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COX2-PGE2调节肿瘤的发生和发展机制研究进展张翅腾;王毅【摘要】前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)是体内的一种花生四烯酸代谢产物,它与机体的发热、炎症反应和细胞生长及分化等生理活动密切相关.环氧化酶2(Cyclooxygenase 2,COX2)是PGE2合成的主要限速酶,主要在细胞因子、生长因子等促炎症因素作用下产生.近年来的一些研究发现COX2-PGE2信号通路与多种类型的肿瘤细胞的增殖和转移有关,然而,其具体机制尚未完全清楚,目前的研究提示其在不同的肿瘤细胞中可能具有不同的作用机制.针对COX2-PGE2通路调节肿瘤细胞生长的机制的研究对深入了解肿瘤的发生和发展具有重要的意义,并有望为抗肿瘤药物的研发提供一个新靶点.【期刊名称】《西南军医》【年(卷),期】2018(020)001【总页数】4页(P50-53)【关键词】前列腺素E2;肿瘤;环氧合酶2【作者】张翅腾;王毅【作者单位】421000 湖南衡阳,南华大学附属第二医院泌尿外科;421000 湖南衡阳,南华大学附属第二医院泌尿外科【正文语种】中文【中图分类】R73.34恶性肿瘤是21世纪威胁人类健康最重要的因素之一，每年至少有800万人死于恶性肿瘤。
预计在下一个20年内，全球每年新发癌症病例数将由2012年的1400万上升到2200万。
正因如此，恶性肿瘤的发生与治疗也成为了本世纪医学研究最热门的课题之一。
随着肿瘤发病机制研究的深入以及临床治疗方案的不断改进，人类已经在肿瘤的预防和治疗方面取得了很大的进步。
但是目前临床普遍应用的肿瘤治疗方案，包括各类手术切除、放疗和/或化疗等的疗效都在很大程度上依赖肿瘤的早期诊断。
然而，在实际临床工作中，大多数癌症患者就诊时已经处于肿瘤的中晚期，目前所用的常规治疗方案只能维持较短的生存期限(一般小于5年)。
因此，我们迫切的需要进一步明确肿瘤发生及发展的相关机制，并研发出更为有效的抗肿瘤药物。
FGFR2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义的开题报告引言：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发生与进展可能涉及多种信号途径和分子变化。
近年来，一些研究表明FGFR2（成纤维细胞生长因子受体2）是一个潜在的乳腺癌靶点。
本文试图探讨FGFR2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义，为深入了解乳腺癌的病理生物学机制和寻找新的治疗策略提供参考。
研究背景：FGFR2是一种膜受体，作为成纤维细胞生长因子（FGF）信号通路的重要组成部分，参与了很多细胞的增殖、分化、迁移和存活等生理过程。
过去几年中，多项研究发现FGFR2在乳腺癌中的异常表达与细胞增殖、侵袭、转移以及预后等方面存在密切关系。
研究目的：本文旨在分析FGFR2在乳腺癌组织中的表达水平和临床意义，为深入了解乳腺癌的发生和发展机制提供新思路，同时为寻找更为精准有效的治疗策略提供参考依据。
研究方法：1.文献调研：通过检索PubMed、Web of Science和CNKI数据库等，收集并筛选出FGFR2与乳腺癌相关的研究文献，并进行分析和综合总结。
2.实验设计：对患有乳腺癌的患者进行组织样本收集和FGFR2表达检测，同时对相应的临床资料进行记录和统计分析，以探究FGFR2在乳腺癌中的表达和其与临床特征的相关性。
研究结果：临床研究发现，FGFR2在乳腺癌组织中明显上调，与Myc和Bcl-2等增殖和抗凋亡相关基因的表达协同作用，表明FGFR2是一个与乳腺癌细胞生长和存活密切相关的关键分子。
对FGFR2高表达患者的临床资料分析发现，其在TNM分期、淋巴结转移、ER/PR表达和患者预后等方面均存在显著差异（P<0.05），提示FGFR2可能是乳腺癌的一个潜在预后标志物。
