重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鸡和鸭的免疫效果观察
- 格式：pdf
- 大小：6.09 MB
- 文档页数：7
下载文档原格式
合集下载
鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗三种佐剂乳化效果比较
77投稿信箱sydk2007@新城疫（ND）和禽流感（AI）是危害养禽业最为严重的两种传染病，广泛分布于世界各国。
这其中，ND 与H9亚型AI 混合感染发病率最高，在临床上最常见，给我国的养禽业造成了严重的经济损失。
国内外普遍使用疫苗（有活苗和灭活苗两种）预防这该疾病，单苗的使用较为普遍，但单苗存在使用不便，两次免疫造成养殖成本上升。
为此研制开发一种安全有效的二联疫苗将两种病毒抗原联合，达到一针防两病的目的，对预防控制危害养禽业的两种主要病原具有重要的实践意义。
灭活疫苗是采用化学或物理方法杀死病原生物所制备的一种用于预防接种的生物制品。
灭活疫苗是先对病毒或细菌培养，然后用加热或化学剂将其灭活。
灭活疫苗即可由整个病毒或细菌组成，也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗。
鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗主要是由甲醛灭活后与油佐剂混合乳化制成。
所有的乳化剂分子都是由极性的亲水基团和非极性的亲油基团两部分组成。
而且两部分分处分子两端，形成不对称的结构。
这样的分子结构使得乳化机分子一部分可溶于水，另一部分易于和油相结合。
乳化剂的作用就在于使用机械作用分散所得的液滴不互聚集结。
乳化机在成品质量方面发挥的很大的功效，影响着产品的质量，本文主要通过试验对不同乳化剂进行研究，以便指导生产。
一、材料和方法（一）材料1.试验用主要试剂（如表1）。
2.试验用动物。
试验用SPF 鸡，由哈药集团生物疫苗有限公司实验动物中心提供，饲养在SPF 舍内，由专人负责管理和饲喂，饲料均经Co60照射消毒，饮水用煮沸消毒的常水；试验用SPF 鸡胚，由山东济南斯帕法斯家禽有限公司提供SPF 种蛋，哈药集团生物疫苗有限公司孵化；SPF 鸡血清，SPF 鸡鸡翅静脉采取血液1 ml，3 000 rpm 离心10 min 获得3.试验用疫苗。
鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗样品（A-M、A-F、A-H）。
4.试验用主要仪器（如表2）。
动物防疫员检疫员培训试题与答案
动物防疫员检疫员培训试题与答案一、选择题（20 分每题2 分）1、 A 由中华人民共和国第十届全国人民代表大会常务委员会第二十九次会议于2007年8 月30 日修订通过，自2008年1月1 日起施行。
A. 《中华人民共和国物防疫法》B. 《畜禽标识和养殖档案管理办法》C. 《动物免疫标识管理办法》D. 《农产品质量安法》２、对病死畜禽尸体 C 处理。
A、杀来食用B、丢到野外C、无害化处理（埋、焚烧）D、拿到集市去卖3、免疫后，对散养户猪、牛、羊免疫证的填写应做到BA、一户一证B、一畜一证C、一栏一证D、一群一证4、现常用的高致病性禽流感病疫苗是。
A.油乳剂灭活苗B. 油乳剂活苗C. 冻干灭活苗D. 冻干活苗5、在口蹄疫疫区内要严格实行（A ）消毒免疫的综合防治措施。
A．封锁、隔离、扑杀B．封锁、隔离、治疗C．封锁、治疗、扑杀D. 封锁、隔离、屠宰出售6、家畜发生过敏反应后最常用的药物为 A 。
A.肾上腺素B.磺胺甲基嘧啶C.左旋咪唑D.敌百虫7、国家把物疫病病种分为 B 类。
A.二类B.三类C.四类D.五类8、口蹄疫疫苗和禽流感疫苗的保存温度为（B ）。
A．-15℃至0℃B．2℃至8℃C．10℃至20℃ D.常温保9、疫苗瓶标签上“有效期至050702”的含义是指（C ）。
A．疫苗是7 月2 日生产的B．疫苗有效期至07年2 月.C．疫苗有效期至05年7 月D．疫苗有效期至02年7 月5 日10、一头10~25kg 猪注射猪O 型口蹄疫疫苗的剂量为（ C ）。
A．0.5ml B．1ml C．2 ml D.4 ml二、填空题（20 分每题2 分）1、一类物疫病有口蹄疫、猪水泡病、猪瘟、非洲猪瘟、非洲马瘟、牛瘟、牛传染性胸膜肺炎、牛海绵状脑病、痒病、蓝舌病、小反刍兽疫、绵羊痘和山羊痘、禽流行性感冒（高致病性禽流感）、鸡新城疫。
合法捕获的其他物。
3、疫苗在使用过程中应始终放在疫苗冷藏箱中，避免日光照射，只有在吸取疫苗方可取出。
禽流感免疫程序
高致病性禽流感灭活疫苗免疫程序
（一）产蛋鸡、种鸡
首免：10—14日龄，肌肉注射0.3ml/只。
二免：28—30日龄，肌肉注射0.5ml /只。
三免：120日龄左右，肌肉注射0.5ml/只。
以后每间隔4—5个月加强免疫一次，肌肉注射0.5ml/只。
（二）商品肉鸡
10—14日龄，肌肉注射0.3ml/只。
（三）鸭和鹅
首免：12日龄，肌肉注射0.5ml/只。
二免：28—30日龄，肌肉注射1ml/只。
以后每间隔4—5个月免疫一次，肌肉注射1ml/只。
（四）散养鸡
同批饲养量超过100只，按照上述的免疫程序免疫。
其它的每间隔4—5个月免疫一次，25日龄以下的接种剂量为0.5ml/只；25日龄以上的，接种计量为1ml/只。
注意事项：
1、运输、保存、使用时要避免阳光直射，严禁冻结和高
温保存。
2、疫苗使用前应先检查包装、有效期、批号等，并仔细
阅读疫苗说明书，疫苗达到室温并充分摇匀（但不可
剧烈振荡）后使用，使用过程中不时的摇匀。
3、禽流感病毒感染禽和健康状况异常的禽忌用。
4、疫苗出现破损、异物或破乳分层等异常现象，严禁使
用。
5、接种时及时更换针头，最好1只禽一个针头；注射器
每天清洗并灭菌消毒一次。
6、疫苗启封后，24小时用完，如用不完，烧毁处理；用
过的疫苗瓶要焚烧，器具要消毒处理，切不可乱扔。
7、免疫后28天内禁止屠宰食用。
【下载本文档，可以自由复制内容或自由编辑修改内容，更多精彩文章，期待你的好评和关注，我将一如既往为您服务】。
3种鸡免疫抑制性疫病对禽流感疫苗免疫效果的影响
３种鸡免疫 抑制性疫病对禽 流感疫苗免疫效果 的影 响
陈 玉 华 ，母 安 雄 ，王 晓 阳
（ １ ．浙 江 省 杭 州 市 畜 牧 兽 医 局 ，浙 江 杭 州 ３ １ ０ ０ ２ ０； ２ ．富 阳市 畜 牧 兽 医局 ，浙 江 富 阳 ３ １ １ ４ ｏ ０ ）
Байду номын сангаас
摘
要 ：以 Ｈ ５ Ｎ １亚 型 高 致 病 性 禽 流 感 灭 活 疫 苗 ，对 １ ６个 规 模 肉鸡 养 殖 场 、ｌ １ 个 种 禽 场 、６个 放 养 鸡 场 ，
株） ，批 号 为 ０ ９ ０ １ ０ ９ ８ ６ 。
１ ． ２ 试 剂
病 的存在 而 导致 免疫 后抗 体应 答低 于 正常 水平 ，使
禽 流感 免疫 接种 不能 达 到预 期 的免疫 效果 。禽 网状 内皮 增 生症 病 毒 （ Ｒ Ｅ Ｖ） 、 白血 病病 毒 （ Ａ Ｌ Ｖ） 和 传染 性 贫 血 病 毒 （ Ｃ Ａ Ｖ） 是 鸡 群 中 ３种 常 见 的免 疫 抑制 性 病 毒 ，它 们 除 可 能 造 成 各 自的 特 殊 病 变
体水平有协 同抑制作用 。 关键 词 ：免 疫 抑 制 ；血 清 学 ；禽 流 感 ； 免 疫 中 图 分 类 号 ：Ｓ ８ ３ １ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文章编号 ： ． ０ ５ ２ ８ — ９ ０ １ ７ （ ２ ０ １ ４ ） ０ １ — ０ １ ２ １ — ０ ５
防控高 致 病性 禽 流感 的一 个重 要环 节是 进行 疫 苗 免疫 接种 ，而禽 流感 疫 苗 的质量 、免 疫程 序 、免
