实验报告 种子萌发及胁迫实验
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实验2:种子萌发及胁迫实验
1 种子萌发及胁迫实验
1、实验目的
通过NaCl、聚乙二醇等处理各种不同瓜类种子,研究盐胁迫及水分胁迫对种子发芽率及各种生理指标的影响影响。
2、实验原理
盐胁迫是由于高盐浓度下,细胞或组织的渗透压增加,导致内环境的稳定被破坏,从而影响种子的发芽以及根芽的生长。同时,盐胁迫还会造成离子毒害以及高盐引起的营养亏缺、氧化胁迫等,这些都会造成种子的萌发及生长受到抑制,能耗增加。通过不同浓度的NaCl来处理种子,用来比较它们的耐盐程度。
水分胁迫是指植物水分散失超过水分吸收,使植物组织含水量下降,膨压降低,正常代谢失调的现象。植物除因土层中缺水引起水分胁迫外,干旱、淹水、冰冻、高温或盐碱条件等不良环境作用于植物体时,都可能引起水分胁迫。不同植物及品种对水分胁迫的敏感性不同,影响不一。聚乙二醇(PEG6000)是一类不能通过细胞壁的大分子渗透调节物质,对细胞毒性小,使植物组织和细胞处于类似干旱的水分胁迫之中。通过研究了不同浓度 PEG6000模拟干旱胁迫对不同种子萌发的影响,观测种子的发芽能力及生理变化,可以揭示不同植物的抗旱能力。
3、实验材料、仪器及试剂
3.1 实验材料
共处理六种不同的种子,分别为:①超恒精选毛节瓜 ②优选新绿宝吊瓜 ③细长粉皮冬瓜王④新津研4号 ⑤海南大肉三号 ⑥密宝南瓜F1
3.2 实验仪器
纱布、标签纸、培养皿、托盘、胶头滴管、烧杯、容量瓶、镊子、直尺、钥匙、电子天平、恒温培养箱等
3.3 实验药品及试剂
蒸馏水、PEG6000、氯化钠固体等
4、实验步骤
4.1 盐胁迫处理 实验2:种子萌发及胁迫实验
2 (1)材料预处理
分别选取大小均匀,健康饱满的6种不同种子,升汞消毒后将其置于培养皿中并加入蒸馏水在室温下吸胀12小时。
(2)用200ml容量瓶分别配制20 mmol/L、40 mmol/L、60 mmol/L、80 mmol/L、150 mmol/L、200 mmol/L、250 mmol/L七个梯度的氯化钠溶液,将其置于干净的烧杯中,备用。
(3)将吸胀好的种子置于干净的吸水纸上将上面的水分擦干。
(4)剪大小合适的纱布,双层置于干净的培养皿底部,分别加入数滴不同浓度的NaCl溶液将纱布浸湿,并在外壁贴上标签。
(5)将处理好的种子均匀的放在培养皿中(1-4号分别20粒,5号6粒,6号18粒),将其置于托盘上,并盖上盖子,放在27±2℃的恒温培养箱中恒温黑暗中培养。
(6)每天用水清洗种子一次,重新加入处理液,每四天换一次纱布,并每天记录发芽的种子数,以根长2㎜作为发芽标准,以培养皿中有一粒萌发即为该处理的发芽始期,连续十天不在有种子发芽为结束期。
(7)发芽期间,逐日记载发芽粒数、胚根长和胚芽长,并计算种子发芽势(GE)、发芽率(GP)、发芽指数(Gi)、活力指数(Vi)。计算公式如下:
GE=发芽高峰期发芽的种子数/供试种子数×100% (以种子发芽的第二天测定)
GP = Ga / Gn(Ga:第四天正常发芽种子数 Gn:供试种子数)
Gi =∑(Gt/Dt) (Gt: 逐日发芽数 Dt:相应发芽天数)
Vi = Gi*S (S:胚根鲜重,这里用主根长来代替)
4.2 水分胁迫处理
与盐胁迫的(1)(3)(5)(6)(7)操作步骤相同,将七个梯度的NaCl改为5个浓度梯度的PEG溶液,分别为10%、15%、20%、25%、30%。
两种处理共用一组对照(CK),对照处理为蒸馏水。
5、实验记录及分析
5.1 NaCl处理结果及分析
①盐胁迫对种子发芽胚根长(radicle length)和胚芽长(germinal length)的影响
在不同胁迫时间下,各不同品种种子发根长度和发芽长度均表现随盐浓度升实验2:种子萌发及胁迫实验
3 高而下降的总趋势。(表1)
表1 不同NaCl浓度下各种子发根长度(RL)和发芽长度(GL)
品种
天数/d NaCl浓度/mmol /L 1 2 3 4 5 6
单位/cm RL GL RL GL RL GL RL GL RL GL RL GL
0%(CK) / / 1.8 0 / / 1.8 0 / / 1.9 0
20 / / 1.5 0 / / 1.5 0 / / 1.7 0
40 / / 1.2 0 / / 1.0 0 / / 1.3 0
2 60 / / 0.7 0 / / 0.6 0 / / 1.1 0
80 / / 0.5 0 / / 0.5 0 / / 0.9 0
150 / / 0.2 0 / / 0.4 0 / / 0.7 0
200 / / 0 0 / / 0.4 0 / / 0.4 0
250 / / 0 0 / / 0 0 / / 0 0
0% / / 3.1 1.4 1.9 0 2.5 4.2 / / 3.5 0
20 / / 1.8 0 1.4 0 2.2 4.8 / / 3.0 0
40 / / 1.6 0 0.8 0 1.4 5.6 / / 2.5 0
3 60 / / 1.2 0 0.3 0 0.9 0 / / 2.0 0
80 / / 0.9 0 / / 0.7 0 / / 1.5 0
150 / / 0.5 0 / / 0.7 0 / / 1.1 0
200 / / 0 0 / / 0.5 0 / / 0.8 0
250 / / 0 0 / / 0 0 / / 0 0
0% 0.5 0 4.5 5.1 2.0 0 4.0 9.2 0.3 0 3.8 0
20 0.4 0 2.7 2.3 1.6 0 2.9 10.0 0.2 0 3.5 0
40 0.2 0 2.0 1.3 1.1 0 2.2 7.8 0 0 2.5 0
4 60 0 0 1.5 0.5 0.5 0 1.0 1.5 0 0 2.3 0
80 0 0 1.0 0 0.2 0 1.0 0.8 0 0 1.8 0
150 0 0 0.6 0 0 0 0.9 0 0 0 1.3 0
200 0 0 0 0 0 0 0.6 0 0 0 0.9 0