骨髓单个核细胞移植脑梗塞大鼠的行为学评价及对乙酰胆碱水平的影响
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热带医学杂志2014年9月第14卷第9期J Trop Med.Sep.2014.Vo1.14.No.9 ・临床研究论著・ 骨髓单个核细胞移植脑梗塞大鼠的行为学评价及 对乙酰胆碱水平的影响 张贯石 ,潘晓华。,何欣’,王辉 ,贾芙蓉 (1.吉林大学白求恩医学部基础医学院,吉林长春130021;2.吉林大学第一医院,吉林长春130021; 3.解放军第二。八医院检验科,吉林长春130062) 摘要:目的观察人骨髓单个核细胞(BMMC)移植对脑梗塞大鼠的影响。方法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO) 模型,将骨髓单个核细胞静脉注射脑梗塞大鼠体内进行治疗。用平横木行走实验评价大鼠运动功能;用TYC染色法 观察脑梗塞区坏死比例;采用化学显色反应法测定各组大鼠脑组织和血浆中乙酰胆碱(Ach)浓度和乙酰胆碱酯酶 (TChE)活性。结果与模型组比较,给予骨髓单个核细胞组大鼠行为学评分明显变高(P<O.05),大脑坏死面积明 显减少(P<O.O1),脑组织和血浆中的Ach水平和TChE活性显著增高和增强(P<0.05)。结论静脉注射骨髓单个 核细胞可促进脑梗塞大鼠中枢神经系统功能恢复及胆碱能系统恢复。 关键词:骨髓单个核细胞:脑梗塞;乙酰胆碱;乙酰胆碱酯酶 中图分类号:R743 文献标识码:A 文章编号:1672.3619(2014)09.1 156.03 Ethologic estimate and effects of AchE activity on middle cerebral artery occlusion rats after administratiOIlS with bone marrow—derived mononuclear cells ZHANG Guan.shi ,PAN Xiao.hua ,HE Xin ,WANG Hui ,JIA Fu-rong ̄ (J.College ofBasic Medical Science,Norman Bothume Health Science Center ofJilin Univesity,Jilin,Changchun 130021;2.The First Hospital ofJilin University,Jilin,Changchun 130021;3.The 208 Hospital ofPLA, in,Changchun 130062,China) Abstract:Objective To observe the effects on middle cerebral a ̄ery occlusion(MCAO)rats after administration with human bone marrow-derived mononuclear ceils(BMMC).Methods Preparing MCAO rats,administrating MCAO rats with BMMC.Rat motor function was measured by using Beam walking Test(BWT).Cerebral infarction area was detected with Trc staining.With chemical colour detection,true choline esterase(TChE)activity and Acetylcholine(Ach)level in brain tissue and blood were measured.Results Comparing to MCAO group,behavioral scoring of BMMC treating group is significant higher(P<0.05),and with less area of cerebral necrosis(P<0.叭).TChE activity and Aeh level in brain tissue and blood plasma in BMMC treating group become higher than those in MCAO group(P<0.05).Conclusion Intravenous administration of BMMC recovers both centre neurological function and cholinergic n in MCAO rats Key words:bone marrow—derived mononuclear cells;brain infarction;Acetylcholine;true choline esterase 脑梗塞导致的大脑局部缺血、缺氧可引起脑组 织坏死,出现中枢神经功能障碍,最终导致行为学 改变等一系列变化。乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)是 胆碱能神经元系统的神经递质,与中枢神经功能密 切相关E1],由乙酰胆碱酯酶(true choline esterase, 基金项目:吉林省科技厅项目基金(201105036) 作者简介:张贯石(1956一),男,主管技师,主要从事病理组织切 片、细胞形态学研究 通讯作者:贾芙蓉(1971一),女,副主任技师,在读博士,主要从事骨 髓细胞形态学和干细胞机理研究,E—mail:jiafurong234@ sina.corn TChE)分解。TChE存在于黑质多巴胺能神经元的 树突或胞体,亦可分泌到细胞外液。通过测定TChE 活性和Ach水平可反映损伤后脑内胆碱能系统的恢 复情况。本研究将人骨髓单个核细胞(bone marrow— derived mononuclear cells,BMMC)经尾静脉注人脑 梗塞大鼠体内,观察大鼠行为学、脑TI'C染色及胆 碱能的变化。 1材料与方法 1.1 主要试剂与仪器 骨髓、脐带血细胞处理试 剂盒购自宁夏中联达生物有限公司;2,3,5一氯化三苯 基四氮唑(2,3,5一triphenyltetrazolium chloride,Trc)