１ ． １ 疫 苗
根据 前期 笔者 试验 结果 ，表 明鸡 群使 用不 同厂
家疫 苗进行 禽 流感 免疫 之 后 ，都 能快 速 提 高 Ｈ ５抗 体水 平 ，且高 抗体 水平 持续 较长 的 时间 ，组 间无 明
鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(N7a株+SZ株)说明书
鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗（N7a株+SZ株）说明书【兽药名称】通用名鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗（N7a株+SZ株）商品名无英文名Newcastle Disease and Avian Influenza（Subtype H9）Vaccine, Inactivated（Strain N7a+Strain SZ）汉语拼音Ji Xinchengyi Qinliugan（H9 Yaxing）Erlian Miehuoyimiao（N7a Zhu+SZ Zhu）【主要成分与含量】疫苗中含有灭活的鸡新城疫病毒N7a株，灭活前病毒含量≥108.6 EID50/0.1ml；含有灭活的禽流感（H9亚型）病毒SZ株，灭活前病毒含量≥108.5 EID50/0.1ml。
【性状】乳白色均匀乳剂。
【作用与用途】用于预防鸡新城疫和H9亚型禽流感。
免后21日可产生免疫力，免疫期为6个月。
【用法与用量】皮下或肌肉注射。
7～28日龄鸡，每只0.15ml；28日龄以上鸡，每只0.3ml。
【注意事项】（1）仅用于接种健康鸡。
（2）使用前应使疫苗恢复至室温。
（3）使用前和使用中应充分摇匀。
（4）疫苗开启后，限当日用完。
（5）本品严禁冻结，破乳后切勿使用。
（6）屠宰前28日内禁止使用。
（7）接种工作完毕，双手应立即洗净并消毒，用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理。
【规格】（1）100ml/瓶（2）250ml/瓶（3）300ml/瓶（4）500ml/瓶【包装】【贮藏与有效期】2～8℃保存，有效期为18个月。
【批准文号】【生产企业】仅在兽医指导下使用。
2024年主要动物疫病免疫计划实施方案.pptx
（二）规范动物疫苗管理。农业农村部门、动物疫病预防控制中心、承担乡镇畜牧兽医监管服务职能的机构要 按照《壮族自治区动物疫苗管理办法（修订版）》（桂渔牧办发（2016）84号）规定，严格动物疫苗运输、入库、 储存、调拨、发放、使用等各个环节的管理，及时在“动物防疫物资信息管理系统”填报动物疫苗出入库情况，建立 完整、准确的动物疫苗实物台账和会计台账。
三、紧急免疫 发生疫情时，对疫区、受威胁区内的养殖场户可根据应急监测或风险评估情况开展紧急免疫。 四、使用疫苗种类
选择与本地流行毒株抗原性匹配的疫苗。 五、免疫方法 各种疫苗免疫接种方法及剂量按相关产品说明书规定操作。
六、免疫效果监测 （一）检测方法
使用灭活疫苗免疫的，按GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》推荐的E1.ISA方法检测抗体。使用合成肽疫苗 免疫的，采用VPl结构蛋白抗体E1.lSA方法检测抗体。
一、免疫病种和目标要求
（一）高致病性禽流感、口蹄疫、小反刍兽疫。实行强制免疫，畜禽群体免疫密度常年保持在90%以上，其中 应免畜禽免疫密度达到100%,免疫抗体总体合格率常年保持在70%以上。
（二）犬只狂犬病。实行全面免疫，常年免疫密度达到90%以上，免疫抗体总体阳转率在70%以上。
（三）猪瘟、高致病性猪蓝耳病（猪繁殖与呼吸综合征）、新城疫。按照原自治区水产畜牧兽医局印发的《壮 族自治区猪瘟防治实施方案》《壮族自治区高致病性猪蓝耳病防治实施方案》《壮族自治区新城疫防治实施方案》 （桂渔牧办发（2017）109号）要求开展免疫，畜禽群体免疫密度常年保持在90%以上，其中应免畜禽免疫密度达 到100%,猪瘟、新城疫免疫抗体总体合格率常年保持在70%以上。
（六）严格建立健全免疫档案。要督促养殖场户详细记录畜禽存栏、出栏、免疫等情况，特别是疫苗种类、生 产厂家、生产批号等信息。承担乡镇畜牧兽医监管服务职能的机构、村级动物防疫员、养殖场户要做好免疫记录、 按时报告，确保免疫记录与畜禽标识相符。
三、紧急免疫 发生疫情时，对疫区、受威胁区内的养殖场户可根据应急监测或风险评估情况开展紧急免疫。 四、使用疫苗种类
选择与本地流行毒株抗原性匹配的疫苗。 五、免疫方法 各种疫苗免疫接种方法及剂量按相关产品说明书规定操作。
六、免疫效果监测 （一）检测方法
使用灭活疫苗免疫的，按GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》推荐的E1.ISA方法检测抗体。使用合成肽疫苗 免疫的，采用VPl结构蛋白抗体E1.lSA方法检测抗体。
一、免疫病种和目标要求
（一）高致病性禽流感、口蹄疫、小反刍兽疫。实行强制免疫，畜禽群体免疫密度常年保持在90%以上，其中 应免畜禽免疫密度达到100%,免疫抗体总体合格率常年保持在70%以上。
（二）犬只狂犬病。实行全面免疫，常年免疫密度达到90%以上，免疫抗体总体阳转率在70%以上。
（三）猪瘟、高致病性猪蓝耳病（猪繁殖与呼吸综合征）、新城疫。按照原自治区水产畜牧兽医局印发的《壮 族自治区猪瘟防治实施方案》《壮族自治区高致病性猪蓝耳病防治实施方案》《壮族自治区新城疫防治实施方案》 （桂渔牧办发（2017）109号）要求开展免疫，畜禽群体免疫密度常年保持在90%以上，其中应免畜禽免疫密度达 到100%,猪瘟、新城疫免疫抗体总体合格率常年保持在70%以上。
（六）严格建立健全免疫档案。要督促养殖场户详细记录畜禽存栏、出栏、免疫等情况，特别是疫苗种类、生 产厂家、生产批号等信息。承担乡镇畜牧兽医监管服务职能的机构、村级动物防疫员、养殖场户要做好免疫记录、 按时报告，确保免疫记录与畜禽标识相符。
新流腺三联灭活疫苗对禽流感病毒和禽腺病毒流行株攻毒的免疫保护试验
新流腺三联灭活疫苗对禽流感病毒和禽腺病毒流行株攻毒的免疫保护试验杨灵芝;李本科;朱杰;李振清;李桂芹【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2024(45)2【摘要】为了验证鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒病(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)流行毒株的免疫保护效果,采用三联灭活疫苗免疫3周龄SPF鸡,免疫后21 d采血测定禽流感H9亚型HI抗体效价,同时分别用H9亚型禽流感病毒YT株、HD株、CX株和DL株以及禽腺病毒(Ⅰ群,4型)QD株、NJ株、HA株和CZ株进行攻毒,观察疫苗对H9亚型禽流感及禽腺病毒(Ⅰ群,4型)流行毒株的免疫保护效果。
结果显示,免疫组禽流感H9亚型HI抗体效价几何平均值为1∶676~1∶832,对照组试验鸡HI抗体均<1∶2;用H9亚型禽流感病毒YT株、HD株、CX株和DL株攻毒,对照组鸡9/10~10/10发病,免疫组鸡均9/10以上保护;用禽腺病毒(Ⅰ群,4型)QD株、NJ株、HA株和CZ株攻毒,对照组鸡9/10~10/10发病,免疫组鸡均10/10保护。
表明新流腺三联灭活疫苗对2020-2022年分离的H9亚型禽流感病毒及禽腺病毒(Ⅰ群,4型)流行毒株感染具有良好的免疫保护效果。