研究结论：FGFR2在乳腺癌中的异常表达与乳腺癌细胞的增殖、侵袭和预后等方面密切相关。
深入了解FGFR2对乳腺癌发生发展所起的作用及其下游信号通路有望帮助寻找新的治疗策略，提高乳腺癌的治疗效果和患者的生存质量。
brca2基因突变位点BRCA2基因突变位点是指BRCA2基因中出现的突变，这些突变位点可以影响基因的功能，导致遗传性乳腺癌和卵巢癌等恶性肿瘤的发生。
BRCA2基因是人类体内一种重要的抑癌基因，它位于第13号染色体上，编码一种蛋白质，可以参与细胞DNA修复、细胞凋亡和细胞周期调控等多种生物过程。
BRCA2基因突变位点主要有以下几类：1.错义突变：指由于单个核苷酸改变而导致氨基酸序列发生改变。
这些突变可能会影响蛋白质结构和功能。
2.无义突变：指由于单个核苷酸改变而导致密码子转化为终止密码子。
这些突变会导致蛋白质合成提前终止，从而影响其功能。
3.插入/缺失：指在BRCA2基因中插入或删除一个或多个核苷酸。
这些突变会导致DNA序列发生改变，进而影响蛋白质合成和功能。
4.剪切位点突变：指BRCA2基因中的剪切位点发生突变，导致mRNA的剪切出现异常，从而影响蛋白质合成。
BRCA2基因突变位点与遗传性乳腺癌和卵巢癌密切相关。
研究表明，BRCA2基因突变位点是导致遗传性乳腺癌和卵巢癌的主要原因之一。
在BRCA2基因突变携带者中，乳腺癌和卵巢癌的发生率明显高于普通人群。
此外，BRCA2基因突变还与其他类型的恶性肿瘤如胰腺癌、前列腺癌、胆囊癌等有关。
目前，针对BRCA2基因突变的检测已经成为了临床上预防和治疗乳腺癌和卵巢癌的重要手段之一。
通过检测患者是否携带BRCA2基因突变位点，可以预测其患乳腺癌或卵巢癌的风险，并采取相应措施进行预防或治疗。
总之，BRCA2基因突变位点是引起遗传性乳腺癌和卵巢癌的重要原因之一。
了解BRCA2基因突变位点的类型和影响，有助于预测患者患病风险，并采取相应的预防和治疗措施。
乳腺癌的分子生物学特征研究乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着女性的健康和生命。
近年来，随着分子生物学技术的不断发展，对乳腺癌的研究逐渐深入到分子水平，为乳腺癌的诊断、治疗和预后评估提供了重要的依据。
乳腺癌的发生和发展是一个复杂的多步骤过程，涉及多个基因和分子通路的异常改变。
其中，一些关键的分子生物学特征包括基因突变、基因扩增、基因缺失、表观遗传学改变以及蛋白质表达异常等。
基因突变是乳腺癌发生的重要原因之一。
例如，BRCA1 和 BRCA2基因的突变与家族性乳腺癌的发生密切相关。
携带这些基因突变的女性患乳腺癌的风险显著增加。
此外，TP53 基因的突变在乳腺癌中也较为常见，其突变可能导致细胞的生长和凋亡调控失衡，促进肿瘤的发生和发展。
基因扩增也是乳腺癌中常见的分子事件。
HER2 基因的扩增是乳腺癌中一个重要的分子特征，约 15% 20% 的乳腺癌患者存在 HER2 基因扩增。
HER2 基因扩增会导致 HER2 蛋白的过度表达，与肿瘤的侵袭性和不良预后相关。
针对 HER2 阳性的乳腺癌患者，靶向治疗药物如曲妥珠单抗等取得了显著的疗效，显著改善了患者的生存。
基因缺失在乳腺癌中同样具有重要意义。
例如，PTEN 基因的缺失在乳腺癌中较为常见，其缺失可能导致 PI3K/AKT/mTOR 信号通路的异常激活，促进肿瘤细胞的生长、存活和转移。
表观遗传学改变在乳腺癌的发生和发展中也发挥着重要作用。
DNA 甲基化是一种常见的表观遗传学修饰，在乳腺癌中，一些抑癌基因如RASSF1A 等的启动子区域常发生高甲基化，导致基因表达沉默，促进肿瘤的发生。
组蛋白修饰也是表观遗传学改变的重要形式，如组蛋白乙酰化和甲基化的异常，可能影响染色质的结构和基因的表达。
蛋白质表达异常在乳腺癌中也非常普遍。
雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的表达状态是乳腺癌治疗和预后评估的重要指标。
ER 和PR 阳性的乳腺癌患者通常对内分泌治疗敏感，预后相对较好。
塞来昔布预防大鼠乳腺癌发生及其机制康华峰;王西京;刘小旭;代志军;薛锋杰;薛兴欢【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2006(26)11【摘要】目的观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(DMBA)化学诱发的大鼠乳腺癌形成的影响.方法 DMBA油剂灌胃复制大鼠乳腺癌模型,90只大鼠分为3组:单纯诱癌组作为阴性对照、三苯氧胺组作为阳性对照和塞来昔布组,观察塞来昔布对大鼠乳腺肿瘤发生率和COX-2、VEGF蛋白表达的影响.结果三苯氧胺组(48.15%)和塞来西布组(50.00%)肿瘤发生率明显低于单纯诱癌组(85.71%),差异具有显著性(p=0.003;P=0.004).塞来昔布组COX-2蛋白表达率(28.57%)低于单纯诱癌组(83.33%)和三苯氧胺组(69.23%),差异具有显著性(P=0.001;P=0.035).塞来昔布组VEGF蛋白表达率(42.86%)低于单纯诱癌组(79.17%)(P=0.023);和三苯氧胺组(46.15%)无显著性差异(P=0.863).结论塞来昔布能抑制DMBA诱发的大鼠乳腺癌的发生、发展,下调COX-2和VEGF蛋白表达可能是其机制之一.【总页数】4页(P1599-1602)【作者】康华峰;王西京;刘小旭;代志军;薛锋杰;薛兴欢【作者单位】西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,陕西,西安,710004【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.塞来昔布在MRMT-1大鼠乳腺癌骨转移性癌痛模型的作用机制探讨 [J], 王日雄;施烯;林学德;林建华2.三苯氧胺联合塞来昔布预防大鼠乳腺癌发生的实验研究 [J], 康华峰;王西京;刘小旭;代志军;薛锋杰;薛兴欢3.大豆异黄酮和塞来昔布预防大鼠乳腺癌的发生 [J], 杨定勇;赵之婧;覃春阳;杨立民4.大豆异黄酮和塞来昔布预防大鼠乳腺癌的发生 [J], 杨定勇;赵之婧;覃春阳;杨立民;5.塞来昔布对大鼠化学性乳腺癌的抑制作用及机制 [J], 康华峰;王西京;刘小旭;代志军;薛锋杰;薛兴欢因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
单核苷酸多态SNP人类基因组计划研究成果表明，不同个体的基因都是一样的但在序列上有极小的遗传差异,即遗传多态(genetic polymorphism)，其中最主要的是单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism, SNP)。
所谓单核苷酸多态是指特定的核苷酸遗传变异在人群中出现频率大于1%，它与“种系突变(germline mutation)”在概念上的区别在于种系突变在人群中出现的频率远远<1%。
一般来说，种系突变存在于引起稀有遗传性疾病的基因编码序列，而SNP存在于整个基因组且出现的频率约为每600个碱基对左右就有1个SNP。
人类基因组中至少有300万个SNP。
研究表明，基因编码序列的SNP往往引起基因产物氨基酸的改变；非编码序列的SNP可影响基因表达水平。
所以，这些功能性SNP可造成不同个体对疾病特别是慢性复杂性疾病易感性和对药物治疗反应性的差异。
近10年来，国内外学者在研究SNP与肿瘤易感性方面进行了大量的探索，并发现一些多态等位基因与常见肿瘤易感性相关。
概括而言，这些基因主要包括：(1)致癌物代谢酶基因，(2)DNA修复基因，(3)针对感染原的免疫反应相关基因，(4)细胞凋亡和周期调控基因。
最近，SNP尤其是药物通路基因的SNP与肿瘤化疗和放疗敏感性以及毒副作用的关系也成为研究的热点。
因为SNP是性质稳定的DNA水平的生物标志、可用外周血淋巴细胞检测而取材容易、检测方法相对简单经济，所以学者们正在积极探讨利用SNP作为预测肿瘤发生和发展以及疗效和预后的生物标志的可能性。
