岛津液相使用方法

液相使用方法
1.使用前样品处理：先看样品PH（87P柱为5-9，87H柱为1-3），看是否需要
调整。

取样，离心取上清，煮沸10分钟，离心，过0.22um有机滤膜至液相小瓶中，液体不少于0.5ml（也可将上清保存在-20℃）。

2.流动相过0.22um滤膜，超声10分钟。

（P柱流动相是娃哈哈纯净水，H柱流
动相是0.5M H2SO4，具体方法：0.273ml的98%浓硫酸加纯水稀释到1000ml。

过程中若液体不够，只能用新配的液体缓慢向之前瓶加，不可换瓶）。

3.用流动相清洗泵头（一般为两个泵头，一个连着进样器，一个连着开着的泵，
泵头上有A、B的标签，没有标签的是进样器），将泵头缓慢插入流动相底部，查看下方废液是否快满。

4.开泵A的开关，若使用泵B，则需要把泵A总开关打开，并将其sleep。

5.打开泵pump开关——旋右侧阀门逆时针180度（open）——按func-5-enter，
排气3-5分钟——缓慢将流速调到0.2ml/min（以0.5为单位调整）——关闭右侧阀门（顺时旋转180度），拿杯子接柱温箱流出来的水。

6.将流速自0.2、0.5、1、1.5、、、升至5，用流动相冲整个系统，5min，看压力
跳不跳（变化范围在上下0.4），不跳则证明没有气泡——将流速缓慢降至
0.2ml/min，安装预柱，注意方向（将保护头拧下，按flow方向安装），冲洗
5min，压力稳定——装柱子，用连接头连到预柱后，注意flow方向，冲5min，若压力>9MPa，不能继续使用。

7.将柱子与检测器接头连接（检测器分示差检测器RID、紫外检测器、荧光检
测器等，测糖都用示差检测器，注意连接头是否为示差检测器的连接头），确定连接好，不会漏液。

8.关闭pump，——依次开启柱温箱、检测器、进样器、中央控制器的开关——
打开电脑，进入Labsolutions软件，第一个按钮进入——在仪器处点自动配置，看是否连的仪器都在（用几个显示几个，一般用5个:控制器、泵A、进样器、柱温箱、检测器），点自动配置。

9.配置成功后，显示仪器就绪，打开文件，选择分析方法，点下载（注意泵用
的是哪个，改哪个），若之前没有方法文件，找一个近似的打开，下载，在实时分析的下侧对应之前的修正，主要改：柱温P柱78℃（最高可达85，现在一般用80），H柱60℃，检测器结束时间P柱40分钟（看标品多长时间跑完，有时可以30分钟），H柱20min，流速0.5ml/min——高级：最大压力为
9.8MPa（现在一般设置10-20，不能超过20），点检测器样品架，不用改，确
定，点下载，保存，文件夹选取，建名）。

10.点仪器的激活on/off——点进样器排气——排气10min——点进样器清洗，自
动停止后——点归零——点平衡RID至基线平衡。

11.上样，从1开始，将样品放入板子——点批处理，打开批处理表，（或者新建，
或者打开之前的，修改，再另存），选序号从1-几，方法文件（同分析文件），数据文件（把数据要保存的地方），进样量20微升，点文件，另存批处理，存在新文件夹，保存，将板子放回进样器内，回批处理，要跑的样全选，点批处理开始。

（如果中间补样，先在批处理中间点编辑表/重新开始，点这个就可以暂停，加好样品瓶后，选中要跑的样，再点一次重新开始即可。

加样等上一个样品加入后，洗完针，响声过去后，再加，重新开始不选正在跑着
的样品。

若意外停止，则重新开始要选中它一起开始。

我们主要是注意批处理文件中的样品瓶号、样品架名称、方法文件、数据文件、进样体积）
12.做完后将流速降到0.1ml/min（一点点地降），保存下载，开pump冲着，关软
件，关机，关控制器开关，打开柱温箱，关进样器，关检测器，等温度降到30多度，拆柱，关柱温箱，在冲一会，再关泵，最后将泵头放回原乙腈中。