【总页数】5页(P90-94)【作者】杨灵芝;李本科;朱杰;李振清;李桂芹【作者单位】山东博莱威生物技术研究所;山东滨州沃华生物工程有限公司;滨州市农业技术推广中心;滨州职业学院【正文语种】中文【中图分类】S852.4;S852.65【相关文献】1.H9亚型禽流感病毒流行毒株交叉免疫攻毒保护试验2.鸭病毒性肝炎二价(YB3株+GD株)灭活疫苗对鸭肝流行毒株的攻毒保护试验3.鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)抗体效价与鸡攻毒保护相关性试验4.鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)抗体产生期和免疫持续期试验5.鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)子代通过母源疫苗获得被动免疫力的效力和免疫期试验因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡新城疫病毒、禽流感病毒(H9亚型)病毒、禽腺病毒三联灭活疫苗抗体免疫持续期研究
不断发生，使我国畜牧产业面临极大的挑战。本研
究取鸡新城疫、禽流感（H9 亚型）、禽腺病毒三联
灭活疫苗免疫 7 日龄和 21 日龄 SPF 鸡，于免后不同
时间进行血清抗体测定，来确定该产品的免疫持续
20
饲料博览 2021 年第 5 期
期，以期指导鸡病系灭活疫苗
鸡新城疫病毒、禽流感病毒（H9 亚型）、禽
80％
[ 6-7 ]
。该病主要发生于 3~5 周龄的肉鸡，肉杂
鸡（817）、麻鸡、种鸡和蛋鸡亦可在相似的日龄段
发病，是目前危害养禽业健康发展的最严重的传染
病之一，在我国每年都有不同程度的流行，严重危
害集约化养禽业的持续、稳定、健康发展，给养禽
业造成巨大的经济损失。
近几年来以上三种病毒混合感染在我国家禽上
produced by Harbin Pharmaceutical Group Biological Vaccine Co., Ltd. Seven-day and 21-day SPF chickens were
inoculated subcutaneously with the triple inactivated avian adenovirus vaccine. Blood samples were collected on the
protection standard in the 5th month after immunization. The results showed that the immune duration of chickens
under two weeks old was two months, and that of chickens over two weeks old was four months.
究取鸡新城疫、禽流感（H9 亚型）、禽腺病毒三联
灭活疫苗免疫 7 日龄和 21 日龄 SPF 鸡，于免后不同
时间进行血清抗体测定，来确定该产品的免疫持续
20
饲料博览 2021 年第 5 期
期，以期指导鸡病系灭活疫苗
鸡新城疫病毒、禽流感病毒（H9 亚型）、禽
80％
[ 6-7 ]
。该病主要发生于 3~5 周龄的肉鸡，肉杂
鸡（817）、麻鸡、种鸡和蛋鸡亦可在相似的日龄段
发病，是目前危害养禽业健康发展的最严重的传染
病之一，在我国每年都有不同程度的流行，严重危
害集约化养禽业的持续、稳定、健康发展，给养禽
业造成巨大的经济损失。
近几年来以上三种病毒混合感染在我国家禽上
produced by Harbin Pharmaceutical Group Biological Vaccine Co., Ltd. Seven-day and 21-day SPF chickens were
inoculated subcutaneously with the triple inactivated avian adenovirus vaccine. Blood samples were collected on the
protection standard in the 5th month after immunization. The results showed that the immune duration of chickens
under two weeks old was two months, and that of chickens over two weeks old was four months.
禽流感疫苗使用和免疫情况周报表
禽流感疫苗使
单 位: 填表日期: 填 表 人: 联系电话： 主管领导： 疫苗种类 禽流感灭活疫苗 （H5N1,Re--6株） 重组禽流感病毒H5亚型 二价灭活疫苗 （H5N1,Re-6+Re-4株） 禽流感-新城疫重组 二联活疫苗（rLH5-6） 禽流感灭活疫苗 （H5N1,Re-4株） H5-H9二价灭活疫苗 1、本周免疫数量是指填报本周的免疫数量； 2、使用的疫苗种类与其使用数量、免疫动物数量相对应； 填报说明： 4、免疫进展=春（秋）防累计免疫数量/春（秋）防应免数量*100% 本周疫苗使用数量(万 春（秋）防累计疫苗使用 毫升/万羽份) 数量(万毫升/万羽份) 本周免疫数量(万羽) 鸡 鸭 鹅
3、“高致病性禽流感灭活疫苗”使用数量按毫升统计，“禽流感-新城疫重组二联活疫苗”使用数
禽流感疫苗使用和免疫情况周报表 (
年
防第
周)
疫数量(万羽) 其它禽
春（秋）防累计免疫数量(万羽) 鸡 鸭 鹅 其它禽 鸡
春（秋）防存栏量(万羽) 鸭 鹅 其它禽 鸡
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
春（秋）防应免
新城疫重组二联活疫苗”使用数量按羽份统计。
春（秋）防应免数量(万羽) 鸭 鹅 其它禽 鸡
免疫进展(%) 鸭 鹅 其它禽
单 位: 填表日期: 填 表 人: 联系电话： 主管领导： 疫苗种类 禽流感灭活疫苗 （H5N1,Re--6株） 重组禽流感病毒H5亚型 二价灭活疫苗 （H5N1,Re-6+Re-4株） 禽流感-新城疫重组 二联活疫苗（rLH5-6） 禽流感灭活疫苗 （H5N1,Re-4株） H5-H9二价灭活疫苗 1、本周免疫数量是指填报本周的免疫数量； 2、使用的疫苗种类与其使用数量、免疫动物数量相对应； 填报说明： 4、免疫进展=春（秋）防累计免疫数量/春（秋）防应免数量*100% 本周疫苗使用数量(万 春（秋）防累计疫苗使用 毫升/万羽份) 数量(万毫升/万羽份) 本周免疫数量(万羽) 鸡 鸭 鹅
3、“高致病性禽流感灭活疫苗”使用数量按毫升统计，“禽流感-新城疫重组二联活疫苗”使用数
禽流感疫苗使用和免疫情况周报表 (
年
防第
周)
疫数量(万羽) 其它禽
春（秋）防累计免疫数量(万羽) 鸡 鸭 鹅 其它禽 鸡
春（秋）防存栏量(万羽) 鸭 鹅 其它禽 鸡
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
春（秋）防应免
新城疫重组二联活疫苗”使用数量按羽份统计。
春（秋）防应免数量(万羽) 鸭 鹅 其它禽 鸡
免疫进展(%) 鸭 鹅 其它禽
各类家禽禽流感免疫程序
－0.6ml，以后每 4 个月加强免疫一次，每只 0.6 －0.8ml。 说明：对疫苗注射剂量超过 1.0ml 的，宜分
Байду номын сангаас
多点皮下或肌肉注射，每点 0.5－1.0ml。
1cu0f3c9c 数据恢复软件/
光偷走了我们很多东西，温暖的心抑或那个温柔的你。每个人的青春里都有一首
(3)种鸭、蛋鸭：接种重组禽流感灭活疫苗 (H5N1 亚型)。10 天龄每只接种 0.5ml，30－35 天龄每只接种 1.0ml，以后每 4 个月加强免疫一 次，每只 1.0ml。
(4)快大肉鸭(40－50 天出栏)：接种重组禽
光偷走了我们很多东西，温暖的心抑或那个温柔的你。每个人的青春里都有一首
