硒多糖HPLC液相谱图(蔗糖测定)

分析检测HPLC-RID法测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖含量赵　芳（晋中市综合检验检测中心，山西晋中 030600）摘　要：建立了高效液相色谱-示差折光检测法（High Performance Liquid Chromatography Differential Refractive Detector，HPLC-RID）测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖5种还原糖含量的分析方法。

蜂蜜试样用水提取，摇匀过滤后，经Kromasil 100-5-NH2色谱柱分离，用示差折光检测器测定。

结果表明，果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖在1.0～10.0 mg/mL线性关系良好，5种还原糖的方法检出限均为0.5 g/100 g，加标回收率为82.4%～109.7%，相对标准偏差RSD为0.87%～3.77%。

该方法前处理过程简单、准确度高、精密度好，适用于蜂蜜中5种还原糖的定量检测。

关键词：蜂蜜；还原糖；高效液相色谱-示差折光检测器法Determination of Fructose, Glucose, Sucrose, Maltose andLactosein Honey by HPLC-RIDZHAO Fang(Jinzhong General Inspection and Testing Centre, Jinzhong 030600, China) Abstract: The method was established for the determination of fructose, glucose, sucrose, maltose and lactose in honey by HPLC-RID. Honey samples were extracted with water, shaken and filtered, separated by Kromasil 100-5-NH2 chromatographic column and determined by differential refractive detector. The results showed that the linear relationship among fructose, glucose, sucrose, maltose and lactose was good in the concentration range of 1.0～10.0 mg/mL. The detection limits of the five reducing sugars were 0.5 g/100 g, the spiked recoveries were 82.4%～109.7%, and the relative standard deviation RSD was 0.87%～3.77%. The method has the advantages of simple pretreatment process, high accuracy and good precision. It is suitable for the quantitative determination of the above five reducing sugars in honey.Keywords: honey; reducing sugar; high performance liquid chromatography differential refractive detector蜂蜜中富含多种糖类、氨基酸、维生素等营养成分，清甜爽口、老少皆宜，饮用蜂蜜具有缓解疲劳、有益身体健康和抗菌消炎、保养皮肤的功效[1-3]。

柱前衍生化高效液相色谱法分析多糖中的单糖组成马定远　陈　君　李　萍3胡卓逸(中国药科大学生药药用植物教研室,南京210038)(中国药科大学生化研究室,南京210009)摘　要　报道了多糖中单糖组成的柱前衍生化高效液相色谱测定方法。

采用反向高效液相色谱250nm 紫外检测和使用梯度洗脱,6种还原单糖的12苯基232甲基252吡唑啉酮衍生实现了良好的分离并具有良好的峰形。

对单糖组成的定量测定进行了方法学考察,建立了单糖组成分析的数据分析方法,并用所建立方法对一个多糖中的单糖组成进行了分析,获得良好的重复性。

关键词　单糖,多糖,衍生化,高效液相色谱　2001207204收稿;2002201209接受1　引 言单糖的组成分析是糖分析中的一项重要内容。

已有的糖组成分析方法以气相色谱法和高效液相色谱法为主。

由于单糖分子的多样性,关于糖的分析方法仍在不断发展。

12苯基232甲基252吡唑啉酮(PMP )衍生化方法自运用以来,得到不断完善1～3。

Strydom 运用此法对中性、酸性和碱性醛糖进行了分析,可以使15种单糖得到很好的分离2。

本文首先建立了6种常见单糖(包括一种酸性糖)的分离模式,通过内标法对3种中性单糖的定量进行了方法学考察,并应用所建立的方法对多糖中的单糖进行了组成分析,为此法的更好运用提供了依据。

2　实验部分2.1　仪器与试剂HP1100型高效液相色谱系统,包括G 1312A 二元泵,G 1315A DAD 检测器,HP ChemStation 色谱工作站(Hewlett 2Packard )。

