实验六 叶绿体中色素的提取与分离
·实验指导（攻关不畏难）
一、目的要求：
1、 初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
2、 探索叶绿体中有几种色素。
二、材料用具：
新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）。干燥的定性滤纸，烧杯（100ML ），研钵，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿，药勺，量筒（10ML ），天平。丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。
三、实验原理：
1、 叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中，所以，可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
2、 层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的色素在层析液中的深解度不同：深解度高的随
层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。这样，几分之后，叶结体中
的色素就在扩散中分离开来。
1）称取
5克绿色叶片并剪碎充分研磨
漏斗
（
2
）加入少许SiO 2、CaCO 3和5的丙酮
滤液收集到试管并棉塞封
口
（1） 将干燥处理过的定性滤纸剪成长6㎝、宽1㎝的滤纸条，并在一端剪
去两角；
（2） 干燥处理，重复2——3次。
（1） 用毛细吸管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地画一条滤液线。
（2） 干燥处理，重复画2——3次。
（1） 将3ML 层析液倒入烧杯。
（2） 将滤纸条略微斜靠烧杯内壁（有滤液细线的一端朝下），轻轻插入层
析液中。
（3） 用培养皿盖盖上烧杯。
a 、黄绿色的叶绿素b
1、选材时要注意选取新鲜、颜色深的叶片。
2、用丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨时要快，收集的滤液要用棉塞塞住，
层析时要加盖，减少有机溶剂的挥发。
3、在研磨时加入少许SiO 2，目的是为了研磨得充分；加入少许CaCO3的目的是为了防止研磨时叶绿体
中色素受到破坏；加入丙酮的目的是作为叶绿体中色素的溶剂。
4、在制备滤纸条时，要剪去两角，这是为了使色素带整齐；要在距离去两角的一端1㎝处画一铅笔细
线，其目的是起标记作用，以便使每次重复画的滤液细线在同一位置，画滤液细线要重复2——3次，是为了增加色素的含量，使实验交得明显。
5、分离色素时，一是不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解于层析液中，导
致色素带不清晰，影响实验效果。
·实践检验（温故能知新）
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度最快的色素是（）
A、叶绿素a
B、叶绿素b
C、胡萝卜素
D、叶黄素
2、叶绿体中色素的提取和分离的实验目的是（）
A、观察多种色素的吸收光谱曲
B、验证叶绿体中色素的种类和多种色素的颜色。
C、提取高等植物叶绿体中的色素
D、用纸层析法将色素进行分离
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽的一条色素带的颜色是（）
A、橙黄色
B、黄色
C、蓝绿色
D、黄绿色
4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析，会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是（）
A、橙黄色
B、蓝绿色
C、黄色
D、黄绿色
5、将叶绿体色素滤液放在自然光源和三棱镜之间，从棱镜的另一铡，观察连续光谱中明显变暗的区域是（）
A、红光和蓝紫光区
B、黄光和蓝紫光区
C、红光和绿光区
D、黄光和绿光区
6、下列关于“叶绿体中色素的提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是（）
A、提取高等植物叶绿体中的色素
B、用纸层析法分离色素
C、了解多种色素的吸收光谱
D、验证叶绿体所含色素的种类
二、简答题：
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中：
（1）用纸层析法分离叶绿体中四种色素的原理是。在滤纸上随层析液扩散速度最快的色素是原因是。
（2）为了获得整齐又不重复的四条色素带，在划滤液细线时应注意：
；
。
（3）左图为分离叶绿体中色素的装置，请指出其中的三处错误：
；
；
。
2、图表示叶绿体色素提取和分离实验的部分材料和用具，据图作答：
⑴图①加入研钵内的物质：A 2-3ml；作用是；B 少许，作用是研磨得充分；C 少许，作用是。
⑵将糨糊状研磨液倒入②中，漏斗内基部塞有少许
⑶③剪去两角的作用是，划滤液细线的要求是。
⑷④层析操作过程应注意；层析原理是；加盖的目的是；色素带最宽的是；扩散最快的是。
参考答案：
实验六叶绿体中色素的提取和分离
一、选择题：
1.C
2.B
3.C
4.D
5.A
6.C
二、简答题：
1．⑴叶绿体中四种色素在层析液中溶解度不同，溶解度大的在滤纸条上随层析液扩散得快，反之则慢；胡萝卜素；胡萝卜素在层析液中的溶解度最大；
⑵①应画得细、匀、齐；②干燥处理后，重复画2～3次；
⑶①未盖培养皿盖；②层析液太多；③层析液没及了滤液细线。
2．⑴丙酮；溶解色素；SiO2；CaCO3；防止研磨过程中叶绿素被破坏；⑵脱脂棉；
⑶防止两边色素层析时扩散过快；细、齐、直；
⑷层析液不要没及滤液细线；四种色素随层析液在滤纸条上的扩散速度不同；防止层析液挥发；叶绿素a；胡萝卜素。
（注：可编辑下载，若有不当之处，请指正，谢谢!）