。
致病性强，感染率和死亡率均为90%以上。
主要是虾在进食的时候携带的病毒通过口和消化道进入体内进而感染而致病。
发病初期虾的行动反应迟钝，虾体颜色变暗，而后随着虾体附着物增多，虾壳上开始出现白色圆点，白点持续增多形成白斑，短期内虾壳和肌肉分离，肝胰腺肿大糜烂而死亡。
(二)固着纤毛虫病发病原因主要由水体中的聚缩虫和钟虫在寄主体内进行的出芽生殖或者五星繁殖而引起的。
发病虾类主要表现的症状常在鳃、头胸甲、附肢上出现黄褐色或黑色的绒毛状物，肉眼看去有粗糙感，烂鳃。
染病虾活力下降，生长发育停止，结果引起虾类死亡。
二、主要防治措施病毒发病多为隐性突发性，病毒传播迅速，死亡率高，如果单纯的采用治疗的手段在短时间内很难凑效，为此应在防治上采用“防治相结合”的方针，重点放在加强水产养殖技术改善和优化养殖水体环境，大力推广应用有益细菌生物制剂，降解水中有害因子，切断病毒传播途径，控制病源传播，提高适应能力、增强自身免疫力，根据以上情况提出如下措施和建议:(一)预防措施一是放苗前对全池进行清塘消毒，泼洒二溴海因粒、水质解毒保护剂以清除水中重金属离子及有毒因子。
二是在整个养殖期间，采用水质调控技术，定期检测水质pH值、亚硝酸盐、溶氧量、氨氮含量是否符合指标，定期向水中喷洒水质调节剂进行水质调解，从而调控藻类的生长，保持水质良好稳定。
三是使用无污染和不带病毒的水源，养殖期间根据水质的透明度、水质的好坏可适量的增加或者减少换水量，但每次换水量不超过30%为宜，水质的pH值变化幅度不超过0．5最好。
四是经常性多采用活菌生物净水剂，保持养虾池环境因子和池内藻的相对稳定;并在饲料中添加免疫多糖和维生素C，增强对虾抗病力。
五是可以在池塘四周移栽部分水生植物，挡风护堤，吸收氨氮改善水质;而且还可以起到降温作用，为虾提供良好的生长环境。
感染白斑综合征病毒的斑节对虾免疫酶变化特征摘要:研究了斑节对虾(Penaeus monodon)感染白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)后的发病情况和4种免疫酶活性的变化特征｡通过对斑节对虾进行WSSV急性攻毒试验,发现在感染50 h左右出现死亡高峰,感染60 h后大部分死亡虾出现明显的白斑｡血液酚氧化物酶(PO)､过氧化物酶(POD)､超氧化物歧化酶(SOD)､酸性磷酸酶(ACP)活性在感染WSSV后都呈现先降低再升高再降低的趋势,并在感染后60 h左右,活性达到最大值｡肝脏､肌肉组织中的ACP､SOD活性变化规律与其在血液中的变化类似,肝脏中的ACP､SOD活性明显高于肌肉组织中的活性｡关键词:斑节对虾;白斑综合征病毒(WSSV);免疫酶Characteristics of Immuno-enzymes of Penaeus monodon Infected with White Spot Syndrome VirusAbstract: The mortality of WSSV-infected Penaeus monodon, and the enzyme avtivity for four immuno-enzymes were investigated. It found that the highest shrimp mortality appeared around 50 hours, and the white spots occurred on most of the died shrimps around 60 hours after WSSV infected. The activity of phenoloxidase(PO),peroxidase(POD), superoxide dismutase (SOD) and acid phosphatase(ACP) in blood decreased at first after WSSV infected, then increased to the highest enzyme avtivity around 60 hours and decreased at last. The trends of SOD and ACP activity in liver and muscle were similar to the changes in blood, however, the activity of SOD and ACP in liver were higher than those in muscle.Key words: Penaeus monodon; WSSV; immuno-enzymes甲壳类动物缺乏由抗体介导的免疫反应,不能通过抗原抗体反应来达到自我保护的目的｡其免疫机制为非特异性免疫,通过血细胞及体液因子的活性来抵抗病原微生物的入侵｡