蒙药嘎日迪对大鼠肠黏膜屏障功能修复的实验研究

２０１２年２月第２期　中国民族医药杂志　４５　０．２ｃｎ＇ｌ大小肝组织，４ｏｇ・Ｌｑ中性甲醛液规定，２４ｈ后逐级酒精脱　水。二甲苯透明，５６￣（２石蜡包埋，３￣６ｔ．ｔｍ厚切片，用苏木素一伊红　（ＨＥ）及Ｍａｌｌｏｒｙ染色，光镜下观察肝组织形态学及胶原纤维增生　情况。肝纤维化程度分级参考【３】：０级，肝组织正常，无胶原纤维增　生；１分，胶原纤维在汇管区或中央静脉周围轻度增多；２分，中　央静脉区胶原纤维间隔形成；３分，中央静脉到中央静脉或中央　静脉到汇管区纤维间隔形成或相连接；４分，多数纤维间隔形成，　分割肝实质或形成假小叶，假小叶中央时见汇管区。　３　结果　３．１肝指数：对照组、模型组、ＳＡ　６０、２００ｍｇ・ｋｇ　组，分别为　４．２３＋０．３１，６．２２￣０．５１，５．８４￣０．６４，５．４２士０．８１（尸＜０．ｏ１），５．６１￣０．７３（Ｐ＜　０．０５），比模型组肝指数降低６．１％，１２．７％，９．８％。　３．２血清生化指标：对照组、模型组、ＳＡ　６０ｍｇ・ｋｇ　组、２００ｍｇ・ｋｇ－　组，ＡＬＴ、ＬＤＨ、ＡＬＢ分别为８２￣１２（ｕ・Ｌ．１）、２６６￣２１２（ｕ・　）、４２￣４２　值・Ｌ＿１），２１１￣１５、４２１￣２３、２３￣１．８，１２１￣２３（尸＜０．０５）、３１１￣４２（尸＜　０．０５）、２８￣０．４（Ｐ＜０．０５），１３５￣２２（Ｐ＜０．０５）、２７７￣３４（尸＜０．０５）、３３￣２．６　（尸＜０．０１），比模型组ＡＬＴ、ＬＤＨ、ＡＬＢ（升高）分别降低４２％，２６％，　２２％：３６％、３４％、４３％。　３．３肝组织光镜观察：取肝组织，采用ＨＥ和ＰＡＳ染色，模型组　大鼠肝组织呈多发性变性和坏死，肝细胞索排列紊乱，细胞混浊　肿胀，空泡样变性，枯否氏细胞增多，血窦扩张、瘀血，部分细胞　核消失，细胞膜不完整；用药组不同剂量可使肝细胞变性、坏死　明显减少，病变范围、病变程度明显减轻，肝细胞混浊、空泡样变　性减少，纤维化结构物质明显减少。ＰＡＳ染色病理片经病理图像　系统数据化分析，模型组肝细胞、枯否氏细胞光密度显著增高，　高、低剂量给药组，光密度降低２５．６％（Ｐ＜０．０１）和１８．２％（Ｐ＜　０．０５）。对照组肝小叶结构完整，无炎细胞浸润：模型组大鼠肝细　胞坏死、炎性细胞浸润严重，有胶原纤维构成的纤维间隔，形成　假小叶，纤维化程度明显。ＳＡ组汇管区仍有不同程度的纤维增　生、炎性细胞浸润部分大鼠形成假小叶，但较模型组轻；而高剂　量ＳＡ组也有部分肝组织炎症细胞浸润，肝细胞坏死较少，纤维　增生不明显，与模型组相比，肝纤维化程度减轻更为明显。对照　组、模型组、ＳＡ　６０ｒａｇ・ｋｇ　组、２００ｍｇ・ｋｇ　组，肝纤维化程度积分　分别为０、３．１￣０．４３、２．８￣０．３１、２．４￣０．２８（１￣＜０．０５），比模型组分别降　低９．７％、２２．６％。ＳＡ可防治化学性肝损伤纤维化。　４　讨论　肝细胞变性一肝纤维化一肝硬化一肝衰竭过程中肝纤维化　是一个重要的中间阶段。启动肝细胞变性过程中重要环节之一　的是肝脏细胞自由基增多，消除力降低，引起肝细胞脂质过氧　化，导致肝细胞损害进而发生肝细胞损伤纤维化。肝损伤纤维化　的治疗排除病因外，多采用抗炎、免疫调节、抑制ＨＳＣ激活、降解　胶原产物、刺激肝细胞再生、抗脂质过氧化与自由基。而抗肝损　伤纤维化药物研究进展相对缓慢。其原因：①肝损伤纤维化病理　发生机理复杂，涉及诸多环节，相互影响，在很多方面没有完全　搞清。②损伤纤维化涉及多个环节，化学药品针对单一环节。③　化学药品的毒副作用大，不适宜长期使用；生物制剂如ＩＦＮ一　、　，ＴＮＦ一仪抗肝损伤肝纤维化疗效肯定，但长期使用也有脱发、发　热、白细胞降低、骨髓抑制等副作用，且价格昂贵。　民族医药治疗肝损伤纤维化是我国特有的技术优势，有些　制剂取得较好的抗肝纤维化临床疗效，特别是中药复方制剂。本　实验表明，蒙古山萝卜酸可有效防止大鼠四氯化碳诱发的肝损　伤纤维化，蒙古上萝卜酸的抗氧化作用可能在防治肝损伤作用　具有较大的科学意义，相关机理尚需进一步研究。　参考文献　【１】白清云．中国医学百科全书．蒙医学［Ｍ】．上海科技出版社，１９９２；　２０４．　【２１内蒙古卫生厅．蒙药材标准【ｓ】．内蒙古科技出版社，１９８７；５０２．　［３】３内蒙古卫生局．内蒙古中草药【Ｍ】．内蒙古人民出版社，１９７２；１５８　～１５９．　２０１１年ｌ２月１８日收稿　蒙药嘎日迪对大鼠肠黏膜屏障功能修复的实验研究△　崔箭裴凌鹏　庞宗然刘同祥李树春　（中央民族大学中国少数民族传统医学研究院，ｊｂ京１０００８１）　摘要：目的：观察蒙药嘎日迪对大鼠肠粘膜屏障功能修复的影响。方法：ＳＤ大鼠４８只。随机分对照组、模型组、嘎日迪组和阳性药　物（柳氮磺吡啶片）组。连续喂养２Ｏ天后，进行肠道细菌易位、血液流变学参数、血清内毒素含量、血清还原型谷胱甘肽、超氧化物　歧化酶活性以及丙二醛含量等指标的测定。结果：与模型组比较，蒙药嘎日迪胶囊可有效降低肠道细菌易位率、血清内毒素、血　清丙二醛含量以及血液流变参数（全血粘度、全血还原粘度和红细胞聚集指数），升高血清还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶活　性以及血液流变参数（红细胞电泳指数）。结论：蒙药嘎日迪胶囊具有修复大鼠肠粘膜屏障功能损伤的作用。　关键词：嘎日迪胶囊；肠粘膜屏障；抗氧化作用；血流变学；民族药　中图分类号：１：１２９１．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６－６８１０（２０１２）０２—００４５—０３　溃疡性结肠炎属蒙医结肠“宝日病”范畴，蒙医认为该病的　发生与多种因素有关，其内因是致病“三要素”和琪素、希日乌　素。外因是饮食不当、精神刺激、感染等均可伤及肠胃，肠胃伤则　△基金项目：教育部”长江学者与创新团队计划”专项（ＩＲＴ０８７１）　运化失常，导致肝内恶血（坏血或病血）增多，此恶血经由胃时与　巴达干结合，在小肠与希日合并最后到达结肠与赫依聚合，使肠　功能失调，损伤结肠脉络，使肠粘膜损伤，形成粘膜溃疡而引发　此病。宝日病热邪久积结肠，使热毒成“粘”，雍而为脓，至血败肉　腐产生溃疡、出血等病理变化。因此，疏肝除浊，行气消滞，