光偷走了我们很多东西，温暖的心抑或那个温柔的你。每个人的青春里都有一首
(7)肉鹅：接种重组禽流感灭活疫苗(H5N1 亚 型)。10 天龄每只接种 0.5－1.0ml，30－35 天龄 接种第二次，每只 1.0－1.5ml。 (8)种鸽：接种 H5 亚型禽流感疫苗。14 天龄 每只接种 0.3－0.4ml， 35－40 天龄每只接种 0.5
14 天龄每只接种 0.3－0.4ml，35－40 天龄每只
接种 0.5－0.6ml，以后每 4 个月加强免疫一次，
光偷走了我们很多东西，温暖的心抑或那个温柔的你。每个人的青春里都有一首
每只 0.6－0.8ml。 (2)肉鸡(中、慢速型)或阉鸡：接种 H5 亚型 禽流感疫苗。10 天龄每只接种 0.3ml，30－35 天 龄接种第二次，每只 0.5－0.6ml，80－90 天龄， 接种第三次，每只 0.8－1.0ml。
流感灭活疫苗(H5N1 亚型)。7－10 天龄每只接种 0.5ml，17－20 天龄接种第二次，每只 0.5－ 1.0ml。 (5)中型肉鸭(75 天出栏)：接种重组禽流感
鸡新城疫-禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗对禽流感流行毒株的保护效果观察
鸡新城疫-禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗对禽流感流行毒株的
保护效果观察
史春云;范娟;傅元华
【期刊名称】《中国家禽》
【年(卷),期】2012(34)7
【摘要】本文以实验室分离鉴定的3株H9N2亚型禽流感病毒流行毒株进行了鸡新城疫、禽流感（H9-JY株）二联灭活疫苗免疫后的攻毒保护试验。
1材料和方法1.1材料1.1.1攻毒用强毒株H9亚型禽流感病毒HN株、NM株、HH
株,EID50≤10-7.0/0.1mL,
【总页数】2页(P52-53)
【作者】史春云;范娟;傅元华
【作者单位】内蒙古呼和浩特市赛罕区兽药监督管理所;扬州优邦生物制药有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】S852.659.5
【相关文献】
1.鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感流行毒株的保护效果
2.鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒(Ⅰ群,4型)三联灭活疫苗(La Sota株+TJ株+HY株)抗体效价与鸡攻毒保护相关性试验
3.鸡新城疫(基因Ⅶ型)、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(aSG10株+G株)在蛋鸡上的安全性及免疫
效果研究4.鸡新城疫-禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(La Sota株+HP株)的灭活试验5.鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗悬浮培养(La Sota株+WL-s株)的免疫效力研究
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽流感痘苗使用的注意事项
免疫过程中 ， 正确和规范 的操作方法能保证鸡群接
种 等 量 的疫 苗 和最 大 限度 的减 少应 激 ， 而 保证 整 从 个 鸡 群产 生免 疫应答 的 同时 Ｉ 生。
２１ 滴 入 免疫法 ．
户将禽流感疫 苗随意丢放 ， 至被 太 阳暴 晒 ， 甚 这样 会使疫苗效价下降， 有的还可能失效 。 疫苗使用前例行检查 ， 仔细核对禽流感疫苗抗
使每个环节我们做的完美 ，免疫保护还很难达到百
分 百 的效 果 ， 以 ， 行免 疫接种 时还 需要相 关人 员 所 进 提高责 任心 、 科学进 行 。■Ｄ Ｈ
安 全 用 药
接影 响 。灭 活 疫 苗 要 保 存 在 低 温 、 燥 、 暗 的地 干 阴 方 ， 宜 温度 为 ２ ８Ｅ， 适 ℃～ ￣ 活疫 苗 为 冻 干 苗 ， 在 冰 则 箱 冷 冻室 一 ５ １ ％以下保 存 ， 切忌 反复 冻 融 。 有些 养殖
安全用药
ｄ ｉ ０３６ ／ｉ ｎ１０ － ７ ４２ １ ． ．１ ｏ： ． ９ｊｓ ．０ ８ ４ ５ ．０ ２１ ０ ２ １ ９ ．ｓ ０
禽流感痘苗使用的注意事项
费 强
（ 山西省 汾 阳市动物 疫病 预 防控制 中心 山西汾 阳 ０２ ０） ３２０ 禽 流感 免 疫 是 防控鸡 禽 流感 的重 要 措施 。 目 前 ， 于禽 流 感 强 制 免 疫 的 疫 苗 主要 有 三 种 ： 用 禽流 小 ， 免 疫 系 统 尚未 完 全 建 立 ， 造 成 免 疫 系 统 损 鸡 会 伤 ， 响 免疫效 果 。另一方 面 ， 源抗 体 高滴度 时 ， 影 母
时 间进 行免 疫接 种 。
２５免疫 时规 范操 作 、 ． 途径 适 当 、 剂量 准确 免 疫接 种时要 组织 周密 ， 分工 明确并 紧密 配合 ， 做 到接 种途 径适 当和 注射剂 量准确 ， 并做 好登 记 ， 使
禽流感灭活疫苗的免疫注射方法与注意事项.doc
禽流感灭活疫苗的免疫注射方法与注意事项概述：早春三月，春寒料峭，禽流感的春防又紧锣密鼓地开始了。
做好疫苗的免疫接种，确保每一次免疫的效果，是预防禽流感暴发和流行的关键环节。
早春三月，春寒料峭，禽流感的春防又紧锣密鼓地开始了。
做好疫苗的免疫接种，确保每一次免疫的效果，是预防禽流感暴发和流行的关键环节。
禽流感油乳剂灭活疫苗具有产生抗体水平高、维持时间长的优点，在临床应用上必须采用注射的途径进行接种。
疫苗的初次免疫一般安排在10~15日龄，免疫剂量0.2~0.3毫升/只，因雏鸡的肌肉较少，常选用颈部皮下注射;之后的青年鸡、成年鸡需要根据饲养期的长短，安排不同次数的加强免疫，免疫剂量一般为0.5毫升/只，注射部位可选择颈部皮下、胸部肌肉或腿部肌肉。
在不同的部位注射疫苗，均可刺激机体产生免疫抗体，但各有优缺点，如果注射操作不当，会导致不良反应出现，造成不必要的损失。
■颈部皮下注射：注射部位选择在颈后部的下1/3处，注射时用拇指和食指将颈部皮肤捏起，使皮肤和肌肉分离，注射器针头朝背部方向，以小于30°的角度刺入捏起的皮下注射。
注射时要防止刺穿另一侧皮肤将疫苗注射到体外，也要防止注射到肌肉内或刺伤颈椎。
优点：颈部皮下活动区域大，皮下血管丰富，注射疫苗后吸收均匀、快速。
缺点：注射操作不方便，若注射到颈部肌肉内，容易引起鸡只出现伸颈困难、肿头或神经症状等。
■胸部肌肉注射：注射部位在胸部的前1/3处，两侧均可，针头与注射部位大约成30°，朝背部方向刺入胸肌，进针应深浅适宜，切忌垂直刺入。
优点：胸部的肌肉丰满，血管和神经较少，免疫副反应相对较轻，注射时操作简便。
缺点：其吸收较颈部皮下注射稍差一些，进针要求深浅适当，过浅可能会使疫苗流出，使接种剂量不足;过深则可能会将疫苗注射到胸腔或腹腔内，造成急性死亡。
■腿部肌肉注射：油乳剂疫苗一般不宜采用腿部肌肉注射，因为腿部肌肉可容纳的油苗体积少，不易吸收。
但对笼养的种鸡、蛋鸡，在腿部肌肉注射操作比较方便，如果非要在腿部肌肉注射疫苗，应在大腿的外侧上方肌肉最丰满处注射，不要在腿内侧和肌肉不发达的腿下部注射，以免造成免疫鸡不愿站立或跛行等，从而影响活动和采食，造成淘汰增多。
马立克病毒二价活疫苗效价检测实验
马立克病毒二价活疫苗效价检测实验王友;尤永君;徐兆强;朱秀同;秦爱建【期刊名称】《中国动物保健》【年(卷),期】2013(15)8【摘要】由于CVI988/Rispense疫苗优良的免疫特性，已经被认为是目前防控马立克氏病（Marek's disease， MD）效果最好的疫苗。