血液酚氧化物酶(PO)､超氧化物歧化酶(SOD)､过氧化物酶(POD)以及酸性磷酸酶(ACP)等免疫酶的活性高低经常被用作评价免疫强弱的指标｡对虾的非特异性免疫系统也受很多因素的影响,比如蜕壳､水温突变､溶氧高低､外界刺激和病毒入侵等｡关于虾类的免疫应答机制,已经有很多研究报道,刘庆慧等[1]对中国对虾感染白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)后血细胞数量变化做了研究报道;Songa等[2]分析了感染桃拉病毒后凡纳斌对虾血淋巴和肌肉组成的生化变化;Yoganandhan等[3]报道印度明对虾在感染WSSV后,血淋巴细胞密度和血清蛋白浓度等免疫参数与正常虾有很大差异;宋林生等[4]报道过南美白对虾感染WSSV后SOD活性和过氧化氢酶(CAT)活性的变化｡还有很多其他学者关于对虾免疫反应机理的报道,但这些文献资料所阐述的反应规律不尽相同,有不同的试验结果和理论解释｡由于WSSV病毒病已经成为制约对虾养殖业发展的主要因素,而对虾的抗病能力主要通过非特异性免疫系统实现,因此对参与非特异性免疫的各种免疫酶活性的研究是对虾抗病研究的热点之一｡本研究通过斑节对虾(Penaeus monodon)WSSV急性感染试验,探讨了斑节对虾在感染WSSV后的发病情况和4种免疫酶在体内不同组织的活性变化｡1材料和方法1.1试验材料1.1.1试验用虾试验用斑节对虾由中国水产科学研究院南海水产研究所三亚热带水产研究中心提供｡挑选大小均匀(7.0±0.2)cm､活力旺盛的个体进行WSSV 急性攻毒试验｡1.1.2WSSV病原用白斑症状明显的斑节对虾作为感染材料(PCR检测WSSV阳性,超低温保存)｡取其肌肉组织0.1 g,加入1 mL磷酸盐缓冲液(NaCl 8 g,KCl 0.2 g,KHPO4 1.44 g,KH2PO4 0.24 g,用HCl调节pH值至7.4,定容至1 000 mL,灭菌常温保存)冰浴匀浆,10 000 r/min离心20 min后取上清液,上清液经0.45 μm滤膜过滤后稀释1 000倍作为试验用病毒液｡1.1.3试剂左旋多巴(L-dopa)(Sigma公司生产);PCR buffer､dNTP､Taq DNA聚合酶等购自大连宝生物工程公司;ACP检测试剂盒､SOD检测试剂盒､考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所;邻苯二胺等试剂均为国产分析纯｡1.2试验方法1.2.1WSSV急性攻毒试验试验前随机取虾10尾,进行WSSV病原抽样检测,检测方法采用巢式PCR法[5]｡攻毒试验设感染组和对照组,感染组4个平行,对照组4个平行,每个平行30尾,用于统计试验虾的死亡时间｡另设与前述相同的两个试验组,用于采集血液､肝组织和肌肉组织; 感染组每尾虾用1 mL一次性注射器注射病毒液0.05 mL;对照组每尾虾注射PBS 0.05 mL｡试验在16个500 L的玻璃钢桶中进行｡记录每尾虾的死亡时间,并在试验开始后0､12､24､36､48､60､72 h采集发病对虾的血液､肝组织和肌肉组织｡肝组织和肌肉组织采集后及时冷冻保存;血液采集后4℃保存过夜,第二天离心取血清｡试验期间,水温29~31℃,盐度3.0%~3.2%,pH值7.8~8.2,溶氧6.6~7.0 mg/L｡1.2.2免疫酶活性检测肝组织和肌肉组织加0.9%的生理盐水研磨成10%的组织匀浆,离心后取上清液｡血清和上清液用于免疫酶活性的检测｡1)PO活性的检测｡以L-dopa为底物,采用改进的Ashida[6]的方法按以下步骤进行测定:①配制50 mL 0.01 mol/L的L-dopa(L-dopa 0.0986 g,去离子水50 mL)和0.1 mol/L pH值为6.0的磷酸盐缓冲液(K2HPO4 1 mol/L 13.2 mL,KH2PO4 1 mol/L 86.8 mL,稀释至1 000 mL);②在96孔酶标板中,每孔加200 μL的0.1 mol/L pH 值为6.0的磷酸盐缓冲液;③每孔再加入10 μL血清和10 μL 0.01 mol/L的L-dopa,室温下混匀;④置于酶标仪中,室温28℃左右,固定吸收波长490 nm,每隔2 min测量1次,连续测量10次,测其血清酶动力学OD490值;⑤以OD490对反应时间作图,以试验条件下每分钟OD490值增加0.001定义为一个酶活力单位｡2)POD相对活性的检测,采用改进的雷质文等[7]的方法:①在96孔酶标板中加入血淋巴上清液,20 μL/孔;②加入180 μL显色缓冲液(一水柠檬酸7.3 g,Na2HPO4·2H2O 11.86 g,去离子水定容至1 000 mL);③置于酶标仪中,读取490 nm处的OD值(A1);④向所有样品孔中加入20 μL显色液(邻苯二胺4 mg,30% H2O2 4 μL;显色缓冲液10 mL);⑤置酶标仪中摇匀后,避光显色15 min,读取490 nm处的OD值(A2);⑥血淋巴上清液中POD 相对活性以APOD=(A2-A1)×稀释倍数表示｡