中国海洋大学2005年招收硕士研究生入学考试试题
科目代码：315 科目名称：生物化学A（A卷）
答案写在答题纸上，写在试卷上无效 共 页 第 页 一、名词解释（共20分，每题2分，请答在答题纸上）
1.构型和构象；2.外显子和内含子；3.结构域；4.米氏常数；5.蛋白质工程；6.酶活性中心；7.Edman测序；8.DNA双螺旋结构；9.限速酶；10.第二遗传密码
二、填空题（共20分，每空1分，请答在答题纸上）
1.判断一个糖的D-型或L-型是以 碳原子上的羟基的位置作为依据。
2.凝集素是一类能与 相互作用的蛋白质。
3.Southern和Northern印迹法分别用于研究 和 转移和鉴定的常规技术。
4.生物体内各类物质有各自的代谢途径，不同代谢途径可通过交叉点上的关键中间代谢物而相互转化使各代谢途径得以沟通形成网络，其中三个最关键的中间代谢物是 、
和 。
5.核苷三磷酸在代谢中起着重要的作用： 是能量和磷酸基团转移的重要物质，
参与单糖的转移和多糖的合成， 参与卵磷脂的合成， 供给肽链合成时所需的能量。
6.丙酮酸脱氢酶系受 、 和 三种方式调节控制。
7.蛋白质折叠过程中常见的超二级结构有 三种类型。
8.脂肪酸生物合成中酰基载体为 ，脂肪酸β-氧化中酰基载体为 。
9.氨基酸代谢的一碳单位主要由 供给，核苷酸生物合成中的一碳单位由 供给。
10.赖氨酸带有3个可解离的基团，它们pK分别为2.18、8.95、10.53，其pI为 。
三、单项选择题（共20分，每题1分，请答在答题纸上）
1.下列哪些物质不是糖胺聚糖？（ ）
A、壳聚糖；B、硫酸皮肤素；C、肝素；D、透明质酸
2.在寡聚蛋白质中，亚基间的立体排布、相互作用，以及接触部位间的空间结构称为（ ）
A、三级结构；B、结缔现象；C、四级结构；D、变构现象
1 1 绪论
1．生物化学研究的对象和内容是什么？
解答：生物化学主要研究:
（1）生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能；
（2）生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化；
（3）生物遗传信息的储存、传递和表达；
（4）生物体新陈代谢的调节与控制。
2．你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。
提示：生物化学是生命科学的基础学科，注意从不同的角度，去理解并运用生物化学的知识。
3．说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。
解答：生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（—NH2）、羟基（—OH）、羰基（CO）、羧基（—COOH）、巯基（—SH）、磷酸基（—PO4 ）等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。
生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20种基本氨基酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性（N 端→C端）,蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性(5′、→3′ ),核酸的主链骨架呈“磷酸-核糖（或脱氧核糖）”重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。
生物化学简明教程（第四版)课后习题
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２ 蛋白质化学
１.用于测定蛋白质多肽链N端、C端的常用方法有哪些？基本原理是什么？
解答:（1) N-末端测定法:常采用2,4―二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。
①2,4―二硝基氟苯(DNＦＢ或FＤNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与2,4―二硝基氟苯(2,4―DNFB）反应(Sａngeｒ反应)，生成ＤNP―多肽或DNＰ―蛋白质。由于ＤNＦB与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNP―多肽经酸水解后,只有N―末端氨基酸为黄色DNＰ―氨基酸衍生物,其余的都是游离氨基酸。
② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNS―Ｃl)反应生成DＮＳ―多肽或DNS―蛋白质。由于DＮS与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此DNS―多肽经酸水解后,只有N―末端氨基酸为强烈的荧光物质ＤNＳ―氨基酸，其余的都是游离氨基酸。
③ 苯异硫氰酸脂(ＰITＣ或Edman降解)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯(PITＣ）反应(Eｄman反应),生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时，N―末端的PTC―氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来,除去N―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。
④ 氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的N端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的N端残基序列。
（2)Ｃ―末端测定法：常采用肼解法、还原法、羧肽酶法。
肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除C端氨基酸以游离形式存
在外,其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。
高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中
酸枣仁皂苷A及B的含量
李会军李萍
(中国药科大学生药学教研室南京210038)
摘要目的:建立酸枣仁中酸枣仁皂苷A及B的含量测定方法,为该药材提供质量控制标准。方法:应用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),AllspereODS-2(250mm46mm,5m)色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(70301)为流动相,测定了酸枣仁中酸枣仁皂苷A及B的含量。结果:分析了11批商品药材。酸枣仁皂苷A及B的平均回收率分别为924%(RSD=38%)和918%(RSD=39%)。结论:方法快速简便,重现性良好,可用于酸枣仁药材的质量控制。
关键词酸枣仁高效液相色谱法蒸发光散射检测器
酸枣仁为鼠李科植物酸枣Ziziphusjujubavar
spinosa(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥成熟种
子,具有养心安神的功效,是较为常用的镇静催眠
中药。酸枣仁皂苷A及B为其镇静催眠的有效成
分之一[1],含量测定方法报道的有一阶导数光谱
法[2]及薄层扫描法[3],本文首次采用高效液相色
谱法利用蒸发光散射检测器(ELSD)对酸枣仁皂
苷A及B进行了含量测定研究。实验结果表明该法灵敏度、稳定性和重现性均能满足要求,是一种
检测皂苷类成分的有效方法。
1仪器与试剂
日本岛津LC-10AD液相色谱仪;法国
SEDEX55型蒸发光散射检测器;HS色谱数据工作站(杭州英谱科技开发有限公司);各地酸枣仁药
材样品(见表1)均经作者鉴定;酸枣仁皂苷A及
B对照品由中国药品生物制品检定所提供,纯度
985%;试验用水为上海获特满公司产纯净水;
甲醇为淮阴化学试剂厂产色谱纯;其它试剂均为南京化学试剂厂产分析纯。
2色谱及检测条件
色谱柱:AllspereODS-2(250mm46mm
,5m);预柱:PellicularC18(75mm46
