猪伪狂犬病毒的分子生物学研究进展

一例猪伪狂犬病确诊及处理方案作者：徐勤宽，唐光新来源：《畜牧兽医科学》 2020年第1期徐勤宽1，唐光新2（1.山东省新泰市果都镇畜牧兽医工作站，泰安 271200；2.山东省新泰市谷里镇畜牧兽医工作站，泰安 271215）摘要：伪狂犬病最早发现于美国，由匈牙利科学家首先分离出该病毒。

其属于DNA病毒、疱疹病毒科，是疱疹病毒科中抵抗能力较强的一种，病毒具有广泛嗜性，可致多种动物发病。

对于猪群，可引起母猪发生繁殖障碍性疾病，导致仔猪出现神经症状和腹泻症状。

该文主要论述了一例猪伪狂犬病诊治案例。

关键词：伪狂犬；确诊；处置方案；建议中图分类号：S858.28 文献标识码：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2020.01.0520 引言伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的高度接触性传播的烈性传染病，属于可以造成养猪业重大经济损失的疫病之一。

伪狂犬病毒属疱疹病毒科，甲型疱疹病毒亚科的猪疱疹病毒Ⅰ型。

病毒粒子直径为150～180 nm，由核心、核衣壳和囊膜组成，其中囊膜表面存在外射排列的纤突，为8～10 nm。

在世界范围内，20世纪60年代前，伪狂犬感染猪后症状温和，而在六七十年代，由于基因变异，强毒株出现，猪场爆发伪狂犬病的案例不断增加，临床症状愈加猛烈和明显，带来重大的经济损失。

目前随着生物科学不断进步，对伪狂犬病毒的认识度不断提高，针对该病的gE基因缺失苗免疫在国内已经非常普遍，使的该病的蔓延势头可到控制。

但是作为一线兽医工作者，必须对该病的感染途径、临床症状、诊断方法和处置方案以及该病的流行病学完全掌握，以及时在工作中做出正确性判断。

1 案例分析某猪场存栏母猪30头，10头母猪在产房已生产，共123头7～10日龄仔猪，保育猪80头，育肥猪106头。

母猪在妊娠中期有流产现象发生，母猪流产前呈现一过性发热现象，流产后体温即恢复正常。

产房仔猪出现腹泻症状，腹泻物呈黄白色，发病率约为70%；有的发病仔猪出现精神沉郁、乱叫、不停转圈或倒地划水症状，死亡率约为40%。

小猪伪狂犬症状仔猪伪狂犬是什么症状猪得了伪狂犬怎么治疗猪伪狂犬病怎么治疗猪伪狂犬综合治疗方案猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒引起的多种家畜及野生动物共患的一种急性传染病。

该病在猪群中常呈爆发性流行，引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，初生仔猪则引起神经症状，出现运动失调，麻痹，衰竭死亡，病死率达10成，育肥猪出现呼吸困难、生长停滞现象，本病是危害全球养猪业的重大动物传染病之一。

①伪狂犬病毒属于疱疹病毒科、猪疱疹病毒属，病毒粒子为圆形，直径150～180nm，核衣壳直径为105～110nm。

病毒粒子的外层是病毒囊膜，它是由宿主细胞衍生而来的脂质双层结构。

伪狂犬病毒是疱疹病毒科中抵抗力较强的一种。

在37℃下的半衰期为7h，8℃可存活46天，而在25℃干草、树枝、食物上可存活10～30天，病毒在pH4～9之间保持稳定。

5％石炭酸经2min灭活，但0.5％石炭酸处理32天后仍具有感染性。

0.5％～1％氢氧化钠迅速使其灭活。

病毒对乙醚、氯仿等脂溶剂以及福尔马林和紫外线照射敏感。

②伪狂犬病毒只有一个血清型，但不同毒株在毒力和生物学特征等方面存在差异。

伪狂犬病毒具有泛嗜性，能在多种组织培养细胞内增殖，其中以兔肾和猪肾细胞(包括原I代细胞和传代细胞系)为敏感，当病毒接种量大时，在18～24h后即能看到典型的细胞病变。

③伪狂犬病常见于猪、牛、绵羊、犬和猫，另外，多种野生动物、肉食动物也易感。

猪是伪狂犬病病毒的贮存宿主和传染源，人对本病无易感性。

猪场伪狂犬病病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪，另外，被伪狂犬病病毒污染的工作人员和器具在传播中起着重要的作用。

此外，本病还可经呼吸道黏膜、破损的皮肤和配种等发生感染。

本病一年四季都可发生，但以冬春两季和产仔旺季多发，这是因为低温有利于病毒的存活④猪发生伪狂犬病后，其临诊症状因日龄而异，成年猪一般呈隐性感染，怀孕母猪可导致流产、死胎、木乃伊胎和种猪不育等综合症候群。

15日龄以内的仔猪发病死亡率可达100％，断奶仔猪发病率可达40-50％，死亡率30-40％左右，如继发细菌感染则死亡率更高！⑤临床症状：伪狂犬病毒的临诊表现主要取决于感染病毒的毒力和感染量，以及感染猪的年龄。

