家兔急性肺栓塞实验病理学研究
作者：苗宇 李晓明
来源：《畜牧兽医科学》2019年第16期
摘要：试验旨在探讨石蜡油致家兔急性肺栓塞的病理学特征，为揭示其发病机制提供依据。方法：经耳缘静脉注入石蜡油，建立家兔急性肺栓塞病理模型，观察其临床表现、血流动力学变化及病理变化。结果：在注射石蜡油20min后出现呼吸困难，口唇紫绀，肺部湿哕音，心率和呼吸加快，血压下降，中心静脉压升高;主要病理变化为肺淤血、水肿、气肿和右心室衰竭。结论：静脉注射石蜡油可引起家兔急性肺栓塞，栓塞引起的肺水肿、肺泡通气与血流比例失调导致的缺氧和肺动脉压力升高引起的急性有心衰竭为致死的主要原因。
关键词：家兔;急性肺栓塞;石蜡油;病理变化 中图分类号：S858.291 文献标识码：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.16.006
0 引言
肺栓塞是由于各种栓子堵塞肺动脉及其分支引起的以肺循环障碍和缺氧为特征的病理生理综合征，临床表现为呼吸困难、缺氧、紫绀、肺部哕音、胸腔积液和休克，发病机制尚不完全明确[1-2]。肺栓塞因其病情凶险，且临床表现易与其他心、肺疾病混淆，死亡率和误诊率较高，给人和动物健康造成严重威胁。
1 材料与方法
1.1主要试剂和材料
乌拉坦（上海化学试剂厂，AR），肝素（江西北盛生物技术公司，AR），常规手术器械，RM6240生物信号采集处理系统（成都仪器厂制造），Leica RM2125手动轮转式切片机，Olympus显微镜。
1.2试验动物及分组
中国白兔12只，雌雄各半，体重约2.0kg。随机分成对照组和对照组，每组6只，分笼饲养。
1.3方法
（l）家兔称重，用25%乌拉坦（5mL/kg·bw）全身麻醉，颈部剃毛，1%盐酸普鲁卡因局部浸润麻醉。常规手术分离气管，一侧颈总动脉和对侧颈外静脉插管，与生物信号采集系统连接。由耳缘静脉注入0.3%肝素溶液（2mL/kg·bw）全身抗凝。启动生物信号采集系统，选择急性有心衰竭模块，经Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ通道分别描记呼吸、动脉血压和中心静脉压。
实验2 急性DIC
实验时间：5月23日
【实验目的】
1、学习复制急性DIC动物模型的方法。
2、了解实验室诊断DIC的常用方法及其意义。
3、结合实验和血液学指标测定结果，联系理论知识加深理解DIC的病因及发生机制。
【实验对象】
家兔1只，雌（未孕）雄均可。体重 ～ kg。
【药品和试剂】
1%普鲁卡因、%枸椽酸钠液、2%兔脑粉浸出液（临用时配制）、饱和氯化钠液、生理盐水、1%鱼精蛋白液。
【实验器材】
兔台、哺乳动物手术器械一套（包括手术刀、普通剪刀、眼科剪刀、止血钳）、电热恒温水浴箱、台式离心机、721分光光度计、秒表、刻度离心管（10ml）、试管（13×75mm、15×100mm）、刻度吸管（2ml、5ml）、试管架、微量定量移液器（10µl、50µl、500µl）、橡皮吸球、乳胶滴管、玻片、棉球、纱布、颈动脉插管（硅胶管）2根、动脉夹，注射器。
【实验方法】
1、将家兔仰位固定兔台、颈部剪毛、皮下1%普鲁卡因局部浸润麻醉，作正中纵切口（约3~4cm左右），常规暴露一侧颈总动脉，结扎其远心端，近心端用动脉夹夹闭；在结扎线下方剪口插入硅胶管并固定，松夹放血7ml至盛有%枸椽酸钠液2ml的10ml刻度离心管中，立即混匀离心（3000rpm，5分钟），分离血浆，备作纤维蛋白原定量与3P试验。再松动动脉夹放血2~3滴于洁净玻片上，作凝血时间测定。
2、复制DIC模型：用10ml注射器吸取2%兔脑粉浸液，按3ml/kg的量缓慢（以每分钟2ml的速度为宜）注入家兔耳缘静脉内，同时观察其反应，如出现呼吸急促、躁动不安，即停止注射，速行第二次采血（方法同1），如未出现反应可注射毕后采血。重复上述各项指标测定。
4、整理并分析实验结果。
【附 录】 1、凝血时间测定（玻片法）：放血2~3滴于洁净玻片上，同时按动秒表，用清洁废针头挑拨血滴，见有明显血丝出现，迅即停表，记录时间。
2、纤维蛋白原含量测定（饱和盐水法）：取15×100mm试管一支，置样本血浆，加入饱和氯化钠溶液，立即混匀，于37℃水浴中孵育3分钟取出，再混匀后以721分光光度计，520nm滤光板比浊，读取光密度值；以生理盐水替代饱和氯化钠液作同样操作后为空白对照管调零，测出光密度，按下式计算；
家兔心肌梗死造模
一、实验目的
建立家兔心肌梗死模型并观察心电图
掌握冠状动脉结扎以及静脉注射
二、实验材料
实验动物：家兔 1.9kg 雌性
实验仪器：生物信号采集处理器，针形记录电板，体重秤，兔台，动物手术器材，线，注射器
实验药品：氨基甲酸乙酯，垂体后叶素
三、实验方法
1、实验系统连接及参数设置 血压换能器固定于铁支柱上，高度与心脏处于同一水平面。压力换能器输出线接微机生物信号采集处理系统输入通道。仪器参数： RM6240系统：在“实验”菜单中选择“兔动脉血压调节”。仪器参数：时间常数0.2s，滤波频率100HZ，扫描速度250ms/div。
2、家兔称重后，按1g/kg体重的剂量于耳缘静脉注射200g/L的氨基甲酸乙酯麻醉。快速推注2/3麻醉剂后，观察家兔角膜发射，酌情推注所余药物。动物麻醉后仰卧于手术台上，固定四肢，前肢交叉固定，用棉绳钩住兔门齿，将绳拉紧并缚于兔台铁柱上。
3、药物法：3.1按Ⅱ导联心电图分别将绿色、红色、黑色针形电极插入家兔右上肢、左下肢、右下肢皮下。开始记录家兔的心电图。
3.2记录一段正常心电图后，以2.5单位/kg的剂量给称重1.9Kg的雌性家兔注射垂体后叶素4.75单位。连续记录心电图.
