乙型肝炎病毒前-X基因的研究进展

近年来 ， 研究还发现在某些病毒株的 Ｘ区前存在一个前一 ｘ区， 引起 了许多研究者的兴趣 。本文对前一 ｘ区的发现及研究进 展进行简要 的综述 。
【 关键词 】 乙型肝炎病毒
前一 ｘ基 因
乙型肝 炎病毒 （ Ｂ 属嗜肝 Ｄ Ａ病毒科 、 Ｈ Ｖ） Ｎ 嗜肝 Ｄ Ａ病毒 Ｎ
属 ， 因组全 长 ３ ０ 核苷酸 （ｔ左右 ， 基 ２０个 ｎ） 为部 分双链 环状 Ｄ Ａ Ｎ
型肝炎 患者 ２ ０ ００万人 。尽管 Ｈ Ｖ疫 苗研究取得了显著 的进展 ， Ｂ
但 病毒 致病 及感 染慢性化 的分 子和细胞机制仍未 阐明，慢性 乙 型肝炎 的治疗仍然未有突破。 对 ＨＢ Ｖ基因组 的研究是 阐明病毒致病机制的基础 。２ Ｏ世纪 ７ Ｏ年代以来 ， 随着基 因工程 、 Ｎ Ｄ Ａ重组技术 的兴起 ， 这方 面的研 究取得了很大的进展。１７ ９年 Ｇ ｌ ｅ 等 定了一株克隆在大 ９ ｅｉ ｒ 测 ｂｔ
的研究 。 以 ２例 乙型肝炎患者血 清 中抽提 的 Ｈ Ｖ基 因组为模 Ｂ 板， 应用长 距离且精 确 Ｐ Ｒ方法 （ Ａ— Ｃ ， Ｈ Ｖ基 因组 克 Ｃ Ｌ Ｐ Ｒ）将 Ｂ
Ｈ Ｖ携带率为 ９ ５ 据此 推算 全国有 ６ Ｂ ． ％， ７ ． ９亿人 曾感染过 Ｈ Ｖ， Ｂ 其中 １ 亿人长期携带 Ｈ Ｖ。据估计１ 目前全 国有现 患慢性 乙 ． ２ Ｂ ４ １ ，
隆到测序 载体 中， 选择 ５ 个克隆进行测序 。应 用 Ｄ Ａ Ｉ 软件对 Ｎ ＳＳ 上述 ５ 克隆的 Ｏ Ｆ进行分析 ， 现在 ５ 克隆的 Ｘ区上游均 个 Ｒ 发 株
有一个 Ｏ Ｆ 该区长 １８ｔ与 ｘ基 因融 和表达 。 Ｒ ， ６ ｎ， 为了排除选择样 本的误差 ，作者又在 Ｇ ｎ ａｋ中选择 了 ６株不 同血清型的全基 ｅＢｎ
因序列进行 比较 ， 结果发现一株 （ｄ） ａｒ存在前一 Ｒ 。此外 ， ＸＯＦ 作 者还应用 Ｂ Ａ Ｔ软件 ， ＬＳ 选择 以上 ５ 克隆 中的一个 ， 个 以其 前一 ｘ 区推 断的氨基酸残基序列在 Ｇ ｎ ａｋ中进行搜索 ，发现其中存 ｅＢ ｎ 储的 １ ９个克隆有前一 ｘ区多肽序列 ，ａ序列同源性 分别 为 ８％ ａ ５ ９ ％。２０ ４ ０ ４年 ， 董菁等Ⅲ 前 一 对 ｘ区做 了进一步研究 ， 再次证明了 Ｈ Ｖ基因组存在前一 Ｂ ｘ区 。作者从 １ ７例慢性 乙型肝炎患者血清
肠埃希菌载体 中的 Ｈ Ｖ ａ Ｂ （ ｗ血清型 ） ｙ 全长核苷 酸序列 ， 从而发
表了第一个 ＨＢ Ｖ全基 因组序列 ，长度为 ３ １２ ｔ ８ｎ。此后研究 表 明 ，Ｂ Ｈ Ｖ基因组含 ４个部分重叠 的开放读码 框（ Ｒ ）即前一 ／ ｏ Ｅ， ＳＳ 区、 ＣＣ区 、 前一 ／ Ｐ区和 ｘ区 。前一 ／ ＳＳ区编码 大（ Ｓ 、 ｓ 前一 １前一 ２及 Ｓ 、 前 一 ２及 Ｓ 、 （ ） 种 包膜蛋 白； ＣＣ区编码 Ｈ ｅ ｇ ） 中（ Ｓ ）小 ｓ ３ 前一 ／ ＢＡ 及 Ｈ ｃ ｇ Ｐ区编码 聚合酶 ； ＢＡ ； Ｘ区编码 Ｘ蛋白＿ 除以上 ４ 】 １ 。 个公认