SOD､ACP活性及蛋白质浓度的检测,按南京建成试剂盒内说明进行｡1.3数据处理统计不同时间段虾的死亡个数,计算免疫酶活性高低,用SPSS 16.0对不同时间点4种免疫酶的活性高低进行单因素方差分析,并做Duncan’s多重比较,结果以平均数±标准差来表示｡2结果2.1斑节对虾WSSV急性感染后的发病情况斑节对虾在抽样检测中均为WSSV阴性｡如图1所示,综合感染组4个平行斑节对虾的发病情况发现,注射感染24 h前后,部分虾活力减弱,弹跳无力,对外界刺激反应迟钝;感染32 h左右开始有虾死亡;感染50 h后,部分虾的虾壳轻度红色,头胸甲膨大易剥落,肝肥大,血液变稀,凝血力下降,出现死亡高峰;感染54 h左右,出现第一尾带有明显白斑的死虾｡在感染60 h左右,大部分死亡对虾出现明显白斑｡对照组试验期间没有死亡对虾｡2.2免疫酶活性分析2.2.1血液PO活性的变化特征斑节对虾感染WSSV后,0~24 h血液PO活性下降;24 h后,活性开始恢复,到感染60 h活性达到峰值,并且略高于初始活性;60~72 h,血液PO活性又开始下降;感染0､60 h血液PO活性与感染24､36､48､72 h血液PO 活性存在显著差异(P<0.05)(图2)｡对照组7个时间点血液PO活性大小范围(6.08±0.18)U,不同时间点活性基本相同,没有显著差异｡2.2.2血液POD相对活性的变化特征感染WSSV后,0~36 h血液POD相对活性下降;36 h后,相对活性开始恢复,到60 h相对活性达到峰值(图3)｡各时间点血液POD相对活性没有显著差异｡对照组7个时间点血液POD相对活性大小范围(2.22±0.18),比较稳定,活性基本相同｡2.2.3不同组织ACP活性的变化特征由表1可知,血液､肌肉组织､肝脏组织ACP 活性随感染时间的延长均有先降低再升高再降低这样一个过程,与血液PO和POD活性随感染时间的变化(图2和图3)类似｡血液ACP活性在感染60 h达到峰值,与其他时间点ACP活性存在显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01);肝脏与肌肉ACP活性在感染36 h达到峰值,肌肉组织ACP活性随感染时间延长没有显著差异;肝脏组织36 h ACP活性与12､24 h存在出现极显著差异(P<0.01);另外肝组织ACP活性明显高于肌肉组织｡对照组血液､肌肉及肝脏7个时间点ACP活性没有显著差异,分别与其0 h活性值相近｡2.2.4不同组织SOD活性的变化特征由表2可知,三种组织SOD活性随感染时间的变化与血液PO和POD的变化(图2和图3)类似｡血液与肝脏SOD活性在感染60 h达到峰值;肌肉SOD活性在感染36~48 h达到最大值;60 h血液SOD活性与24 h存在显著差异(P<0.05);36 h和48 h肌肉SOD活性与12､60､72 h存在显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01);肝脏组织SOD活性明显高于肌肉组织;对照组血液､肌肉及肝脏7个时间点SOD活性没有显著差异,分别与其0 h的活性值相近｡3讨论Tang等[8]用病毒定量检测的方式研究了病毒在斑节对虾体内的扩增过程,结果显示0~24 h为缓慢扩增期,24~48 h为指数增长期,48 h后为平台期｡本试验所得死亡曲线(图1)与病毒扩增过程吻合,32 h左右斑节对虾出现死亡,说明已经到了病毒大量扩增的阶段,体质较弱的开始死亡;48 h后病毒扩增到了平台期,病毒粒子大量存在,此时为本试验感染50 h左右斑节对虾的死亡高峰｡感染50 h内死亡的对虾,在甲壳上没有明显的白斑;而感染60 h后死亡对虾,甲壳上大部分有明显白斑,这一结果与谢数涛等[9]的研究结果基本吻合｡通过与已报道的研究结果进行比较,本试验所使用的病毒材料在感染斑节对虾时的毒力与10年前没有明显变化,具有广谱性特征,因此用这些病毒感染斑节对虾后所测定的免疫酶活性的结果,具有一定的代表性｡PO是一种氧化还原酶,酚氧化物酶原激活系统是一个复杂的酶级联系统,该系统中的因子以非活化状态酚氧化酶原的形态存在于血细胞颗粒中,类似于高等动物的补体激活系统｡王雷等[10]､江晓路等[11]报道了中国对虾PO活性的存在和激活机制,认为PO在甲壳动物中起识别和防御作用｡POD的功能是通过过氧化氢酶的作用,将有害的细胞代谢产物过氧化氢分解成水和氧气,起到细胞保护作用,但POD在免疫反应中的地位仍不十分清楚｡ACP是一种磷酸单酯酶,在对虾体内具有清除､消化､水解异物的作用｡