高效液相色谱-荧光结合蛋白沉淀法测定人血浆中格列喹酮及相对生物利用度
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１ｈｂ ４ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ
ｏｆ仇“岫ａｄｄ
５．
ｌａｂｌｅｔｓ姆ＨＰＬＣ
ａｎｄ Ｕｖ
１－７］吴福楷，邱涌．ＨＰＬＣ法测定氨甲环酸胶囊的溶出度［Ｊ］．海 峡药学，２００７，１９（７）：５０—５１． ［８］杨立新．宛六一，代海平．氮甲环酸氯化钠注射液中ｚ－异构 体的控制方法［Ｊ］．中国生化药物杂志，２００４，２５（５）：
中南大学药学院，长沙４１００１３）
摘要：目的建立ＨＰＬＣ结合荧光测定血浆中格列喹酮的方法，研究２种格列喹酮片荆的相对生物利用度。方法 以甲醇一２０ ｉｎｍｏ卜Ｌ－１磷酸二氢氨（氨水调ｐＨ为７．３５）＝６０：４０（ｖ／ｖ）为流动相，样品沉淀蛋白后直接进样， 荧光检测器的ＥＸ为３１５ ｎｍ，ＥＭ为４１０ ｎｍ。１８名健康志愿者采用随机交叉试验设计，分别单剂量口服格列喹酮
４．６
ｔａｎ，
种方法之问的差距主要南于紫外一可见分光光度法测定的 是氨甲环酸的衍生物的浓度，在衍生化的过程中步骤较 烦琐。且影响因素多，而ＨＰＬＣ法测定的结果专属性强， 而且准确度及重复性也较好。
’、－／‘‘＿‘、Ｊ’、，’、—～
参考文献
［１］中国药典２００５年版．二部Ｉｓ］．２００５：６１１． ［２］Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ ［３］Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ
４１０
ｎｉｎ。
１．３储备液的配制 精密称取格列喹酮对照品适量，用甲醇制成浓度为
１．５６
ｍｇ・ｍＬ叫的储备液，置４℃冰箱中保存备用，使用时
用水稀释至所需浓度。 １．４血浆样品的预处理 精密吸取１００“Ｌ血浆，置ｉ．５ ｍＬ具塞尖底离心管中， 加入乙腈３００弘Ｌ，漩涡振荡３０
１０ Ｓ，１３ ０００
ｒ・ｒａｉｎ－１离心
作者简介：陈只来，男，主任药师，主要从事临床药学工作，Ｔｅｌ：（０７５５）８３１１６１８１，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｒｉｌａｉ２００１＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｍ
＊通讯作
者：丁劲松，男，副教授，主要从事药物新制剂及其牛物有效性评价工作，Ｔｅｌ：（０７３１）２６５０３６７，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｄｉｎｇｊｓ０２２１＠１６３．ｃｏｒｎ
ｍｉｎ。取上清液２０肚Ｌ进样。
１．５给药与血样采集 试验经中南大学药学院伦理委员会批准，１８名男性健 康志愿者，年龄２３～２５岁，体重５０～７２ ｋｇ，在签署知情同 意书和体检合格后纳入试验，志愿者随机等分为两组，禁食 过夜（至少１２ ｈ），第２ ｄ清晨空腹口服参比制剂或试验试 制剂６０ ｒａｇ，以２００ ｍＬ温开水送服，于服药前和服药后
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃ１８，（５ ｐｍ，４．６
ｍ×２５０ ｍｍ），Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ
（５ ｔａｎ，４．６ ｍｍＸ ２５０ ｍｍ），试验结果表明：当选用色谱柱
Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ
ｐｌａｓｍａ［Ｊ］．Ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒ Ｂ Ａｎａｌｙｔ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂ ｉｏｍ ｅｄ
Ｋ，Ｈｒａｂａｌｅｋ Ａ，Ｄｏｌｅｚａｌ ｔｒａｎｅｘａｍｉｅ ａｃｉｄ
ＣＨＥＮ
Ｒｉ—ｌａｉｌ，ＺＨＯＵ Ｙａｈ－ｂｉｎｚ，ＴＩＡＮ Ｊｕａｎ２，ＲＡＮ Ｌｉ－ｌｉｎｇｚ，ＺＵＯ Ｙｉｎｇｚ，ＤＩＮＧ Ｊｉｎ－ｓｏｎｇｅ（１．Ｍｅｉｌｉｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，
Ｆｕｔｉａｎ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５ １８０２０；２．Ｓｃｈｏｏｌ Ｃｈａｎｇｓｈａ
格列喹酮对照品（天津药物研究院药业有限责任公司， 含量９９．４％，批号：０５０３０７）；格列喹酮片Ｔ［试验制剂， 万源（福州）药业有限公司，规格：３０ ｍｇ・片～，批号： ０６０９１１］；格列喹酮片Ｒ（参比试剂，北京万辉双鹤药业有 限公司，商品名：糖适平，规格：３０ ｍｇ・片～，批号： ０６０２０４）；磷酸二氢氨（天津市科密欧化学试剂开发中心 ＡＲ）；甲醇（色谱纯，ＴＥＤＩＡ Ｃｏｍｐａｎｙ）；水为超纯水；其
１５
Ｉｓ］．２００６：１ １９３．
２００７
ＩＳ］．２００６：２９６６．
ｍｍＸｌ５０
ｍｍ），依利特Ｃ１８（５舯，４．６
ｍｍＸ ２００ ｍｍ）， Ｃ１８
［４１