衍生化试剂12苯基232甲基252吡唑啉酮(PMP ,上海化学试剂采购供应站试剂厂),甲醇重结晶两次。

色谱用乙睛(T edia )、三氟乙酸(CP 级,上海化学试剂公司)。

单糖对照品:葡萄糖(G lc ,上海化学试剂公司)、甘露糖(Man ,Sigma 公司)、半乳糖(G al ,Sigma 公司)、鼠李糖(Rham 公司)、葡萄糖醛酸(G lcUA )和木糖(Xyl )(上海化学试剂二厂产品)。

HPLC-ELSD法测定微胶囊中阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖含量陈梦1，张晓芳1，*，韩艳超1，栗星2，程远欣2（1.晨光生物科技集团股份有限公司，邯郸 057250；2.河北省植物天然色素技术研究院，邯郸 057250）摘要：建立高效液相色谱-蒸发光散射法（High performance liquid chromatography with evaporative light-scattering detection，HPLC-ELSD）同时测定微胶囊中阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖含量的高效液相色谱方法。

样品经乙腈水超声波浸取，采用Waters Amide色谱柱（4.6×250mm3.5μm）分离，以1%氨水和乙腈为流动相，使用蒸发光散射检测器进行检测。

结果表明，阿拉伯糖：0.44～7.06mg/mL、果糖：0.30～4.74mg/mL、葡萄糖：0.40～6.45mg/mL、蔗糖：0.32～5.04mg/mL、麦芽糖：0.40～6.47mg/mL 及乳糖：0.41～6.61mg/mL范围内线性关系良好；方法检出限为0.02～0.03mg/mL；回收率为95.31%～ 105.33%，6种糖含量相对标准偏差在2.30%～3.50%之间。

该方法前处理简单、灵敏度高和检测速度快，适用于微胶囊中阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的定量检测。

关键词：高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）；微胶囊；阿拉伯糖；果糖；葡萄糖；蔗糖；麦芽糖；乳糖中图分类号：TS202.3/O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2020）05-0095-06doi：10.19804/j.issn1006-2513.2020.05.017Determination of arabinose，fructose，glucose，sucrose，maltose and lactose in microcapsules by HPLC-ELSD CHEN Meng1，ZHANG Xiao-fang1，*，HAN Yan-chao1，LI Xing2，CHENG Yuan-xin2（1. Chenguang Biotech Group Co.，Ltd.，Handan 057250；2. Hebei Province Natural Pigment Industry Technology Research Institute，Handan 057250）Abstract：A high performance liquid chromatography with evaporative light-scattering detection （HPLC-ELSD）was developed for simultaneous detecting of 6 sugars including arabinose，fructose，glucose，sucrose，maltose，lactose in microcapsules. The samples were hydrolyzed by acetonitrile water leaching，separated by a Waters Amide column （4.6×250 mm 3.5 μm），with 1% ammonia and acetonitrile as mobile phase，and evaporative light scattering detector. The results showed that the linear ranges were：arabinose 0.44～7.06mg/mL fructose 0.30～4.74 mg/mL，收稿日期：2019-12-17作者简介：陈梦（1991-），女，硕士。

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法分析生物样品中硒的化学形态喻宏伟 陈春英# 高愈希 李柏 柴之芳（中国科学院高能物理研究所和中国科学院核分析技术重点实验室，北京100049）摘 要 建立了用于生物样品中含硒化合物在线分离分析的联用方法。

用反相离子对高效液相色谱（RP-IP-HPLC ）分离含硒化合物，用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS ）在线分析硒含量。

与标准化合物的色谱图和工作曲线对照进行定性和定量分析，实现了对硒酸钠、亚硒酸钠、硒代胱氨酸、硒代胱胺、硒代蛋氨酸、硒代尿素和三甲基硒离子等7种生物体常见的含硒小分子的分析，检出限为0.1～1.5µg /L ；线性范围为1～100µg /L ，应用于人血清、尿、肝组织细胞质溶胶等样品中含硒小分子的形态分析，所需进样量仅50µL ，各含硒化合物加标回收率在93%～117%。