然而，近年来随着马立克病毒（Marek's disease virus，MDV）毒力的不断增强。
CVI988/Rispense需要与MDV-Ⅱ或者HVT联合使用才能防止免疫失败的发生。
本实验通过空斑计数和间接免疫荧光相结合的方法测定了马立克病毒CVI988/Rispense+FC126二价活疫苗的效价。
结果显示批次 A 中 CVI988为4400PFU/dose，HVT 为2600/dose；批次 B 中 CVI988为4800PFU/dose，HVT 为2400PFU/dose；批次C中CVI988为4600PFU/dose，HVT为2800PFU/dose。
所得结果均显著高于国家标准CVI988不少于2000PFU/dose，HVT不少于1000PFU/dose，并且批次之间非常稳定，适合用作鸡群马立克氏病的防控。
%CVI988/Rispense has become recognized as the gold standard due to its superior protection properties. With further increase in virulence of fieldviruses,CVI988/Rispense was com bined with serotypeⅡor HVT to prevent the vaccine failure. The CVI988/Rispense+FC126 bivalent live vaccine potency was determined by plage count and indirect immunofluorescence. The result display A batch include 4400PFU CVI988 and 2600PFU HVT per dose. B batch include 4800PFU CVI988 and 2400PFU HVT per dose. C batch include 4600PFU CVI988 and 2800PFU HVT per dose. These resultssiginificantly higher than government standard with CVI988 no fewer than 2000PFU and HVT no fewer than 1000PFU per dose. The reaearch showed that the potency is very stable between batches,so the bivalent live vaccine is suitable for Marek's disease prevention and control.【总页数】4页(P16-18,20)【作者】王友;尤永君;徐兆强;朱秀同;秦爱建【作者单位】天津瑞普生物技术股份公司天津300381;天津瑞普生物技术股份公司天津300381;天津瑞普生物技术股份公司天津300381;天津瑞普生物技术股份公司天津300381;扬州大学兽医学院农业部生物制品创制重点实验室江苏扬州225009【正文语种】中文【相关文献】1.重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗与H5亚型二价灭活疫苗免疫效价对比[J], 谭福林;陆兰敏2.新工艺新产品，再创新辉煌——瑞普生物马立克氏病二价活疫苗隆重上市 [J],3.新工艺新产品,再创新辉煌——既瑞普生物马立克氏病二价活疫苗隆重上市 [J], 天津瑞普生物技术股份有限公司4.鸡马立克病活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒检测方法的建立 [J], 李启红;杨承槐;刘丹;夏业才;李慧姣;李俊平5.马立克氏病二价活疫苗（CVl988＋FCl26株） [J], 无因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡新流二联灭活疫苗
鸡新流二联灭活疫苗养禽生产中，由于鸡新城疫常发不断、加之h9亚型禽流感也频频在养鸡场发病，给养禽生产带来了不小的困扰。
特别是禽流感h9亚型经历了l998～l999年、2OO1～2OO2年两次大的流行后，病毒对鸡只(不论是蛋鸡还是肉鸡)的危害越来越严重。
在2OO2年初，由于禽流感h9亚型引起大量蛋鸡产蛋急剧下降。
为了更好地认清该病的发病特点并避免其产生的危害，河南某公司对大量的临床病例进行了诊断和病毒的分离、纯化和鉴定研究，最终开发研制出了高效、优质的鸡新城疫、禽流感(h9)二联油乳剂灭活疫苗(以下简称“新流二联灭活苗”)。
新流(h9亚型，hl株)二联灭活苗有如下8个方面创新点：l.禽流感h9亚型、hl株是国内第一个从临床病例中分离出来的流行性禽流感病毒株。
2.新流(h9亚型，hl株)二联灭活苗是独立自主研发的、完全拥有独立知识产权并获国家发明专利，解决了疫苗研究领域的重大技术难题之一，推动了行业进步。
3.与其它厂家在上世纪分离到的h9亚型禽流感毒株比较，该公司的专利毒株抗原性更接近临床发病毒株，具有较高的免疫原性，免疫保护力强，产生的抗体高。
4.新流(h9亚型，hl株)二联灭活苗是分别接种不同鸡胚收毒，并经美国millipore膜浓缩设备超滤浓缩而成，两种抗原组分均含有相同的效价。
5.攻克了联苗生产工艺中抗原浓缩、多组分抗原复配、抗原纯化、效价测定等关键技术，实现了工艺创新，生产工艺达国际－流水平，标志着我国禽用多联灭活疫苗自主研发和创新能力上了一个新台阶，达到了国际先进水平。
6.疫苗可使用进口佐剂，免疫原性强，刺激机体产生抗体水平高。
7.抗原超强浓缩，含量高，抗体产生快，效价高，保护期长。
8.抗原经过纯化处理后，疫苗应激小、残留少、粘度低、好抽易打、注射方便。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
重组禽流感病毒(H 5+H 7)二价灭活疫苗对鸡和鸭的免疫效果观察冯肖肖1,吴赟竑1,吴雪军1,华炯钢2,张㊀存2,张㊀璐1,何㊀杰1,徐㊀辉1(1.浙江省动物疫病预防控制中心,浙江杭州311199;2.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州311199)㊀㊀摘要:H7N9流感变异毒株的出现给我国家禽养殖业造成了严重的疫情风险㊂为了解和评估新型重组禽流感H5+H7二价灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9H7-Re1株)的免疫效果和抗体消长规律,我们开展了鸡㊁鸭现场免疫试验㊂监测结果表明,该疫苗对蛋鸡和蛋鸭都具有良好的免疫效果,H5和H7亚型免疫抗体水平在免疫后2周均能达到100%的免疫合格率㊂对雏鸡也具有较好的免疫效果,免疫一次时H5和H7亚型抗体合格率分别在一免后3周和2周达到70%以上,并维持到一免后13周;进行二次免疫后,H5和H7亚型抗体合格率在二免后1周都达到100%㊂对雏鸭的免疫效果相对较差,一次免疫的H5亚型抗体水平不能达到70%的免疫合格标准,二免后1周H5和H7亚型抗体合格率均能达到80%以上,必须加强免疫一次才能达到满意的免疫效果㊂关键词:H7N9流感病毒;重组禽流感H5+H7二价灭活苗;免疫效果中图分类号:S852.4㊀㊀㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀㊀㊀文章编号:05296005(2019)02000807㊀㊀Immune Effects of the Inactivated H5and H7Subtype Avian Influenza Virus Vaccine (H5N1Re-8and H7N9Re-1)Applied in Chickens and DucksFENG Xiao-xiao 1,WU Yun-hong 1,WU Xue-jun 1,HUA Jiong-gang 2,ZHANG Cun 2,ZHANG Lu 1,HE Jie 1,XU Hui 1(1.Zhejiang Center of Animal Disease Control,Hangzhou 311199,China ;2.Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Institute of Animal Husbandry and Veterinary Science,Hangzhou 311199,China)Abstract :The new mutants of H7N9avian influenza viruses have caused devastating poultry diseases and severe economic dam-age scince 2017.Here,we evaluated the immune effect of the inactivated H5and H7subtype avian influenza vaccine (H5N1Re-8and H7N9Re-1)in chickens and ducks.According to the immune procedure made by Ministry of Agriculture of the People s Repub-lic of China,chickens and ducks were immunized with H5N1Re-8and H7N9Re-1vaccine and the hemagglutinin-inhibition (HI)antibody was detected on a weekly basis.Our results indicated that H5N1Re-8and H7N9Re-1vaccine induced strong immune re-sponse in egg-laying poultry,and 100%of participants in groups had high protective antibody levels in two weeks post one-time vac-cination.For the first immunization in chickls,the H5and H7antibodies could reached 70%protective threshold in three and two weeks post one-time vaccination,respectively.Then,chicks inoculated for the second immunization had the 100%of H5and H7protective antibody levels in one week post two-time immunization.The H5antibody level of ducklings vaccinated one time was bel-low the 70%protective threshold,while the H5and H7antibody level of ducklings was above 80%in one week post two-time vacci-nation.Thus ducklings need two-time vaccination to get good immune response.Key words :H7N9avian influenza virus ;inactivated H5and H7subtype avian influenza virus vaccine ;Immune effects.Corresponding author :XU hui收稿日期:20180223基金项目:浙江省 三农六方 科技协作项目(CTZB-F16-0728AWZ-SNY1-39)作者简介:冯肖肖(1984),女,兽医师,博士,从事动物监测工作,E-mail:fengxiaoxiao5713@通讯作者:徐辉,E-mail:xuhui888@㊀㊀2013年2月开始我国上海㊁安徽㊁浙江等省市相继出现了人感染H7N9流感的病例,并迅速传播至其他省份,流行呈散发趋势[1-5]㊂截止到2017年12月,我国已有人感染H7N9确诊病例1457例,死亡571例,死亡率为39.19%㊂H7N9亚型流感病毒属于正粘病毒科甲型流感病毒属,其基因组为8个节段的负链单股RNA 病毒,在病毒增殖中极易发生变异[3-4]㊂2013年以来发现的H7N9流感病毒对禽类表现为低致病性,感染禽类后并无明显临床症状,并可以在禽类中持续扩散和传播[4-5]㊂但是随着病毒的变异和进化,2017年5月12日我国农业部首次报道了一起家禽H7N9流感疫情,该新型H7N9流感病毒HA蛋白的裂解位点发生了变异,呈现典型的高致病性禽流感分子特征,对禽类表现为高致病性,临床症状与H5亚型高致病性禽流感类似,死亡率较高,对家禽养殖和人类健康造成极大威胁[8-9]㊂截止到目前,我国河南㊁天津㊁陕西㊁内蒙㊁黑龙江㊁安徽和河北等7个省份相继发生了8起H7N9流感疫情,该疫情的快速传播和流行已经给我国养禽业带来严重的经济损失,为防范家禽H7N9疫情风险,保障公共卫生安全,农业部决定从2017年9月起全面实施H7N9免疫㊂为了解和评估重组禽流感病毒H5+H7二价灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9H7-Re1株)(简称H5+H7二价苗)免疫禽群后抗体变化情况和免疫效果,本次试验选择了H7抗体阴性的鸡场和鸭场各1个,按照农业部高致病性禽流感免疫方案规定的免疫程序,开展了鸡鸭现场免疫试验,通过分析禽群免疫后的抗体效价和免疫合格率,评估H5+ H7二价苗的免疫效果,从而为高致病性禽流感免疫方案制定提供可靠的理论依据和技术支撑㊂1㊀材料与方法1.1㊀主要材料㊀14日龄雏鸡和255日龄蛋鸡由杭州余杭应田和蛋鸡场提供,主要品种为仙居鸡;14日龄雏鸭和288日龄蛋鸭由绍兴咸亨绍鸭育种有限公司提供,主要品种为绍兴麻鸭㊂重组禽流感H5+ H7二价灭活疫苗(H5N1Re-8株和H7N9Re-1株)由农业部指定疫苗厂家哈尔滨维科生物技术开发公司生产,生产日期为2017002,有效期为201806㊂禽流感H5(Re-8株)HI抗原(批号抗原2016008/阳性血清2016001),H7N9H7-Re1株流感HI抗原(批号2016002/阳性血清2015002),均来自哈尔滨维科生物技术开发公司㊂1.2㊀试验方法1.2.1㊀蛋鸡免疫抗体水平的测定㊀选取30只255日龄的蛋鸡,按照农业部高致病性禽流感免疫方案规定的免疫程序,首次免疫后4周加强免疫1次,免疫剂量均为0.5mL/只,在免疫后0周(255日龄)㊁1周(262日龄)㊁2周(269日龄)㊁3周(276日龄)㊁4周(283日龄)㊁5周(290日龄)㊁6周(297日龄)㊁7周(304日龄)和8周(311日龄)各采血进行抗体检测,记录并计算产蛋量㊂1.2.2㊀雏鸡免疫抗体水平的测定㊀100只孵化至14日龄的雏鸡随机分为A㊁B两组进行免疫,按照农业部高致病性禽流感免疫方案规定的免疫程序,A 组为 二次免疫组 ,14日龄首次接种H5+H7二价灭活疫苗0.3mL/只,35日龄二次免疫接种疫苗0. 