消热　２０１２年２月第２期　中国民族医药杂志　凉血，消“粘”解毒，活血化瘀，祛腐生肌是治疗关键。内服嘎日迪　胶囊（主要由阿给、野罂粟等组成的蒙药制剂），具有疏肝除浊，　清除腑热、消“粘”解毒、止痢、止痛等功效㈣。本文拟观察嘎日迪　胶囊对大鼠肠粘膜屏障功能损伤的修复作用，为其临床应用提　供实验依据。　１　材料与方法　１．１材料　１．１．１主要试剂：嘎日迪胶囊（中央民族大学民族药开发中试基地　提供，批号０１０３１２，符合ＧＰＰ标准，临用时充分研磨后用蒸馏水　配成所需浓度的混悬液，主要成分为野罂粟碱、阿给黄酮）；柳氮　磺吡啶片（ＪＬ京双鹤制药厂）；超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）试剂盒、还　原型谷胱甘肽（ｃＳＨ）试剂盒、丙二醛（ＭＤＡ）试剂盒（购自南京建　成生物工程研究所）。　１．１．２主要仪器：７３２一Ｂ型分光光度计（北京光学仪器厂）；离心机　（北京医疗仪器厂）；全自动血液流变仪（日本日立公司）；ＩＳ一　２０００全自动生化分析仪（美国Ｂｅｃｋｍａｎ公司）。　１．１．３实验动物：ＳＤ大鼠，体重２００—２５０ｇ，雌雄各半，合格证号：　ＸＫＹ一１００２１５—１０，购自中国军事医学科学院实验动物养殖中心。　１．２方法　１．２．１动物分组、造模与给药：ｓＤ大鼠４８只，雌雄各半，随机分　为４组，每组１２只。正常对照组与模型组：每日灌胃蒸馏水　２０ｍＬ・ｋｇ　；嘎日迪组：每日灌胃０．６ｇ・ｋ　；阳性药物组：每日灌胃　０．４ｇ。ｄ一。　１．２．２肠系膜淋巴结细菌培养及肠道细菌易位率计算：按无菌要　求取回盲部肠系膜淋巴结，称重后加ｌｍＬ无菌等渗盐水制成匀　浆，取均浆液Ｏ．１ｍＬ接种于血平板，孵育４８ｈ后计算菌落数。按　国际通用标准，以每克淋巴结组织菌落＞１００菌落形成单位为细　菌移位阳慢　计算各组肠道细菌易位率（即移位阳性动物个数胲　组动物总数￣１００％）。　１．２－３血液流变学测定：于末次给药后，腹主动脉取血，加抗凝剂　全自动血液流仪检测血液流变学各项指标。　１．２．４血清内毒素测定：分离血清后，按试剂盒说明书进行血清　内毒素测定。　１．２．５血清ＧＳＨ、ＳＯＤ活性和ＮＤＡ含量测定：按试剂盒说明书进　行上述三项指标测定。　’　１．２．６统计学处理：各组数据均用ＳＰＳＳ１０．０统计软件做统计学处　理，结果以　表示，应用ｔ检验判定其差异。　２　结　果　２．１一般情况：实验期间各组动物进食、饮水及生长状况良好，经　连续灌胃２０天未有死亡。实验开始与结束各组大鼠体重差别均　无显著性。　２．２肠道细菌易位率：为排除人为污染，实验将只有腹腔棉拭子　培养阳性大鼠的肠系膜淋巴结培养结果才能作为细菌移位阳性　率进行计算。与对照组相比，模型组出现细菌移位率明显升高，　差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）；而嘎日迪组与阳性药物组均低于　模型组，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０１），具体试验数据见表１。菌　种进一步鉴定可知，肠系膜淋巴结培养阳性的细菌主要是以大　肠杆菌为主的肠道寄生菌。　２．３血液流变学指标变化：由表２可见，与对照组相比，模型组大　鼠全血粘度、全血还原粘度和红细胞聚集指数均升高，差异具有　统计学意义（Ｐ＜０．０５），而红细胞电泳指数降低，差异亦具有统计　学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）；与模型组相比，嘎日迪组和阳性药物组均具有　改善大鼠高切变率下的全血粘度、低切变率下的全血粘度、高切　变率下的全血还原粘度和低切变率下的全血还原粘度及红细胞　聚集指数的作用，且差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５），同时可升高　红细胞电泳指数，差异亦具有统计学意义（尸＜Ｏ．０５）。　２．４血清内毒素水平变化：由表３可见，与对照组比较，模型组血　清内毒素水平明显升高，差异显著具有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；与　模型组比较，嘎日迪组和阳性药物组均明显降低，差异显著具有　统计学意义（Ｐ＜０．０１）。　表１　各组大鼠肠道细菌移位率　