本方法操作简便，灵敏度高，重现性好，适合于各种生物样品中含硒小分子的形态分析。

关键词 反相离子对高效液相色谱，电感耦合等离子体质谱，联用技术，生物样品，形态分析，硒 2005-09-28收稿；2006-01-07接受本文系国家自然科学重大项目（No.10490181）和国际原子能机构CRP 项目（No.13246/RO ）资助1 引 言硒是一种重要的人体必需微量元素，它参与组成体内许多重要抗氧化酶的活性中心，近年来研究表明，其具有抗癌功能［1～4］。

硒的生物功能与其化学形态和含量密切相关［5］，因此要全面研究硒的生物学意义，形态分析（确定样品中元素的一种或多种化学形态的定性和定量分析）十分必要。

硒在生物和环境样品中含量极低，所以对分析的灵敏度和精确度的要求很高［6］。

国外已有数篇文章综述了硒形态分析的相关方法［7，8］，联用技术被认为是进行化学形态分析（chemical speciation ）的有效手段，其中高效液相色谱（HPLC ）与电感耦合等离子质谱（ICP-MS ）联用作为一种高灵敏的元素形态分析方法得到广泛的应用［9～12］。

HPLC-ELSD测定当归中蔗糖的含量陈江弢;李海舟;王东;杨崇仁;刘云【摘要】目的:建立一种高效快速的高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定中药当归中蔗糖含量的方法.方法:采用Shodex NH2P-50 4E(4.6×250mm, 5μm)色谱柱,以乙腈-水(78:22)为流动相,流速:1.2mL·min-1,柱温:60℃,漂移管温度:90℃,气体流量:2.1SLPM.结果:蔗糖在40.32～403.2μg线性关系良好.结论:该法可以用于传统中药当归药材中蔗糖含量的检测.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2008(010)003【总页数】2页(P19-20)【关键词】当归;HPLC-ELSD;蔗糖【作者】陈江弢;李海舟;王东;杨崇仁;刘云【作者单位】中国药科大学天然药物化学教研室,江苏,南京,210039;中国科学院昆明植物研究所,云南,昆明,650204;中国科学院昆明植物研究所,云南,昆明,650204;中国科学院昆明植物研究所,云南,昆明,650204;北京万赛生物医药技术发展有限公司,北京,100097【正文语种】中文【中图分类】R2当归Radix angelica sinensis是我国著名的传统中药材，使用历史悠久。

当归自古以来为妇科要药，是常用的中药材。

当归的化学成分很复杂，主要含有脂溶性成分，如挥发油，另含有水溶性成分，包括酸类、糖类、氨基酸和阿魏酸等。

当归含有多种糖类，其中蔗糖含量很高［1］。

本文通过HPLC-ELSD法，检测了当归药材中的蔗糖含量，为当归药材的开发和利用提供了依据。

WATERSAlliance色谱仪器，2695型四元梯度泵，自动进样，Alltech 500型蒸发光散射（ELSD）检测器。

甲醇、乙腈均为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。

蔗糖购自Sigma公司（美国），纯度＞98%；药材采集自产地，并经中国科学院昆明植物研究所杨崇仁教授鉴定为当归Angelica sinensis（Oliv.）Diels的干燥根。

高效凝胶渗透色谱法测定多糖纯度及分子量一、本文概述多糖作为一种重要的生物大分子，广泛存在于自然界中，具有多种生物活性，如免疫调节、抗病毒、抗肿瘤等。

因此，对多糖的纯度及分子量的准确测定对于其研究和应用具有重要意义。

高效凝胶渗透色谱法（High Performance Gel Permeation Chromatography，HPGPC）是一种常用的多糖纯度及分子量测定方法，具有操作简便、分辨率高、重现性好等优点。