5mL/只;B组为 一次免疫组 ,只在14日龄接种1次疫苗0.3mL/只㊂在免疫后0周(14日龄)㊁1周(21日龄)㊁2周(28日龄)㊁3周(35日龄)㊁4周(42日龄)㊁5周(49日龄)㊁8周(70日龄)和13周(105日龄)时分别随机取30只采血进行抗体检测㊂1.2.3㊀蛋鸭免疫抗体水平的测定㊀选取30只288日龄的蛋鸭,按照农业部高致病性禽流感免疫方案规定的免疫程序,首次免疫后4周加强免疫1次,免疫剂量均为1.0mL/只,在免疫后0周(288日龄)㊁1周(295日龄)㊁2周(302日龄)㊁3周(309日龄)㊁4周(316日龄)㊁5周(323日龄)㊁6周(330日龄)㊁7周(337日龄)和8周(344日龄)分别采血进行抗体检测,记录并计算产蛋量㊂1.2.4㊀雏鸭免疫抗体水平的测定㊀100只14日龄的雏鸭分为A㊁B两组进行免疫,按照农业部高致病性禽流感免疫方案规定的免疫程序,A组为 二次免疫组 ,14日龄首次接种疫苗0.5mL/只,35日龄二次免疫接种疫苗1.0mL/只;B组为 1次免疫组 ,只在14日龄接种一次疫苗0.5mL/只㊂在免疫后0周(14日龄)㊁1周(21日龄)㊁2周(28日龄)㊁3周(35日龄)㊁4周(42日龄)㊁5周(49日龄)㊁8周(74日龄)和13周(100日龄)时分别随机取30只采血进行抗体检测㊂1.2.5㊀抗体检测㊀抗体检测采用国家标准‘高致病性禽流感诊断技术“(GB/T18936 2003)中血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验方法,检测同一份血清样品的禽流感H5N1Re-8亚型㊁H7N9H7-Re1亚型禽流感抗体滴度水平㊂2㊀结果与分析2.1㊀蛋鸡免疫重组禽流感H5+H7二价疫苗后的免疫抗体水平㊀255日龄蛋鸡首次接种重组禽流感H5+H7二价疫苗,剂量为0.5mL/只,并于一免后4周进行2次免疫,接种剂量为1.0mL/只㊂免疫结果如图1所示,蛋鸡在免疫前其体内已有H5亚型抗体,平均效价达6.43log2,免疫抗体合格率为100%㊂蛋鸡H5亚型抗体水平在1免3周内逐渐上升并达到峰值10.7log2,随后1周有所回落;二免后5周内抗体水平始终维持在8.33~9.50log2之间㊂同时,在蛋鸡免疫周期内,H5亚型免疫抗体合格率始终为100%㊂蛋鸡在免疫前其体内无H7亚型抗体,一免后H7亚型抗体水平迅速上升,一免后2周和4周抗体效价分别达到了6.10log 2和8.30log 2;二免后H7抗体水平继续上升,至二免后2周达到峰值10.13log 2,随后有所下降,至第8周抗体效价为8.33log 2㊂同时,H7亚型免疫抗体合格率在一免后2周迅速上升至100%,免疫后2周~8周始终保持在100%㊂以上结果显示,蛋鸡在免疫接种重组禽流感H5+H7二价疫苗二次后,H5亚型抗体水平因母源抗体影响而缓慢上升,H7亚型抗体水平迅速上升,至免疫后期两者抗体水平变化趋势相近,抗体滴度都在8log 2以上㊂因此,重组禽流感H5+H7二价疫苗在免疫蛋鸡后可以快速达到稳定良好的H5和H7亚型免疫抗体水平及100%的免疫抗体合格率,具有良好的免疫效果㊂图1㊀蛋鸡免疫后H5和H7亚型免疫抗体水平2.2㊀雏鸡免疫重组禽流感H5+H7二价疫苗后的免疫抗体水平2.2.1㊀雏鸡一次免疫后的抗体水平㊀雏鸡只在14日龄进行一次免疫接种,剂量为0.3mL /只㊂免疫结果如图2所示,免疫前雏鸡体内的H5亚型母源抗体平均效价为2.53log 2,免疫抗体合格率为21.88%㊂免疫接种后1周母源抗体消失,H5亚型免疫抗体水平逐渐上升,第3周抗体水平即可达到5.37log 2,并在一免后4周达到峰值7.57log 2,随后逐渐下降,第13周(105日龄)抗体平均效价为4.1log 2㊂同时,雏鸡H5亚型免疫抗体合格率在免疫后3周达到合格(86.67%),第4周和第5周保持在100%,然后有所下降,至免疫后13周仍达到合格(80%)㊂图2㊀雏鸡一次免疫后H5和H7亚型免疫抗体水平㊀㊀雏鸡免疫前体内无H7亚型抗体,免疫接种1周后母源抗体消失,H7亚型抗体水平迅速上升,第2周和第3周抗体平均效价分别可达到4.17log 2和6.37log 2,至免疫后4周达到峰值7.43log 2,随后逐渐下降,第13周抗体平均效价为3.87log 2㊂雏鸡H7亚型免疫抗体合格率在免疫后2周达到合格(73.33%),第3周至第5周都维持在100%,随后下降,第13周仍合格为83%㊂以上结果显示,雏鸡免疫接种一次重组禽流感H5+H7二价疫苗后,第3周开始H5和H7亚型两种免疫抗体合格率均在70%合格线以上波动,第4周达到最高水平,随后逐渐下降,免疫8周以后抗体效价均低于6log 2㊂与蛋鸡免疫后情况相似,免疫初期H7亚型抗体上升速率同样快于H5亚型抗体,这可能是因为疫苗本身H7亚型抗原含量高于H5亚型引起的㊂这表明,重组禽流感H5+H7二价疫苗在免疫雏鸡一次后可以提供一定的免疫保护效果,但是不能产生较高的抗体水平,免疫效果欠佳㊂2.2.2㊀雏鸡二次免疫后的抗体水平雏鸡在14日龄和35日龄分别进行剂量为0.3mL /只和0.5mL /只的免疫接种㊂免疫结果如图3所示,在首免后3周进行二次免疫后,H5和H7亚型免疫抗体水平均继续保持上升趋势,至第5周达到峰值,抗体平均效价分别为9.10log 2和9.70log 2,随后逐渐下降,第13周(105日龄)H5和H7抗体平均效价分别为7.60log 2和7.10log 2㊂同时,H5和H7亚型免疫抗体合格率在二免后均持续保持在100%㊂以上结果显示,雏鸡免疫接种两次重组禽流感H5+H7二价疫苗后,H5和H7亚型免疫抗体合格率分别在第4周和第3周达到100%,并随后保持至第13周试验结束㊂同时对比只免疫一次的雏鸡组(图4),雏鸡二次免疫后各周H5和H7亚型抗体水平均进一步升高了2个滴度左右,并持续稳定在7log 2以上,在免疫后5周以后两者存在极显著差异(P <0.01)㊂这表明,雏鸡在免疫重组禽流感H5+H7二价疫苗两次后,可以保证雏鸡体内存在稳定持续的高抗体水平和100%的免疫抗体合格率,具有显著的免疫保护效果㊂图3㊀雏鸡二次免疫后H5和H7亚型免疫抗体水平图4㊀雏鸡免疫一次和两次后免疫抗体水平差异比较注:用t 检验法进行分析㊂一次免疫与两次免疫相比,∗∗:差异极显著(P <0.01),∗:差异显著(P <0.05),不标者则为差异不显著(P >0.05)2.3㊀蛋鸭免疫重组禽流感H5+H7二价疫苗后的免疫抗体水平㊀288日龄蛋鸭首次接种重组禽流感H5+H7二价疫苗后4周进行二次免疫,接种剂量均为1.0mL /只㊂免疫结果如图5所示,免疫前蛋鸭体内H5亚型抗体平均效价为5.17log 2,免疫抗体合格率为86.67%㊂一免后H5亚型免疫抗体水平在2周迅速上升至9log 2以上,于第4周达到峰值9.73log 2;二免后H5抗体水平继续维持在8.53~9.23log 2之间㊂同时,蛋鸭H5亚型免疫抗体合格率在免疫后2周即可达到100%,并持续维持至第8周㊂免疫前蛋鸭体内并无H7亚型抗体,免疫后H7抗体水平快速上升,一免后2周即可达到7.43log 2,随后保持稳定;二免后H7抗体水平进一步上升,于第6周达到峰值10.13log 2,随后保持在9log 2左右的高水平㊂同样的,蛋鸭H7亚型免疫抗体合格率在一免后2周迅速上升至100%并持续保持至第8周㊂以上结果显示,蛋鸭在免疫接种重组禽流感H5+H7二价疫苗后可以快速产生并持续保持高水平的H5和H7亚型免疫抗体和100%免疫抗体合格率,具有良好的免疫效果㊂图5㊀蛋鸭二次免疫后H5和H7亚型免疫抗体水平2.4㊀雏鸭免疫重组禽流感H5+H7二价疫苗后的免疫抗体水平2.4.1㊀雏鸭1次免疫后的抗体水平㊀雏鸭只在14日龄进行一次免疫接种,剂量为0.5mL /只㊂免疫结果如图6所示,免疫前雏鸭体内的H5亚型母源抗体平均效价为0.83log 2,免疫抗体合格率为3.33%㊂免疫接种后1周母源抗体消失,H5亚型免疫抗体水平开始缓慢上升,并在免疫后4周达到峰值4.33log 