单核苷酸多态作为肿瘤易感性标志代谢酶基因多态与肿瘤易感性大多数环境致癌物需经过代谢激活后才有致癌作用，而代谢也可以使致癌物失去活性。
因此，个体对致癌物作用的敏感性取决于代谢激活和代谢解毒的平衡。
激活活性高而解毒活性低的人可能处于易感状态，相反则可能处于低风险状态。
参与代谢内源性和外源性化学物质的代谢酶在人群中分布呈多型性，即酶的活性有很大的个体差异。
1PART 什么是乳腺癌易感基因这是两种直接与乳腺癌有关的基因，分别命名为乳腺癌基因1号和乳腺癌基因2号，英文简称BRCA l和BRCA2。
它们都是抑癌基因，正常情况下能够抑制肿瘤，特别是乳腺癌的发生。
2PART 为什么要做乳腺癌易感基因检测人体的BRCA 基因发生突变，其抑制肿瘤的功能就丧失了。
这部分高危人群一生之中患乳腺癌的风险远高于常人。
据调查统计 显示女性BRCA1突变携带者一生中发生乳腺癌的风险达50-85%，并且突变携带者平均乳腺癌诊断年龄比一般人群要提早20多年。
有BRCA2基因突变者，患乳腺癌的风险达50%-85%。
在女性乳腺癌患者中，有33%-86%的患者被检测出有BRCA2基因突变。
乳腺癌已经成为女性最常见的恶性肿瘤之一。
全国肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位。
女性乳腺癌发病率（粗率）全国合计为42.55/10万城市为51.91/10万农村为23.12/10万通过检测，我们能够做到：·明确自身患癌风险·对高危人群采取针对性体检和干预措施·在日常生活中有效预防·阻止病情发展于萌芽阶段地址：安徽省合肥市环湖东路107号安徽省肿瘤医院未携带BRCA1/2突变的女性人群，其风险约为10%普瑞迈德医学检验所，提供专业的乳腺癌易感基因检测服务，实现乳腺癌易感基因的精准检测。
3PART 血液检测服务4PART哪些人有必要做乳腺癌易感基因检测5PART 检测的流程6PART 如何看待检测结果·全面 覆盖绝大部分与乳腺癌和卵巢癌相关的BRCA1/2异常位点·准确 PCR检测技术是目前最先进的基因检测技术·可靠 经国内外多个临床试验证实·权威 BRCA1/2检测获NCCN、FDA、ASCO等美国权威机构批准和推荐检测优势血缘亲属中已有易感基因突变者或有乳腺癌家族史的女性月经初潮过早（12岁以前）闭经过迟（52岁以后）40岁以上未孕或第一胎足月产在35岁以后曾患有乳腺增生、卵巢囊肿或功能性子宫出血的女性有过多的X线胸透或胸片检查史者肥胖患者、糖尿病者、长期大量使用外源性雌激素者有烟酒不良嗜好、生活不规律、心理压力巨大、有巨大精神创伤者在体检中心/门诊开单检测血液BRCA1/2基因检测3400元/次采血5ml 检测报告将会在10个工作日内完成申请登记1检测 出报告33专家解读4样本采集2·检测结果应该由专业医生结合受检者个人健康状况和其家族史综合分析，并为受检者进行解读。
Shp2蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义的开题报告
1. 论题背景
Shp2蛋白是一种重要的酪氨酸磷酸酶，参与多种生物过程，包括细胞增殖、分化、转移、凋亡等。
近年来，Shp2蛋白在乳腺癌中的表达及
临床意义引起了研究人员的广泛关注。
本文旨在通过文献研究，探讨
Shp2蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义。
2. 研究内容
2.1 Shp2蛋白在乳腺癌中的表达
Shp2蛋白在正常乳腺组织中表达较低，而在乳腺癌组织中表达明显升高。
一些研究还发现，Shp2蛋白表达水平与乳腺癌临床分期、转移和
预后密切相关。
2.2 Shp2蛋白在乳腺癌中的作用机制
在乳腺癌细胞中，Shp2蛋白参与了许多信号通路的调控，包括ERK、PI3K/AKT、JAK/STAT等。
这些通路的异常激活与乳腺癌的发生、转移密切相关，而Shp2蛋白则能够通过调节这些信号通路，促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。
2.3 Shp2蛋白在乳腺癌治疗中的应用前景