Bartha-K61毒株的前世今生伪狂犬病毒又称猪疱疹病毒，该病毒能引起多种家畜和野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要特征的传染病。

猪伪狂犬病严重制约着世界养猪业的发展，各国专家学者不遗余力的研究疫苗防控该病，欧美和亚洲部分发达国家已经通过疫苗免疫、检测淘汰、扑杀等措施净化和根除了伪狂犬病，在伪狂犬净化过程中疫苗起到关键性作用。

我国猪伪狂犬疫苗毒株以Bartha-K61株为主，目前在售该毒株的疫苗企业有42家国内兽用生物制品企业和4家外企，其约占猪伪狂犬疫苗市场份额的60%。

Bartha毒株是1961年由匈牙利学者Bartha分离的猪强度株，经猪肾原代细胞继代50代，在37℃培养，然后又转入32℃培养20代，并挑选1-2mm的小噬斑连续选斑培育而成。

制苗时用40代种毒，先传猪肾原代细胞1-2代复壮，挑取小斑，再传鸡胚成纤维细胞制苗。

其冻干后对细胞的滴度最低为103·5-4.5TCID50/0.2ml。

该苗主要用的免疫接种。

肌肉注射，两次免疫注射才能获得较好的免疫效果，两次免疫间隔3-4周。

Bartha-K61疫苗株不仅缺失了主要毒力因子gE及能与其组成复合物的蛋白gI，还在US区存在其他一些缺失，这些基因的缺失解释了Banha-K61疫苗株的安全性。

gE基因缺失疫苗结合gE-_ELASA鉴别诊断方法是美国和欧盟成员国推行伪狂犬病净化和根除计划的理论基础。

为了防止不同的疫苗株间发生重组，使疫苗毒株毒力返强，所以gE基因缺失疫苗是欧盟成员国和北美地区各国唯一被允许使用的修饰活疫苗。

在美国和欧洲的应用实践表明，伪狂犬病gE基因缺失疫苗的应用对于伪狂犬病的控制和消除是一个突破。

1948年，我国首次检测出伪狂犬病毒，上世纪60年代伪狂犬病在地方流行，并未造成较大的经济损失，随后疫情出现蔓延，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所1979年引进了Bartha-K61弱毒株，试制成功了伪狂犬弱毒冻干疫苗，通过Bartha-K61疫苗应用有效遏制住了猪伪狂犬病疫情。

防控措施-养猪技术猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒引起的猪的急性传染病。

该病在猪呈暴发性流行。

可引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，新生仔猪大量死亡，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。

该病特点是能够长时间带毒、散毒,且各种应激因素都可能导致这种潜伏感染暴发疾病。

所以必须加强防治。

下面具体来了解一下：猪伪狂犬病的临床症状猪伪狂犬病的诊断及防控措施。

1、临床症状随着猪年龄的不断增长，患病后会表现出不同的临床症状。

新生仔猪患病后会表现出眼睛周围发红，双眼紧闭，陷入昏睡，体温升高达到41-42°C，呼吸困难，有混杂泡沫的黏液从口角流出，部分发生呕吐、腹泻。

乳猪患病后两耳后倾，初期受到刺激会兴奋且呜叫，后期受到任何刺激都不会叫出声，只会导致局部肌肉发生震颤；眼睑发生水肿，腹部存在粟粒大小的紫色斑点，部分甚至全身都呈紫色；初期行走摇晃，部分甚至后退行走，非常容易跌倒，之后会倒地不起，四肢不断划动，头颈后仰，往往呈现间歇性抽搐，肌肉痉挛，角弓反张，经过4T0min又能够站起。

病程持续最短时只有4-6h，最长时可达到5天，通常在2-3天。

患病仔猪断奶前后如果排出黄色水样稀粪，死亡率能够达到100%。

大于2月的猪患病后具有较轻的症状，且随着年龄的增长，基本不会表现出神经症状，通常表现出精神萎靡，咳嗽，呼吸困难等。

妊娠母猪患病后，体温能够升高大约o.5C，精神萎靡,食欲不振或者完全废绝，咳嗽，呈现腹式呼吸，伴有便秘，且容易发生延迟分娩、流产以及死产。

对于妊娠后期患病的母猪，尽管能够产出活仔猪，但由于其具有较差的生活力，一般会在出生1-2天内表现出神经症状，最终发生死亡。

2、实验室诊断细菌分离培养。

在无菌条件下，取病死猪的心血、肝脏、脑组织进行抹片，接着进行染色镜检，没有发现细菌。

同时，将以上病料在马丁肉汤及鲜血琼脂平板接种，置于37°C体条件下进行24-48h培养，也没有长出细菌。

41猪伪狂犬病（P R ）是由伪狂犬病病毒（PRV）引起的传染性疫病，该病毒可引起猪及多种家畜、野生动物发病，临床上以发热、痒、神经症状为主要特征，主要危害仔猪、成年猪，造成猪群发病死亡，仔猪发病最为严重，死亡率可高达100%，中大猪发病以呼吸道症状为主。