Ｃｈａｎｇ Ｑ，Ｙｉｎ Ｏ Ｑ，Ｃｈｏｗ Ｍ ｓ Ｌｉｑｕｉｄ ｅｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ２ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｅｘａｍｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｈｕｍａｎ
万方数据
中南药学２００９年４月第７卷第４期Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ａｐｒｉｌ ２００９，Ｖ０１．７ Ｎｏ．４
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ ｂｙ ＨＰＬＣ—ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ
ａｎｄ ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ２ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｔａｂｌｅｔｓ
７．３５
ｂｙ ＮＨ３・Ｈ２０）ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ，ａｎｄ
ｔｏ
ａｔ
ａ
ｎｎｌ，ＥＭ：４１０
ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ
ｎｒｒｕ
Ａ ｓｉｎｇｌｅ ｏｒａｌ ｄｏｓｅ ｏｆ ６０ ｍｇ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｗａｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ
１８
ｈｅａｌｔｈｙ
Ｇｌｉｑｕ—
ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ ｉｎ
ｄｏｎｅ
格列喹酮（Ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ）为第２代磺酰脲类口服降血糖 药物，用于治疗非胰岛素依赖型糖尿病［１”３。该药能特异性 地与胰岛Ｂ细胞膜上的磺酰脲受体结合，从而刺激Ｂ细胞 分泌胰岛素；同时，还可以改善外周组织（肌肉、肝脏、脂 肪）的胰岛素抵抗状态［３．４］。为研究格列喹酮的体内变化规 律，评价格列喹酮片的生物有效性，目前已经建立了多个生 物样品中格列喹酮的测定方法，采用的检测方法包括紫外检 测‘５’６３和荧光检测［７’８］。但这些方法均需要进行液液萃取或 柱切换等较复杂的生物样品前处理，不利于批量样品的快速 测定圳。本文建立了直接沉淀蛋白结合ＨＰＬＣ－荧光检测的 方法测定人血浆中的格列喹酮，方法灵敏度高、操作简单快 速，并用该方法研究了２种格列喹酮片剂的相对生物利用 度。 １实验部分 １．１仪器与试药
Ｌｃ一２０１０Ｃ ＨＰＬＣ系统（配备ＲＦ一１０ＡＸＬ荧光检测
他试剂均为国产分析纯。 １．２色谱条件 色谱柱：迪马Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃ１８柱（４．６
ｎｌｌｎＸ ２００
ｍｍ，
５“ｍ）；柱温：２５℃；流动相：甲醇一２０ ｍｍｏｌ・Ｌ－１的磷酸 二氢氨（氨水调ｐＨ为７．３５）为６０：４０（ｖ／口），流速：１．０ ｍＬ・ｒａｉｎ叫；发射波长（Ｅｘ）：３１５ ｎｌＴｌ，检测波长（Ｅｒａ）：
ｏｆ
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
４１００１３）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
ａｎｄ
Ｔｏ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｌａｓｍａ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ２ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｔａｂｌｅｔｓ（Ｔ Ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｗａｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ
０．３３３、０．６６７、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、４．０、６．０、 ８．０、１２．０、２４．０
器、ＬＣ－－Ｓｏｌｕｔｉｏｎ工作站，日本岛津）；ＴＧＩ。１６Ｍ台式高速 冷冻离心机（长沙英泰仪器有限公司）；ｗＨ一２微量旋涡混
合仪（上海沪西分析仪器厂）；ＡＧ２８５天平（Ｍ翻门ＭＬＥＲ
ＴＯＭＬＥＤ０）。
３１１．
（收稿日期：２００９—０１—１６；修回日期：２００９－０３—０５）
试验结果表明：采用紫外一可见分光光度法测定的平 均溶出量结果比ＨＰＬＣ法稍高，且批间的ＲＳＤ较大，２
高效液相色谱一荧光结合蛋白沉淀法测定 人血浆中格列喹酮及相对生物利用度
陈日来１，周彦彬２，田娟２，冉黎灵２，左英２，丁劲松２。（１．深圳市福田区梅林医院，广东深圳５１８０２０；２
ａｓ
Ｌ