由于Shp2蛋白在乳腺癌中的作用机制，已经成为研究新的治疗策略的重要靶点。
一些研究已经发现，通过靶向Shp2蛋白能够有效地抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭，为乳腺癌的治疗提供了新的思路。
3. 结论
Shp2蛋白在乳腺癌中的表达与乳腺癌的发生、转移和预后密切相关。
通过调控多种信号通路，Shp2蛋白促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。
此外，靶向Shp2蛋白也有望成为乳腺癌治疗的新策略。
因此，进一步深
入研究Shp2蛋白在乳腺癌中的作用机制和治疗前景，对于提高乳腺癌的预后和治疗效果具有重要意义。
乳腺癌基因检测的意义与应用引言：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，但也有男性患者。
早期发现和治疗乳腺癌至关重要，而基因检测成为了一个新兴的诊断手段。
本文将探讨乳腺癌基因检测的意义以及其在临床中的应用。
一、基因检测的定义与原理1. 基因检测的定义：基因检测通过分析个体DNA序列或表达水平，来评估个体患某种遗传性疾病或可能会发生的疾病风险。
2. 基因检测的原理：基因检测主要采用PCR、DNA芯片和高通量测序等技术，通过检查特定的基因突变、拷贝数变异和抗体水平等指标，来推断是否存在相关风险。
二、乳腺癌基因检测涉及的重要基因1. BRCA1和BRCA2基因：这两个基因是乳腺癌中最重要的高风险突变基因。
人们携带这些突变时，罹患乳腺癌的风险显著增加。
2. PALB2基因：PALB2基因突变也与乳腺癌有很强相关性。
三、乳腺癌基因检测的意义1. 早期筛查和预防：通过乳腺癌基因检测，可以早期发现患者是否携带高风险基因突变，并采取相应防范措施。
比如，切除受影响组织、定期进行乳腺核磁共振检查等。
2. 患者管理和治疗：通过乳腺癌基因检测，可以预测患者对特定治疗方法的疗效及其副作用。
根据结果，医生可以制定个性化的治疗方案，提高治愈率并减少不必要的副作用。
3. 家族遗传咨询：对于家庭中已发生过患者的家庭成员来说，通过乳腺癌基因检测可以更好地评估个人罹患该病的风险，为他们提供改善生活方式、早期监测甚至手术预防等建议。
四、乳腺癌基因检测的应用1. 高风险人群筛查：对于具有家族乳腺癌史或者其他相关因素的人群，建议进行基因检测，以便早期发现高风险患者。
2. 诊断与预后：在已确诊患者中，通过基因检测可以进一步确定治疗方案，并判断预后情况。
例如，基因检测结果可以帮助决定是否需要行化疗等措施。
3. 新药开发和临床试验：基于个体基因信息，乳腺癌的治疗正在朝着个体化方向不断发展。
个体化治疗不仅提高了患者的生存率，还为乳腺癌新药的开发提供了重要依据。
COX-2选择性抑制剂塞来昔布对裸鼠荷人子宫内膜腺癌的抑制作用肖义涛;罗来敏;张睿【期刊名称】《肿瘤防治研究》【年(卷),期】2010(0)1【摘要】目的探讨环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人子宫内膜腺癌的治疗作用及其机制。
方法建立人子宫内膜腺癌HEC-1B细胞裸鼠荷瘤模型,待成瘤后随机分为对照组与实验组,对照组予生理盐水口服2周,实验组分别予塞来昔布4mg/d和2mg/d口服2周。
从治疗开始每3天计算瘤体积一次,描绘肿瘤生长曲线,治疗结束后处死裸鼠剥除瘤组织,计算抑瘤率,采用RT-PCR 法测定移植瘤组织COX-2mRNA的表达、免疫组化法测定COX-2蛋白的表达和微血管密度(MVD)。
结果塞来昔布对裸鼠皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用,且随着药物浓度的增加,抑瘤作用逐渐增强(抑瘤率分别为32.4%和48.6%),RT-PCR结果显示移植瘤组织COX-2mRNA的表达逐渐减弱,免疫组化结果显示移植瘤组织COX-2蛋白的表达及微血管密度(MVD)逐渐减少,实验组与对照组之间及各实验组之间的差异均有统计学意义(P<0.05),COX-2蛋白的表达与MVD数量呈正相关(r系数为0.921,P<0.01)。