本文旨在介绍HPGPC法测定多糖纯度及分子量的原理、实验步骤、数据处理及注意事项，以期为多糖的研究和应用提供参考。

二、实验材料与方法1 多糖样品：选择待测定的多糖样品，确保其来源清晰，无杂质污染。

2 高效凝胶渗透色谱（HPGPC）柱：选择适当型号的HPGPC柱，以适用于待测多糖样品的分子量范围。

3 流动相：通常选用适当的溶剂或缓冲液作为流动相，以保证多糖样品在色谱柱上的良好分离。

4 检测器：使用示差折光检测器（RI）或紫外检测器（UV）等，以监测多糖样品在色谱柱上的分离情况。

5 其他试剂与仪器：包括样品制备所需的试剂、色谱仪、注射器、进样针等。

1 样品制备：将多糖样品溶解在适当的溶剂中，制备成一定浓度的溶液，以便进行后续分析。

2 色谱条件优化：通过预实验，优化色谱条件，包括流动相的选择、流速、柱温等，以获得最佳的分离效果。

3 进样与分离：将制备好的多糖样品溶液通过注射器注入HPGPC 仪中，通过色谱柱进行分离。

在分离过程中，利用检测器监测多糖样品的分离情况。

4 数据收集与处理：收集分离过程中的数据，利用相应软件对数据进行处理和分析，包括分子量计算、纯度分析等。

5 结果评价：根据分析结果，评价多糖样品的纯度及分子量分布情况，为后续研究提供依据。

通过以上实验材料与方法，可以高效地进行多糖纯度及分子量的测定，为后续多糖的结构研究、质量控制等提供重要支持。

三、实验结果与讨论在本研究中，我们采用了高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）对多糖样品的纯度和分子量进行了测定。

高效液相色谱蒸发光散射检测器测定保健食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖和木糖尚姝;冯有龙【摘要】目的：建立高效液相色谱-蒸发光散射法同时测定保健食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、木糖的方法。

方法采用Sepax HP-Amino(300mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(70∶30),流速为1.0 mL·min-1,柱温为35℃；使用蒸发光散射检测器检测,漂移管的温度105℃,载气流速2.2 mL·min-1。

结果果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖和木糖进样量分别在1.0328~10.328μg(r=0.9989),1.5085~15.085μg(r=0.9997),1.0199~10.199μg(r=0.9998),1.5094~30.187μg(r=0.9995),2.9992~59.984μg (r=0.9996),5.05~50.5μg (r=0.9996)范围内与峰面积的对数呈现良好的线性关系；平均回收率(n=6)分别为96%,105%,103%,95%,98%和99%；重复性实验,6种糖含量的 RSD(n=6)分别为2.95%,2.52%,1.75%,1.62%,2.23%和1.85%。

结论该方法操作简单、快速、准确,适用于多种保健食品中糖的分析。

%Obj ective A method for the simultaneous determination of 6 sugars such as fructose,glucose,sucrose,maltose,lactose and xylose in functional foods was described by using high performance liquid chromatography with evaporative light scattering de-tection(ELSD).Methods Sepax HP-Amino column (300 mm×4.6mm,5μm)was adopted,the mobile phase was composed of acetonitrile-water(70∶30)at a flow rate of 1.0 mL·min-1 ,and the column temperature was set at 35 ℃;The conditions of ELSD were as follows:the temperature of the drifting tube 105 ℃,the flow rate of nebulizer gas 2.2 mL·min-1 .ResultsThe logarithm of samples size of fructose,glucose,sucrose,maltose,lactose and xylose had good linearity with the logarithm of peak ar-ea in the ranges of 1.032 8-10.328μg(r=0.998 9),1.508 5-15.085μg (r=0.999 7),1.019 9-10.199μg(r=0.999 8),1.509 4-30.187μg (r=0.999 5),2.999 2-59.984μg(r=0.999 6),and 5.05-50.5μg (r=0.999 6),respectively;The average recoveries were 96%,105%,103%,95%,98% and 99%,respectively;Repeatability experiments showed that RSD values of their contents were2.95%,2.52%,1.75%,1.62%,2.23% and 1.85%,respectively.Conclusion This method was simple,fast,and accurate for the analysis offructose,glucose,sucrose,maltose,lactose and xylose in functional foods.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】5页(P27-31)【关键词】高效液相色谱法;蒸发光散射;保健食品;果糖;葡萄糖;蔗糖;麦芽糖;乳糖;木糖【作者】尚姝;冯有龙【作者单位】江苏省食品药品检验所，南京 210008;江苏省食品药品检验所，南京 210008【正文语种】中文【中图分类】R927.2糖是植物和动物的主要能源物质，也是生命过程中必需的营养素［1］，在生命过程中提供能量、增强人体的免疫功能、控制和调节细胞的分裂和生长［2］。