Ｃ１８（５ ｔａｎ，４．６ ｒｎｍＸ２５０ ｍｍ）时，氨甲环酸的峰
ｉｒｅ Ｓｃｉ，２００４，８０５（２）：２７５—２８０．
形对称性较好，且能与相邻杂质峰完全分离。
３．３
Ｉｓ］Ｖａｖｒｏｖａ
ｔｉｖｅｓ ｏｆ
Ｐ。ｅｔ
ａ１．１０ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ ｄｅ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ
ｒｉｖａ—
２种方法的比较 采用ＨＰＩ．Ｃ法与原标准的紫外一可见分光光度法进行溶
ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｔｉｔｙ ｏｆ ｔａｂｌｅｔ Ｔ ｗａｓ（１０１．５士１３．３）％ｗｈｅｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔａｂｌｅｔ １Ｌ
ａｃｃｕｒａｔｅ
ＡＵＣｏ～２４
ｔｈｅ ｉｎｄｅｘ，ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
Ｔｈｅ
ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉＳ
ｎｏ
ａｎｄ ｓｅｎｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ
ａｒｅ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ，ｗｈｉｃｈ
Ｋｅｙ
ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ．
ｗｏｒｄｓ：ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ；ＨＰＬＣ－ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ；ｐｒｏｔｅｉｎ－ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ；ｒｅｌａｔｉｖｅ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ
ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ
ｅｎｈａｎｃｅｒｓ
口］．Ｃｏｎｔ Ｒｅｌ，２００５，１０４（１）：４１—４９． ［６］刘成广．反相高效液相色谱法测定氨甲环酸葡萄糖注射液 中氨甲环酸的含量［Ｊ］．医药导报，２００７，２６（１０）：
１２１４—１２１
出量的测定结果对比，结果见表４。
表４ ＨＰＬＣ法与紫外一可见分光光度法测定溶出量的结果比较表
片６０ ｍｇ后测定两者相对生物利用度。结果血浆中格列喹酮与内源性杂质分离完全，在３０．５～１ ９５０肛ｇ・Ｌ＿１浓
ｏｆ仇“岫ａｄｄ
５．
ｌａｂｌｅｔｓ姆ＨＰＬＣ
ａｎｄ Ｕｖ
１－７］吴福楷，邱涌．ＨＰＬＣ法测定氨甲环酸胶囊的溶出度［Ｊ］．海 峡药学，２００７，１９（７）：５０—５１． ［８］杨立新．宛六一，代海平．氮甲环酸氯化钠注射液中ｚ－异构 体的控制方法［Ｊ］．中国生化药物杂志，２００４，２５（５）：
中南大学药学院，长沙４１００１３）
摘要：目的建立ＨＰＬＣ结合荧光测定血浆中格列喹酮的方法，研究２种格列喹酮片荆的相对生物利用度。方法 以甲醇一２０ ｉｎｍｏ卜Ｌ－１磷酸二氢氨（氨水调ｐＨ为７．３５）＝６０：４０（ｖ／ｖ）为流动相，样品沉淀蛋白后直接进样， 荧光检测器的ＥＸ为３１５ ｎｍ，ＥＭ为４１０ ｎｍ。１８名健康志愿者采用随机交叉试验设计，分别单剂量口服格列喹酮
４．６
ｔａｎ，
种方法之问的差距主要南于紫外一可见分光光度法测定的 是氨甲环酸的衍生物的浓度，在衍生化的过程中步骤较 烦琐。且影响因素多，而ＨＰＬＣ法测定的结果专属性强， 而且准确度及重复性也较好。
’、－／‘‘＿‘、Ｊ’、，’、—～
参考文献
［１］中国药典２００５年版．二部Ｉｓ］．２００５：６１１． ［２］Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ ［３］Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ
４１０
ｎｉｎ。
１．３储备液的配制 精密称取格列喹酮对照品适量，用甲醇制成浓度为
１．５６
ｍｇ・ｍＬ叫的储备液，置４℃冰箱中保存备用，使用时
用水稀释至所需浓度。 １．４血浆样品的预处理 精密吸取１００“Ｌ血浆，置ｉ．５ ｍＬ具塞尖底离心管中， 加入乙腈３００弘Ｌ，漩涡振荡３０
１０ Ｓ，１３ ０００
ｒ・ｒａｉｎ－１离心
作者简介：陈只来，男，主任药师，主要从事临床药学工作，Ｔｅｌ：（０７５５）８３１１６１８１，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｒｉｌａｉ２００１＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｍ
＊通讯作
者：丁劲松，男，副教授，主要从事药物新制剂及其牛物有效性评价工作，Ｔｅｌ：（０７３１）２６５０３６７，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｄｉｎｇｊｓ０２２１＠１６３．ｃｏｒｎ