组序列 中， 也发现 了前一 Ｒ 。１９ Ｘ Ｏ Ｆ ９ ５年 Ｔ ｋｈ ｓｉ 研究 了 ２ ａａ ａｈ 等嘲 ４
个来 自无症状携带者 和 ３ ３个来 自慢性肝炎患者的 ＨＢ Ｖ基 因组 序列 ， 结果发现 ５个来 自无症状携带者 、 １ ２ 个来 自慢性肝炎患者
的 ＨＢ Ｖ基 因组 中有前一 ｘ区 ， 分别 占 ２ ％和 ６ ％。１９ 年 Ｔ ｋ — １ ４ ９８ ａ ａ ｈｓｉ ９ ａｈ 等［ １ 为了研究 Ｈ Ｖ基 因组 中与肝细胞癌有关 的特 征 ，
塞旦 壁 盘盍
生 月箍 １ 卷第６ ２ ｌ 期 Ｊ ｌ Ｈ ｐｔｌ ｅｅ ｂｒ ０８ ０１ Ｎ ． Ｃｉ ｅｏ ， ｃ ｅ ２０ ． １ １ ｏ ｎ ｏ Ｄ ｍ Ｖ ． ６
・
综 述 ・
乙型肝炎 病 毒前 一 因的研 究进展 Ｘ基
张延峰 成 军
【 摘要 】 目 前公认乙型肝炎病毒基 因组含有 ４个部分重叠的开放 读码框 （ Ｒ ）即前一， 区 、 Ｃ Ｏ Ｆ， ｓ ｓ 前一 ／ 、 Ｃ区 Ｐ区和 ｘ区。
中提 取 Ｈ Ｖ基因组 ， Ｂ 应用多引物一 聚酶链反应进行 Ｈ Ｖ基 因 多 Ｂ
的 Ｏ Ｆ外 ， Ｒ 还发现在某些病毒株的 Ｘ区前存在一个前一 ｘ区 ， 这
一
发现 引起 了许 多研究者 的兴趣 ， 本文将对前一 ｘ区的研究进展
Ｈ Ｖ基 因 组 前 一 区的 发 现及 确 认 Ｂ Ｘ
型分型 ， 然后将前 一 区扩增 ， 隆到测序载体 后进行单克隆 测 ｘ 克
个 乙型肝 炎病 毒表面抗原 （ Ｂ Ａ ） Ｈ ｓ ｇ 阳性 的 日本肝细胞癌患者血 清样本的长距离 Ｐ Ｒ产物直接测序 ， Ｃ 获得了 Ｈ Ｖ基因组 的全长 Ｂ 核苷酸序列。 ４ 在 Ｏ个 Ｈ Ｖ基 因组序列 中， １ Ｂ 有 ９个（７５ 存在 ４ ．％） 前一 Ｒ 。２０ Ｘ Ｏ Ｆ ０ ３年 ， 董菁 等Ｉ对 Ｈ Ｖ前一 １ Ｏ Ｂ ｌ ｘ区进行 了较为深入
病毒 １Ｈ Ｖ感染呈世界性流行 ， ， Ｂ ２ 。 据世界卫生组织报道［ 全球约 ３ １ ， ２ ０亿人曾感染过 Ｈ Ｖ，其 中 ３５亿人 为慢性感染者 ，每年约有 Ｂ ．
１０万 人死 于 Ｈ Ｖ感染 所 致 的肝 衰 竭 、肝 硬 化 和肝 细 胞 癌 ０ Ｂ （ Ｃ ｏ中国属 ＨＢ ＨＣ Ｖ感染 高流行区 ，９ ２年一 ９ ５年全国病毒 １９ １９ 性肝炎血清流行病学调查显示 ， 我国人群 Ｈ Ｖ感染率为 ５ ．％， Ｂ ７６
序。 结果在测序的 ４ ５个克隆 中，７ （０ 克隆存在前一 ２ 个 ６ ％） Ｘ编码 区。 ０ ５年 ， ２０ 段学章等【 】 ｌ 应用 Ｄ Ａ ｍｒ Ｎ ｓ 软件 中的 ＭｅＡ ｉ ｇ ｌ ｎ程序分 ｇ