热带医学杂志2014年9月第14卷第9期JTrop Med,Sep.2014,Vo1.14,No.9 ・1179・ 裂症患者所组成的随机双盲安慰剂对照研究中发 现,与在原来抗精神病药物治疗的基础上加上安慰 剂进行治疗的对照组相比.加上雌激素0.625 mg/d 维持治疗4周的实验组PANSS量表的4项评分 (阳性量表评分、阴性量表评分、一般精神病理性量 表评分及总评分)都显著降低(P<0.01),雌激素的 辅助治疗有效的改善了女性慢性精神分裂症患者的 精神症状。这可能和雌激素与DA、5一HT及GABA等 神经递质系统都存在交互作用有关[,, ;另外低睾酮 水平的男性认知功能较差且伴随有抑郁症状,在补 充睾酮后这些症状都有所改善[-,m],因此,睾酮被 认为对男性认知功能起着保护作用。因此针对精神 疾病患者在抗精神病药物治疗后引发高催乳素血 症的患者,除了降低药物剂量、换用致HPRL风险 较低的药物、中药治疗、低频重复经颅磁刺激等常 规措施之外。增加性激素联合治疗也是一种提高疗 效的选择。 利培酮治疗组男性患者睾酮水平和女性患者 的雌二醇水平在治疗后明显降低,推测可能与高水 平的催乳素抑制了下丘脑促性腺激素的合成和释 放,从而减少睾酮和雌二醇等性激素的合成;而奥 氮平组和氯氮平治疗组的男性、女性患者在治疗前 后睾酮和雌二醇的变化不明显,除了前面提及的它 们对丘脑垂体一漏斗通路D2受体的阻断作用较弱 外,还可能与其在体内的代谢方式与速度有关。另 外,本研究结果还显示,女性患者奥氮平治疗组和 利培酮治疗组的孕酮水平治疗后比治疗前低.但差 异无统计学意义(P>O.05),这可能与研究例数较少、 服药监测时间较短有关,以后的研究中将继续关 注。总之,非典型抗精神病药物所致精神病患者的 性激素紊乱是精神病患者治疗中常见的副反应.可 不同程度地影响患者的服药依从性以及治疗的效 果,因此及时监测患者的性激素指标以指导临床医 生适时调整治疗方案很有必要。 参考文献 [1]Iju—Seifert H,Kinon BJ,Tennant CJ,et a1.Sexual dysfunction i’n patients with schizophrenia treated with conventional antipsychotics or fispefidone[J].Neuropsychiatr Dis Treat, 2009,5:47-54. [2] Kelly DL,Wehring HJ,Earl AK,et a1.Treating symptomatic hyperprolaetinemia in women with schizophrenia:presentation of the ongoing DAAMSEL clinical trial(Dopamine partial Agonist, Aripiprazole,for the Management of Symptomatic ELevated prolactin)[J].BMC Psychiatry,2013,13(1):1-14. [3] Melkersson K.Diferences in prolactin elevation and related symptoms of atypical antipsychoties in schizophrenic patients [J].J Clin Psychiatry,2005,66(6):761-767. [4] Inder WJ,Castle D.Antipsychotic—induced hyperprolactinaemia [J].Aust N z J Psychiatry,2011,45(10):830-837. [5] Fukuta H,Ito I,Tateno A,et a1.Effects of menopause on brain structural changes in schizophrenia[J].Psychiatry Clin Neurosci, 2013,67(1):3—11. [6] Ghafari E,Fararouie M,Shirazi HG,et a1.Combination of Estrogen and Antipsychotics in the Treatment of Women with Chronic Schizophrenia[J].Clin Schizophr Relat Psychoses,2013,6 (4):172-176. [7]Hayes E,Gavrilidis E,Kulkarni J.The role of oestrogen and other hormones in the pathophysiology and treatment of schizophrenia[J].Schizophr Res Treatment,2012,2012:540273. [8] Kulkami J,de Castella A,Headey B,et a1.Estrogens and men with schizophrenia:is there a ease for adjunctive therapy[J]. Schizophr Res,2011,125(2-3):278-283. [9]Taylor GT,Maloney S,Dearborn J,et a1.Hormones in the mentally disturbed brain:steroids and peptides in the development and treatment of psychopathology[J].Cent Nerv Syst Agents Med Chem,2009,9(4):331-360. [10]Moore L,Kyaw M,Vercammen A,et a1.Serum testosterone levels are related to cognitive function in men with schizophrenia[J]. Psyehoneuroendocrinology,2013,38(9):1717—1728. 收稿日期:2014—02—13 (上接第1158页) 1319一l322. [7] Zhang Y,Wang W.Effects of bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on light—damaged retina[J ̄.Invest Ophthalmol Vis Sei,2010,51(7):3742—3748. [8] Sadan O,Shemesh N,Barzilay R,et a1.Mesenchymal stem cells induced to secrete neurotrophic factors attenuate quinolinic acid toxicity:a potential therapy for Huntington’s disease[J].Exp Neurol,2012,234(2):417—427. [9] Johnson TV,Bull ND,Hunt DP,et a1.Neuroprotective effects of intravitreal mesenchyma! stem cell transplantation in experimental aucoma[J].Invest Ophthalmol Vis Sci,2010,51 (4):2051—2059. [10]Croft AP,Przyborski SA.Mesenchymal stem cells expressing neural antigens instruct a neurogenic cell fate on neural stem cells[J].Exp Neurol,2009,216(2):329—341. [11]Li Y,Chen J,Chen XG,et a1.Human marrow stromal cell therapy for stroke in rat:Neurotrophins and functional recovery [J].Neurology,2002,59(4):514-523,