4、结扎法：4.1胸部手术。胸前区剪毛，于胸骨左缘第2～4肋间断肋，暴露纵隔及心脏，保持两侧胸膜完整，避免发生气胸，纵行切开心包，提起左心耳，距主动脉根部冠脉开口3mm以及5mm处双重结扎左冠状前降支，随后关闭胸腔。整个手术过程用5%葡萄糖生理盐水静脉滴注。
4.2结扎左冠状动脉前降支后，观察心脏梗死区，记录心电图。
四、实验结果 见课堂打印
1、注射垂体后叶素可成功建立家兔心肌梗死模型。（附页）
2、结扎后，心肌变紫，搏动减弱，本组实验无法显示实验结果，因此失败，若模型建立成功可见到ST段抬高。
五、实验讨论
1、实验对象的选择。本实验之所以选择家兔是因为有以下几点优点：①家兔体形适中，适应能力强，耐受创伤。②家兔冠状动脉原有侧支循环比其他动物少，易于操作。③家兔的组织结构具有特异性，发生严重心律失常和急性心衰的可能性小。④病理组织学分析表明,此种家兔心肌梗死病变为陈旧性心肌梗死病变伴
一、实验目的
本实验旨在通过建立兔子血栓模型，研究不同药物或治疗方法对血栓形成的影响，为临床血栓病的预防和治疗提供理论依据。
二、实验原理
血栓是指血液在血管内凝固形成的固体块状物。血栓形成是多种因素共同作用的结果，包括血管内皮损伤、血液凝固系统激活、血液成分改变等。本实验通过注射血栓诱导剂，模拟人体血栓形成过程，研究不同药物或治疗方法对血栓形成的影响。
三、实验材料
1. 实验动物：健康成年兔子10只，体重2.5-3.0kg。
2. 实验试剂：肝素钠、阿司匹林、尿激酶、氯化钙、生理盐水等。
3. 实验仪器：手术显微镜、手术器械、注射器、计时器等。
四、实验方法
1. 实验分组：将10只兔子随机分为5组，每组2只。
2. 建立血栓模型：在兔子耳缘静脉注射肝素钠，以诱导血栓形成。
3. 观察指标：
（1）血栓形成时间：记录注射肝素钠后，血栓形成所需的时间。
（2）血栓长度：使用手术显微镜观察血栓长度。
（3）血栓质量：取出血栓后，使用电子天平称量血栓质量。
（4）抗凝活性：检测兔子的抗凝活性，观察药物或治疗方法对血栓形成的影响。
4. 实验操作：
（1）A组：正常对照组，不给予任何药物或治疗方法。
（2）B组：肝素钠组，给予肝素钠治疗。
（3）C组：阿司匹林组，给予阿司匹林治疗。
（4）D组：尿激酶组，给予尿激酶治疗。 （5）E组：氯化钙组，给予氯化钙治疗。
五、实验结果
1. 血栓形成时间：A组（正常对照组）血栓形成时间为（10±2）min，B组（肝素钠组）血栓形成时间为（8±1）min，C组（阿司匹林组）血栓形成时间为（9±1）min，D组（尿激酶组）血栓形成时间为（7±1）min，E组（氯化钙组）血栓形成时间为（12±2）min。
2. 血栓长度：A组（正常对照组）血栓长度为（2.0±0.3）cm，B组（肝素钠组）血栓长度为（1.5±0.2）cm，C组（阿司匹林组）血栓长度为（1.6±0.3）cm，D组（尿激酶组）血栓长度为（1.2±0.1）cm，E组（氯化钙组）血栓长度为（2.5±0.4）cm。
