实验7_种子生活力的快速测定

种子生活力快速测定实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。

种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。

本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。

实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%3、材料：玉米、小麦吸胀种子方法一：红墨水染色法实验原理：红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。

操作步骤：1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸涨备用。

2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养皿中，用5%红墨水染色。

3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。

结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100方法二：BTB变色法实验原理：活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。

CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。

BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。

BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。

色泽差异显著，易于观察。

操作步骤：1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。

培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。

种子生活力快速测定种子生活力快速测定实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。

种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。

本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。

实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%3、材料：玉米、小麦吸胀种子方法一：红墨水染色法实验原理：红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。

操作步骤：1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸涨备用。

2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养皿中，用5%红墨水染色。

3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。

结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100方法二：BTB变色法实验原理：活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。

CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。

BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。

BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。

色泽差异显著，易于观察。

操作步骤：1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。

培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。

种子生活力快速测定一、实验原理通过本实验，掌握种子生活力快速测定的原理和方法。

二、实验原理（1）活细胞染色：脱氢辅酶（NADH或NAFPH)存在于活的细胞内，当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原，便由无色的TTC变为红色的三苯基甲（TTE)。

当细胞死亡后，NADH会迅速被降解，不会发生相应的颜色反应，故TTC染色法可显示细胞是否存活。

（2）死细胞染色：有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择性；而无生命力的细胞，其细胞膜已经消失，因此有的有色物质（如品红）不能进入活的细胞内，但可以进入已经死亡的细胞，从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色，故可以据此鉴别细胞是否死亡。

三、实验材料、药品和器具1、实验材料：花生、黄豆2、实验药品和器具：品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等四、试验方法1、分别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入TTC培养1h左右，观察胚染色的情况。

胚被染色的为有活力种子，未被染色的为无活力的种子。

2、别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入品红培养10-20min，倒掉品红溶液，冲洗数次，观察胚染色的情况。

胚被染色的为无活力种子，未被染色的为有活力的种子。

五、实验结果品种测定方法测定种子总数有生活力种子粒数无生活力种子粒数种子生活率花生TTC 30 28 2 93% 品红30 28 2 93%黄豆TTC 30 30 0 100% 品红30 29 1 97% 实验结果可以得出选用TTC染色和品红染色得出的结果存在差异，用TTC染色得出的结果高于品红染色法。

结果分析：可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净，品红粘在胚上，影响实验的观察，导致结果差异。

六、注意事项1、选取种子的时候，要尽量选取未发芽的种子，避免影响测定。

2、添加染色液时，要是然也尽量没过种胚，使种胚和染液充分接触。

种子生活力测定方法
种子生活力是指种子在适宜条件下发芽和生长的能力，是种子质量的重要指标
之一。

种子生活力的好坏直接影响着作物的产量和品质。

因此，科学准确地测试种子的生活力是农业生产中非常重要的工作。

种子生活力的测定方法有很多种，其中常用的包括种子萌发率测定法、种子发
芽指数测定法、种子活力指数测定法等。

首先，种子萌发率测定法是通过将一定数量的种子放置在适宜的温湿度条件下
观察其发芽情况来测定种子的生活力。

这种方法简单易行，能够快速地获得种子的生活力信息，因此在实际生产中得到了广泛应用。

其次，种子发芽指数测定法是通过统计一定数量的种子在一定时间内发芽的数
量来测定种子的生活力。

这种方法能够更加客观地反映种子的生活力情况，但需要较长时间来进行实验，因此在实际生产中使用较少。

最后，种子活力指数测定法是通过将种子在一定温湿度条件下培养一段时间后，测定其发芽率和发芽势来综合评价种子的生活力。

这种方法能够较为全面地评价种子的生活力，但操作复杂，需要较长时间来完成实验。

综上所述，种子生活力的测定方法各有优缺点，农业生产中应根据实际情况选
择合适的方法进行测试。

只有通过科学准确地测定种子的生活力，才能保证种子的质量，提高作物产量，为农业生产做出更大的贡献。

实验七种子生活力的快速测定一、氯化三苯基四氮唑法（TTC法）[原理] 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚无此反应。

当TTC溶液深入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH3或NADPH2）还原时，可产生红色的三苯基甲曁（TTF），胚便染成红色。

当种胚的生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化则不明显，故可由染色的程度推知种子生活力的强弱。

[仪器与试剂] 培养皿2套，镊子1靶；单面刀片1片；垫板（切种子用）1块；烧杯1个；综合试剂瓶；取1gTTC溶于1dm3蒸馏水或冷开水中，配成0.1%的TTC 溶液。

药液pH应在6.5～7.5，以pH试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后在加水）。

[方法]1．将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。

2．随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。

3．把切好的种子分别放在培养皿内，加TTC溶液，以浸没种子为度。

4．放入30～50℃的恒温箱内保温30min。

也可在20℃左右的温室下放置40～60min。

5．保温后，倾出药液，用自来水冲洗种子2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，办判断结果记入表内。

[注意事项]1．TTC溶液最好现配现用。

如需要贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。

2．染色温度一般为25～35℃为宜。

3．判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根虽有小部分坏死，但其它部位完好。

4．判断无生活力的种子应具备：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；子叶不染色或丧失技能的组织超过1/2；胚染成很淡的紫红色或淡灰红色；子叶与胚叶轴的连接处或在培根上有较重的坏死部分；胚根受伤以及发育不良的未成熟的种子。