ｍｉｎ。取上清液２０肚Ｌ进样。
１．５给药与血样采集 试验经中南大学药学院伦理委员会批准，１８名男性健 康志愿者，年龄２３～２５岁，体重５０～７２ ｋｇ，在签署知情同 意书和体检合格后纳入试验，志愿者随机等分为两组，禁食 过夜（至少１２ ｈ），第２ ｄ清晨空腹口服参比制剂或试验试 制剂６０ ｒａｇ，以２００ ｍＬ温开水送服，于服药前和服药后
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃ１８，（５ ｐｍ，４．６
ｍ×２５０ ｍｍ），Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ
（５ ｔａｎ，４．６ ｍｍＸ ２５０ ｍｍ），试验结果表明：当选用色谱柱
Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ
ｐｌａｓｍａ［Ｊ］．Ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒ Ｂ Ａｎａｌｙｔ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂ ｉｏｍ ｅｄ
Ｋ，Ｈｒａｂａｌｅｋ Ａ，Ｄｏｌｅｚａｌ ｔｒａｎｅｘａｍｉｅ ａｃｉｄ
ＣＨＥＮ
Ｒｉ—ｌａｉｌ，ＺＨＯＵ Ｙａｈ－ｂｉｎｚ，ＴＩＡＮ Ｊｕａｎ２，ＲＡＮ Ｌｉ－ｌｉｎｇｚ，ＺＵＯ Ｙｉｎｇｚ，ＤＩＮＧ Ｊｉｎ－ｓｏｎｇｅ（１．Ｍｅｉｌｉｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，
Ｆｕｔｉａｎ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５ １８０２０；２．Ｓｃｈｏｏｌ Ｃｈａｎｇｓｈａ
格列喹酮对照品（天津药物研究院药业有限责任公司， 含量９９．４％，批号：０５０３０７）；格列喹酮片Ｔ［试验制剂， 万源（福州）药业有限公司，规格：３０ ｍｇ・片～，批号： ０６０９１１］；格列喹酮片Ｒ（参比试剂，北京万辉双鹤药业有 限公司，商品名：糖适平，规格：３０ ｍｇ・片～，批号： ０６０２０４）；磷酸二氢氨（天津市科密欧化学试剂开发中心 ＡＲ）；甲醇（色谱纯，ＴＥＤＩＡ Ｃｏｍｐａｎｙ）；水为超纯水；其
１５
Ｉｓ］．２００６：１ １９３．
２００７
ＩＳ］．２００６：２９６６．
ｍｍＸｌ５０
ｍｍ），依利特Ｃ１８（５舯，４．６
ｍｍＸ ２００ ｍｍ）， Ｃ１８
［４１
Ｃｈａｎｇ Ｑ，Ｙｉｎ Ｏ Ｑ，Ｃｈｏｗ Ｍ ｓ Ｌｉｑｕｉｄ ｅｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ２ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｅｘａｍｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｈｕｍａｎ
万方数据
中南药学２００９年４月第７卷第４期Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ａｐｒｉｌ ２００９，Ｖ０１．７ Ｎｏ．４
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ ｂｙ ＨＰＬＣ—ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ
ａｎｄ ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ２ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｔａｂｌｅｔｓ
７．３５
ｂｙ ＮＨ３・Ｈ２０）ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ，ａｎｄ
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ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ
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１８
ｈｅａｌｔｈｙ
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ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ ｉｎ
ｄｏｎｅ
格列喹酮（Ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ）为第２代磺酰脲类口服降血糖 药物，用于治疗非胰岛素依赖型糖尿病［１”３。该药能特异性 地与胰岛Ｂ细胞膜上的磺酰脲受体结合，从而刺激Ｂ细胞 分泌胰岛素；同时，还可以改善外周组织（肌肉、肝脏、脂 肪）的胰岛素抵抗状态［３．４］。为研究格列喹酮的体内变化规 律，评价格列喹酮片的生物有效性，目前已经建立了多个生 物样品中格列喹酮的测定方法，采用的检测方法包括紫外检 测‘５’６３和荧光检测［７’８］。但这些方法均需要进行液液萃取或 柱切换等较复杂的生物样品前处理，不利于批量样品的快速 测定圳。本文建立了直接沉淀蛋白结合ＨＰＬＣ－荧光检测的 方法测定人血浆中的格列喹酮，方法灵敏度高、操作简单快 速，并用该方法研究了２种格列喹酮片剂的相对生物利用 度。 １实验部分 １．１仪器与试药
