六堡茶中真菌的多样性分析
- 格式：pdf
- 大小：4.07 MB
- 文档页数：73
六堡茶中真菌的多样性分析
徐书泽
二○一四年五月
硕士学位
论 文
硕
士
徐
书
泽
六
堡
茶
中
真
菌
的
多
样
性
分
析
2014
分类号 密级
UDC
硕士学位论文
六堡茶中真菌的多样性分析
徐书泽
学科专业 食品科学
指导教师 滕建文 教授
论文答辩日期 学位授予日期
答辩委员会主席
广西大学学位论文原创性和使用授权声明
本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得
的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个
人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大
学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研
究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。
本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归
属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有
权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论
文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行
检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。
本学位论文属于：
□保密，在 年解密后适用授权。
□不保密。
(请在以上相应方框内打“√”)
论文作者签名： 日期：
指导教师签名： 日期
作者联系电话： 电子邮箱： I 六堡茶中真菌的多样性分析
摘 要
六堡茶是一种产于广西梧州市的黑茶，具有其消食解腻，降脂减肥等
功效。作为一种发酵茶，微生物不仅参与六堡茶的加工过程，而且对其品
质及功效的形成具有重要影响，但目前关于六堡茶中微生物的研究少且不
够深入，对其中存在的微生物类群种属不确定。本文对梧州3个具有地理
性标识的茶厂的六堡茶样品进行真菌的多样性研究，以期全面了解存在于
其中的真菌类群，为优势菌的寻找利用、加工工艺的优化、品质及安全性
的研究奠定理论基础。具体研究结果如下：
利用高通量测序技术对梧州茶厂的4个成品六堡茶的真菌多样性和群
落结构进行了研究，共鉴定得到3个门，7个纲，9个目，6个科及8个属
的真菌类群，包括Aspergillus（曲霉属）、Eurotium（散囊菌属）、Penicillium
（青霉属）、Blastobotrys、Guehomyces、Rasamsonia、Rossbeevera和Emericella
（翘孢霉属）。其中Aspergillus（曲霉属）和Eurotium（散囊菌属）2个菌
属的真菌在4个样品中的相对丰度依次为99.85%、90.65%、99.94%和
60.37%，同时样品CY4中存在37.69%在属水平上未确定分类信息的菌群。
利用传统分离培养技术研究了3个不同茶厂的14个六堡茶样品的真菌
多样性，结果表明其真菌数量范围为3.9×102
~1.1×106
cfu/g，通过传统形态学
鉴定结合真菌ITS分子鉴定技术从中分离鉴定得到5个属18个种的微生物，
包括曲霉属8种，分别为Aspergillus niger（黑曲霉）、Aspergillus tubingensis
（塔宾曲霉）、Aspergillus fumigatus（烟曲霉）、Aspergillus oryzae（米曲霉）、
Aspergillus sydowii（萨氏曲霉）、Aspergillus ochraceus（赭曲霉）、Aspergillus
tamarii（溜曲霉）、Sclerotium aspergillus（菌核曲霉）；青霉属7种，分别为 II Penicillium citrinum（桔青霉）、Penicillium chrysogenum（产黄青霉）、
Penicillium oxalicum（草酸青霉）、Penicillium mallochii、Penicillium
chermesinum（鲜红青霉）、Penicillium meleagrinum（斑点青霉）、Penicillium
brocae；拟青霉属1种：Paecilomyces varioti（宛氏拟青霉）；散囊菌属1种：
Eurotium amstelodami（阿姆斯特丹散囊菌）；酵母1种：Stephanoascus ciferrii
（西弗射盾子囊霉）。其中Sclerotium aspergillus（菌核曲霉），Penicillium
chermesinum（鲜红青霉），Paecilomyces varioti（宛氏拟青霉），Penicillium
meleagrinum（斑点青霉），Penicillium brocae 5种真菌是首次从黑茶中分离
鉴定得到。
高通量测序技术得出六堡茶中的优势菌主要为Ascomycota（子囊菌门）
Eurotiomycetes（散囊菌纲）Eurotiales（散囊菌目）Trichocomaceae（发菌
科）真菌，在属水平上以Aspergillus（曲霉属）和Eurotium（散囊菌属）为
优势菌属，以青霉属和酵母为次要菌属。结合传统分离鉴定技术也从14个
茶样中分离得到了以上4个属的真菌，并在种水平上对其进行了鉴定，这
为六堡茶中优势菌群的进一步研究利用奠定了基础。
关键词：六堡茶 真菌 鉴定 高通量测序
III
FUNGAL COMMUNITY ANALYSIS OF LIUPAO TEA
ABSTRACT
LiuPao tea is a dark tea manufactured in the Guangxi province, it is
believed to have digestive and anti-obesity effect. As a kind of fermented tea,
microbial fermentation is not only involved in the processing of the tea , but also
has important influence on its special quality and function in health care. But
studies on the microbes of LiuPao tea are less and not deep enough so far, its
microflora is unclear. This study investigated the fungal colonizations exisiting
in LiuPao tea which produced in three factories, in order to fully understand its
fungal diversity, identify the predominant fungi to provide theory support for
LiuPao tea's quality, safety and deep development in the future.The research
results are as follows:
The fungal diversity and community structure in four LiuPao tea samples
were studied with high-throughput sequencing technology, and 3 phyla, seven
classes, 9 orders, 6 families and 8 genera of fungi taxa were identified, including
Aspergillus、Eurotium、Penicillium、Blastobotrys、Guehomyces、Rasamsonia、
Rossbeevera and Emericella.The relative abundance of Aspergillus and
Eurotium were 99.85%、90.65%、99.94% and 60.37% in the four tea samples
respectively, and there are 37.69% unclassified information in CY4 samples.
The fungal colonization was investigated from 14 representative samples
by using the method of dilution plating.The results of the survey showed that the
number of yeast and mold were ranging from 3.9×102
to 1.1×106
cfu/g, the
isolates were identified to belong to18 species of 5 genera by morphology and
means of sequencing the rDNA fragments, including 8 species of Aspergillus:
