光温条件对三叶青愈伤生长及黄酮积累的影响

三叶青总黄酮的提取和纯化工艺研究的开题报告一、选题背景和意义三叶青是一种常用的民间草药，在中医中被列为清热解毒、凉血止血、消肿止痛的良药。

近年来，随着人们对传统中草药的认识深入，国内外很多研究发现三叶青中含有大量的总黄酮，具有很好的药用价值，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降脂、降压等功效。

因此，对于三叶青总黄酮的提取和纯化工艺研究，具有重要的理论和实践意义。

二、研究目的和内容本研究旨在研究三叶青总黄酮的提取和纯化方法，包括溶剂提取、分配萃取、薄层层析、中压液相色谱等技术的优化及其在三叶青总黄酮制备中的应用。

具体内容包括：1. 优化三叶青总黄酮提取工艺采用单因素试验和正交试验法，优化三叶青总黄酮的提取工艺，确定最佳提取工艺方案。

2. 优化总黄酮的纯化方法根据三叶青总黄酮的物化特性，采用分配萃取、薄层层析、中压液相色谱等技术进行总黄酮的纯化，寻找最佳的纯化方法。

3. 总黄酮含量的分析采用高效液相色谱测定三叶青中总黄酮的含量，研究不同工艺条件对总黄酮含量的影响，并确定最佳工艺条件。

4. 质量评价对提取得到的实验样品进行质量评价，包括形态特征的观察、药效学评价、化学成分分析等。

三、研究意义1. 对于治疗炎症、肿瘤等疾病具有重要的临床价值；2. 对提高三叶青资源的综合利用价值具有推动作用；3. 对制定科学、合理的中药质量标准具有现实的意义。

四、研究方法本研究采用实验室实验法，主要包括样品制备、提取、纯化及其它分析测试和数据处理等。

其中，利用UPLC对提取得到的总黄酮含量进行分析，采用正交试验法对提取过程中主要影响因素进行优化。

同时，通过对样品的质量评价来验证所得结果的可靠性。

五、研究预期结果1. 建立一套较为完善的三叶青总黄酮提取和纯化方法；2. 确定最佳工艺条件，提高总黄酮的纯度和产量；3. 建立一套检测三叶青中总黄酮含量的分析方法；4. 初步验证三叶青总黄酮的药效学和化学成分；5. 为未来进一步研究和开发三叶青药物提供依据和参考。