刘树青等[12]认为ACP是巨噬细胞溶酶体酶的标志酶,在甲壳类血液和血细胞中有重要的防御功能｡SOD是生物体内非常重要的一种抗氧化酶,能保护功能大分子不被破坏､减缓机体衰老｡近年来的研究表明,SOD活性与生物的免疫水平密切相关,可以用它的活性变化作为衡量对虾免疫状态的指标,甚至是定量指标｡本试验通过对斑节对虾进行WSSV急性攻毒试验,动态检测了这几个指标在不同感染时间的活性,除血液POD､肝脏SOD和肌肉ACP活性在不同的感染时间变化不显著以外,其他的都存在显著(P<0.05)或极显著性差异(P<0.01),加之在对照组中4种免疫酶的活性很稳定,可以推测PO､SOD､ACP的活性变化与WSSV感染复制有关,是斑节对虾机体应激后所作出的防御反应｡综合本试验中PO､POD､SOD和ACP活性在血淋巴､肌肉和肝脏中的变化,可以发现它们都有在感染初期活性降低,感染中期活性升高,感染后期活性再次降低的规律｡这一结论与邱德全等[13]研究在不同氨氮浓度下携带WSSV的凡纳滨对虾发病后酚氧化物酶酶活性变化规律具有一致性;与黄旭雄等[14]试验中明对虾急性感染哈维弧菌和WSSV后,血液SOD､PO变化规律相类似｡但是关于感染病菌后血液免疫酶的活性变化,不同学者有不同的结论,有报道显示中国对虾在注射一定量弧菌和大肠杆菌后,其血淋巴PO活性降低[10],严重感染WSSV的中国对虾PO活性也显著下降[7]｡同时也有报道称给斑节对虾投喂芽孢杆菌后,PO活性比对照组显著增高[15];用活的嗜水气单胞菌注射罗氏沼虾,血液PO活性24 h内升高4倍后又恢复到原来水平[16]｡本试验中4种免疫酶活性变化与上述报道也有类似之处,PO､SOD等感染72 h后最终酶活性也都显著下降,符合酶活性在感染后下降的观点,而且在最终活性降低之前有一个活性恢复的过程,这也与酶活性升高观点相吻合｡另外肝脏组织中的ACP､SOD活性均高于肌肉组织可能是由于肝脏为免疫器官的原因｡参考文献:[1] 刘庆慧,黄捷,杨冰,等. 人工选育中国对虾两个群体WSSV感染相关免疫与生化因子的变化[J]. 海洋水产研究,2005,26(6):22-27.[2] SONGA Y L,YU C L,LIEN T W,et al. Haemolymph parameters of Pacific white shrimp(Litopenaeus vannamei) infected with Taura syndrome virus [J]. Fish & Shellfish Immunology,2003,14(4):317-331.[3] YOGANANDHAN K,THIRUPATHI S,HAMEED A S S. Biochemical,phsiological and hematological changes in white spot syndrome virus-infected shrimp,Penaeus indicus [J]. Aquaculture,2003,221(1-4):1-11.[4] 宋林生,苏建国,蔡中华,等. 正常与感染白斑病的凡纳滨对虾几项免疫指标的初步研究[A].甲壳动物学论文集(第四辑)[C]. 北京:科学出版社,2003.335-340.[5] 李文杰,周国勤,朱菲莉,等. 检测克氏原螯虾白斑综合症病毒(WSSV)的巢式PCR方法的建立与初步应用[J]. 南京师大学报(自然科学版),2009,32(2):98-101.[6] ASHIDA M. Purification and characterization of pre-pheonoloxidase fromhemolymph of the silkworm Bombyx morl[J]. Arch Biochem Biophy,1971,144(2):749-762.[7] 雷质文,黄捷,杨冰,等. 感染白斑综合症病毒(WSSV)对虾相关免疫因子的研究[J]. 中国水产科学,2001,8(4):46-51.[8] TANG K F J,LIGHTNER D V. Quantification of white spot syndrome virus DNA through a competitive polymerase chain reaction[J]. Aquaculture,189(1-2):11-21.[9] 谢数涛,何建国,李色东,等. 斑节对虾白斑症的发病历程[J]. 暨南大学学报(自然科学与医学版),2000,21(5):70-74.[10] 王雷,李光友,毛远兴. 中国对虾血淋巴中的抗菌､溶菌活力与酚氧化物酶活的测定及其特性研究[J].中国水产科学,1995,26(2):p[14] 黄旭雄,周洪琪,宋理平. 急性感染对中国明对虾非特异免疫水平的影响[J]. 