解脲脲原体之微生物学检验

解脲脲原体是什么病解脲脲原体是我们人类生殖道所分离出来的支原体的一种，人的生殖道一共有三种，解脲脲、生殖、人型三种支原体，其中大部分的是解脲脲原体。

它主要和不孕症、生殖道的炎症等病状有关系，是这些症状的检查项之一，如果通过检查后发现有解脲脲原体的存在，就可以明确有解脲脲原体感染。

那么解脲脲原体究竟是什么病呢？解脲脲原体是什么病临床资料证明，解脲脲原体与不孕症、自然流产、死胎、女性生殖道炎症等威胁女性健康的疾病有一定的关系。

资料显示，在女性常见的生殖道炎症中，解脲脲原体占非淋球菌阴道炎的67.6%；在宫颈炎和阴道炎病例中，解脲脲原体检出率为67%；在不育夫妇中，大约有90%的妇女感染了解脲脲原体，而正常女性仅22%可以检测出解脲脲原体。

所以当不孕症患者查不出原因的时候，应检查解脲脲原体。

解脲脲原体感染导致生殖道炎症，使粘膜细胞坏死，输卵管中的纤毛失去运动功能，受精卵运动受到抑制；解脲脲原体可直接吸附在精子的头部，破坏精子的活力，影响精子与卵子的正常结合，患者难以正常受精。

解脲脲原体感染还与精子膜有共同抗原，一旦感染就有可能导致免疫性不孕。

在不孕症中，解脲脲原体感染率在55.2%-80%之间。

孕妇一旦感染解脲脲原体，很容易发生低体重儿、新生儿呼吸道感染、胎儿死亡等严重后果。

什么样的情况下需要治疗一、如果男女双方均无泌尿生殖道感染的相关症状，仅解脲支原体阳性，考虑为携带者，不必治疗。

二、解脲支原体经感染治疗后症状体征消失，仅解脲支原体实验室检查结果为阳性时，应考虑是否转为解脲支原体携带，不必继续进行药物治疗。

三、男性若确诊为解脲支原体性尿道炎，建议同事治疗性伴，期间注意避免无保护sex。

四、男性精液质量异常且有生育需求时，男女双方建议同时治疗一疗程。

五、如果能够进行生殖支原体监测，应该在怀疑尿道炎和宫颈炎时积极进行生殖支原体检测。

六、治疗盆腔炎时，应该考虑支原体可能参与盆腔炎的发病，抗菌谱适宜使用覆盖支原体方案。

测定细菌数量的方法1、计数器测定法：即用血细胞计数器进行计数。

取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。

由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。

本法简便易行，可立即得出结果。

本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。

2、电子计数器计数法:电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。

该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。

因此，要求菌悬液中不含任何碎片。

3、活细胞计数法常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。

取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。

此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。

使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。

广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。

4、比浊法比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。

细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。

此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。

5、测定细胞重量法此法分为湿重法和干重法。

湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。

此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。

解脲/人型支原体分离培养与药敏实验分析目的：了解本地区解脲支原体耐药状况，指导临床合理用药。

方法：应用支原体微量培养及同步药敏试剂盒，检测解脲支原体及其药敏分析。

美满霉素、交沙霉素、克拉霉素三种抗生素敏感性高，不易产生耐药性，且耐药率变化不大；结论：临床治疗UU引起的非淋菌性尿道炎，本地区应推荐美满霉素、强力霉素、交沙霉素作为治疗解脲支原体的首选药物。

不论是UU单项感染或是UU+MH混合感染均产生多重耐药，支原体的耐药问题严重，治疗要根据药物敏感性报告用药。

提示：在进行治疗前做支原体药敏试验很有必要。

支原体（mycoplasma）是细胞外生存的最小微生物。

是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3～0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态，能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。

它不同于细胞，也不同于病毒。

种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域，给人类健康和科研工作带来不利影响。

从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体及发酵支原体。

脲解支原体属（ureaplasma）含脲解支原体等体、脲解支原体及人型支原体等对人有致病性。

肺炎支原体是呼吸道感染、肺炎的主要原因。

能引起人类泌尿生殖道感染的有解脲支原体（UU）、人型支原体（MH）、生殖道支原体等，其中最常见的是UU，约有30%～40%男性的非衣原体、非淋病性尿道炎是由UU所致；此外UU可通过胎盘感梁胎儿，引起早产、死胎、低体重胎儿和新生儿呼吸道感染。

由于不合理使用抗生素，支原体对常用抗生素耐药已非常普遍，对其进行培养及耐药性监测显得尤为重要。

解脲支原体（M.urealyticum）为支原体属中唯一的一个种，因生长需要尿素而得名。

菌落微小，直径仅有15～25um，须在低倍显微镜下观察，故旧称T株（tiny strain）。

铜陵中山医院实验室微生物操作sop文件支原体培养鉴定及药敏操作规程1.目的支原体是缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，也是目前所知能在人工培养基中生长繁殖的最小微生物，呈多形态性，基本为球形，亦可呈球杆状或丝状，可通过除菌滤器。