Ｌｃ一２０１０Ｃ ＨＰＬＣ系统（配备ＲＦ一１０ＡＸＬ荧光检测
他试剂均为国产分析纯。 １．２色谱条件 色谱柱：迪马Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃ１８柱（４．６
ｎｌｌｎＸ ２００
ｍｍ，
５“ｍ）；柱温：２５℃；流动相：甲醇一２０ ｍｍｏｌ・Ｌ－１的磷酸 二氢氨（氨水调ｐＨ为７．３５）为６０：４０（ｖ／口），流速：１．０ ｍＬ・ｒａｉｎ叫；发射波长（Ｅｘ）：３１５ ｎｌＴｌ，检测波长（Ｅｒａ）：
ｏｆ
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
４１００１３）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
ａｎｄ
Ｔｏ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｌａｓｍａ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ２ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｔａｂｌｅｔｓ（Ｔ Ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｗａｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ
０．３３３、０．６６７、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、４．０、６．０、 ８．０、１２．０、２４．０
器、ＬＣ－－Ｓｏｌｕｔｉｏｎ工作站，日本岛津）；ＴＧＩ。１６Ｍ台式高速 冷冻离心机（长沙英泰仪器有限公司）；ｗＨ一２微量旋涡混
合仪（上海沪西分析仪器厂）；ＡＧ２８５天平（Ｍ翻门ＭＬＥＲ
ＴＯＭＬＥＤ０）。
３１１．
（收稿日期：２００９—０１—１６；修回日期：２００９－０３—０５）
试验结果表明：采用紫外一可见分光光度法测定的平 均溶出量结果比ＨＰＬＣ法稍高，且批间的ＲＳＤ较大，２
高效液相色谱一荧光结合蛋白沉淀法测定 人血浆中格列喹酮及相对生物利用度
陈日来１，周彦彬２，田娟２，冉黎灵２，左英２，丁劲松２。（１．深圳市福田区梅林医院，广东深圳５１８０２０；２
ａｓ
Ｌ
Ｃ１８（５ ｔａｎ，４．６ ｒｎｍＸ２５０ ｍｍ）时，氨甲环酸的峰
ｉｒｅ Ｓｃｉ，２００４，８０５（２）：２７５—２８０．
形对称性较好，且能与相邻杂质峰完全分离。
３．３
Ｉｓ］Ｖａｖｒｏｖａ
ｔｉｖｅｓ ｏｆ
Ｐ。ｅｔ
ａ１．１０ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ ｄｅ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ
ｒｉｖａ—
２种方法的比较 采用ＨＰＩ．Ｃ法与原标准的紫外一可见分光光度法进行溶
ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｔｉｔｙ ｏｆ ｔａｂｌｅｔ Ｔ ｗａｓ（１０１．５士１３．３）％ｗｈｅｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔａｂｌｅｔ １Ｌ
ａｃｃｕｒａｔｅ
ＡＵＣｏ～２４
ｔｈｅ ｉｎｄｅｘ，ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
Ｔｈｅ
ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉＳ
ｎｏ
ａｎｄ ｓｅｎｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ
ａｒｅ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ，ｗｈｉｃｈ
Ｋｅｙ
ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ．
ｗｏｒｄｓ：ｇｌｉｑｕｄｏｎｅ；ＨＰＬＣ－ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ；ｐｒｏｔｅｉｎ－ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ；ｒｅｌａｔｉｖｅ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ
ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ
ｅｎｈａｎｃｅｒｓ
口］．Ｃｏｎｔ Ｒｅｌ，２００５，１０４（１）：４１—４９． ［６］刘成广．反相高效液相色谱法测定氨甲环酸葡萄糖注射液 中氨甲环酸的含量［Ｊ］．医药导报，２００７，２６（１０）：
１２１４—１２１
出量的测定结果对比，结果见表４。
表４ ＨＰＬＣ法与紫外一可见分光光度法测定溶出量的结果比较表
片６０ ｍｇ后测定两者相对生物利用度。结果血浆中格列喹酮与内源性杂质分离完全，在３０．５～１ ９５０肛ｇ・Ｌ＿１浓