水生生物学报,2007,31(3):325-331.[15] SUNG H H,HWANG S F,TASI F M. Responses of giant freshwater prawn (Macrobrachium rosenbergii) to challenge by two strains of Aeromonas spp[J]. J Invertebr Pathol,2000,76(4):278-284.[16] MOULLAC G L,SOYEZ C,SAULNIER D,et al. Effect of hypoxic stress on the immune response and the resistance to vibriosis of the shrimp Peaneus stylirostris[J]. Fish Shellfish Immunol,1998,8(3):621-629.。
严重危害对虾生长的白斑病，养殖户要知道的发病原因和防治措施白斑病是对虾感染病毒引起的严重性传染病，在1991年的时候，我国开始出现这种疾病，现在几乎所有养殖对虾的国家都有发生，每年给水产养殖业造成了很大的经济损失。
它的病原是对虾白斑综合症病毒，一种杆状的双链环状DNA病毒。
感染发病以后，对虾摄食量减少或停止，行动缓慢，无力活动，最后腹部朝上沉入池底或是被其它的对虾吃掉，养虾池塘面积较大、放养密度较高很容易发生病毒感染。
因为对虾白斑病的危害，我国养殖对虾的产量由1991年的21.96万吨骤降到1994年的6.39万吨。
经过对白斑病的研究和防治，对虾产量逐步恢复，2017年时我国的对虾养殖产量已达186.4万吨。
对虾白斑病病毒的传播途径•白斑病病毒的宿主分为两类，敏感宿主和潜在宿主，目前已发现有98种水生动物都是它的宿主，像海水甲壳类动物，现在人们养殖的对虾、蟹类、野生虾类都是白斑病病毒的宿主。
浮游微藻是养殖池塘中一类很重要的生物，也是浮游动物和养殖虾类的生物饵料，感染动物排出的病毒被微藻吸附，从而成为病毒的携带者，将病毒传播给浮游动物和对虾。
•微藻可以吸附病毒，并使它的活性保持时间延长4倍以上，吸附在微藻表面的病毒可以被轮虫或桡足类摄食，并感染浮游动物，感染病毒的轮虫或桡足类可产生病毒的休眠卵，并且孵化出的幼体可以将病毒传染给对虾幼体。
通过调查和取样，在暴发白斑病的池塘中，中国对虾和日本对虾以及池中的脊尾白均可检测到阳性，阳性率大小与发病的程度有关；桡足类检测为阳性，说明桡足类是对虾白斑病毒中宿主之一，由携带病毒的桡足类水平传播给对虾等以此为饵的甲壳类动物。
对虾白斑病暴发与环境的关系1、对虾白斑病致病性与养殖水体物理环境的关系•有很多的研究者发现，下大雨后养殖的对虾容易暴发白斑病，可能就是养殖水体的温度急剧变化所致。
另外还发现对虾白斑病暴发与池塘水深、换水量等都有关。
这也许就是池塘的温度、盐度的变化有关，水越浅、换水量过大对池塘温盐环境的影响就越大，对虾越容易发生疾病。
南美白对虾细菌性白斑病与病毒性白斑的区别及防治对策南美白对虾在养殖过程中如果受到细菌和病毒的侵袭，头胸甲壳上有点状或鱼鳞状白斑。
一些养殖户对白斑病十分害怕，认为一旦对虾患上白斑病，就无法治愈了，其实，很多白斑病是可以治愈的。
现将南美白对虾细菌性白斑和病毒性白斑的症状、预防措施和治疗方法做一介绍。
1症状1.1细菌性白斑1.1.1目测：将病虾头胸甲剥离后，对着光线观察，甲壳完好。
1.1.2镜检：放大100倍或160倍，有的病虾甲壳上有不明显的点状小洞，一个视野可见3～10个，此种现象为初发阶段，病虾头胸甲不易剥离，此时对对虾没有造成伤害。
有的甲壳上有点状小洞，洞中间有一黑点，此为坏死组织，一个视野可见5个以上黑点，头胸甲易剥离，此类对虾已出现摄食减少或其他不适症状。
1.2病毒性白斑1.2.1目测：将病虾甲壳剥离后，对着光线可见白点。
1.2.2镜检放大100倍或160倍，有的病虾甲壳上有点状白斑，白斑有2层、3层和4层之分，形状如同不规则的大小鱼鳞片重叠，中间一层小而深，此为轻者，此类病虾头胸甲易剥离，病虾已出现零星死亡。
有的病虾甲壳上呈多层礼花对外喷射状，中间有眼点，严重的接近穿通甲壳，此类病虾已经出现批量死亡。
无论轻重病毒性白斑都伴有细菌性白斑症状。
1.3共同特点一是海水养殖池多发于淡水养殖池；二是均侵袭3cm以上的对虾；三是均有红尾、肠炎或肝脏异常等综合症。
2病因投饵次数多，投饵量大，排泄物也多，易污染水质；残饵等有机物发酵造成池内水质、底质变坏，病菌大量繁衍；虾在池水恶化、底质变坏的环境内自身免疫力和抵抗力下降，因此大量病菌侵袭对虾。
对虾甲壳上先受细菌侵袭，变成点状白斑，此时若不及时采取措施，点状会逐渐变大，白斑中间出现点状黑色死亡组织；如不采取有效措施，对虾受侵害，免疫力和抵抗力急剧下降，其他综合症状出现，细菌、病毒大量侵入对虾，形成病毒性白斑综合症而造成病虾批量死亡（病毒侵袭病灶很少与细菌侵袭病灶重叠）。
