量子点试剂盒说明书

第1篇一、产品概述本试剂盒是针对多糖含量测定而设计的高效、便捷的检测工具。

适用于各类生物样本中多糖含量的定量分析，包括但不限于植物提取物、动物组织、微生物发酵液等。

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）原理，通过特异性抗体与多糖的结合，实现对多糖含量的精确测定。

二、产品组成1. 试剂盒- 多糖抗体- 标准品- 酶标抗体- 底物溶液- 洗涤缓冲液- 封闭液- 终止液2. 仪器- 酶标仪- 微量移液器- 恒温水浴箱- 试管3. 试剂- 酶标仪专用缓冲液- 酶标仪专用洗涤液三、使用方法1. 样本准备- 将待测样本按照说明书要求进行稀释。

- 确保样本无污染，避免酶标仪读取误差。

2. 加样- 在酶标板孔中加入50μl的标准品或样本稀释液。

- 在所有孔中加入50μl的多糖抗体。

3. 孵育- 将酶标板放入恒温水浴箱，37℃孵育1小时。

4. 洗涤- 使用酶标仪专用洗涤液，将酶标板充分洗涤3次。

5. 加酶标抗体- 在所有孔中加入50μl的酶标抗体。

- 37℃孵育1小时。

6. 洗涤- 使用酶标仪专用洗涤液，将酶标板充分洗涤3次。

7. 加底物溶液- 在所有孔中加入50μl的底物溶液。

- 避光孵育15分钟。

8. 终止- 在所有孔中加入50μl的终止液。

9. 检测- 使用酶标仪在450nm波长下检测各孔的吸光度（OD值）。

10. 数据分析- 将测得的OD值与标准曲线进行比较，计算多糖含量。

四、注意事项1. 试剂和仪器- 使用前请仔细阅读说明书，确保试剂和仪器符合使用要求。

- 使用酶标仪时，请按照仪器说明书进行操作。

2. 样本处理- 样本处理过程中，请确保无污染，避免影响检测结果。

- 样本稀释时，请使用适宜的稀释液，确保稀释倍数合理。

3. 操作步骤- 操作过程中，请严格按照说明书进行，避免人为误差。

- 注意操作环境，避免交叉污染。

4. 标准曲线- 标准曲线的绘制应使用新鲜标准品，并确保标准曲线线性良好。

5. 质量控制- 定期进行质量控制，确保试剂盒的准确性和可靠性。

Fluorometric Thiol Quantitation KitGreen FluorescenceCatalog Number MAK151Storage Temperature –20 ︒CTECHNICAL BULLETINProduct DescriptionThe Fluorometric Thiol Quantitation Kit provides an ultrasensitive assay to quantitate the thiol content of small molecules. The proprietary thiol sensor generates a strongly fluorescent adduct (λex = 490/λem = 520 nm) upon reacting with a thiol-containing compound. In addition, both absorption and emission spectra of the thiol adduct are pH-independent, making this assay kit highly robust. The kit can detect as little as 1 picomole of cysteine or glutathione (GSH) in a 100 μL assay volume (10 nM). The assay can be performed conveniently in either a 96 or 384 multiwell plate format. ComponentsThe kit is sufficient for 200 assays in 96 well plates. Thiol Detection Reagent 1 vl Catalog Number MAK151AAssay Buffer 25 mL Catalog Number MAK151BGSH Standard 1 vl Catalog Number MAK151CDMSO 0.2 mL Catalog Number MAK151D Reagents and Equipment Required but Not Provided.∙96 well flat-bottom plate – It is recommended to use black plates with clear bottoms for fluorometricassays.∙Fluorescence multiwell plate readerPrecautions and DisclaimerThis product is for R&D use only, not for drug, household, or other uses. Please consult the Safety Data Sheet for information regarding hazards and safe handling practices.Preparation InstructionsAllow reagents to come to room temperature before use. Briefly centrifuge vials before e ultrapure water for the preparation of reagents.Thiol Detection Reagent – Reconstitute with 100 μL of DMSO to generate a 100⨯ Thiol Detection Reagent stock solution. Mix well by pipetting, then aliquotand store at –20 ︒C.GSH Standard – Reconstitute with 200 μL of water to generate a 1 mM (1 nmole/μL) GSH Standard stock solution. Mix well by pipetting, then aliquot andstore at –20 ︒C. Use within 6 months ofreconstitution.Storage/StabilityThe kit is shipped under ambient conditions and storage at –20 ︒C, protected from light, is recommended.2ProcedureAll samples and standards should be run in duplicate. GSH Standards for Fluorometric DetectionDilute 30 μL of the 1 mM Standard with 970 μL of Assay Buffer to prepare a 30 μM standard solution. Further dilute the 30 μM standard solution by 3-fold serial dilutions with Assay Buffer. Add 50 μL of the diluted standard solutions into a 96 well plate, generating 0 (blank), 0.014, 0.04, 0.12, 0.37, 1.1, 3.3, and 10 μM standards. Diluted standards are not stable and should be used within 4 hours.Sample Preparation for 96 well PlateAdd 0–50 μL of sample to wells. Bring samples to a final volume of 50 μL with Assay Buffer.Note: For unknown samples, it is suggested to test several sample dilutions to ensure the readings are within the linear range of the standard curve.Assay Reaction for 96 well Plate1. Set up the Master Reaction Mix according to thescheme in Table 1. The Master Reaction Mix isenough for one plate, as 50 μL of the MasterReaction Mix is required for each reaction (well).Note: The Master Reaction Mix is not stable andbest used within 2 hours.Table 1.Master Reaction Mix2. Add 50 μL of the Master Reaction Mix to each ofthe wells. Mix well using a horizontal shaker or by pipetting, and incubate the reaction for10–60 minutes at room temperature. Protect theplate from light during the incubation.3. Measure the fluorescence intensity at λex = 490/λem = 535 nm. Assay Reaction for 384 well PlateRun assay as written for 96 well plate. Use 0–25 μL of sample or standard and 25 μL of the Master Reaction Mix per well.ResultsCalculationsThe background for the assay is the value obtained for the 0 (blank) GSH standard. Correct for the background by subtracting the blank value from all readings. Background values can be significant and must be subtracted from all readings.Use the values obtained from the appropriate GSH standards to plot a standard curve.Note: A new standard curve must be set up each time the assay is run.Using the corrected measurement, the concentration of thiol present in the samples may be determined from the standard curve.3KVG,LS,MF,MAM 02/18-1 2018 Sigma-Aldrich Co. LLC. All rights reserved. SIGMA-ALDRICH is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC, registered in the US and other countries. Sigma brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see product information on the Sigma-Aldrich website at and/or on the reverse side of the invoice or packing slip.。