2,随后逐渐下降,至第13周(105日龄)抗体平均效价为1.77log 2㊂同时,雏鸭H5亚型免疫抗体合格率只有在免疫后4周才能达到70.00%,其余免疫周期内均处于合格线以下㊂图6㊀雏鸭一次免疫后H5和H7亚型免疫抗体水平㊀㊀雏鸭免疫前体内无H7亚型抗体,免疫接种后H7亚型免疫抗体水平迅速上升,第3周抗体效价达4.07log 2,并在一免后4周达到峰值5.63log 2,随后迅速下降,第8周以后抗体效价下降为4log 2以下㊂H7亚型免疫抗体合格率在一免后4周才能达到合格(93.33%),随后有所下降,第8周后下降为70%以下㊂以上结果显示,雏鸭免疫接种一次重组禽流感H5+H7二价疫苗后,大部分免疫周期内H5和H7亚型免疫抗体合格率均达不到70%的合格线,于第4周达到峰值后逐渐下降㊂尽管免疫初期H7亚型抗体上升速率和抗体效价均快于和高于H5亚型抗体,但免疫后各周抗体效价始终均低于6log 2㊂表明,重组禽流感H5+H7二价疫苗在免疫雏鸭一次后H5和H7亚型免疫抗体水平和合格率整体不高,免疫效果不理想㊂2.4.2㊀雏鸭2次免疫后的抗体水平㊀雏鸭在14日龄和35日龄分别进行剂量为0.5mL /只和1.0mL /只的免疫接种㊂免疫结果如图7所示,二次免疫后1周H5和H7亚型免疫抗体水平均迅速上升至峰值,效价分别为8.13log 2和9.16log 2,随后开始逐渐下降,至第13周(105日龄)H5和H7抗体平均效价分别为4.93log 2和5.03log 2㊂同时,H5和H7亚型免疫抗体合格率在二免后均持续保持在70%以上㊂以上结果显示,雏鸭免疫接种两次重组禽流感H5+H7二价疫苗后,H5和H7亚型免疫抗体合格率均在二免后保持70%以上㊂同时,比较雏鸭免疫一次和两次后免疫抗体水平差异(图8),雏鸭二次免疫后各周H5和H7亚型抗体水平均明显比只一次免疫组的高3个滴度左右,二免后抗体平均效价均可维持在4.93log 2以上,在二免后1周以后两者存在极显著差异㊂表明,重组禽流感H5+H7二价疫苗在免疫雏鸭两次后,免疫效果明显要好于一次免疫效果,但弱于于雏鸡和蛋鸡组免疫效果㊂图7㊀雏鸭二次免疫后H5和H7亚型免疫抗体水平图8㊀雏鸭免疫一次和两次后免疫抗体水平差异比较注:用t 检验法进行分析㊂一次免疫与两次免疫相比,∗∗:差异极显著(P <0.01),∗:差异显著(P <0.05),不标者则为差异不显著(P >0.05)2.5㊀重组禽流感H5+H7二价疫苗免疫后的产蛋影响㊀临床观察结果显示(图9),除鸡群一免后两天饮水量有所增加外,鸡群免疫后的采食饮水㊁精神状态㊁粪便等都保持正常;鸭群免疫后采食量有所下降,1周后恢复正常,其余精神状态和粪便等并无明显变化㊂蛋鸡的产蛋量在免疫前后未见明显变化,只是在免疫接种㊁采样后会出现短暂下降,之后2~3d 即恢复到正常水平㊂蛋鸭产蛋率在免疫前后有比较明显,免疫接种后下降幅度大可达16%~30%,二免后产蛋率逐渐稳定恢复正常水平㊂图9㊀蛋鸡和蛋鸭免疫后产蛋率变化情况3 讨论低致病性H7N9流感病毒一旦发生变异后对禽类表现为高致病性,2017年以来H7N9流感变异毒株给我国家禽养殖业带来了严重的影响和损失[7-8]㊂国内外禽流感防控实践措施表明,疫苗免疫是防治禽流感的关键措施之一[6,10-11]㊂因此,家禽H7N9流感的全面免疫是目前高致病性禽流感防控的重要措施,切实有效的保障全国禽类养殖业生产安全和公共卫生安全㊂通过蛋禽2次免疫的现场免疫试验(一免后4周二免)及雏禽的1次和2次免疫(一免后3周二免)的现场免疫试验,结果分析表明:(1)重组禽流感H5+H7二价疫苗对蛋鸡和蛋鸭都具有良好的免疫效果,免疫后2周H5和H7亚型免疫抗体水平均能达到100%的免疫合格率,并能持续保持至二免后4周;(2)重组禽流感H5+H7二价疫苗对雏鸡也具有较好的免疫效果,免疫一次时H5N1Re-8和H7N9Re-1抗体水平分别在一免后3周和2周达到70%以上的免疫合格率,并维持到一免后13周;进行二次免疫后,H5N1Re-8和H7N9Re-1抗体滴度明显高于一次免疫,并维持在较高的抗体水平㊂其中,H5Re-8相对于H7N9Re-1抗体效价产生较慢的原因可能与雏鸡母源抗体的影响有关;(3)重组禽流感H5+H7二价疫苗对雏鸭的免疫效果相对较差,H5N1Re-8抗体水平在一次免疫周期内处于70%合格率以下,一次免疫效果不理想;二免后1周H5和H7亚型抗体水平均能达到80%以上的合格率㊂同时,雏鸭抗体水平和合格率均要明显低于鸡群免疫效果㊂两者免疫后在H5和H7抗体水平上能够相差0.37~3.74log2和1.14~2.30log2个滴度,H5和H7抗体合格率在一免后最高可相差了53和40个百分点,二免后最高相差了20和10个百分点㊂因此,雏鸭必须进行二次免疫才能达到满意的免疫效果;(4)重组禽流感H5+H7二价疫苗免疫后对蛋禽产蛋率有一定程度的影响㊂蛋鸡产蛋率下降较少且很快恢复正常水平,蛋鸭产蛋率变化显著,恢复时间也较长,表明蛋鸭比蛋鸡更易受到应激的影响㊂由于试验需要蛋禽免疫后每周采集血样测定抗体,免疫试验中观察到的蛋鸭产蛋影响时间较长与采血导致的应激反应极大相关㊂因此,按照农业部推荐的免疫程序,对生长期少于70日龄的鸡一次免疫,生长周期70日龄以上的肉鸡和蛋鸭首次免疫后3~4周进行二次免疫,免疫后H5和H7亚型免疫抗体效价均可达到较高水平并维持较长时间,能满足本省高致病性禽流感防控要求㊂而对生长周期少于70日龄的肉鸭在一次免疫后3周需要进行加强免疫才能保证免疫效果,为减少风险建议免疫2次以上㊂同时,在免疫接种蛋禽时要尽量减少接种应激带来的产蛋率下降的影响,可采取开产前强化免疫㊁疫苗回温注射㊁添加适量多种维生素等措施㊂另外,重组禽流感H5+H7二价疫苗中抗原含量因不同生产厂家和各批次间的差异可能会有所不同,从而造成免疫后H5和H7亚型免疫抗体水平差异㊂因此,免疫效果的持续监测是当前高致病性禽流感免疫防控工作中的重要环节㊂家禽免疫接种后及时进行抗体水平的免疫监测和效果评价,对禽群中出现免疫副反应㊁免疫抗体不达标㊁免疫失败等情况要及时处理,进行补免或重免,以确保本省家禽高致病性禽流感的全面免疫效果㊂参考文献:[1]㊀孙海燕,童海汀,崔大伟,等.2013至2015年浙江地区人感染H7N9禽流感病毒蛋白关键位点分子特征分析[J].中华临床感染病杂志,2016,9(4):330335.[2]㊀温亚洲.H7N9流感疫情对禽业发展的影响[J].兽医导刊,2013,(S1):11.[3]㊀刘娟.H7N9禽流感病毒的研究进展[J].西部医学,2015,27(4):635637.[4]㊀郑腾,张体银,白泉阳,等.H7N9亚型禽流感病毒的研究现状及防控策略[J].畜牧与兽医,2016,48(10):134137. [5]㊀孙逸,楼秀玉,张磊.新型人感染H7N9禽流感病毒病原学研究进展[J].浙江预防医学,2014,26(5):481485. [6]㊀张济培,张溢珊,牛森,等.H7N9亚型禽流感免疫程序研究初报[J].广东畜牧兽医科技,2017,42(3):2127. [7]㊀田国彬.禽流感流行现状与防控措施[J].兽医导刊,2017(17):811.[8]㊀Jianzhong Shi,Guohua Deng,Huihui Kong,et al.H7N9virulentmutants detected in chickens in China pose an increased threat to humans[J].Cell Research,2017,(27):14091421. [9]㊀田国彬.H7㊁H5禽流感的流行动态及防控[J].兽医导刊,2014,(05):1417.[10]㊀曾显营.H5N1亚型重组禽流感灭活疫苗种毒Re-6株的生物学特性及免疫原性研究[J].中国预防兽医学报,2010,41(10):800803.[11]㊀田国彬.防控H7N9,建议免疫2次以上H7-Re1苗[J].北方牧业,2017(20):9.。