南美白对虾白斑病毒病的成因与防治摘要简要总结南美白对虾白斑病毒病的症状；对该病的成因进行分析，主要在于三个方面：一是虾体自身携带病毒、二是水环境污染、三是长期水质不化验；并提出具体的防治方法。
关键词南美白对虾；白斑病毒病；成因；防治南美白对虾（Penaeus vannam ei）以其生长速度快、抗逆性强、广盐性、适宜高密度养殖等优点，在我国南北方沿海海水、半咸水、淡水进行大面积养殖，目前池塘养殖产量可达30～45t/hm2。
近年来，随着南美白对虾养殖的普及与推广，其病害不断发生，尤其是白斑病毒病，发病之迅速，危害之大，使养殖户深受其害。
若发病较轻，治疗及时，损失相对还少一点；若发现较迟，治疗不及时，可能会出现大面积的死亡，甚至全军覆没，严重挫伤了养殖生产者的积极性。
笔者现根据在基层一线的实践，就南美白对虾白斑病毒病的症状、成因和防治进行简要分析，供广大养殖户在生产中参考。
1症状病虾胸腹部常有白色或暗蓝色斑点，发病后期虾体皮下、甲壳及附肢呈现白色斑点或甲壳软化、头胸甲易剥离、皮分离，肌肉常常粘在甲壳上。
病虾游动缓慢，有的侧游、离群，体色暗微红色，基本不摄食。
池塘投饵量明显下降，对虾死亡多发生在天亮以前，虾池中死虾数量急速增加，2～3d内可从十几尾增加至上百尾。
2成因2.1虾体自身携带病毒由于育苗场在选择亲虾来源时没有严格按照繁育程序进行选种和繁育，大都追求利益最大化，购进劣质价廉的苗种，或人为降低繁育成本，投饲一般性饵料，致使幼小虾子小时就营养不良，养殖过程中小虾米自然抵抗力不强。
有条件的最好能投一些丰年虫等。
2.2水环境污染水环境污染分为外因污染和外源污染。
2.2.1外因污染。
由于没能及时换水或进行水质调节，没能科学地投饵，发现有的养殖户1d投饵3次，早、中、晚各投1次，均衡投料，而没能掌握虾的活动规律。
南美白对虾有着日伏夜出的特性，白天有趋光性，夜间其活动力和摄食力明显增强，故白天投饵不当，会滞留在塘底，污染水体，一般1g的饲料在水体发酵分解相当于4g的粪便在污染水体。
对虾白斑病难以治疗？提前预防是关键展开全文对虾白斑病，白斑综合症是由白斑综合症病毒（WSSV）引发的病症，主要危害对象为斑节对虾、凡纳滨对虾（南美白对虾）、中国对虾、日本对虾等。
对虾白斑病从发现少量病虾到绝大部分死亡仅一周的时间，短期内即可造成对虾活力下降，而且传播速度快，无特效药物可治疗，死亡率高，是威胁对虾养殖业健康发展的重要疾病之一，也是对虾养殖世界性难题。
对虾白斑目前普遍认为的对虾白斑病的致病因素1、改底不彻底。
特别是养虾老池或养鱼池，底泥较多，在缺氧、暴雨、倒藻、池底质恶化，水体有害物质（氨氮、亚硝酸盐、硫化氢等）超标等条件存在时，会导致对虾体质下降，可诱发对虾白斑病的暴发。
2、病原侵入。
虾苗自身携带病毒病，或者对虾机体内部抵御能力不足，此时病原体侵会造成病原体在体内的大量增殖，最终导致对虾白斑病。
3、营养不良。
长期投饵不足或投喂劣质饵料，使对虾长期处于饥饿状态，导致体质较差，免疫力下降，诱发白斑病。
4、放苗密不合理，超出科学范围，致使对虾白斑病发病快，传染率高，死亡率也高。
对虾白斑科学防控是应对对虾白斑病的关键：1、勤改底、定期检测加大改底的力度，定期检测池水pH值、氨氮、亚硝酸盐等指标以及溶氧藻象等情况，同时保持水体稳定，合理增氧，对虾作为底栖的生物，一旦底部恶化将会造成对抗病力下降。
对虾白斑2、防止细菌感染加强对水质的综合管理，定期消毒，控制养殖水体中细菌（弧菌）感染，注意发病前期的抗菌药使用。
对虾白斑病一直是水产养殖的难题，也是高发病，传播快、死亡率高，容易造成严重的经济损失。
所以一定不能大意，要做到以防为主，防重于治。
根据不同情况及时采取相应措施，防止病害扩大。
关于对虾白斑综合症的研究进展与讨论摘要：对虾白斑综合症病毒(White spot syndrome virus, WSSV)是对虾养殖的主要病害之一，能导致养殖的对虾大规模死亡。
WSSV是含有囊膜的无包涵体杆状双链DNA病毒，属于线形病毒科(Nimaviridae)，白斑病毒属(Whispovirus)。
WSSV传染能力强，致死率高，且能感染多种虾、蟹。
本文对对虾白斑综合症病毒的研究现状做了详尽的报道，以期为后来的研究提供便利，并在最后用哲学的观点对其进行了相关讨论。
关键词：对虾；病害；对虾白斑综合症病毒；检测；基因；蛋白质1 对虾养殖及其病害1.1 世界对虾养殖情况由于全球对虾消费市场的不断扩大，且海洋中能捕捞的量逐年减少并已不能满足市场的需求，所以对虾养殖业便逐渐兴起。
1982年，对虾养殖产量在世界虾类总产量中的比重不到5%，到2003年，已上升到37%。