结论COX-2选择性抑制剂塞来昔布能够抑制裸鼠荷人子宫内膜腺癌的生长,其机制可能与降低COX-2的表达、减少微血管的生成有关。
【总页数】4页(P26-29)【关键词】环氧化酶-2;塞来昔布;子宫内膜腺癌;微血管密度【作者】肖义涛;罗来敏;张睿【作者单位】上海交通大学附属第六人民医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R737.33【相关文献】1.COX-2选择性抑制剂塞来昔布联合PPAR-γ配体罗格列酮治疗子宫内膜癌的实验研究 [J], 冯振中;武世伍;李楠;蔡兆根;吕秀红;陈嘉薇2.COX-2抑制剂联合放疗对人乳腺癌裸鼠移植瘤作用的研究 [J], 梁娜;张树友;王辉;牛国梁3.选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对人肺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用研究 [J], 陈健;毕艳丽;仇容;徐麟皓;钱佳红;杨玉秀4.塞来昔布增强阿霉素对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用 [J], 涂宏; 杨丝丝; 何葵; 杨文军; 万剑; 周玖桥5.环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用 [J], 刘江伟;张东辉;许永华;李开宗;窦科峰;张东;冯德元因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
http://www.paper.edu.cn - 1 - 环氧化酶2(COX-2)基因功能多态性与中国人群乳腺癌危险性关系的研究1
高君1，柯巧1，马红霞1，王艳1，胡志斌1，翟祥军1，王雪晨2，秦建伟3，陈文森1，靳光付1，刘继勇1，王心如1，魏庆义4，沈洪兵1
1南京医科大学流行病与卫生统计学系，南京（210029） 2南京市鼓楼医院外科，南京（210008） 3江苏省肿瘤医院乳腺外科，南京（210009） 4 M. D. Anderson肿瘤中心流行病系，休斯顿（77030） E-mail：hbshen@njmu.edu.cn 摘 要：环氧化酶（Cyclooxygenase）是前列腺素（Prostaglandins，PGs）合成的限速酶，至少有两种同工酶, 即COX-1和COX-2。在肿瘤发生中起着重要作用，COX-2过度表达能够促进细胞增殖、抑制凋亡和促进乳腺癌细胞侵袭。COX-2功能性多态改变可能改变个体对乳腺癌的易感性。本研究中对COX-2的三个多态位点(启动子区的-1195G/A、-765G/C和in 3’UTR区的8473C/T)与中国人群乳腺癌遗传易感性的关系进行了研究。我们的病例对照研究中包括615例病理学明确诊断的乳腺癌病例和643例无癌对照，以年龄进行频数匹配。Logistic回归分析显示， COX-2三个多态性位点单位点分析未发现与乳腺癌危险性的关联。但是，以携带0-3个突变等位基因者为参照，我们发现携带3个以上突变等位基因的个体患乳腺癌的风险显著增加（调整OR =1.36，95%CI=1.01-1.83）。单倍型分析发现与常见的单倍型G-1195G-765T8473相比单倍型A-1195G-765T8473和A-1195C-765T8473可以显著提高个体患乳腺癌的
风险（OR值及95%可信区间分别为1.20（1.01-1.43）和9.16（1.14–73.51））。研究结果提示提示COX-2基因调控区域的这三个单核苷酸多态可能参与乳腺癌的病理进程。 关键词：环氧化酶2（COX-2），基因多态性，乳腺癌，分子流行病学 中图分类号：R18
1．引言 环氧化酶（Cyclooxygenase ，COX）也叫做前列腺素内过氧化物合酶（prostaglandin endoperoxide synthases ，PTGs），是花生四烯酸代谢过程中前列腺素合成的限速酶。前列腺素（Prostaglandins，PGs）在多种生理和病理进程中发挥了重要作用，包括：炎症、细胞增殖和血管生成等，这些在肿瘤的发生发展中也起了关键性作用[1-3] 。COX至少有两种同工
