尿常规测定方法的操作规程
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尿常规测定方法的操作规程
【产品名称】
通用名称: 尿液分析试条(化学分析法)
英文名称: urine test strip
【预期用途】
适用于与尿液分析仪配套使用或目测。作尿液化学分析的过筛检测。对尿葡萄糖、尿蛋白、尿酮体、尿隐血、尿胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、PH值、尿比重、尿白细胞、尿维生素、肌酐、微量白蛋白的检测。
【检验原理】:
潜血:
根据血红蛋白接触活性法原理,通过血红蛋白的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物,使四甲基联苯按氧化呈色。
胆红素:
根据偶氮偶合法的原理,2,4-二氯苯胺重氮盐与胆红素进行特异性反应,并与胆红素的浓度相对应产生不同的颜色。
尿胆原:
根据偶氮结合法的原理,尿胆原在强酸条件下和重氮盐偶联形成胭脂红色素。
尿酮体:
根据硝普酸钠法原理,硝普酸钠和酮体(乙酰乙酸)在碱性条件下相互作用而呈现紫色,特别是乙酰乙酸对此特别灵敏。
尿蛋白:
根据染料结合的蛋白误差法原理,蛋白质与染料结合形成复合物产生色变,特别是对白蛋白的反应比对球蛋白、血红蛋白、本-周氏蛋白和粘蛋白更为灵敏。
亚硝酸盐:
反应依赖于尿中格兰氏阳性细菌把硝酸盐还原成亚硝酸盐,亚硝酸盐与对氨基苯砷酸反应生成重氮化合物,重氮化合物再与萘基乙二按二盐酸结合呈现出桃红色。
葡萄糖:
根据葡萄糖氧化酶法反应原理,葡萄糖氧化酶特异性氧化β-D-葡萄糖,生成葡萄糖醛酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下,使指示剂氧化而呈现出棕色。
PH:
通过PH指示剂测定5.0~9.0的范围内的PH值,正常人的新鲜尿液PH值在5.0~7.0之间。
尿比重:
利用多聚电解质方法,尿中电解质与聚电解质发生离子交换的原理。阳离子存在时,多聚物氢离子通过交换释出,使溴百里酚蓝指示剂发生颜色变化,颜色由蓝经过蓝绿最后变成黄色。
尿白细胞:
根据酯酶法的原理,粒细胞浆内含有酯酶,这种酶能水解一种3-羟基吲哚酚酯类底物,释放出酚从而与重氮试剂反应生成紫红色化合物。
尿维生素C:
它的反应原理是根据2.6—二氯靛酚染料在氧化状态时显颜色,被Vc还原时无色。在强Vc状态下,葡萄糖、潜血、胆红素项目呈假阴性。Vc的测定对准确的临床诊断起了一定的辅助作用。
【主要组成成份】(mg/100条)
白细胞:取代吲哚酚酯1.0、重氮盐1.0、缓冲剂155
酮体:亚硝基铁氰化钠50、缓冲剂160
亚硝酸盐:对氨基苯砷酸0.65、N-1-萘乙二胺盐酸盐0.45、缓冲剂55
尿胆原:固兰B盐1.8
胆红素:2,4-二氯苯胺重氮盐15、缓冲剂356
蛋白:四溴酚兰0.33、缓冲剂666
葡萄糖:葡萄糖氧化酶6.6、过氧化物酶2.2、缓冲剂555
比重:溴百里酚兰0.46、聚甲基乙烯酯马来酸钠18
PH:溴二甲酚兰3.6、溴甲酚绿0.6
潜血:过氧化羟基异丙苯36.8、四甲基联苯胺2.2、缓冲剂36
维生素C:2,6-二氯靛酚染料0.22
【储存条件及有效期】
+4℃~25℃温度下, 干燥避光场所储存,目测试纸有效期为24个月,仪测试纸有效期为12个月,开封后在规定条件下贮存,有效期:目测法6个月,仪测法1个月。
【适用仪器】
适用于高尔宝GEB系列尿液分析仪:GEB试纸;适用于 Bayer Clinitek系列尿液分析仪:GB10试纸;适用于日本爱科来(原日本京都第一科学)系列尿液分析仪:10EA试纸;适用于Roche Miditron 系列尿液分析仪:BM10试纸;适用于山西亚森FA系列等尿液分析仪:FA试纸。
【样本要求】
样本的收集和准备
用清洁干燥的容器收集新鲜尿液并尽快测试,尿样在室温下的放置时间不可超过1小时,否则应将尿样保存在2-8℃冰箱中并在2小时内测定,不要在尿样中加入防腐剂。尿样不可离心,测试前将尿样混匀。
【检验方法】
目测试剂带
1、将所有的试垫区浸入样本中,并立即将其取出。
2、让试剂带的边缘沿着样本容器口轻轻撩拭,以去除残余的尿液。
3、横握试剂带,与瓶签上的比色图谱比较,记录结果。按瓶签上所定的时间记录半定量结果。2分钟后
的颜色变化无临床诊断意义。
仪测试剂带:请按仪器操作手册进行操作。
尿试纸条与适用的尿液分析仪配套使用,请按所用的尿液分析仪的说明书进行操作。
【参考值(参考范围)】
【检验结果的解释】
特异性及干扰因素
白细胞
低比重尿、碱性尿白细胞容易溶解,造成白细胞测定结果比镜检结果偏高。
酮体
试纸块不与β-羟丁酸反应。假阳性偶见于含大量左旋多巴代谢物的尿液。
亚硝酸盐
此试验只对亚硝酸盐有特异性而不会对尿中其他任何正常排泄物质有反应。本试验仅基于含有硝酸盐还原酶的细菌,因此阴性并不能排除菌尿的可能,当VC浓度超过100mg/L时会造成假阴性结果。由于人体内硝酸盐的存在,阳性也不能完全肯定泌尿系统感染。
尿胆原
已知的对Ehrlich有干扰的物质对此试验均有干扰。某些药物(如非那吡啶)可在酸性介质中显红色而导致弱阳性结果。试纸块反应性能随温度的升高而增强,反应的最适温度为22℃~26℃。甲醛可抑制反应。此试验不能检测尿胆原缺失。
胆红素
在低PH值的情况下,一些药物代谢物会给出假阳性结果(如吲哚硫酸等),当VC达到100mg/L以上亦可能出现假阳性结果。
蛋白
试纸对白蛋白的反应比对球蛋白、血红蛋白、本周氏蛋白和粘蛋白灵敏,因此阴性结果并不排除尿液中这些蛋白的存在。高比重尿、高缓冲尿、碱性尿、某些消毒剂或清洁剂的污染可致假阳性结果。
葡萄糖