HPLC-RID法测定生脉饮(党参方)中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖张璐;张土金【期刊名称】《药品评价》【年(卷),期】2022(19)19【摘要】目的:建立生脉饮(党参方)中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的高效液相色谱-示差折光(HPLC-RID)检测方法。

方法:供试品以水为提取溶剂,采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(70∶30);柱温为45℃;流速为1.0 mL/min;示差折光检测器温度为40℃,并对收集的14批次样品进行检测。

结果:果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的线性范围分别为0.049~2.452mg/mL(r=0.9993),0.090~4.503 mg/mL(r=0.9995),0.041~2.042mg/mL(r=0.9997),0.070~3.524 mg/mL(r=0.9994);回收率(n=9)分别为98.21%、98.91%、95.82%、96.47%,RSD分别为1.1%、0.3%、2.3%、1.8%。

结论:该方法准确性高、专属性强,可真实反映生脉饮(党参方)中蔗糖的实际投料情况。

【总页数】5页(P1161-1165)【作者】张璐;张土金【作者单位】南昌市检验检测中心;上高县妇幼保健院【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.HPLC-CAD法测定浓维磷糖浆中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖含量2.HPLC-RID 法测定苹果中果糖山梨醇葡萄糖和蔗糖3.HPLC-RID法测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖含量4.高效液相色谱法测定莲子酶解液中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖含量5.HPLC-RID法测定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的方法学验证因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HPLC-RID测定甘蔗茎节蔗糖、葡萄糖和果糖含量林月绪;张华;陈如凯【摘要】研究高效液相色谱示差折光检测法(HPLC-RID)测定甘蔗茎节3种主要糖分蔗糖、葡萄糖和果糖的含量,摒弃有毒流动相乙腈,建立一种无毒、快捷、准确的检测方法.该法通过乙醇浸提,采用Waters SugarPak Ⅰ色谱柱(6.5 mm ×300 mm,10μm),流动相为超纯水,流速0.4 mL·min-1,柱温90℃,检测器温度35℃.检测方法线性关系好、灵敏度高,RSD为2.77％-4.5％(n=5),方法重复性良好;加标回收率高,达95.4％-101.8％;能满足甘蔗及相似作物中3种糖的准确分析.【期刊名称】《福建农林大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(044)003【总页数】4页(P232-235)【关键词】HPLC-RID;甘蔗茎节;蔗糖;葡萄糖;果糖【作者】林月绪;张华;陈如凯【作者单位】福建农林大学生命科学学院;福建农林大学国家甘蔗产业技术研发中心,福建福州350002;福建农林大学国家甘蔗产业技术研发中心,福建福州350002【正文语种】中文【中图分类】O657.7甘蔗是我国最重要的糖料作物之一，甘蔗茎节含有蔗糖、葡萄糖、果糖等糖类，甘蔗糖类检测对甘蔗品质鉴定、品种开发和种植有重要意义［1，2］.目前，蔗糖、葡萄糖、果糖的检测方法有气相色谱法［3，4］、离子色谱法［5，6］及高效液相色谱法等.气相色谱法由于糖为非挥发性物质需要进行衍生化处理、检测过程较复杂;离子色谱法因糖易在电极上发生氧化还原反应而影响检测灵敏度、重现性;高效液相色谱检测主要用碳水化合物柱、氨基柱为分离色谱柱，以乙腈和水混合溶剂为流动相，用示差折光检测器（RID）［1，7，8］、质谱检测器（MS）［9，10］、蒸发光散射检测器（ELSD）［11-13］.乙腈是一种有毒致癌物质，易挥发，以乙腈为流动相不仅给测试人员身体带来伤害，还对环境造成污染;氨基柱固定相上的氨基易与还原糖（葡萄糖、果糖）发生反应，影响柱子寿命;质谱、蒸发光散射检测器价格昂贵、专用性强，不利于检测方法推广普及.