酶, 即COX-1和COX-2。COX-1是结构型酶，体内大多数影响PG合成的正常组织都可表达。而COX-2是诱导型酶，在大多数正常组织中都不表达，但在生长因子、细胞因子、内毒素、激素、促肿瘤剂及癌基因等多种刺激因素的作用下可迅速诱导其表达[4-6]。COX-2过度表达能够促进细胞增殖、抑制凋亡和促进新生血管生成[2,7-8]。近年来研究发现，COX-2在多种肿
瘤中呈过度表达[9-13]， 包括乳腺癌[14-16]。Denkert等[17]报道COX-2过度表达与乳腺癌的淋巴结转移、低分化程度、肿瘤大小有关。另外，众多研究包括流行病学研究[18-20]和动物实验[21,22]
证明了定期服用非甾体类抗炎药（NSAIDs）能够预防乳腺癌的发生，其主要机制通过抑制COX-2的作用。 转录水平上的调控是COX-2基因调控表达和稳定性的主要机制[23]。Mestre等[24,25]报道
COX-2基因的启动子区包含了多种转录因子结合位点，例如：CRE（cAMP应答启动子元件）以及Sp1、NF-κB、c-MYB等因子结合位点。因此， COX-2基因启动子区的多态性改变可能潜在地影响某种因子的结合，改变基因的转录活性，进而影响环氧化酶的表达[26-28]及肿瘤的
1本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金（20040312006）的资助。 http://www.paper.edu.cn - 2 - 发生。张雪梅等[28]发现，在COX-2基因启动子区-1195G→A的多态性改变产生了一个c-MYB转录因子结合位点，增强了COX-2基因的转录活性。并且在中国人群的病例对照研究中证实了-1195G/A和启动子区的另一个单核苷酸多态-765G/C与食管癌的遗传易感性密切相关。有研究 [26.27]认为启动子区的-765G/C是一个潜在的功能性位点，G→C的突变消除了一个Sp1结
合位点，但是产生了一个E2F结合位点，进而导致环氧化酶2表达的增加或减少。另外，有研究表明鼠类COX-2基因的33’端非编码区含有一些调控序列，可以改变mRNA的稳定性以及翻译效率[29] ，因此这对于mRNA的降解、稳定和翻译很重要[30]。所以，COX-2基因的3’端非编码区的多态改变可能会改变调控因子的亲和力而影响COX-2的表达，进而影响个体对癌症（包括乳腺癌）的易感性 [31-33]。
在本研究中，我们假设COX-2基因的启动子区两个多态(-1195G/A、-765G/C)和3’端非编码区的单核苷酸多态(8473C/T)可能单独或/和联合与乳腺癌的遗传易感性有关。为了验证这个假设，我们通过病例对照研究（615例乳腺癌病例和643例频率匹配的无癌对照），对COX-2 -1195G/A、-765G/C和8473C/T三个多态性与中国人群乳腺癌遗传易感性的关系进行研究。
2．材料和方法 2.1 研究对象 研究包括615例乳腺癌病例和643例频率匹配的无癌对照。病例为2004年1月至2005年3月在江苏省人民医院、江苏省肿瘤医院、南京市鼓楼医院、东南大学附属中大医院收治的新发乳腺癌患者。所有患者都为无亲缘关系的南京市及其周边地区汉族人群，经病理组织学确诊。剔除标准包括既往癌症史，其他组织转移癌症和有既往放⁄化疗史。对照是从江苏省社区慢性非传染性疾病筛查的人群（共10,500个对象）中随机挑选的，根据病例的城乡（城市或农村）和年龄（±5岁）分布进行频数匹配，为无乳腺肿瘤和其它肿瘤患病史的健康女性。研究对象签署知情同意书后，由经过统一培训的调查员使用统一的调查表，对全部调查对象进行面访问卷调查，内容包括一般情况、月经及生育史、与生殖相关的生活方式、环境暴露史和一级亲属肿瘤家族史（父母、同胞和孩子）。调查后，每位研究对象提供5ml的静脉血液标本。
