三、蛋白质工程在食品工业中的应用
天然酶制剂 优点: 高效、特异的催化活力 缺点: 1. 分子质量很大,仅有一个活性中心,催化效率低; 2. 对环境因素如温度、pH和重金属离子等比较敏感
分子修饰考虑的问题: ①改变亚基间静电相互作用强度; ②改变邻近残基间氢键数目; ③替换易被氧化和化学修饰的残基; ④减少蛋白质从伸展到折叠过程的自由能等。 改变酶的特性: ①提高稳定性 包括热稳定性、抗蛋白酶稳定性、抗氧化稳 定性和有机溶剂稳定性等。 ②提高酶活力 酶活力中心及调控部位少数几个关键氨基酸 残基在空间排列 ③改变酶的选择性 改变电荷分布,亲/疏水性及立体结构
五、交错延伸
交错延伸(stagger extension process, StEP)的原理: 在PCR反应中把常规的退火和延伸合并为一步, 并大大缩短 其反应时间(55℃, 5 s), 从而只能合成出非常短的新生 链, 经变性的新生链再作为引物与体系内同时存在的不同 模板退火而继续延伸。此过程反复进行, 直到产生完整的 基因长度, 结果产生间隔的含不同模板序列的新生DNA分 子。
DNA体外进化的过程主要包括: ①通过随量筛选检出由一个氨基酸置换而引起的预期性状改善, 精确选取阳性结果,供进一步进化
④此过程的不断循环直至获得预期性状的新型蛋白质。
定向进化的基本策略与自然进化两个关键的步骤都是 产生分子多样性和定向筛选,而且方法都是随机诱变和 体外重组。
顺序。 主要的化学键 肽键,有些蛋白质还包括二硫键。
一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学 功能的基础。
蛋白质的二级结构
定义
蛋白质分子中某一段肽链的局部空间
结构,即该段肽链主链骨架原子的相对空
间位置,并不涉及氨基酸残基侧链的构象 。