本研究拟建立一种安全无毒、快捷准确检测甘蔗茎节糖类含量的高效液相色谱法，该法用Waters SugarP akⅠ（钙基糖分离柱）为HPLC色谱柱，以超纯水为流动相，适当流速、柱温下用示差折光检测器实现蔗糖、葡萄糖、果糖的分离检测.甘蔗茎节样品取自福建农林大学甘蔗研究所甘蔗种植园区，选取新台糖22号（ROC22）蔗株中部茎节，取样时间为2014年1月6日.蔗糖、葡萄糖、果糖标准样为国产色谱纯（纯度≥99.5%）;Milli-Q Academic超纯水机;Waters2695高效液相色谱仪（具有120位自动进样器）配Waters2414示差折光检测，色谱工作站为Empower;Mettler Toledo XS205 分析天平（0.01 mg）.Waters SugarPakⅠ柱（6.5 mm×300 mm，10μm），带配套预保护柱;流动相为超纯水;柱温90℃;流速为0.4 mL·min-1;进样量 10 uL.准确称取蔗糖1.0 g（准确至0.01 mg）用10mL容量瓶溶解定容，制得100 g·L-1混合标准溶液，稀释得 50、40、30、20、10 g·L-1标准工作溶液;葡萄糖、果糖各0.1 g（准确至0.01 mg），分别用10 mL 容量瓶溶解定容制得10 g·L-1标准溶液，稀释得 1.2、0.9、0.6、0.3、0.1 g·L-1标准工作溶液;为考察标样分离情况，另准确称取3种糖各0.25 g于同一50mL容量瓶溶解定容制得5 g·L-1混合标准溶液.所有样品进样前经0.45μm有机滤膜过滤.甘蔗等作物中糖类提取常采用乙醇水溶液水浴浸提［1，8，14］.简述如下:甘蔗茎节样品去皮切碎于液氮中研磨成粉，准确称取1.0 g（加标样品于此时加入），5 mL 80%乙醇于80℃下浸提30 min，离心取上清液，残渣再次提取后合并上清液，水浴蒸至近干后用超纯水溶解定容至5 mL.蔗糖、葡萄糖、果糖这些单糖、二糖在结构上没有紫外吸收基团，因此不能选择紫外分光光度检测器检测.示差折光检测器是根据样品流路与参比流路之间折射率的变化以测定样品浓度的通用检测器，适用于糖类检测;但对温度变化敏感，要求高于室温5-10℃［15］.本试验采用示差检测器检测，RID检测器温度设定为35℃［16］，灵敏度可满足需要.Waters SugarPakⅠ色谱柱由钙基树脂填装而成，流动相中允许有机相最大含量为5%，过多有机相进入系统可能引起填料的膨胀而永久损坏色谱柱.实验过程中还发现，少量有机相（小于5%乙腈、甲醇）的加入对甘蔗茎节糖类分析没有显著影响，并引起基线漂移（如图1，a所示）;因此直接选择0.45μm滤膜过滤后超纯水为流动相，使用Waters2695在线脱气系统脱气.水在低温时高的粘度会带来很高的反压，为避免损坏色谱柱，分析时至少要选择70℃以上的柱温.实验过程考察0.4 mL·min-1流速时，柱温分别为80℃、85℃、90℃、95℃时某代表性甘蔗茎节样品的分离效果（如图1，b，c，d，e 所示），发现柱温升高各组分峰形对称性有所改善，蔗糖与葡萄糖分离度有所增加，并能很好地减少果糖峰形宽展;但95℃柱温下3种糖的分离效果与90℃条件下无明显区别，考虑到柱温过高可能影响色谱柱寿命，本试验采用色谱柱柱温为90℃.由于色谱柱工作条件要求流动相流速低于0.6 mL·min-1，故实验设计考察了0.2、0.4、0.6 mL·min-1条件下3种糖的分离效果.实验结果发现0.6 mL·min-1流速条件下，3种糖混合标样（5 g·L-1）能较好分离且分析时间短，但柱压力显著升高;实际测定甘蔗茎节样品时有杂质与蔗糖峰不能分离，干扰在0.4 mL·min-1流速条件下能很好消除;0.2 mL·min-1流速下3种糖分离效果很好，但峰形变宽且分析时间延长至25 min以上.因此，选择0.4 mL·min-1为流动相流速条件，该流速条件能同时满足有效分离和快速测定的需求（如图2所示，样品浓度均为5 g·L-1），蔗糖、葡萄糖、果糖保留值分别为10.07、12.43和14.86 min.以上述混标初步测定某代表性甘蔗茎节样品中果糖、葡萄糖、蔗糖含量，约为0.5、1.1、25.0 g·L-1（如图3所示）;故分别设计1.4中所述3种糖类各级标准溶液.以标样峰面积y为纵坐标、标样质量浓度x为横坐标，由工作站Empower绘制标准溶液曲线得线性回归方程并给出判定系数;按信噪比S/N=3计算出各组分检测限，结果表明方法线性关系良好、检测限优于课题组前期氨基柱分析结果［1］，能满足甘蔗茎节样品中糖的分析（表1）.