注：与对照组比较：伙０．０１，差异显著；与模型组比较：ｈＰ＜０．０５，存　在差异。　表２　各组大鼠血液流变学变化ｃｎ＝ｌ２．ｉ±ｓ）　

注：与对照组比较：啦＜０．０５，存在差异；与模型组比较：－ｌ尸＜Ｏ．０５，存　在差异。　袭２（续）　各组大鼠血液流变学变化（ｎ＝１２。ｉ±ｓ）　

注：与对照组比较：伙０．０５，存在差异；与模型组比较：　：０．０５，存　在差异。　表３　各组大鼠血清内毒素水平变化（ｎ＝１２．ｉ￣ｓ）　组别　内毒素（ＥＵｍ）　对照组　模型组　噶日迪组　阳性药物组　２７１．１５￣２８．１２　３ｌ５．Ｏ７￣３２．６２‘　２８９．５７￣２９．４０ｂ　２８５．０９￣２８．７１　注：与对照组比较：ａＰ＜Ｏ．０１，差异显著；与模型组比较：ｈＰ＜０．０１，差　异显著。　２．５血清ＧＳＨ、ＳＯＤ活性与ＮＤＡ含量变化：由表４可见，与对照　组比较，模型组血清ＮＤＡ含量明显升高，ＧＳＨ和ＳＯＤ活性明显　降低，差异显著具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）；与模型组比较，嘎日迪　组和阳性药物组均明显降低血清ＮＤＡ含量，升高ＧＳＨ和ＳＯＤ　活性，差异显著具有统计学意义（Ｐ（０．０１）。