850㊀㊀2023年第64卷第4期收稿日期:2022-12-05基金项目:浙江省乐清市农业科技项目(2020N040)作者简介:缪晓丹(1987 ),女,浙江兰溪人,农艺师,从事农产品质量安全及实验室检测工作,E-mail:805009037@㊂通信作者:徐丽红(1962 ),女,浙江丽水人,研究员,从事农产品质量安全科研工作,E-mail:xlh3888@㊂文献著录格式:缪晓丹,徐丽红,郁利杰,等.采收期及加工方式对三叶青品质的影响[J].浙江农业科学,2023,64(4):850-855.DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.20220868采收期及加工方式对三叶青品质的影响缪晓丹1,2,徐丽红1∗,郁利杰3,张涛3(1.浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所,浙江杭州㊀310021;2.兰溪市优质农产品服务中心,浙江兰溪㊀321100;3.浙江农林大学农业与食品科学学院,浙江杭州㊀310018)㊀㊀摘㊀要:研究不同采收期㊁加工方式和干燥温度对近野生铁皮石斛林下3a 生三叶青的品质指标(浸出物㊁多糖㊁灰分㊁黄酮)的影响㊂结果表明,不同采收期及加工方式对三叶青块根的品质均有一定影响㊂三叶青地下块根在1 4月均可采收,且采收后的浸出物含量差异不显著;而1月㊁2月㊁4月采收的三叶青黄酮含量较高,3月㊁4月采收的多糖含量较高㊂3月采收的黄酮含量最低,而此时多糖含量最高;2月采收的多糖含量最低,而此时黄酮含量最高,说明2 3月三叶青块根的多糖和黄酮内部物质间发生了转换,药农可根据成分需要择期采收㊂真空冷冻干燥是保留品质含量最多的处理,但操作复杂,加工成本较高;对加工成本压力较大的企业推荐自然阴干,而对总黄酮含量要求较高时,推荐微波干燥㊂不同干燥温度制三叶青茶时,可推荐选择50㊁55㊁60㊁65ħ干燥㊂关键词:三叶青;采收期;加工方式;品质中图分类号:S604㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:0528-9017(2023)04-0850-06㊀㊀三叶青为葡萄科崖爬藤属植物,学名三叶崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg),又名金线吊葫芦㊁蛇附子等[1-2],是我国特有的珍贵中草药㊂主要分布于长江以南的浙江㊁福建㊁广东㊁台湾等省份㊂‘本草纲目“中有 三叶崖爬藤,性味苦㊁辛㊁凉,清热解毒㊁活血袪风 的记载,而现代研究认为其具有抗肿瘤㊁抗病毒㊁调节免疫等药理作用[1],常用于治疗小儿惊厥㊁支气管炎㊁肺炎等;外用毒蛇咬伤㊁跌打扭伤,以及对各种热症㊁水肿等均具有独特的疗效,且无副作用㊁无抗药性,被誉为西药无法替代的 植物抗生素 [3]㊂三叶青以块根或全草入药,可晒干或鲜用,但以地下块根药用效果最好,全年可采收[4],研究表明,三叶青中的化学成分包括黄酮类㊁多糖类㊁酚酸等,而黄酮类是其抗肿瘤的主要活性成分[5]㊂随着药用价值的不断挖掘,市场需求增加,2018年浙江省将三叶青确定为新 浙八味 中药材之一,2020年三叶青在治疗新型冠状病毒感染时发挥了很好的效果,其中新冠肺炎1号方 化湿宣肺合剂的首位配方药就是三叶青㊂遗憾的是三叶青至今未被‘中国药典“收载,也没有现行的国家标准,质量标准稀缺㊂市场上衡量三叶青价值的标杆是品质,然而不同的采收期对三叶青品质影响较大,文献[6]虽有记载三叶青可在每年冬至到惊蛰期间采收,但相关的研究数据甚少㊂同时有研究表明,三叶青样品茎叶部分黄酮含量高于块根部分[7],开发利用价值较大,所以为充分利用已被采收块根的三叶青叶片,开展研究三叶青茶的制作具有重要意义;随着市场需求量的扩大,三叶青种植面积不断增加,三叶青干品的品质指标成为人们的关注点,为研究三叶青品质的影响因素,本试验以林下3a生三叶青块根和叶片为样品,分别通过不同采收期和不同加工方式研究品质指标的影响,筛选出最佳的采收期和加工方式㊂1㊀材料与方法1.1㊀试验材料㊀㊀选用长势均匀的林下3a 生三叶青地下鲜块根和鲜叶,不同采收期试验样品由浙江省具有代表性的药农提供;不同加工方式试验样品由温州雁圣源铁皮石斛有限公司提供(近野生铁皮石斛林下种植)㊂1.2㊀处理设计1.2.1㊀不同采收期试验设计㊀㊀试验分别于2021年1月㊁2月㊁3月㊁4月上旬,选取浙江省具有代表性的农户基地样品,开展不同采收期对三叶青地下块根品质指标(浸出物㊁多糖㊁灰分㊁黄酮)的影响研究,筛选出三叶青品质最佳的采收期㊂试验设每个采收期为1个处理,每个处理重复6次,制成干样各100g备用㊂1.2.2㊀不同加工方式试验设计㊀㊀试验于2021年11月 2022年3月进行,取同一地块相同品种的3a生三叶青地下块根鲜品,经清洗晾干切成1.5mm片状后,采用4种不同的加工方式:T1,自然阴干,即将三叶青切片置于室内阴干(吹电风扇增加空气流动),每隔3h翻动1次;T2,微波干燥,即将三叶青切片置于微波环境中,低火1min,放凉,再微波1min,放凉,反复操作至半干,再低火0.5min,放凉,再微波0.5min,放凉,反复操作加热至干燥;T3,鼓风烘干,即将三叶青切片置于60ħ下鼓风烘干,每隔3h翻动1次;T4,真空冷冻干燥,即将三叶青切片置于-17ħ预冷冻,再置于-50ħ真空冷冻干燥机中烘干㊂共4个处理,每处理重复5次,制成干样各100g备用㊂测定不同加工方式处理的三叶青地下块根品质指标(浸出物㊁多糖㊁灰分㊁黄酮)㊂试验取2021年11月 2022年3月期间已采收块根的三叶青鲜叶,三叶青鲜叶经烘烤-揉搓后于4种干燥温度(50㊁55㊁60㊁65ħ)下热风烘干,测定不同干燥温度处理的三叶青茶品质指标(多糖㊁浸出物㊁黄酮㊁灰分)㊂1.3㊀测定方法㊀㊀三叶青浸出物㊁灰分㊁多糖㊁黄酮均以干样测定㊂三叶青地下鲜块根按试验设计处理后烘干,研磨成粉末,过二号筛,装袋密封,置干燥密闭容器中备用㊂浸出物测定参照‘中国药典“醇溶性浸出物测定法测定[8],灰分测定参照‘中国药典“灰分测定法测定,黄酮测定参照郑军献等[9]所发表的紫外可见分光光度法测定,多糖测定参照余乐等[10]所发表的浙产三叶青的质量控制研究中的测定方法测定,品质检测由浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所承担㊂2㊀结果与分析2.1㊀不同采收期对三叶青地下块根品质的影响2.1.1㊀不同采收期对三叶青地下块根多糖含量的影响㊀㊀由表1可知,不同采收期的三叶青地下鲜块根多糖平均含量(以干基计)在14.98%~26.04%, 3月采收的三叶青地下鲜块根多糖含量为26.04%, 4月采收的三叶青地下鲜块根多糖含量为21.94%, 1月采收的三叶青地下鲜块根多糖含量为15.78%, 2月份采收的三叶青地下鲜块根多糖含量为14.98%;与2月采收比较,3月采收差异极显著, 4月采收差异显著,3月与4月之间差异不显著㊂本结果与余乐等[10]的研究结果相近,说明4种不同采收期均能有效保存三叶青多糖的含量,但3月和4月采收的三叶青多糖平均含量明显较高,故当对三叶青多糖含量要求较高时,可推荐3月㊁4月采收㊂表1㊀不同采收期对三叶青地下块根多糖含量的影响采收月份多糖含量/%重复1重复2重复3重复4重复5重复6平均含量/%312.3229.9719.7531.2135.7127.2926.04a A 424.3118.2719.5425.5325.2818.7121.94ab AB 117.6519.7512.2119.6711.7213.7015.78bc B 217.7012.7913.2712.4621.0212.6614.98c B ㊀㊀注:同列数据后无相同小写字母表示处理间差异达显著水平(P<0.05);同列数据后无相同大写字母表示处理间差异达极显著水平(P<0.01)㊂表2~9同㊂2.1.2㊀不同采收期对三叶青地下块根浸出物含量的影响㊀㊀由表2可知,不同采收期的三叶青地下鲜块根浸出物平均含量(以干基计)在12.00%~14.02%, 1月采收的三叶青地下鲜块根浸出物含量为14.02%,2月采收的三叶青地下鲜块根浸出物含量为13.15%,3月采收的三叶青地下鲜块根浸出物含量为12.43%,4月份采收的三叶青地下鲜块根浸出物含量为12.00%,各处理之间差异不显著㊂4种不同采收期的三叶青浸出物含量均符合2015年版‘浙江省中药材炮制规范“中规定[11]的三叶青浸出物含量(ȡ7.5%),且1 4月采收对三叶青852㊀㊀2023年第64卷第4期㊀㊀表2㊀不同采收期对三叶青地下块根浸出物含量的影响采收月份浸出物含量/%重复1重复2重复3重复4重复5重复6平均含量/%115.3023.4012.2011.7010.3011.2014.02a A216.3016.1011.0015.5011.908.1013.15a A37.7011.709.1018.5010.0017.6012.43a A417.7020.908.709.008.607.1012.00a A浸出物影响不大,故均可采收㊂2.1.3㊀不同采收期对三叶青地下块根黄酮含量的影响㊀㊀由表3可知,不同采收期的三叶青地下鲜块根黄酮平均含量(以干基计)在0.21%~0.33%,2月采收的三叶青地下鲜块根黄酮含量为0.33%,1月采收的三叶青地下鲜块根黄酮含量为0.32%,4月采收的三叶青地下鲜块根黄酮含量为0.30%,3月采收的三叶青地下鲜块根黄酮含量为0.21%;1月和2月采收的三叶青黄酮含量与3月比较差异均显著,而这2个处理之间差异不显著㊂各处理与余乐等[10]的研究结果一致,说明4种不同采收期均能有效保存三叶青黄酮的含量,但1月和2月采收的三叶青黄酮平均含量明显较高,故对三叶青黄酮含量要求较高时,可推荐1 2月采收㊂表3㊀不同采收期对三叶青地下块根黄酮含量的影响采收月份黄酮含量/%重复1重复2重复3重复4重复5重复6平均含量/%20.360.380.360.350.420.120.33a A10.310.520.270.280.280.250.32a A40.300.490.270.200.390.130.30ab A30.090.280.150.310.280.150.21b A2.1.4㊀不同采收期对三叶青地下块根灰分含量的影响㊀㊀由表4可知,不同采收期的三叶青地下鲜块根灰分平均含量(以干基计)在 4.66%~5.67%,灰分平均含量从高到低的处理依次是1月采收的三叶青地下鲜块根灰分含量为5.67%,2月采收的三叶青地下鲜块根灰分含量为5.12%,4月采收的三叶青地下鲜块根灰分含量为4.95%,3月采收的三叶青地下鲜块根灰分含量4.66%,各处理之间差异不显著㊂与崔伟亮等[12]的研究结果一致,故1 4月采收对三叶青灰分含量影响不大㊂表4㊀不同采收期对三叶青地下块根灰分含量的影响采收期月份灰分含量/%重复1重复2重复3重复4重复5重复6平均含量/%110.209.00 3.00 3.60 4.20 4.00 5.67a A27.20 6.60 4.60 5.40 3.70 3.20 5.12a A49.47 5.68 4.23 3.70 3.24 3.38 4.95a A33.004.343.945.573.407.694.66a A㊀㊀多糖㊁黄酮㊁浸出物和灰分是衡量三叶青品质的重要指标,其中黄酮不仅可以消炎止痛,保肝抗炎,且能抑制癌细胞增殖,促进癌细胞凋亡[13-15],同时在抗衰老和提高免疫等方面也有诱人的前景㊂从试验数据可以看出,三叶青地下块根在1月㊁2月㊁3月㊁4月均可采收,且采收后的浸出物含量差异不显著;而1月㊁2月㊁4月采收的三叶青黄酮含量较高,3月㊁4月采收的多糖含量较高;3月采收的黄酮含量最低,而此时多糖含量最高;2月采收的多糖含量最低,而此时黄酮含量最高,说明2 3月的三叶青黄酮㊁多糖等内部物质间发生了转换,药农可根据成分需要择期采收㊂2.2㊀不同加工方式对三叶青地下块根品质指标含量的影响2.2.1㊀不同加工方式对三叶青地下块根多糖含量的影响由表5可知,不同加工方式的三叶青地下块根多糖平均含量(以干基计)在17.19%~24.11%,多糖平均含量从高到低依次是T4真空冷冻干燥(24.11%)㊁T1自然阴干(21.83%)㊁T3热风干燥(21.81%)㊁T2微波干燥(17.19%);T4真空冷冻干燥与T1自然阴干㊁T3热风干燥处理差异显著,而与T2微波干燥处理差异极显著㊂与陈翔等[16]的研究结果一致,说明T4真空冷冻干燥最能有效保存三叶青多糖含量,其次是T1自然阴干和T3热风干燥处理㊂表5㊀不同加工方式对三叶青地下块根多糖含量的影响处理方式多糖含量/%重复1重复2重复3重复4重复5平均含量/%T423.3227.4923.7223.7322.3124.11a A T121.8924.5923.3919.7519.5421.83b A T322.6927.3722.1818.9117.9221.81b A T217.8019.8214.2216.2417.8717.19c B 2.2.2㊀不同加工方式对三叶青地下块根浸出物含量的影响㊀㊀由表6可知,不同加工方式处理的三叶青地下鲜块根浸出物平均含量(以干基计)在15.40%~ 17.03%,浸出物平均含量从高到低的处理分别是T3热风干燥为17.03%,T4真空冷冻干燥为16.87%,T1自然阴干为16.13%,依次比T2微波干燥的15.40%,增加了1.63㊁1.47㊁0.73百分点,而各处理之间差异不显著㊂4种不同加工方式所得的浸出物含量均符合2015年版‘浙江省中药材炮制规范“[11]中三叶青浸出物含量ȡ7.5%的规定,而各处理对三叶青浸出物影响的区别不大㊂表6㊀不同加工方式对三叶青地下块根浸出物含量的影响处理浸出物含量/%重复1重复2重复3重复4重复5平均含量/%T325.1016.0010.009.108.9017.03a A T419.6018.0013.009.808.3016.87a A T122.4015.0011.009.108.7016.13a A T221.2014.0011.009.207.7015.40a A 2.2.3㊀不同加工方式对三叶青地下块根黄酮含量的影响㊀㊀由表7可知,不同加工方式的三叶青地下鲜块根黄酮平均含量(以干基计)在0.46%~0.58%,黄酮平均含量从高到低依次是T2微波干燥(0.58%)㊁T4真空冷冻干燥(0.49%)㊁T1自然阴干(0.48%)㊁T3热风干燥(0.46%),与熊科辉等[17]的研究结果一致;T2微波干燥㊁T4真空冷冻干燥和T1自然阴干3个处理间差异不显著,而与T3热风干燥处理差异显著㊂说明T2微波干燥㊁T4真空冷冻干燥和T1自然阴干均能有效保存三叶青黄酮含量,其次是T3热风干燥处理㊂表7㊀不同加工方式对三叶青地下块根黄酮含量的影响处理黄酮含量/%重复1重复2重复3重复4重复5平均含量/%T20.860.560.770.280.410.58a A T40.680.470.850.190.250.49ab A T10.620.590.780.150.270.48ab A T30.610.580.720.180.200.46b A 2.2.4㊀不同加工方式对三叶青地下块根灰分含量的影响㊀㊀由表8可知,不同加工方式的三叶青地下鲜块根灰分平均含量(以干基计)在4.12%~4.84%,灰分平均含量从高到低依次是T4真空冷冻干燥(4.84%)㊁T3热风干燥(4.66%)㊁T1自然阴干(4.51%)㊁T2微波干燥(4.12%),与崔伟亮等[12]的研究结果一致;T4真空冷冻干燥㊁T3热风干燥和T1自然阴干3个处理间差异不显著,T4真空冷冻干燥与T2微波干燥处理差异极显著㊂说明T4真空冷冻干燥保存的灰分含量较多㊂表8㊀不同加工方式对三叶青地下块根灰分含量的影响处理灰分含量/%重复1重复2重复3重复4重复5平均含量/%T4 5.69 4.54 4.22 4.13 5.62 4.84a A T3 4.99 4.10 4.64 4.16 5.42 4.66a AB T1 5.18 3.94 4.23 4.54 4.64 4.51ab AB T2 4.76 3.56 4.22 3.40 4.64 4.12b B ㊀㊀T4真空冷冻干燥在冷冻过程中温度较低,呼吸酶的活性较弱,呼吸作用减缓,有利于多糖㊁浸出物㊁黄酮等的保存㊂黄酮类化合物在受热时易发生酚性氧化反应[15],活性成分降低,而T2微波干燥处理,升温较快,植物组织内部温度较高,在发生酚性氧化前,三叶青的氧化酶已失活,利于保存黄酮含量㊂2.3㊀不同干燥温度对三叶青茶品质指标含量的影响㊀㊀三叶青鲜叶经烘烤-揉搓后于4种干燥温度(50㊁55㊁60㊁65ħ)下热风烘干,结果发现,各处理多糖平均含量(以干基计)在17.47%~ 18.87%,多糖平均含量从高到低的处理依次是854㊀㊀2023年第64卷第4期65ħ(18.87%)㊁55ħ(17.92%)㊁60ħ(17.88%)㊁50ħ(17.47%),各处理间差异不显著;浸出物平均含量(以干基计)在24.70%~ 26.33%,浸出物平均含量从高到低的处理依次是60ħ(26.33%)㊁65ħ(26.27%)㊁50ħ(24.93%)㊁55ħ(24.70%),各处理间差异不显著;黄酮平均含量(以干基计)在0.87%~ 0.96%,黄酮平均含量从高到低的处理依次是55ħ(0.96%)㊁65ħ(0.93%)㊁50ħ(0.91%)㊁60ħ(0.87%),各处理间差异不显著;灰分平均含量(以干基计)在10.26%~11.03%,灰分平均含量从高到低的处理分别是60ħ(11.03%)㊁65ħ(10.39%)㊁55ħ(10.29%)㊁50ħ(10.26%),各处理间差异不显著㊂说明4种不同干燥温度均能有效保存三叶青叶品质(多糖㊁浸出物㊁黄酮㊁灰分)含量,而各处理对三叶青茶品质指标含量影响不大,故均可推荐(表9)㊂表9㊀不同干燥温度对三叶青茶品质指标的影响温度/ħ多糖含量/%浸出物含量/%黄酮含量/%灰分含量/%5017.47a A24.93a A0.91a A10.26a A 5517.92a A24.70a A0.96a A10.29a A 6017.88a A26.33a A0.87a A11.03a A 6518.87a A26.27a A0.93a A10.39a A 2.4㊀不同加工方式的三叶青加工成本2.4.1㊀不同干燥温度对三叶青叶加工成本的影响㊀㊀三叶青鲜叶经烘烤-揉搓后于4种干燥温度(50㊁55㊁60㊁65ħ)下热风烘干,研究不同干燥温度对三叶青烘干时间的影响㊂发现各处理随着烘干温度的升高,收缩逐渐严重,失水速度增快,烘干时间逐渐变短,有利于节省时间成本㊂其中65ħ热风烘干需8.01h,60ħ热风烘干需8.53h, 55ħ热风烘干需9.19h,50ħ热风烘干需10.22h,在65ħ热风烘干温度下,烘干时间最短㊂在三叶青茶烘干过程中,使用上海森信实验仪器有限公司生产的电热恒温鼓风干燥箱,电源电压为220V,频率为50Hz,消耗功率为1640W,工作室尺寸是600mmˑ550mmˑ600mm,室内设有两层搁板,排铺密度是1.5kg㊃m-2㊂经调研[18]发现,667m2可得鲜叶平均产量约114kg,一般工商业平均电价约为1.05元㊃(kW㊃h)-1,结合各干燥温度下的烘干时间,计算667m2三叶青鲜叶的烘干成本㊂发现65ħ热风烘干需1588.31元,60ħ热风烘干需1691.42元,55ħ热风烘干需1822.29元,50ħ热风烘干需2026.53元㊂三叶青茶热风烘干过程中,随着温度的升高,烘干时间变短,烘干成本降低,经济效益提高㊂2.4.2㊀不同加工方式对三叶青块根加工成本的影响㊀㊀对三叶青地下块根经T1自然阴干㊁T2微波干燥㊁T3鼓风烘干和T4真空冷冻干燥处理开展烘干成本比较,真空冷冻干燥处理一次可烘干鲜样约2.2kg,烘干平均时间为36.34h,真空冷冻干燥机电源功率为850W,经调研[19]发现,667m2可得地下块根平均产量约153kg,计算真空冷冻干燥处理烘干667m2三叶青地下块根的烘干成本为2255.60元㊂微波干燥处理三叶青鲜样(样品质量为300.00g)所需平均时间为1.37h,微波炉的额定电压为220V,额定频率为50Hz,额定输出功率为1400W,结合工商业电价1.05元㊃(kW㊃h)-1,计算微波干燥处理烘干667m2三叶青鲜样的烘干成本为1027.09元㊂鼓风烘干三叶青地下块根的排铺密度是4kg㊃m-2,平均烘干时间13.89h,计算鼓风烘干处理667m2三叶青鲜样的烘干成本为1386.19元,自然阴干(加电吹风)一批三叶青需2~3d,电风扇额定输出功率为100W,计算自然阴干处理667m2三叶青鲜样的烘干成本为64.26~96.39元,属4种干燥处理成本最低㊂3㊀小结㊀㊀本试验通过开展不同采收期和加工方式对三叶青品质指标的影响研究,发现品质指标随着采收时间和加工方式的不同而存在差异㊂在1 4月采收的三叶青浸出物含量均符合‘浙江省中药材炮制规范“(2015年版)规定ȡ7.5%,差异不显著;3 4月份采收的三叶青粗多糖含量较多,1月㊁2月㊁4月份采收的三叶青黄酮含量较多㊂3月份采收的黄酮含量最低,而多糖含量最高,2月采收的多糖含量最低,而黄酮含量最高,说明2 3月的黄酮㊁多糖等随着植物的生长,内部物质间发生了转换㊂T4真空冷冻干燥更能有效保存三叶青多糖㊁浸出物㊁黄酮和灰分的含量,其次是T1自然阴干,而T2微波干燥对黄酮的保存较明显㊂不同干燥温度(50㊁55㊁60㊁65ħ)均能有效保存三叶青茶的多糖㊁浸出物㊁黄酮和灰分的含量,且各处理间差异不显著㊂参考文献:[1]㊀丁富娟,李慧芬,崔伟亮,等.三叶青名实考辨[J].中国实验方剂学杂志,2018,24(9):208-212.[2]㊀郑平汉,郑雨雁,詹佳.三叶青生产技术[J].新农村,2019(6):23-25.[3]㊀陈加红.浙江野生三叶青的规模化组培育苗[J].河南农业,2018(13):56.[4]㊀刘培刚,魏克民.三叶青生物学㊁药理学及临床应用相关研究进展[J].中国中医药科技,2018,25(6):927-933.[5]㊀徐硕,金鹏飞,徐文峰,等.民间中药三叶青的研究进展[J].中南药学,2016,14(12):1336-1341.[6]㊀韩景泰. 蛇年 话 蛇药 :清热解毒蛇附子[J].开卷有益(求医问药),2013(11):47.[7]㊀阮明颖.不同产地三叶青总黄酮及多糖含量的测定[J].当代化工研究,2021(22):19-23.[8]㊀陈旭华,徐光临,刘力.2020年版‘中国药典“矿物药质量标准变化分析[J].中成药,2022,44(9):2974-2978.[9]㊀郑军献,胡轶娟,梁卫青,等.紫外可见分光光度法测定三叶青中总黄酮的含量[J].中国中医药科技,2009,16(5):386-387.[10]㊀余乐,刘敏,陈张金,等.浙产三叶青的质量控制研究[J].中国现代应用药学,2018,35(8):1194-1198. 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弱光和低温对大棚蔬菜的影响冬春季利用设施栽培蔬菜，当外界温度低于蔬菜正常生长的适宜温度下限时就会发生冷害或冻害。

其植物的表现有下面几个方面：1.叶片受害：在子叶期受害表现为子叶边缘失绿，出现“镶白边”，温度恢复正常后真叶生长不受影响；定植后如遇短期低温或冷风侵袭，植株部分叶片边缘受影响会呈暗绿色，然后逐渐干枯。

2. 根系受害：表现为根系生长停止，不能发生新跟，部分老根开始发黄，逐渐死亡。

即使温度很快回升，植株会表现萎蔫货生长速度减慢。

受害严重的植株难以恢复生长。

3. 生长点受害：较为严重的冻害发生时，顶芽受冻，不发新叶。

在天气转暖后可考虑补苗。

4.花果受害：蔬菜在开花期遇低温天气的影响，授粉受精率降低，稍后会形成大量的落花落果或畸形果。

对茄子的影响茄子（Solanum melongean L.）起源于亚洲东南亚热带地区，属喜温性的低温敏感型蔬菜。

近年来，随着我国节能型日光温室的普及与推广，茄子已成为设施栽培的主要果菜之一，但是在反季节生产时，覆盖物和骨架结构遮光及冬春季节的低温、雨、雪、连阴天等不良气候条件，使设施内的植物经常在低温弱光逆境中生长，从而造成作物徒长、光合能力下降和抗病虫害能力的减弱，对于像茄子以果实为产品器官的作物，低温弱光还会影响到开花、坐果及果实的发育，最终导致产量和品质的下降。

因此，要实现节能日光温室茄子等蔬菜产业的可持续发展，除了进一步改善日光温室的性能、培育日光温室专用品种，加强病虫害防治外，还需要进一步了解影响茄子光合生理特性的外界环境条件，掌握其影响机理，通过应用栽培管理措施和改善环境条件，以最大限度地发挥日光温室的生产潜力。

温室越冬茄子正处于低温弱光期，这段时间根系吸收肥力能力下降，很容易受营养元素的影响而出现异常症状(如叶片黄化、僵果、裂果、花不开放、落花落果等)。

1、叶黄化缺铁植株顶部幼叶失绿严重，呈黄白色，叶脉保持绿色，由于铁元素在植株体内移动性小，所以下部叶片发生较少，往往在顶部叶片上发生较多。

三叶青保护和繁育技术研究初报作者：周小卿曹东宝来源：《农业与技术》2014年第10期摘要：总结三叶青的保护和繁育、整地移栽、田间管理、功效和价值、社会效益等育苗关键技术措施。

关键词：三叶青；野生濒临绝种植物的驯化中图分类号：S567 文献标识码：A前言三叶青，拉丁名：Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg，属葡萄科三叶崖爬藤，多年生、蔓生藤本植物，是我国独有的珍贵物种，珍稀药用濒危植物。

生物学特性喜凉爽气候，适温在25℃左右生长健壮，冬季气温降至10℃时生长停滞。

耐旱忌积水，耐阴抗病少虫害，耐寒可塑性强。

对土壤要求不严，以含腐殖质丰富或石灰质的土壤上种植为好，成活率、覆盖率很高，生长速度快。

物种产自江苏、浙江、江西、福建等地。

生长于海拔300～1300m的山坡灌丛、山谷、溪边林下岩石缝中。

因产地不同，其形状、药性会略有差异，其中浙江三叶青的葫芦状果实呈金黄色，大如莲子，就药性而言在各类三叶青中属上品。

三叶青（葡萄科植物），又名：无毒1 形态特征草质藤本，小枝纤细，有纵棱纹，无毛或被疏柔毛。

卷须不分枝，相隔2节间断与叶对生。

叶为3小叶，小叶披针形、长椭圆披针形或卵披针形，长3～10cm，宽1.5～3cm，顶端渐尖，基部楔形或圆形，侧生小叶基部不对称，近圆形，边缘每侧有4～6个锯齿，锯齿细或有时较粗，上面绿色，下面浅绿色，两面均无毛；叶柄长2～7.5cm，中央小叶柄长0.5～1.8cm，侧生小叶柄较短，长0.3～0.5cm，无毛或被疏柔毛。

花序梗长1.2～2.5cm，被短柔毛；花梗长1～2.5mm，通常被灰色短柔毛；花蕾卵圆形，高1.5～2mm，顶端圆形；果实近球形或倒卵球形，直径约0.6cm，有种子1颗；种子倒卵椭圆形，顶端微凹，基部圆钝，表面光滑，种脐在种子背面中部向上呈椭圆形，腹面两侧洼穴呈沟状，从下部近1/4处向上斜展直达种子顶端。

花期4～6月，果期8～11月。

黄瓜(L.)为葫芦科甜瓜属一年生蔓生或攀缘草本植物,黄瓜野生种起源于喜马拉雅山南麓的热带雨林地区,经过长期驯化栽培,现广泛种植于温带和热带地区。

我国是黄瓜生产大国,资料显示,2020年我国黄瓜栽培面积为127万hm 2,约占世界的56.4%,年产量7336万t 左右[1];我国南北方均能栽培黄瓜,栽培品种类型以华南型、华北型和小型黄瓜为主。

黄瓜属于冷敏感植物,花果期在夏季,为中国各地夏季主要蔬菜之一,也是我国北方温室或大棚进行蔬菜越冬生产的最主要种类之一[2]。

由于目前设施环境调控能力较差,在日光温室和大棚中进行黄瓜生产,存在遭受低温弱光逆境为害的情况,使得黄瓜产量和品质下降,商品性降低,影响经济效益和菜农的积极性。

1黄瓜温光需求特征1.1对温度的要求黄瓜属于喜温性蔬菜,不耐寒冷。

种子发芽适宜温度为25~30℃,花粉萌发的适宜温度为30~35℃[3]。

光合作用的适宜温度为白天25~32℃、夜晚15~18℃。

黄瓜的根际温度要求为20~25℃,当地温低于12℃时,黄瓜根部的生理活动会受到阻碍;当低于5℃时,严重影响黄瓜的生长发育甚至造成死亡;当地温超过38℃时,根系开始腐烂直至死亡。

黄瓜正常生长发育的温度为10~35℃,最适宜的温度为25~32℃。

当温低温弱光对大棚黄瓜生长发育影响的研究进展薛鑫,孙信成,李琪,张忠武,胡超,蒋万,杨连勇,康杰,黄琳(湖南常德市农林科学研究院,415000)基金项目:国家现代农业产业技术体系专项(CARS-23);湖南省重点研发计划项目(2020NK2044)薛鑫(1986-),男,农艺师,主要从事农业技术推广工作,电话:138****3485,E-mail :****************孙信成(1988-),男,通讯作者,农艺师,主要从事设施蔬菜栽培研究,电话:182****1172,E-mail :******************收稿日期:2021-07-08摘要:低温弱光是大棚蔬菜栽培普遍面临的问题,低温弱光胁迫是影响植物生长发育和产量、品质的主要非生物胁迫。

姓名：王刚班级：中草药121 学号：1209010468光对药用植物次生代谢产物的形成与积累的研究进展光作为一个重要的环境因子,对植物生长发育有广泛的调节作用。

它不仅能够通过影响植物的光合作用,把光能转变为化学能贮存起来,为植物的生长提供能量。

同时,光还以环境信号的形式作用于植物,通过光敏色素等作用途径调节植物生长、发育和形态建成,使植物更好地适应外界环境。

一、光照强度药用植物对次生代谢产物积累的影响。

光是植物生命活动中重要的环境因子之一，它不仅是植物生长发育的能量来源，而且作为信号因子调控植物的生长发育。

光对植物次生代谢产物的合成和积累产生重要的影响。

适宜的光照强度能促进植物同化产物的积累，进而有利于次生代谢产物的合成。

研究表明，减弱光照强度可诱导积累生物碱，从而增加植物组织中生物碱的含量[31-32]；适度遮荫条件下，红豆杉中的紫杉醇[33]、雷公藤（Tripterygium wilfordii）愈伤组织中的二萜内酯[34]、银杏（Ginkgo biloba）叶中的黄酮[35]、参根中人参皂甙[36]、绞股蓝（Gynostemma pentaphyllum）中的总皂甙[37]等次生代谢产物的含量都有不同程度的提高。

叶和春[38]通过研究发现，光照对新疆紫草（Arnebia euchroma）愈伤组织紫草宁衍生物的形成有强烈抑制作用。

然而，有些研究发现，增加光照强度有利于生物碱等一些次生代谢物的合成[32]，如充足的光照能提高金银花（Loniceraferdinandii）中氯原酸[39]、麻黄（Ephedra sinica）生物碱[40]等有效成分的含量。

目前，关于光强对萜类物质影响的研究结果也并不一致。

有研究表明，强光照促进单萜类物质的积累，低光照条件下其含量降低。

萜烯类物质也会受到光强的影响。

遮荫处理后的幼苗也表现出较低水平的丹宁酸。

因此，在生产实践中，可以通过调整植株的种植密度、进行适当的遮荫处理等措施来改变光强，从而达到最佳的种植效果，获得最大收益。

药用植物三叶青的生物学特性及林下栽培技术摘要三叶青是我国特有的一种民间药用植物，具有很高的药用价值和经济价值。

该文介绍三叶青的生物学特性，并从选地与整地、育苗、种植、林地管理、病虫害防治、采收等方面总结三叶青林下栽培技术，以期促进三叶青产业的发展。

关键词三叶青；生物学特性；林下栽培技术三叶青拉丁学名为Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg，中文学名三叶崖爬藤，又名金线吊葫芦、丝线吊金钟、石老鼠、石猴子等。

三叶青属于被子植物门双子叶植物纲原始花被亚纲鼠李目葡萄科崖爬藤属植物[1-2]，是雌雄异株的多年生草质攀援藤本植物。

三叶青作为名贵中药，为我国特有的一种民间药用植物，其以块根或全草入药[3]，具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤等功效。

对各种热症不明原因的高热、扁桃体炎、肺炎、咽喉炎[4]、各种水肿（各种炎性水肿、蛇伤）有独特的疗效，是西药无法替代的“植物抗生素”，经济价值非常高。

林下套种三叶青等名贵中药材是提高林地使用效率，增加林产品供给的有效措施。

近年来，由于环境的改变及泛采、乱挖、只挖不种，致使原本就稀有的野生三叶青日渐稀少，濒临灭绝，根本不能满足医药市场需求，更显现其不可多得的珍贵。

因此，人工大面积种植三叶青前景广阔，研究开发三叶青林下种植技术势在必行。

1 三叶青生物学特性三叶青为多年生攀援藤本植物，一般长度为3.0～6.0 m。

小枝纤细，有纵棱纹。

卷须与叶片对生，不分枝。

叶片互生，叶柄长2.0～3.0 cm，掌状复叶，小叶3枚，小叶片呈狭椭圆形至狭卵状椭圆形，叶片长3.0～7.0 cm、宽1.5～3.0 cm，中央小叶较两侧小叶略大，顶端至叶尖逐渐变尖，叶缘具刺状疏齿，叶片两面均无毛，或仅在下面中脉上有毛。

花序腋生，长1～5 cm，二级分枝通常为4个，集生成伞形，花二歧状着生在分枝末端；花序梗长1.2～2.5 cm，被短毛；花蕾卵圆形，高1.5～2.0 mm，顶端圆形；花萼碟形，萼片细小，卵状三角形；花瓣4枚，卵圆形，顶端有小角；雄蕊4枚，花药黄色；花盘明显，4浅裂；子房陷在花盘中呈短圆锥状，花柱短，柱头4裂，星状展开。

1232㊀㊀2024年第65卷第5期收稿日期:2023-05-23作者简介:倪剑萍(1976 ),女,浙江杭州人,农艺师,本科,从事农业技术推广工作,E-mail:240913088@㊂通信作者:江花琴(1975 ),女,浙江杭州人,农艺师,本科,从事农业技术推广工作,E-mail:729461436@㊂文献著录格式:倪剑萍,闻军清,刘叶君,等.不同基质配比对三叶青生长的影响[J].浙江农业科学,2024,65(5):1232-1235.DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.20230785不同基质配比对三叶青生长的影响倪剑萍1,闻军清2,刘叶君3,江花琴2∗,丁耿伟2,缪强2,羊鲁军2(1.杭州市富阳区银湖街道区域发展与治理中心,浙江杭州㊀311402;2.杭州市富阳区农业农村局,浙江杭州㊀311400;3.杭州市富阳区春江街道区域发展中心,浙江杭州㊀311421)㊀㊀摘㊀要:基于基地生产实践,开展生物质炭㊁泥炭土等不同配比基质应用试验,观察三叶青块根㊁藤茎叶及植株长势,对生物质炭㊁泥炭土等基质生态改良效果开展评价,为三叶青品质提升提供技术支撑㊂试验发现,三叶青生产中,基质加入生物质炭能起到降低基质容重㊁增加基质总孔隙度㊁促进根系发育㊁提高基质pH 值㊁促进三叶青叶片发育等作用㊂生物质炭的加入提高了三叶青根际细菌/真菌比值,使基质微生态环境偏向细菌型,对三叶青生长更为有利㊂关键词:基质配比;三叶青;生物质炭;泥炭土中图分类号:S359.9㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:0528-9017(2024)05-1232-04A preliminary report on the effect of different ratio ofsubstrate on the growth of Tetrastigma hemsleyanumNI Jianping 1,WEN Junqing 2,LIU Yejun 3,JIANG Huaqin 2∗,DING Gengwei 2,MIAO Qiang 2,YANG Lujun 2(1.Yinhu Street Center for Regional Development and Management of Fuyang District,Hangzhou City,Hangzhou 311402,Zhejiang;2.Agriculture and Rural Bureau of Fuyang District,Hangzhou City,Hangzhou 311400,Zhejiang;3.Chunjiang Street Center for Regional Development and Management ofFuyang District,Hangzhou City,Hangzhou 311421,Zhejiang)㊀㊀Abstract :Based on the production practice of the base,this study carried out the application experiments of differentratios of biochar and peat soil,observed the growth of roots,cane leaves and plants of Tetrastigma hemsleyanum ,andevaluated the ecological improvement effect of biochar and peat soil,so as to provide technical support for the improvement of the quality of Tetrastigma hemsleyanum .Adding biochar to the substrate in the production of Tetrastigma hemsleyanumcan reduce the substrate bulk density,increase the total porosity of the substrate,promote root development,increasesubstrate pH value,and promote the development of leaves.Moreover,due to the increase in the ratio of bacteria and fungi in the rhizosphere of Tetrastigma hemsleyanum by adding biochar,the substrate micro-environment tends to be bacterial,which is more favorable for its growth.Keywords :substrate ratio;Tetrastigma hemsleyanum ;biochar;peat soil㊀㊀三叶青重点采收块根及藤茎叶,但生产上采用的基质配比经常造成根系不易成形结块,且藤茎叶及块根易发生病虫害等问题,影响产品品质[1]㊂因此,基于基地生产实践,试验开展生物质炭㊁泥炭土等不同配比基质应用,观察三叶青块根㊁藤茎叶品质及植株长势,对生物质炭㊁泥炭土等基质生态改良效果开展评价,为三叶青品质提升提供技术支撑㊂1㊀材料与方法1.1㊀试验材料㊀㊀试验选用杭州富阳石硃坞农业科技有限公司自主选育的三叶青株系石硃1号,具有较强抗病性㊂1.2㊀试验设计及方法基质理化性质测定包括容重㊁总孔隙度㊁pH 值㊁电导率(EC 值)㊂通过稀释平板法对基质中细菌㊁真菌㊁放线菌总数进行测定,细菌培养使用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,真菌培养使用改良马丁琼脂培养基,放线菌培养使用改良高氏一号培养基㊂本试验采用随机区组设计,试验以石硃1号扦插苗及脱毒无菌苗为植物材料,按照泥炭土㊁生物质炭(碳化玉米秸秆)㊁有机肥(羊粪)㊁无机肥(钙镁磷肥)等不同体积进行复混,设5个不同处理(表1),用基地常用基质做对照(CK)㊂试验用无纺布袋上口直径30cm㊁底部直径30cm㊁高30cm,每袋装填搅拌均匀基质15kg,基质面距离桶上沿约5cm㊂每个处理3次重复,每袋定植3株㊂于2022年5月上中旬完成种植,2022年6 7月开展土壤理化性质㊁病原微生物检测,2022年10月开展生物质炭㊁泥炭土等不同配比基质应用观察,明确三叶青植株(根系㊁藤茎叶)长势㊂1.3㊀数据处理㊀㊀用SPSS 进行数据处理与分析㊂表1㊀试验设计Table 1㊀Experimental design处理基地常用基质/%泥炭土/%无机肥/%生物质炭/%有机肥/%CK 1000000T106002020T205004010T30802000T40100000T5(脱毒)80202　结果与分析2.1㊀不同配比基质对土壤理化性质的影响㊀㊀CK 土壤容重最大,随着时间延长各处理容重无明显变化;随着时间延长各处理总孔隙度变化不明显㊂定植0d 时,CK 总孔隙度低于其他处理㊂随着时间延长,处理CK 的pH 值逐渐升高,其他处理pH 值逐渐降低㊂定植0d 时,处理T1㊁T2㊁T3㊁T4㊁T5的pH 值在7.72~8.51,处理T1㊁T2㊁T3㊁T4㊁T5的pH 值高于CK;定植后25d,处理T1㊁T2㊁T3的pH 值高于CK,处理T5㊁T4的pH 值低于CK;定植45d 时,处理T1㊁T2的pH 值高于CK (表2)㊂表2㊀不同配比基质的理化性质Table 2㊀Physicochemical properties of substrates with different ratios处理容重/(g㊃m-3)总孔隙度/%pH 值0d25d45d0d25d45d0d25d45dCK 1.00 1.00 1.000.390.380.377.327.417.56T10.360.360.360.520.540.598.268.077.83T20.280.280.260.600.650.688.518.237.96T30.550.560.540.450.460.487.927.427.33T40.630.620.620.400.390.397.727.347.29T5(脱毒)0.510.530.520.450.450.448.037.187.22㊀㊀不同配比基质EC 分析表明,定植0d 时,各处理EC 高于CK㊂随着时间延长,各处理EC 明显降低,定植后25㊁45d 时,各处理EC 仍高于CK (表3)㊂表3㊀不同配比基质的EC 值Table 3㊀Soil conductivity of substrates withdifferent ratios处理EC 值/(mS㊃cm-1)0d25d45dCK 0.650.460.33T1 2.390.650.53T2 2.590.770.61T3 3.170.550.43T41.010.470.36T5(脱毒)3.200.540.39㊀㊀不同配比基质对根际微生物量影响明显(图1)㊂处理T1~T5细菌数量差异显著,处理T1㊁T2㊁T5细菌数量明显高于CK㊁T3和T4;处理T3㊁T4真菌数量增加明显,处理T1㊁T2㊁T5与CK 差异不明显;T1㊁T2和T5细菌/真菌比显著高于其他配比处理和CK,但处理之间差异不明显;T5处理放线菌数量明显高于其他处理,T3㊁T4放线菌数量低于其他处理㊂2.2㊀不同配比基质对三叶青生长指标的影响㊀㊀2022年10月观察三叶青根系及植株长势,整理基质合理配方㊂每个基质配方组选取5株三叶青,以株为单位选取成熟叶片5组,测定每组左㊁中㊁右小叶的叶片长㊁宽㊂清洗根系周围基质后用滤纸吸干水分,测量记录根长及须根重㊂其中叶长1234㊀㊀2024年第65卷第5期㊀㊀柱上无相同小写字母表示组间差异显著(P <0.05)㊂图1㊀不同配比基质对三叶青根际微生物数量的影响Fig.1㊀Effects of substrates with different ratios on the number of rhizosphere microorganisms inTetrastigma hemsleyanum采用叶片基部至叶尖长度,叶宽采用叶片最大宽度,根长采用须根近根端至远端长度,根重采用总须根鲜重㊂不同基质配方各小叶叶片长㊁宽有差异,T1㊁T2㊁T3左小叶叶长明显高于CK,T1㊁T2㊁T3㊁T4㊁T5左小叶叶宽明显高于CK;T1㊁T2㊁T5中小叶叶长明显高于CK,T1㊁T2㊁T3㊁T4㊁T5中小叶叶宽明显高于CK;T1㊁T3右小叶叶长明显高于CK,T1㊁T2㊁T3㊁T4㊁T5右小叶叶宽明显高于CK (表4)㊂表4㊀不同配比基质对三叶青生长的影响Table 4㊀Effects of substrates with different ratioson the growth of Tetrastigma hemsleyanum处理左小叶/cm中小叶/cm右小叶/cm叶长叶宽叶长叶宽叶长叶宽CK 3.98 1.53 5.36 1.93 4.12 1.49T1 4.30 1.94 5.98 2.23 4.29 1.83T2 4.16 2.46 5.54 2.77 3.76 2.41T3 4.92 2.30 5.33 2.45 4.78 1.90T43.93 2.16 5.29 2.17 3.55 1.85T5(脱毒)3.592.595.523.253.401.85㊀㊀营养期T5茎粗显著大于其他处理,T3茎粗最小,与CK 差异不明显;施用肥料一定程度上能增加三叶青茎粗(表5)㊂T1处理根系总长最长,T2次之,T1㊁T2及T3明显高于CK,T5低于CK㊂T1㊁T2处理总根鲜重最重,T1㊁T2㊁T3和T4处理高于CK,T5低于CK,脱毒苗因对外部环境适应期长,根系发育比其他处理缓慢㊂表5㊀不同配比基质对三叶青根茎的影响Table 5㊀Effects of different substrates onrhizomes of Tetrastigma hemsleyanum处理茎粗/cm 总根长/cm 总根鲜重/g CK 0.21110.328 3.214T10.26112.264 4.132T20.27212.187 4.085T30.20111.491 3.573T40.27010.965 3.516T5(脱毒)0.3169.2523.018㊀㊀生产中一般以草木灰作为生物炭替代产品,本次试验同时设置大田加入草木灰观察组,亦按照基地常用基质㊁有机肥(羊粪㊁油茶饼)㊁草木灰等不同体积进行复混,设4个不同处理组合配比(表6),2021年11月完成种植,本次试验2022年10月同时对T6~T9单独测定茎长㊁叶片数㊁总重㊁分枝数㊂T8㊁T9处理的各指标明显高于T6㊁T7处理,说明加入草木灰能显著促进植株的发育,以加入50%比例草木灰植株长势旺盛㊁叶片多㊁鲜重大,同品种条件下成型结块更快㊂表6㊀草木灰对三叶青生长的影响Table6㊀Effects of plant ash on the growth of Tetrastigma hemsleyanum处理基地常用基质/%有机肥(羊粪)/%油茶饼/%草木灰/%茎长/cm叶片数总重/g分枝数T69505038.5332.7011.58 2.10 T79280041.0921.00 6.31 1.80 T8500050103.8341.6722.10 2.33 T9650035128.7337.0024.50 2.023　结论与讨论目前,三叶青生产多采用当地泥土等基质,加之栽培管理不规范,导致栽植三叶青质量和产量无法得到保证[2-3]㊂基质以T1㊁T2处理表现较佳,即三叶青袋栽生产中,采用泥炭土作为栽培基质主要成分,同时对比T1㊁T2基质成分,发现生物质炭的加入能起到降低基质容重㊁增加基质总孔隙度㊁促进根系发育㊁提高基质pH值㊁降低定植基质EC㊁促进三叶青叶片发育等作用,并由于生物质炭的加入提高了三叶青根际细菌/真菌比,使基质微生态环境偏向细菌型,对三叶青生长更为有利㊂生物质炭因由生物质热解产生,应用到土壤中能影响土壤生物和物理化学性质,起到调节土壤功能的作用;同时慢热解产生的生物质炭含有更多的脂肪族化合物,易分解碳和营养素,有利于农业土壤改良,诱导植物的系统抗性[4]㊂从本次试验可知基质中施加生物质炭能减轻土传病害,显著抑制灰霉病㊁白粉病和炭疽病等病害,促进植株健壮生长;但本次试验中加入20%~50%生物质炭或草木灰均能促进植株㊁根系的生长,具体生产应用最佳比例有待进一步试验核实㊂参考文献:[1]㊀梁君瑛,韩素芳,应尚蛟,等.三叶青遗传资源与栽培技术研究进展[J].浙江农业科学,2018,59(6):966-968.[2]㊀汪舍平,徐建春,张亮亮,等.不同栽培生境对三叶青生长及微量元素和总黄酮含量的影响[J].浙江农业科学,2017,58(12):2177-2178,2183.[3]㊀陈灏.杉木种子园下套种三叶青的块根产量分析[J].安徽农学通报,2017,23(16):107-108.[4]㊀吴志庄,高贵宾,欧建德,等.生物炭肥对毛竹林下三叶青叶绿素含量㊁光合与荧光特性的影响[J].西北林学院学报,2017,32(5):59-63,103.(责任编辑:王新芳)。