取某代表性甘蔗茎节样品，按1.5中所述液氮研磨、浸提、定容等步骤平行处理5份，峰面积RSD值分别为蔗糖2.77%、葡萄糖 3.23%、果糖 4.50%;某代表性样品加标结果如下表2所示（n=5）.结果表明，测定方法重复性好、回收率高，实验中成功应用该方法检测基地多批次甘蔗茎节样品.本方法HPLC以钙基阳离子交换柱Sugar-PakⅠ为分析柱，以RID检测器对甘蔗茎节提取液进行分析，对甘蔗中含量较多的3种糖实现有效分离和定量检测.研究表明，该方法用超纯水取代常用有毒溶剂乙腈作为流动相，简便快捷、安全，结果准确可靠;检测方法线性关系好、灵敏度高，判定系数均大于0.9995;方法重复性良好，RSD小于5%、加标回收率高;能满足甘蔗及相似作物或水果中3种糖的准确分析.【相关文献】［1］逯平杰，代容春，叶冰莹，等.高效液相色谱法测定甘蔗节间果糖，葡萄糖和蔗糖的含量［J］.食品科学，2011，32（2）:198-200.［2］霍汉镇.现代制糖化学与工艺学［M］.化学工业出版社，2008:1-5.［3］周欣，王庆彪，刘锡钧，等.气相色谱法检测葡萄糖、麦芽糖、果糖和蔗糖［J］.海峡药学，2001，13（4）:48-49.［4］张峻松，宣晓泉，唐纲岭，等.毛细管气相色谱法测定烟草中葡萄糖、果糖、蔗糖的含量［J］.中国烟草学报，2007，13（2）:17-20.［5］崔鹤，李戈，纪雷，等.离子色谱脉冲安培法测定蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖［J］.化学分析计量，2001，10（1）:25-26.［6］CASEIRO A，MARR IL，CLAEYSM，et al.Determination of saccharides in atmospheric aerosol using anion-exchange highperformance liquid chromatography and pulsed-amperometric detection［J］.Journal of Chromatography A，2007，1171（1-2）:37-45.［7］DE CORTESSÁNCHEZ-MATA M，CÁMARA-HURTADOM，DÍEZ-MARQUÉSC.Identification and quantification of soluble sugars in green beans by HPLC ［J］.European Food Research and Technology，2002，214（3）:254-258.［8］胡志群，王惠聪，胡桂兵.高效液相色谱测定荔枝果肉中的糖、酸和维生素C［J］.果树学报，2006，22（5）:582-585.［9］王浩，刘艳琴，杨红梅，等.液相色谱——质谱联用技术测定无糖食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖［J］.分析化学，2010，38（6）:873-876.［10］CHANDRAJU S，THEJOVATHIC，KUMAR C.Extraction，isolation and identificationof sugars from banana peels（Musa Sapientum）by HPLC coupled LC/MS instrument and TLC analysis［J］.Journal of Chemical and Pharmaceutical Research，2011，3（3）:312-321.［11］杨俊，刘江生，蔡继宝，等.高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定烟草中的水溶性糖［J］.分析化学，2006，33（11）:1596-1598.［12］张媛媛，聂少平，万成，等.高效液相色谱—蒸发光散射检测法同时测定单糖\双糖及低聚果糖［J］.食品科学，2009，30（18）:237-239.［13］宋晓晖，谢凯，李艳丽，等.HPLC-ELSD法测定梨果实中不同种类可溶性糖含量［J］.南京农业大学学报，2012，35（2）:87-91.［14］陈思，曾磊，陈尚武，等.蔗糖转运蛋白基因VvSUC12和VvSUC27在葡萄胚性和非胚性愈伤组织中的差异表达［J］.生物工程学报，2010，26（4）:530-537.［15］龚时琼.高效液相色谱仪常用检测器的使用与维护［J］.现代仪器，2009，16（1）:55-55. ［16］查圣华，王泽凤，姜水红，等.HPLC法测定益生元冲剂中水苏糖含量的方法学研究［J］.食品科技，2011，36（7）:278-282.。

