pET22b(+)
DO-stat 甘油流加 培养温度37 oC
13
8
37 a,b, ex
2.8
原核表达体系
• 酶活水平高 • 工艺流程简单 • 发酵周期短
pET28a(+)
摇瓶发酵 诱导温度20 oC
60
N.S.
360 b,in
6.0
pHsh
分批发酵 温度诱导型菌株
25
20
22 ex
0.9
(Zhuge et al., 2007)
继续增加甘油含量对菌体生长和PGL合成影响不明显 . 但以葡萄糖为碳源时工程菌产酶不稳定 .
2. 影响重组大肠杆菌胞外生产PGL的关键因素
2.3 金属离子对重组大肠杆菌生长与PGL合成的影响
Metal ions Adding Concentration Mode(OD600) (mM) Extracelullar PGL(U ml-1) Intracelullar PGL(U ml-1) Biomass (OD600)
7.9 10.4 13.7 28.7
Specific productivity (U gcell-1)
1.6 1.7 1.8 2.5
Secretion capability (%)
37.9 32.6 42.6 54.8
SB
12.1
25.9
2.1
53.9
采用在TB培养基作为发酵培养基,胞外PGL酶活到达28.75 U ml-1,分别是LB培养 基的3.6倍和SB培养基的1.1倍.TB培养基和SB培养基中,比生产率(胞外酶活/DCW) 和分泌率(胞外酶活/总酶活)基本相当,LB、2×YT和SOC培养基稍低 .