支原体种类繁多，分布广泛，已分离到150多种，而人体支原体至少有15种，其中对人类有致病作用的主要有：肺炎支原体、解脲脲原体、人型支原体和生殖道支原体。

在这里主要是介绍解脲脲原体和人型支原体的培养检测程序。

2.范围采集生殖道或尿道标本检测解脲脲原体和人型支原体。

适用于尿液、尿道分必物、前列腺液、精液和宫颈分泌物等。

3.培养程序3.1形态与培养特性支原体没有细胞壁，形态多形性，但主要有三种基本形态：球形、双球形和丝状。

革兰染色阴性，但不易着色，姬姆萨染色着色较好，呈淡紫色。

支原体营养要求较高，一般以牛心浸液为基础，再添加10%~20%的动物血清及10%的新鲜酵母浸液。

支原体最适pH为7.8～8.0，低于pH 7.0则死亡，一般为兼性厌氧菌，个别菌种为专性厌氧菌。

该菌生长缓慢，在支原体培养基中典型菌落呈“油煎蛋”样，其中以肺炎支原体的菌落最大，解脲脲原体的菌落最小，宜在低倍镜下观察。

支原体在液体培养基中生长量较少，一般不易浑注。

3.2程序步骤3.2.1标本取样后立即送检，必须在2h以内接种，2～8℃保存不超过5h，尿液标本应在膀胱内停留>2h以上，新鲜标本取10ml经3000r/min离心15min对样本进行浓集后取0.2ml.沉淀进行培养。

3.2.2试剂盒放置至室温后，在编号区标上编号，取出试剂，将稀释液加到培养基干粉瓶的2.9ml标线处，摇匀待干粉完全溶解后吸50ul到C-孔，作为阴性对照孔。

3.2.3将拭子或样本（尿液或液体标本取离心后的沉淀0.2ml）加入培养液中，拭子应稍加用力挤压旋转数次，使样本充分溶解于培养液，弃拭子，用移液器分别吸50ul培养液加入余下各孔中，然后每孔滴加二滴无菌液状石蜡，盖上盖，置35～37℃孵箱中培养，分别于24h观察解脲脲原体和48h观察人型支原体的培养及药敏结果。

解脲支原体药敏结果分析国显红（辽宁省东港市中医院检验科，辽宁 东港）摘要：目的对东港市解脲支原体的药敏情况以及耐药性进行分析探讨，以期为抗生素的临床合理应用提供相应的指导。

方法本研究所使用的解脲支原体（ureaplasma urealyticum，Uu）和人形支原体（mycoplasma human，Mh）培养鉴定试剂盒均生产于珠海丽珠试剂有限公司，使用以上试剂盒对东港市中医院泌尿生殖科解脲支原体培养阳性标本检测分析，统计解脲支原体对于各类抗生素的敏感性以及耐药性。

结果在解脲支原体的药物敏感性方面，美满霉素最高，为86.9%，其次是交沙霉素(85.6%)、强力霉素(85.0%)、克拉霉素(72.8%)、司帕沙星(56.0%);而对环丙沙星(2.8%)、螺旋霉素(5.2%)、罗红霉素(5.5%)、壮观霉素(16.8%)、氧氟沙星(16.8%)、左氧氟沙星(19.0%)、阿奇霉素(29.1%)的敏感性较低，耐药性较强。

结论本研究结果与其他地区的解脲支原体药敏结果存在一定差异，其中药物敏感性较高的美满霉素、交沙霉素、强力霉素、克拉霉素等在本地区的解脲支原体感染治疗中可推广应用，而耐药性较高的左氧氟沙星、阿奇霉素等应当尽量避免使用。

关键词:解脲支原体;抗生素;耐药；药敏结果中图分类号：R446.5 文献标识码：B DOI: 10.19613/ki.1671-3141.2018.53.085本文引用格式：国显红.解脲支原体药敏结果分析[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(53):127,129.0 引言解脲支原体主要寄居于人体的泌尿生殖道，且近年来由其引发的非淋菌性尿道炎患者逐渐增多。

传统抗生素如红霉素等对该类感染的治疗效果不甚理想，使得部分患者长期治疗，导致菌群失调。

为解决解脲支原体感染的耐药性，指导合理用药,我们于2016年1月至2018年1月对327例解脲支原体培养阳性标本进行强力霉素、美满霉素、克拉霉素、氧氟沙星、罗红霉素、壮观霉素、交沙霉素、螺旋霉素、左氧氟沙星、阿奇霉素等抗生素耐药测定,结果如下。

解脲支原体（UU）核酸检测试剂盒(PCR荧光法)说明书【产品名称】通用名：解脲支原体(UU)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)英文名：Ureaplasma Urealyticum polymerase chain reaction (PCR) Fluorescence Diagnostic Kit【包装规格】32人份/盒【预期用途】可作为临床实验室对男性尿道拭子样本或女性宫颈拭子样本中解脲支原体核酸定性检测，为临床早期发现尿道炎或子宫颈炎及性病高危人群的筛查提供分子生物学上的参考依据。

适应症：由解脲支原体感染引起的尿道炎及宫颈炎【检验原理】本试剂盒选用解脲支原体(UU)保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对解脲支原体(UU)核酸的自动化检测。

【主要组成成份】注:不同批号试剂盒中各组份不可以互换【储存条件及有效期】试剂-20℃可保存12个月，未使用完的试剂继续冷冻保存不影响其稳定性，但试剂反复冻融不得超过三次。

【适用仪器】具有FAM荧光通道的ABI7000型荧光PCR扩增仪。

【样本要求】1. 标本：男性尿道拭子样本或女性宫颈拭子样本2. 采集容器：应当选用国家批准生产的一次性使用的男性拭子或女性拭子，拭子应当包括套管、棉签杆、塞子，棉签杆与塞子都应连接牢固。

3. 采集：样本采集具体方法请参考《微生物标本采集手册》一书。

【男性】先清洁尿道口，要求病人在采样前2小时不能排尿。

取尿道分泌物或细小棉拭子伸入尿道约2-4cm，略捻拭子取出分泌物（应略带黏膜）。

将分泌物或棉拭子置入无菌玻璃管，密闭送检。

【女性】先用棉/麻拭子将宫颈口过多的分泌物擦去，用扩阴器扩阴，再换取棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处，直到看不到拭子头，旋转10-20秒，取出拭子，将拭子置入无菌玻璃管中，密闭送检。