第18卷第1期分析测试学报V ol.18N o.1 1999年1月FENXI CESHI XUE BAO(Journal of Instrum ental Anal y sis)Jan.1999高效液相色谱及薄层色谱分析蔗糖脂肪酸酯杨勤萍徐国梁施邑屏袁长贵3李祖义33(中国科学院上海有机化学研究所上海200032)摘要采用薄层色谱(T LC)扫描法和高效液相色谱法(HP LC)定性及定量地分析了蔗糖脂肪酸酯的组分。

这两种方法的测定结果基本一致,而HP LC与T LC相比,则更具快速、灵敏、准确性。

关键词高效液相色谱,薄层色谱,蔗糖脂肪酸酯蔗糖脂肪酸酯(蔗糖酯,SE)是一种有效的非离子型表面活性剂,其良好的表面性能和广泛的适用范围受到了人们的欢迎。

日本、美国、欧洲共同体、联合国粮农组织(FAO)及世界卫生组织(WHO)等均已批准蔗糖酯为食品添加剂。

蔗糖酯的合成方法可分为溶剂法、微乳化法、丙二醇酯法、相溶法等。

但不论采用何种合成方法,产物都含有蔗糖单酯(M ono)、蔗糖双酯(Di)、蔗糖多酯(P ol y)以及未反应的残糖和脂肪酸酯(FA ester)等杂质[1]。

蔗糖酯的这些杂质如未能有效除去,将会影响其表面活性和使用。

因此我国和世界各国都制订了蔗糖酯的国家标准,以控制蔗糖酯产品质量。

在蔗糖酯的分析测定中,用得较多的是薄层色谱法(T LC),它可进行定性及定量测定,但定量测定步骤较繁[2]。

也有用气相色谱进行蔗糖酯水解产物的分析[3]。

高效液相色谱(HP LC)是一种快速定量方法,国外70年代开始已应用到蔗糖酯的分析中[4]。

我们采用均相无溶剂法合成了蔗糖酯,为了跟踪产品的含量与质量,我们采用了薄层色谱扫描法与高效液相色谱法分析了蔗糖脂肪酸酯的成分与含量。

1实验部分1.1主要试剂与仪器蔗糖脂肪酸酯样品用均相无溶剂酯交换反应制得,包括小试、中试样品;标准样品F140、F70为日本Dai lchi ko gy o S ei y abu公司的不同型号的蔗糖酯样品;十六酸甲酯、蒽酮为分析纯。

亿信检测推出单糖组成方案
简介：GC-MS（气相质谱联用技术测定单糖组成）
1多糖含量检测
方法：苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物,再以比色法测定。

该法为糖类检测过程中通用的测定糖含量方法。

2多糖的单糖组成和摩尔比检测
1仪器
图1 安捷伦GCMS检测仪
2方法：多糖全水解-乙酰化-GCMS
3示例图谱
图2 多糖样品全水解-乙酰化-GCMS总离子流图
图3 标准单糖乙酰化GCMS谱库匹配图
3多糖分子量分布范围检测
1仪器
图4 安捷伦1200高效液相色谱仪
2方法：HPLC-GPC-RI
3示例图谱（标准曲线）。