还可造成严重的免疫抑制，继发或混感猪瘟、蓝耳病、圆环病毒病、传染性胸膜肺炎等，极易暴发流行或大流行，导致更高发病死亡率。

特别是近年来，猪伪狂犬病病毒毒性增强了，给该病防控带来困难，成为猪场严控的主要传染病之一，防控不当会造成猪场严重经济损失。

我国已经把猪伪狂犬病列入国家中长期动物疫病防治规划，有必要净化控制该病，保护养猪业的发展。

1 伪狂犬病病毒及流行特点伪狂犬病病毒（PRV）是一种疱疹病毒，属于有囊膜病毒并有纤突，与附着感染有关；病毒基因组为DNA病毒，病毒编码蛋白gB、gD、RR的基因对病毒的复制是必须的，也有利于化验室鉴别诊断。

迄今为止还没有发现抗原特性不同的伪狂犬病病毒毒株，只是毒株毒力强弱不同。

近年来病毒毒力增强，不但能够引起小猪发病死亡，也可造成大猪发病甚至死亡。

同等毒力毒株侵袭不同种类动物发病情况也不一样，例如：可以引起猪发病死亡的毒株，对牛、羊感染较低；人对PRV无易感性。

伪狂犬病病毒在寒冷季节活性增强，现在由于病毒毒力增强，其他季节发病也较严重。

伪狂犬病病毒可以侵害猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠等动物及其他野生动物。

但是大量实验证明：猪和鼠是疫源动物，也就是说伪狂犬病的发病流行是由猪、鼠带毒或接触其病死尸体而感染发病的，特别是鼠害严重的猪场，更要做好灭鼠和伪狂犬病免疫接种工作，以防疫病发生。

伪狂犬病的潜伏期为1.5～10d，可以通过消化道、呼吸道、破损的伤口感染。

病毒首先在扁桃体、咽部和鼻腔内增殖，通过2条途径传播：（1）沿神经干传播，引起神经细胞感染，造成神经症状，如共济失调、瘙痒等；（2）通过白细胞携带病毒，通过血液传播到机体各部位，尤其是通过妊娠母猪的胎盘组织侵入胎儿，造成流产或死产。

健康养殖·诊疗84畜牧业环境 2020.05摘　要：猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引发的一种病毒性疾病，随着近几年社会经济的迅速发展，养猪规模的不断扩大，又出现了一种新型伪狂犬病毒。

而这种伪狂犬病毒最主要的储存宿主就是生猪本身，并且这种病毒的传染范围比较大，很容易传染给其他家畜。

因此，需要养殖户额外注意，生猪一旦感染这种病毒，就要做好隔离和消毒工作，选用紧急接种猪伪狂犬病灭活疫苗进行处理。

关键词：猪伪狂犬病；诊断；治疗猪伪狂犬病毒有着较强的传染性，传染范围比较广泛，它主要引发生猪的脑脊髓炎和发热等症状。

这种病毒在不同生长阶段的生猪产生的临床症状也是截然不同的。

比如：影响母猪繁殖、阻碍配种，妊娠期的母猪会出现流产现象；仔猪出现神经症状以及顽固性腹泻等症状；会降低公猪繁殖机能，出现严重呼吸道感染现象等症状。

据调查表明，近几年这种病变的发生数量持续增加，严重威胁到了生猪养殖户的经济利益，阻碍了生猪养殖业的稳定发展，所以，养殖户在生猪养殖过程中要高度重视对这种病毒的防治。

1　猪伪狂犬病的流行特点猪伪狂犬病在发病时对季节没有任何要求，在春夏秋冬季节都有可能发生，最寒冷的季节也是发病期最频繁的时期，这种病毒有着较快的传播速度，还有散发式流行特点[1]。

并且传播途径比较广泛，其中主要通过消化道感染和呼吸道感染，在猪与猪之间接触时也会传播，其中包括经胎盘感染以及交配感染等；并且在生猪养殖过程中也会通过生猪的饮食进行传染。

这种病毒在仔猪身上极易传染，对于成年生猪和隐性病猪来说有着较慢的发病期，同时在生猪发病期间还会很容易出现病毒传播现象，一旦发生这种情况将很难被彻底清除。

2　病毒诊断在实际的生猪养殖过程中，如果生猪患有猪伪狂犬病时，其诊断主要包括以下三种方法：①兽医可以提取病死猪的淋巴结、扁桃体以及小脑等部位，采用荧光抗体进行实验操作，如果检查人员发现显微镜下出现黄绿色的荧光，则可以判断出这种结果呈阳性；②检查工作人员还可以对以上三个部位采取聚合酶链接反应进行分子生物学检测；③除此之外还可以提取病猪的脑组织以及淋巴等，制定组织悬液进行实验反应，其比例按照1：10 的生理盐水，同时还要添加一定量的青霉素和硫酸链霉素，运用已经配置好的组织悬液对病死猪进行皮下接种或者肌内接种[2]。