葛根含量测定方法(葛根素)
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【关键词】高效液相色谱法;,,清热降糖颗粒;,,葛根素摘要:目的应用高效液相法测定清热降糖颗粒中葛根素的含量。
方法以甲醇-水(24∶76)为流动相,用外标法定量。
结果葛根素在0.037 8~0.472 5 μg范围内,葛根素峰面积值与进样量呈良好的线性关系;回归方程为:y=4 047.36x-1.77,r=0.999 9;加样回收率为102.6%,rsd=0.98%(n=5)。
结论该法简便、准确、灵敏度高,可作为该品含量测定方法。
编辑。
关键词:高效液相色谱法;清热降糖颗粒;葛根素清热降糖颗粒处方由葛根等药材组成,具有滋阴清热,生津止渴作用。
主治糖尿病阴虚热盛重症,可降血糖,改善胰岛素抵抗。
用于咽干口燥,心烦畏热,渴喜冷饮,多食渴饥,溲赤便秘,舌红苔黄,脉细滑数等症。
葛根素是葛根的主要有效成分,因此采用高效液相法测定葛根素的含量,为控制本制剂质量提供实验依据。
1 器材1.2 试剂均为色谱纯。
1.3 试药葛根素对照品:由中国药品生物制品检定所提供(供含量测定用,批号:0752-9907);清热降糖颗粒由江苏省中西医结合医院制剂室提供。
2 方法与结果2.1 色谱条件zorbax sb-c18(ф4.6 mm×150 mm);流动相:甲醇-水(24∶76);流速:1.0 ml/min;检测波长:250 nm;柱温:30℃。
2.2 供试品溶液的制备取本品内容物适量,研细,精密称取0.25 g,加入30%乙醇溶解并定容至100 ml,精密量取1 ml,加30%乙醇定容至25 ml,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,即得。
2.3 对照品溶液的制备及标准曲线绘制2.3.1 对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品2.362 5 mg,置25 ml量瓶中,加30%乙醇至刻度,摇匀,精密量取2 ml,置10 ml量瓶中,加30%的乙醇至刻度,摇匀,即得。
2.3.2 标准曲线绘制精密吸取上述葛根素对照品溶液,加甲醇配成不同浓度的溶液。
葛根素吸光系数葛根素是一种天然的红色素,具有抗氧化、抗癌、降血压、降血脂等多种功效,是目前备受研究的新型生物活性物质之一。
葛根素吸光系数是指其在特定波长下的吸光度值,是衡量其纯度和浓度的重要指标。
以下为详细介绍:一、葛根素吸光系数的意义葛根素作为一种天然红色素,在食品、药品、化妆品等各个领域都有广泛的应用。
然而,由于其在产品加工过程中容易受到热、光、氧等因素的影响,导致其纯度和浓度下降,因此如何准确测定葛根素的含量显得十分必要。
而葛根素吸光系数则是一种测定葛根素含量的常用方法之一,具有快速、准确、便捷等优点。
二、葛根素吸光系数的测定方法测定葛根素吸光系数的方法主要有分光光度法和高效液相色谱法。
其中,分光光度法是目前比较流行的方法。
具体步骤如下:1. 取适量葛根素样品,加入适量的色谱纯水,制成10mg/L的葛根素溶液。
2. 将所得溶液分别置于1cm宽的量筒中,用紫外分光光度计在517nm 处测定其吸光度,记录数值。
3. 根据质量浓度关系式计算得到葛根素样品在517nm处的吸光系数。
三、葛根素吸光系数的数值葛根素吸光系数一般在517nm处测定,其参考值范围为12.5-37.5,具体数值还需根据实验条件和测定方法等因素而定。
需要提醒的是,在实际应用中,吸光系数数据往往会受到多种因素的影响,如溶液浓度、溶解度、温度、pH值等,因此需要科学合理的方法进行测定和比较。
四、结论葛根素作为一种营养保健品,其吸光系数的测定对于保证其纯度和浓度具有非常重要的意义。
通过分光光度法可测定得到葛根素在特定波长下的吸光度值,进而计算得到其吸光系数。
然而,需要注意的是,葛根素吸光系数的数值常受到多种因素的影响,因此在实际应用中需要格外小心。
葛根中葛根素的高效液相色谱分析【摘要】目的测定不同产地葛根中葛根素的含量。
方法用HPLC法测定,以MeOH-H2O-HAc(25∶75∶0.5)为流动相,250 nm为检测波长。
结果葛根素在0.026~1.95 μg与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8),平均回收率为97.3%,RSD为1.35%(n=5)。
结论该法简单、快速、准确,适用于葛根中葛根素含量的测定。
【Abstract】Objective Determination of Puerarin in the Redix Puerariae from different areas.Methods Puerarinwere determined by HPLC.The mobile phase wasMeOH-H2O-HAc(25∶75∶0.5).Detection wavelength was at 250 nm.Results The Puerarin curve showed good linear correlation within 0.026-1.95 μg(r=0.999 8).The average recovery of Puerarin was 97.3% with RSD of 1.35%(n=5).Conclusion The method is simple and can be used to determine Puerarin with quick and accurate.【Key words】Redix puerariae; Puerarin;HPLC葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的干燥根,是常用中药材,具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻功效,用于外感发热头痛、项背强痛、口渴、消渴、麻疹不透、热痢、泄泻、高血压颈项强痛等[1]。