2.2 基因型检测 染色体DNA是从外周血白细胞中提取的,按照蛋白酶K消化然后酚－氯仿提取和乙醇沉淀的标准程序。参照文献[28,34]设计COX-2 -1195G/A、-765G/C 和8473C/T的扩增引物，序列如下: −1195G/A F, 5′-ccctgagcactacccatgat-3′, R, 5′-gcccttcataggagatactgg-3′; −765G/C F, 5′-tattatgaggagaatttacctttcgc-3′, R, 5′-gctaagttgctttcaacagaagaaat-3′; and8473C/T F, 5′-gtttgaaattttaaagtacttttgat-3′, R, 5′-tttcaaattattgtttcattgc-3′. 20µlPCR扩增反应体系包括：约50 ngDNA、12.5 pmol引物、0.1 mM dNTP、 1 × PCR buffer (50 mM KCl,10 mM Tris-HCl和0.1% Triton X-100, pH 9.0,) and 1 U Taq酶。8473C/T位点的MgCl2浓度是1.8 mM，而−1195G/A和
-765G/C的是1 mM。PCR扩增循环包括95°C预变性5min，接着进入循环；95°C变性30s；然后按COX-2 -1195G/A、-765G/C 和8473C/T位点，分别以61°C、54°C及53°C退火40s; 接着72°C延伸45s，2-4步骤循环35次后72°C延伸10min。分别用内切酶PvuII, HhaI和BclI (New England BioLabs, Beverly, MA)来辨别−1195G/A,−765G/C和8473C/T基因型。虽然一些基因型缺失或者由于某些DNA质量和⁄或数量问题导致分型失败，但是每个位点仍然达到了95%的应答率。最终，本研究成功获得601例乳腺癌病例和643例对照的三个多态性位点的所有基因http://www.paper.edu.cn - 3 - 型。 2.3 统计方法 采用χ2 检验（分类变量）或/和t 检验（连续变量）比较病例和对照间人口学特征、乳
腺癌发病相关因素及COX-2多态位点变异等位基因频率的分布，采用单因素和多因素logistic回归分析计算优势比（odds ratio, OR）及其95%可信区间（confidence interval, CI）表示各多态性位点变异基因型与野生纯合型比较致乳腺癌的相对危险度。采用分层分析法控制混杂因素对分析结果的影响。采用拟合优度χ2 检验计算对照组的基因型分布是否符合
Hardy-Weinberg平衡，采用PHASE 2.0 软件推算COX-2三个多态位点单倍型频率在病例和对照组中的分布。所有的统计检验均为双侧概率检验，P<0.05为差异有统计学意义。所用统计软件为SAS9.1.3版。
3．结果 研究对象的一般特征如表1所示。病例组和对照组的平均年龄差异无显著性。病例组的月经初潮年龄显著低于对照组，而首胎活产年龄则显著高于对照。而且产次、流产和肿瘤家族史在病例组和对照组之间的分布差异有显著性（表1）。 COX-2 -1195G/A、-765 G/C 及8473C/T各种基因型在病例组和对照组中的分布见表2。在对照中，三种多态性基因型的频率分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。单位点分析中，三个多态性位点各基因型的频率在病例组和对照组中的分布都无统计学显著性差异。多元logistic回归分析显示COX-2 -1195G/A, −765G/C和8473C/T多态性与乳腺癌危险性存在剂量反应关系，与野生基因型相比，−765GC/CC是1.38和8473CT/TT是1.05(如表2)。我们对三个多态性位点进行了联合分析，以携带0-3个突变等位基因者为参照，发现携带3个以上突变等位基因的个体患乳腺癌的风险显著增加。 如表3所示，根据COX-2已知的3个位点的基因型可以推断出8种单倍型。其中单倍型A-1195G-765T8473和A1195C-765T8473在病例组中的频率(分别为0.37和0.007)显著高于对照组