目前，虾类的消费主要集中在美国、欧盟、日本、中国，消费量约占世界虾类产销量的75%，而主要对虾类生产国，包括海洋捕捞和人工养殖对虾却主要分布在东南亚，少部分在西半球。
1997年-1999 年养殖对虾的国际市场价格非常好，于是一个新的对虾养殖高潮突然掀起，越南和印度成为对虾主要出口国。
2002年，中国养殖对虾产量超过泰国居世界第一。
2004年全世界虾关产量达到607。
9x104t，全球最大虾类生产国依次为中国、泰国、印尼、越南等，而西半球国家只有拉丁美洲厄瓜多尔居于主要产虾国的第十位，其次是墨西哥[1]。
在此背景下，全球养殖对虾的面积激增，产量大幅度增加，给国家和地区带来了巨额利润，使对虾养殖业得到更迅猛的发展。
近几十年来，世界各国对虾养殖业的快速发展，为全球粮食安全、食物供给、经济增长、国际贸易平衡、就业和扶贫等做出了巨大的贡献。
对虾养殖起源于亚洲，随着全球化进程的不断加快，许多南美国家基于本国的资源优势，大力发展对虾养殖业，特别是南美白对虾的人工养殖，目前亚洲总产量仍然位居世界对虾养殖产量的80%以上[2]。
1.2 我国对虾养殖业发展我国对虾养殖起步于20世纪80年代初期，经过数十年的不断努力发展，目前我国对虾产量已经位居世界第一。
在我国水产品出口市场上，对虾占有重要的位置。
我国对虾养殖发展可分为三个阶段。
(1)第一阶段为起步发展期：从上世纪80年代初到1987年，我国对虾养殖面积从几千公顷发展到近10万公顷，养殖对虾产量从几百吨增长到近20多万吨。
其特点为养殖中国对虾为主，人工育苗商业化，饮料生产工业化，水产冷冻加工业开始起步，对虾养殖成为辽宁、山东、河北三省水产养殖发展的最大亮点。
(2)第二阶段为萧条期：从1993年-1997年，对虾白斑综合症病毒暴发流行，全国对虾养殖产量从1992年的22万多吨，下降到1994年的5。
5万吨。
对虾养殖产量的急剧下降，造成了巨大的经济损失，给养虾养殖业带来了沉重的打击。
很多对虾养殖企业因病害严重，又无法控制，纷纷转移养殖其他经济种类海洋生物或者放弃。
(3)第三阶段为恢复-快速发展期：由于经历了灾难性瘟疫，对虾的病害防治引起了人们的不断重视。
从1998-2003年，历经多年的努力探索，政府和企业把对虾养殖业作为优势产业发展。
特别是1998年凡纳滨对虾在广东省的深圳、汕头等地养殖成功后，对虾产量开始缓慢恢复。
此时对虾企业把握各种机遇，排除不利因素，积极开拓国外市场，养殖对虾的出口出取得了重大成绩。
目前我国对虾产业已经进入新的发展时期。
2004年，我国海水养殖的对虾产量达到53。
5万吨，约占全球养殖对虾产量的31%，对虾养殖业进入了高峰阶段。
凡纳滨对虾又名南美白对虾，学名Litopenaeus vannamei，又称白肢虾，白对虾。
外形酷似中国对虾，平均寿命至少可以超过32个月。
成体最长可达24cm，甲壳较薄，正常体色为浅清灰色，全身不具斑纹。
在分类学上隶属于节肢动物门(Arthropoda)、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、游泳亚目(Natantia)、对虾科(Penaeidae)、滨对虾属(Litopenaeus)，是少数几种具有开放式纳精囊的对虾种类。
1.3 对虾主要病害20世纪80年代以来，随着世界沿海各国的对虾养殖业的蓬勃发展，其病害也日益突出。
由于对虾病毒性疾病的爆发，使得对虾养殖产量急剧下降，造成了巨大的经济损失。
近年来已报道的对虾疾病种类有对虾白斑综合症病毒(WSSV)、黄头症病毒(YHV)、桃拉综合症病毒(TSV)和传染性皮下造血器官坏死病毒(IHHNV)等数。
除给对虾养殖业带来严重经济损失之外，还对海洋资源的可持续发展造成巨大威胁，因此对虾病毒病的研究已成为当前世界虾病研究领域的焦点之一[3]。
我国对虾病毒病研究起步较晚，虽然近年有关对虾病毒病研究取得很大进展，但生产中存在很多问题仍未完全解决。
尽管在对虾养殖中可以加入抗生素增强对虾的抗病性，但大量的使用会抑制对虾自身免疫力。
对病毒引起的病害目前没有特殊治疗方法。
故国内外治疗对虾病普遍采用以防为主的方法，其根本目的是通过提高对虾自身免疫力以增强其抗病力。
因此研究甲壳类动物的免疫机制，有效的提高虾类本身的搞病能力，是解决病害问题的一条非常有效的途径。
据印度科钦大学科研人员在对虾养殖场长达2年的白斑病毒发病性研究，得出在常期使用的对虾养殖场，海水中低溶解氧、高含量的氨，以及温度、盐度、pH 值的不稳定波动对白斑综合症病毒的爆发会产生的相当大的阻力[4]。
自20世纪80年代末出现的对虾白斑综合症病毒(WSSV)暴发流行病，90年代初相继蔓延到所有亚洲主要养虾的国家，且均遭受重大损失。
1997年在南美洲对虾养殖区也出现流行，并对该区养虾业造成重大影响。
至今，WSSV仍然是全球对虾养殖的头号杀手。