影响银杏叶黄酮含量的因子及其评价Ξ程水源 顾曼如　束怀瑞(湖北农学院,荆州434103) (山东农业大学园艺系,泰安271018) 摘　要　银杏叶黄酮含量受遗传因素、生理生化因素、发育进程、生态条件、栽培措施等5大因素的影响,对各因素的作用大小作了评价,并提出今后银杏叶黄酮含量调控研究的4点建议。

关键词　银杏叶黄酮;影响因子;作用评价;研究建议中图法分类号S664.301　银杏叶黄酮含量高,种类丰富,药效奇特,一直受到国内外学者的高度重视。

迄今已从银杏叶中分离出了38种黄酮化合物,其中黄酮及苷类28种,双黄酮6种,儿茶素4种[1]。

近几年来,银杏叶黄酮含量变化与其影响因子的研究报道剧增,笔者参照文献并结合自身的研究,对影响银杏叶黄酮含量的因子进行归纳分析,并对其作用大小予以评价。

1　影响银杏叶黄酮含量的因素影响银杏叶黄酮含量的因素有许多,有内部因素和外部因素。

笔者把它归纳成5类:(1)遗传因素:品种或品系或优良单株、植株性别;(2)生理生化因素:内源激素、酶、色素、光合作用及光合产物、黄酮合成的前体物质、叶片含水量及新鲜度等;(3)发育进程:季节或采叶期、树龄、枝龄、叶片成熟度、结果与否;(4)生态条件:指产地生态,包括土壤生态和气象生态,具体因子有光照、温度、水分、大气、土壤;(5)栽培因素:采收次数、整形修剪方式、肥料种类及施用、生长调节剂种类及施用、苗木繁殖方式、栽培方式、产叶量、苗木密度、叶质、生长势等。

2　各因素对银杏叶黄酮含量的具体影响各因素对银杏叶黄酮含量的具体影响目前基本上可以得出结论的有品种或品系、产地、季节或采叶期、树龄、枝龄、苗木繁殖方式。

陈学森等报道的44种参比品种或品系中,泰山4号银杏叶黄酮含量最高,为26.4mg/g ,尖底圆玲最低,为9.5mg/g [2]。

不同产地由于受人工栽培生态、气象生态、土壤生态等综合影响,其银杏叶黄酮含量也有较大差异,并在一定区域范围内,从南到北,叶黄酮含量有逐渐增加趋势,但生态型的影响主要发生在银杏幼龄期[3～4]。

基金项目浙江省新苗人才计划项目(ZJPCKJCX201006);浙江医药高等专科学校校级科研项目(ZPCSR2010003)。

作者简介吴浩(1985-),女,浙江瑞安人,助理实验师。

研究方向:生物技术。

*通讯作者收稿日期2011-09-21三叶青(Tetrastigma hemsleyanum )又名金钱吊葫芦,是葡萄科多年生蔓生藤本植物,以块根或全草入药,是我国独有的珍贵物种。

其主要活性成分黄酮可用于治疗高热、扁桃体炎、肝炎、风湿性关节炎及病毒性脑膜炎等多种疾病,也是抗肿瘤常用药物[1-2]。

三叶青对生长环境的要求非常苛刻,近年来,随着自然环境恶化以及人们无序的采挖,致使野生三叶青资源已濒临灭绝。

目前,对三叶青的研究主要集中在其药理作用上,而关于三叶青的组织培养研究尚少见报道[3-4],且都是以带腋芽的茎段为外植体,繁殖系数较低。

另外,培养基的组分都是以单因素水平来设计的,无法准确了解多因素的相互作用。

本研究以不带腋芽的茎段为外植体,选择不同的培养基和激素配比进行正交试验,以筛选出愈伤组织诱导和芽分化的较佳培养基,从而为三叶青的快速繁殖提供新途径。

1材料与方法1.1试验材料试验材料采自浙江省丽水市,经安徽师范大学生命科学学院周守标教授鉴定为三叶青,外植体取不带腋芽的幼嫩茎段。

1.2试验设计愈伤组织诱导采用正交试验设计,设3个因素,每个因素3个水平,共9个处理,即培养基(White 、B5、MS )、6-BA (1、2、4mg/L )、IBA (0、0.2、0.5mg/L )。

愈伤组织分化试验也采用正交试验设计,设3个因素,每个因素3个水平。

共9个处理,即培养基(White 、B5、MS )、6-BA (2、3、4mg/L )、NAA (0.5、1.0、2.0mg/L )。

1.3试验方法取新鲜采集的幼嫩茎段,用自来水冲洗2h ,然后在无菌超净台上用8%NaClO 消毒5min 后,无菌去离子水清洗6次,再用0.1%HgCl 2消毒5min ,取出,用无菌去离子水清洗8次,用无菌吸水纸吸干水分,剪成1.5~2.0cm 2小块,接种到各愈伤组织诱导培养基上。

福建不同产地三叶青叶中总黄酮含量比较范世明;陈琳;林婧;于虹敏;黄学城;许文;陈丹;黄泽豪【期刊名称】《福建中医药》【年(卷),期】2015(046)003【摘要】目的比较福建省不同产地三叶青叶中总黄酮的含量. 方法用紫外可见分光光度法,以芦丁为对照品,在波长500 nm处测定三叶青样品中的总黄酮含量. 结果芦丁在16.08～144.72 μg/mL有良好的线性关系,平均加样回收率为99.57％,不同产地的三叶青中总黄酮存在差异. 结论紫外可见分光光度法可简便、准确、快速地测定三叶青叶中总黄酮含量,福建永泰、大田、闽侯、仙游、漳平的三叶青叶总黄酮含量较高.【总页数】3页(P38-40)【作者】范世明;陈琳;林婧;于虹敏;黄学城;许文;陈丹;黄泽豪【作者单位】福建中医药大学药学院,福建福州350122;福建中医药大学药学院,福建福州350122;福建中医药大学中西医结合研究院,福建福州350122;福建中医药大学药学院,福建福州350122;福建中医药大学药学院,福建福州350122;福建中医药大学药学院,福建福州350122;福建中医药大学生物医药研发中心,福建福州350122;福建中医药大学药学院,福建福州350122;福建中医药大学药学院,福建福州350122【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.不同产地不同品种柚皮中总黄酮和柚皮苷的含量比较 [J], 庞瑞;杨中林2.广西不同产地三叶青中总黄酮含量分析 [J], 黎颖菁;付金娥;韦树根;潘丽梅;3.广西不同产地三叶青中总黄酮含量分析 [J], 黎颖菁;付金娥;韦树根;潘丽梅4.不同生长环境三叶青中总黄酮提取工艺及含量比较 [J], 李春华;王诚远;何倌发;陈俊5.不同产地三叶青总黄酮及多糖含量的测定 [J], 阮明颖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。