注意：
1.若存在问题，检查仪器是否都连接上，需要观察压力，压力过高要分析是系
统问题，还是柱子问题，拆下柱子，看压力变化，若是系统原因冲一会继续使用。

2.若液相要过夜，检查废液痛中液体是否快满，检查流动相是否够过夜，检查
流速是否正常，压力是否正常。

3.压力单位的更改：打开系统配置，在仪器（通讯设置）里双击系统控制器，
更改压力单位即可。

仪器故障解决：
1.如遇仪器故障（通讯错误:中断），打开系统配置，在仪器（通讯设置）里双击系统控制器，查看继电器1是否变成event，将event改为start即可。

最终抄数据，直接复制到Excel，图可以右击复制，可左键拖选需要的部分，（若不选，会一直是所选时间段峰图，高度图），可copy到Excel里。

一般都是LC 分析图的对比图。

若基线上漂或者不准，需要手动积分。

设标准品：跑完标品后，打开标品文件，视图——助手（右侧框中）——左侧校准——向导弹出框中，改2次面积积分，以及浓度级，命名，添加所配浓度，保存，到方法，可直接用其跑样。

或者，点批处理，编辑，添加文件，添加需要解析的数据和标曲，重选方法（刚刚保存的方法，选浓度级，再解析）。

液相数据文件处理：
1.制作标曲文件
先打开再解析，选择跑过的标品数据文件（我们一般跑未稀释、稀释5倍和稀释10倍），选择稀释10倍的标品数据文件，点左侧栏中的向导。

在向导1/5页面中计算依据选高度，点击下一步；
在向导2/5页面中，选择峰数，在需要的峰前打勾，点下一步；
在向导3/5页面中，计算依据选高度，零截距选不通过原点，浓度mg/ml，浓度值格式中小数点后位数选3，点下一步；
在向导4/5页面中，不做更改，点下一步；
在向导5/5页面中，更改化合物名，浓度（1），浓度（2），浓度（3）分别填稀释10倍、稀释5倍、未做稀释的标品的浓度，从小到大填，然后点完成。

点左侧栏中的应用到方法，点是，另存为方法文件。

2.数据处理
打开一个批处理文件，在工具栏处选择“选择数据文件创建表”，先选择稀释10倍的标品文件，再选择稀释5倍的标品文件，再选择未稀释的标品文件，最后选择要处理的数据文件，点确定。

然后修改样品类型，稀释10倍的标品那里选择标准-初始化校准曲线；稀释5倍的标品那里选择标准-添加校准点；未稀释的标品那里选择标准-添加校准点；要处理的数据文件都是未知。

然后方法文件选择刚才做好的带标曲的方法文件，点向下填充。

然后修改级别号，稀释10倍的标品那里为级别1，稀释5倍的标品那里为级别2，未稀释的标品那里为级别3。

最后点批处理再解析开始，处理完成。

日常维护：
每天和开机之前前要做的：
在泵运行前检查溶剂是否脱气及管道中是否有气泡；
•检查管道有无破损或泄漏；
•检查相关管道中是否有盐沉积；
•在使用缓冲盐流动相后应使用不含有盐的溶剂彻底的清洗系统；
•定期检查管道可能的损伤，像破裂、划痕、切口及堵塞；
•定期检查清洗液瓶的液面高度，确保高度总是在瓶外标签上标示的上下限之间；
•同样，应定期更新清洗液瓶中的溶剂。

当使用了高含盐的流动相后，为避免清洗液瓶中盐浓度过高损坏到柱塞密封，应至少一天更换一次清洗液；
•为避免污染应定期检查溶剂进口的过滤器，必要时更新清洗滤芯；当使用缓冲盐流动相时，注意检查一次泵的泄漏(参见目测柱塞密封垫泄漏• 任何其它的维护程序必须由专业工程师完成!
伯乐87P重生：
0.1M HNO3，0.1M Pb(NO3)2，30%乙腈水溶液，均需过0.22um滤膜
先将P柱用30%乙腈水溶液25℃反向冲2-4h，再60℃冲2个小时。

然后换0.1M Pb(NO3)2，冲14个小时（过夜），最后水洗。

溶液流速均为0.2ml/min。

柱子不可多次重生，注意使用时爱护小心！。