张苗 高速逆流色谱原理及应用讲解
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高速逆流色谱技术
目 录
介绍································································································································ 1
高速逆流色谱的原理···································································································· 1
1.系统描述····················································································································· 2
1.1主机························································································································ 2
1.2恒流泵···················································································································· 2
1.3紫外检测器············································································································ 3
1.4恒温循环器············································································································ 3
2007 第九卷 第一期 ★Vol.9No.1
〔WorldScienceandTechnology/ModernizationofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica
〕高速逆流色谱技术在药物研究开发中的应用*
□曹学丽** (北京工商大学化学与环境工程学院/北京市植物资源研究开发重点实验室 北京 100037)
收稿日期:2006210210 修回日期:2006211230* 北京市教育委员会科技发展教育计划项目(KM200410011001);天然药物活性成分分离纯化技术研究,负责人:曹学丽;北京市自然科学基金项目(2042006)高速逆流色谱螺线形圆盘柱分离系统的研究,负责人:曹学丽。** 联系人:曹学丽,博士,教授,主要从事天然植物和药物活性成分的逆流色谱分离纯化技术研究。Tel:010268983116,E2mail:Caoxl@。摘 要:对高速逆流色谱(HSCCC)技术。在天然药用植物活性成分分离及标准品制备、中药指纹图谱分析、天然新药的研发和活性部位筛选等方面中的应用及其在生物药物以及药物工业化领域的应用发展趋势进行了综述。关键词:高速逆流色谱 药物研究开发 活性成分分离
高速逆流色谱(High-SpeedCountercurrentChro2matography,HSCCC)是一种连续高效的液2液分配色谱分离技术。该技术由于不需要固体支撑体,物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现,因而避免了因不可逆吸附引起的样品损失、失活、变性等,特别适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触,使得样品的制备量大大提高,是一种理想的制备分离手段,目前已广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域,尤其是在我国生物医药以及中药现代化等领域的应用愈来愈广。HSCCC在过去的20~30年中发展十分迅速,产生了一系列新型的分离技术,积累了大量的科研成果。自1995年以来,国外已有5本英文专著出版[1-5],我国目前也已出版两本中文专著[6,7]。本文将重点就近年来HSCCC在药物研究开发中的应用进行讨论和综述。一、高速逆流色谱工作原理作为一种色谱分离方法,HSCCC与高效液相色谱(HPLC)最大的不同在于其柱分离系统。如果将一套大家所熟知的制备HPLC系统的色谱柱部分用一台HSCCC的螺旋管式离心分离仪代替,即可构成一套HSCCC色谱分离系统,它包括储液罐、泵、螺旋管分离柱、检测器、色谱工作站或数据采集软件或记录仪以及馏分收集器等组成部分。在实际分离时,首先选择预先平衡好的两相溶剂中的一相为固定相,并将其充满螺旋管柱,然后使螺旋管柱在一定的转速下高速旋转,同时以一定的流速将
高速逆流色谱中样品分离原理:
样品进入分离柱内,分离管柱内的轻相和重相是动态的。随着逆流色谱仪的高速旋转产生的二维力场,轻相由于比重轻相对重相摔在分离管的内侧;而重相相对轻相摔在分离管的外侧。
样品进入分离管之后,随着流动相(重相)慢慢穿过轻相和重相。在穿越过程中根据样品组分对轻相、重相的分配系数不同而保留时间发生变化;对轻相分配系数大的组分的保留时间长,而对重相分配系数大的组分的保留时间则短。
如图所示:
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①②③④⑤⑥⑦……………………………………………………………………………………
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图1. 样品进入分离管时的情况
………………――――轻相
oooooooooooo――――重相
①②③④⑤⑥⑦——样品(7组分)
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…………………④……………………………………………………………………………
………………①…③……⑥……………………………………………………………
…………………⑤……………………………………………………………………………
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[中药指纹图谱]
高速逆流色谱(HSCCC)技术与色谱指纹谱沈平
(国家中药制药工程技术研究中心,上海201203)
关键词:高速逆流色谱(HSCCC);指纹图谱;提取分离摘要:介绍了高速逆流色谱(HSCCC)技术与色谱指纹谱的研究近况,HSCCC的工作原理,技术特点。HSCCC技术在中草药分离分析方面尚属起步阶段,随着中药产业的迅猛发展,HSCCC技术在中草药分离、分析方面的应用前景广阔。中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:100121528(2001)0520313203
High2speedCounter2currentChromatographyandFingerPrint
SHENPing2niang(NationalEngineeringResearchCenterforTraditionalChineseMedicine,Shanghai201203,China)
Keywords:HSCCC;fingerprint;extractionandseparation
Abstract:Inthisarticle,theauthorreportedtherecentdevelopmentinstudyonhigh2speedcounter2current
chromatography(HSCCC)andfingerprint,workprincipleandtechnologyspecialityofHSCCC,andnotedthat
theprospectofHSCCCapplicationinseparationandanalysisofChinesemedicinesandherbalmedicinesisbroad
asrapiddevelopmentofthepharmacenticalindustryofChinesemedicine,eventhoughtheapplicationisstillin