2 对虾白斑综合症病毒的研究概况2.1 对虾白斑综合症病毒的命名、形态学特症和其分类学地位1992-1995间，各地研究人员相继在对白斑综合症的病原体进行了研究，从中分离纯化到一种新型的非包涵体型杆状病毒，并各自根据所分离病毒株的地域分布、原始宿主、形态发生以及主要病理症状，对各个分离株进行命名[5]，这期间共计出现了16个不同的名称。
到1995年，台湾学者Lo等[6]通过对从中国、印度、美国以及泰国分离的对虾白斑病毒DNA 进行研究。
结合发病对虾在临床症状、感染组织、病理变化、流行特点，发现各地的白斑综合症病毒差异极小，可能为同一种新型病毒。
1996年，Lightner[7]等建议将这类杆状病毒统一命名为白斑综合症病毒(White spot syndrome virus，WSSV)。
此后，该命名逐渐得到普遍的认可，并于2005年，在国际病毒分类委员会(ICTV)第8次报告中，正式将WSSV归属为线形病毒科(Nimaviridae)，白斑病毒属(Whispovirus)。
电子显微镜负染观察表明对于不同分离株，其完整的病毒粒子形态结构十分相似。
经观察发现，该病毒呈纺锤状、无包涵体，其个体大小约250-380nm⨯70-150 nm，一端略平带轻微四陷，一端略细，略细端有一细长鞭毛状结构(日本报道的病毒粒子并未发现存在类似结构)，大小约40mn⨯50mn，如图1所示。
完整的病毒粒子包括囊膜和核衣壳两部分。
囊膜由2层单位膜组成，厚度约为6-7 nm，两膜之间有较宽阔的间隙；紧接囊膜向内是核衣壳，其大小约为380-330 nm 80-60 nm；结构为螺旋排列的亚单位形成的圆柱体，两端各有一帽状结构，一端为较扁的梯形，另一端为三角锥形；螺旋带与核衣壳长轴垂直，螺距30nm，每咀螺旋宽26 nm，螺旋间距4mn；据推测螺旋结构可能是由指环域(ring-structure)堆积形成的，而每一个环结构则一排直径为10nm的亚单位组成。
核衣壳中是由核酸组成的致密的髓核。
病毒粒子主要存在于对虾的细胞核中[8]，但也有报道从福州地区分离到的白斑病毒仅存在于细胞质中[9]。
对WSSV的核糖核酸还原酶大小亚基因的进化分析的结果表明该病毒是一个新属。
此外，31个病毒(含WSSV)的DNA聚合酶(B家族)进化树分析的结果与此结果一致(图2)。
2.2 对虾白斑综合症病毒的感染宿主和传播途径WSSV的宿主非常广泛，已发现和确定的有近40种。
世界上所有的人工养殖对虾种类、大部分野生虾蟹类等都是WSSV的宿主。
主要养殖对虾斑节对虾、日本囊对虾、中国明对虾、长毛明对虾、凡纳滨对虾、刀额新对虾及野生短钩对虾、脊尾白虾体内均能检出WSSV 阳性，它们是WSSV的敏感宿主。
野生虾、沼虾、克氏原鳌虾、野生龙虾等虽不呈WSSV 阳性，但它们可被WSSV感染，且许多被感染个体不引起疾病症状，它们是WSSV的可能宿主[10]。
WSSV的经口摄食自然传播感染途径已得到认可，浸泡或共居是否为WSSV的传播感染途径还不很明确，有报道称WSSV在实验条件下确实可通过共居方式传播，但只能以潜伏的方式存在于感染对虾体内[11]。
但是，自然状态由于水体大小、水质以及动物行为等原因，尚不能确定是否如此。
自然状态下，WSSV似乎也不排除垂直转播的可能。
例如，朱山[12]用差异PCR在发病野生脊尾白虾组织及其卵扩增阳性，表明该病毒在野生脊尾白虾可经卵垂直传播。
2.3 对虾白斑综合症的症状、组织病理学分析以及感染动物模型对虾白斑综合症是一种病程短，死亡率高的对虾疾病。
一口虾池从发现少量病虾到绝大部分死亡历时约一周。
发病的初期，同一虾池中的大虾先于小虾死亡。
一个虾池发病后，其对虾的累计死亡率一般达不到100%，仍有少量对虾存活下来。
患病对虾浮头、靠岸、离群静卧池边，厌食、空胃、昏睡，对外界的刺激反应逐渐迟钝，部分病虾鳃及体表附着聚缩虫、丝状细菌、藻类及污物，病虾头胸部肿大。
一般对虾感染WSSV 36小时后即出现红体症状，48 h后甲壳可见白斑，尤其头胸部及腹部尾节甲壳内表面，严重时对虾触角及附肢上也有白色[13]。
其中，上皮组织和造血组织是病毒侵染的主要部位，其中对虾甲壳下表皮的上皮细胞和胃的上皮细胞最易感染病毒，鳃的上皮细胞、中肠的结缔组织及其它部位的结缔组织对WSSV敏感程度仅次于上述组织。
由于WSSV目前没有可用于增殖的细胞系，克氏原螯虾已经成为WSSV研究中最常用的替代宿主。
原因主要有两点：首先，WSSV在淡水克氏原鳌虾体内的增殖过程和增殖特性与其在对虾体内的相应行为非常相似；其次，从发病或死亡螯虾体内观察到的病毒粒子，其形态大小与从中国对虾中分离的病毒粒子相似或相同[14]。
同时，因为克氏原螯虾较对虾更适合室内人工喂养，所以它不仅为研究WSSV提供了一个良好的病毒增殖体系，而且为深入研究WSSV性质及与宿主之间的关系提供了一个相对理想的实验模型。