现代研究证实,葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物,具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用,同时也有降低血压的作用。
XXXXXXXXX有限公司
一、目的:建立葛根药材、饮片的质量标准,确保投用药材、饮片的质量。
二、范围:本规定适用于葛根药材、饮片的质量控制。
三、责任:
四、内容:
1.标准来源
《中国药典》2015年版一部
2.技术要求
2.1葛根药材
2.2葛根饮片
3.贮存条件:置通风干燥处,防蛀。
4.相关标准操作规程:葛根检验操作规程(SOP-ZL-JG(YL)-127)、物料取样标准操作规程(SOP-ZL-QA-001)。
5.企业统一指定的物料名称:与2015年版《中国药典》一部一致。
6.内部使用的物料代码:1101213。
7.经批准的供应商:见合格供应商目录。
8.印刷包装材料的实样或样稿:无此项内容。
9.注意事项:防蛀。
10.复验期:执行“物料有效期及复验期管理规程(SMP-WL-008)”相关规定。
11.文件附件:共0份。
12.修订及变更历史:。
葛根质量标准及检验规程目的:明确葛根质量标准及检验规程。
范围:适用于葛根检验。
责任:检验员负责实施,质量管理部主管负责监督。
内容:1.产品名称及代码:葛根 R-1111.1标准依据:中国药典2010版一部p3121.2包装形式:袋装1.3供应商:1.4取样:照《原辅料、药材和饮片、包装材料取样标准操作规程》取样,应符合规定。
1.5有效期:12个月1.6企业内控质量标准:2.检验规程:2.1性状:取供试品于白色背景下,在自然光下观察外观、颜色,本品呈不规则的厚片、粗丝或边长为5~12mm的方块。
切面浅黄棕色至棕黄色。
质韧,纤维性强。
气微,味微甜。
2.2鉴别:2.2.1仪器、试剂、用具:甲醇、水饱和的正丁醇、拟人参皂苷F11对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品,人参Rg1对照品、硅胶G、三氯甲烷、乙酸乙酯、水、10%硫酸乙醇、日光灯、紫外灯等。
2.2.2.操作方法:2.2.2.1本品粉末淡棕色。
淀粉粒单粒球形,直径3~37μm,脐点点状、裂缝状或星状;复粒由2~10分粒组成。
纤维多成束,壁厚,木化,周围细胞大多含草酸钙方晶,形成晶纤维,含晶细胞壁木化增厚。
石细胞少见,类圆形或多角形,直径38~70um。
具缘纹孔导管较大,具缘纹孔六角形或椭圆形,排列极为紧密。
2.2.2.2①制备薄层板:称取硅胶G约30g,置研钵中,加100ml含羧甲基纤维素钠溶液,在研钵中按同一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入玻璃板上,轻晃玻璃板使其均匀,置水平台上于室温下晾干后,临用前在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。
②溶液的制备:供试品溶液的制备:取本品粉末0.8g,加甲醇10ml,放置2小时,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备:精密称取葛根对照药材0.8g,加甲醇10ml,放置2小时,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇0.5ml使溶解,作为对照药材溶液。
对照品溶液的制备:取葛根素对照品约10mg,置10ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
药物研究 The medicine study 中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy ・13・
颈痛舒口服液中葛根素含量测定方法的研究 许广华。李小伟 韩双。 安徽省太和县中医院,安徽太和236608
【摘要】 目的:建立颈痛舒口服液中葛根素含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以甲醇一水(27:73)为流动相:检测 波长:250nm;流速:1.0ml/min;柱温:30"(2。结果:葛根素在0.2808~2.808 ̄g范围呈良好的线性关系,平均回收率97.6%,RSD= 1.32(n=6);结论:定量测定方法简单、准确,重复性、稳定性良好,精密度高,结果可靠,可作为颈痛舒口服液质量控制的方法,以 提高该药的质控水平,更好的发挥其l 床疗效,更好地服务于病人。 【关键词】 高效液相色谱法;颈痛舒口服液;葛根素 【中图分类号】R286 【文献标志码】A 【文章编号】1007—8517(2014)07—0013—02
葛根为豆科植物野葛或甘葛藤的干燥根,为中风常用 的祛风解毒药之一,具有解肌,升阳透疹,解热生津等功 效…,制剂处方中主药葛根的有效成分为葛根素、黄豆苷、 黄豆苷元等黄酮类成分,其中葛根素的含量最高。颈痛舒 口服液来自于我院推拿科主任、副主任医师朱向阳的经验 方,在长期给予颈椎病患者治疗过程中,除用推拿牵引等 非药物治疗的同时服用颈痛舒口服液,以缓解病人因气血 不足,而引起的头痛、头晕、手臂麻木、酸痛、活动不利 等症状。为了有效控制该药品的质量,根据新药审评有关 规定,本文建立了测定颈痛舒口服液中葛根素含量的高效 液相色谱法,结果分离度好、重现性好、灵敏度高,可作 为控制颈痛舒口服液质量的方法 。 1仪器 北京普析I_6一DP6型高效液相色谱仪(生产厂家:北 京普析通用设备科技有限公司);101—1A型数显恒温干燥 箱(生产厂家:上海光地仪器设备有限公司);AL一120型 电子天平(生产厂家:瑞士梅特勒一托利多仪器公司);ZF
葛根含量测定方法(葛根素)
葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根。2005版《中国药典》一部采
用高效液相色谱法测定其葛根素的含量。
一、高效液相色谱法
2005版《中国药典》葛根含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(25:75)
为流动相;检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不得低于4000。
供试品溶液的制备:取本品粉末约0.1g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入30%乙醇50ml,
称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用30%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,
取续滤液,即得。
HPLC法测定葛根及其制剂中葛根素的含量时,使用最多的流动相系统为甲醇-水系统,
另外还有甲醇-水,加醋酸调节pH等。
A:以甲醇-水为系统的,常见的比例及实验条件为:
①Waters2695/ 2996/ Empower 色谱系统;色谱柱Symmetry C18 柱( 3.9mm×150mm, 5
μm);流动相:甲醇-水(25:75);DAD检测波长254nm;柱温35℃。
②SP8800 型高效液相色谱泵;Hypersil ODS (4.6mm×250mm,5μm大连依利特科学有
限公司);流动相:甲醇-水(30:70);柱温40℃;检测波长250nm。
③Waters高效液相色谱仪;十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);甲
醇-水(40:60)为流动相;检测波长为250nm;柱温30℃。
④美国Spectra-Physics 液相色谱仪;色谱柱Lunm C18 (150mm×4.6mm, 5μm ) 不锈
钢柱(美国Phenom enex 公司);流动相为甲醇-水(28:72);检测波长250nm;柱温30℃。
B:乙腈-水系统:
①LC-10ATvp高效液相色谱仪;Hypersil ODS 色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);乙腈-水
(15:85)为流动相;检测波长250nm。
②TSP 高效液相色谱仪;色谱柱Turner C18H37(5μm,4.6mm×150mm);流动相:乙
醇-水(43:207);柱温30℃;检测波长250nm。
C:加酸调节的,如:
①LC-10A高效液相色谱仪;色谱柱为ODSC18柱(5μm,4.6mm×150mm);流动相为甲醇
-水(35:65),内含0.01%醋酸;柱温35℃;检测波长251nm。
②SP-8800高效液相色谱仪;色谱柱ODS-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇
-1.4%醋酸溶液( 22:78 );柱温室温;测定波长: 250nm。
③美国Beckman公司高效液相色谱仪;Hypersil ODS柱(2.5μm,4.6mm×250mm);流
动相为甲醇-氯仿-1.5%冰醋酸(22:1:77);检测波长250nm。
④SP1000 高效液相色谱泵;色谱柱YMC C18不锈钢柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:
甲醇-水醋酸(42∶100:0.2);检测波长250nm;柱温:室温。
其它如:吕竹芬等测定心血宁滴丸中葛根素的含量,采用高效液相色谱法,Dikma
piamonsil C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),以甲醇-乙腈-水(30:2 :65)为流动相,流速
为1.0mL/min,检测波长250nm。
颜春华等测定脑得生片中葛根素的含量,采用日本岛津LC-4A高效液相色谱仪;色谱柱
DiamonsilTM (钻石) C18(200mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇-0.1%枸橼酸溶液(5:
25:75);紫外检测波长250nm;柱温室温。
制备样品溶液时,一般以30%乙醇、50%乙醇、乙醇、甲醇、流动相或盐酸溶液(9→1000)
等为溶剂,采用超声法提取。
二、其它
杨振林等测定葛根冲剂中葛根素含量,采用薄层- 紫外分光光度法,751GD 型分光光度
计(上海分析仪器总厂)。薄层层析硅胶G板,以氯仿-甲醇-水(7:28:0.2)为展开剂,在紫外
灯(365nm)下定葛根素位置,刮下斑点,用甲醇洗脱,测定波长为251±1nm。
崔小兵等测定通脉颗粒剂中葛根素及阿魏酸的含量,采用双波长(λ1= 250nm ,λ
2=313nm) 梯度洗脱法。Waters 2690 型高效液相色谱仪;色谱柱Kromasil C18柱(4.6mm×
250mm,5μm);柱温为30℃,甲醇-1%醋酸水梯度洗脱;检测波长为250nm;柱温30℃。
方崇波等采用离子络合紫外分光光度法测定葛根素及其制剂的含量,采用UV4/2401 紫
外分光光度计(岛津)。方法::在pH=4.0条件下,葛根素和Al3+形成络合物,在339.8 nm波
长处通过测定吸收度的改变来测定含量。