成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S 法)产品编号 产品名称包装 C0148S成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S 法)50次产品简介：碧云天生产的成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S 法) (Alizarin Red S Staining Kit for Osteogenesis)，也称成骨检测试剂盒(Osteogenesis Assay Kit)，是一种基于茜素红S 螯合钙离子(Ca 2+)生成橙红色复合物，以检测成骨细胞矿化结节的染色试剂盒。

人体和动物的骨组织在生命过程中不断地进行着重建，骨重建过程包括骨的分解吸收与新骨的形成。

破骨细胞(osteoclasts)负责骨分解与吸收，而成骨细胞(osteoblasts, OB)是骨形成的主要功能细胞，负责新骨形成。

在成骨分化过程中，其基本的生物学特征是骨基质合成、分泌、矿化及成熟。

成骨细胞首先合成I 型胶原(collagen-I, COL-I)、骨钙素(osteocalcin, OC)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)等胞外基质，并通过基质小泡释放钙离子和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)等酶类物质，钙离子在碱性磷酸酶作用下沉淀在胶原纤维丝上，完成基质矿化过程，最终形成骨组织。

I 型胶原从增殖期开始表达，基质合成期达巅峰；碱性磷酸酶是成骨细胞分化的早期标志物，骨基质合成期开始出现，矿化期达巅峰；骨钙素是成骨细胞分化成熟的标志，一般矿化早期开始表达，矿化结节成熟后达巅峰。

矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志，同时也是成骨细胞行使成骨功能的主要形态学特征，观察成骨细胞的矿化结节是研究成骨细胞分化的常用技术方法之一。

茜素红S 染色是一种常用的染色方法，广泛用于成骨细胞分化、骨细胞或组织病理生理的研究。

茜素红S (Alizarin Red S, 简称ARS)，别名茜素磺酸钠、茜素胭脂红，CAS 号为130-22-3，分子式为C 14H 7NaO 7S ，分子量为342.25。

sNPSHOT 试剂盒1. 关于试剂盒：一次最多检测10个SNP位点试剂盒包括对照模板和引物的Mix试剂，做对照反应。

2．产品简介需要备的东西：1）SNPshot Multiplex Ready reaction MIX2）模板和引物3）对照的Multiples Control DNA and Primer Mix 只提供对照模板和对照引物，用于做对照反应4)ddNTP 荧光标记颜色组合分三种包装备注：-20℃保存4 软件及其它材料要求1. GeneScan-120 LIZ Size Standard Recommended2. 3700 Data Collection version 1.1 (enabled with 3700 data collection 5-Dye Update File P/N4324208)3. SNP1_POP5 (凝胶)5 自备材料1）Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) 碱性磷酸酶2）PCR纯化试剂盒6 基本流程备注:PCR产物须纯化，0.01 to 0.4 pmol 模板（PCR产物纯化试剂盒）7 对照反应1）对照引物小片段来，片段越小，标记基团在分子量上占得比例就越大，所以与实际片段长度相差越大。

2）对照反应体系，如下表：备注：颠倒混匀，混匀后，迅速置于冰上。

如果常温20分钟以上，会导致背景加深。

3）实验样品多个引物混合后，推荐各引物终浓度0.2u M，注Snapshot MIX 引物设计为反应后，耗尽所有反应中的引物。

推荐各引物初始浓度为0.2u M。

如某一引物浓度特别低或特别高，应调整引物浓度。

在6引物组合中，引物浓度范围，0.05 u M 到1 u M ，是适宜的。

模板浓度一般不需调整。

4）反应体系SNaPshot Multiplex ready Reaction mix 冰上解冻。

注：依据引物及模板体积，适当调整水的体积。

人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)水平。

用纯化的人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)，再与HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)含量。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：18ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176 北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176电话：4006501950 传真：************-816电话：4006501950 传真：************-816AML1-ETO 荧光定量试剂盒使用说明书【产品名称】中文名：AML1-ETO 荧光定量试剂盒英文名：Leukemia related AML1-ETO fusion gene Fluorescent Quantitative PCR DetectionKit （FQ-PCR)【包装规格】 20人份/盒【用 途】本试剂盒适用于白血病AML1-ETO 融合基因定量检测，仅供科研使用，辅助临床诊断及治疗。

【储存条件】储存温度：-20℃。

避光保存。

【有 效 期】有效期：见试剂盒标签。

【原 理】本试剂盒使用荧光标记探针杂交方法，采用核酸扩增技术，对白血病BCR-ABL-190融合基因进行RNA 定量检测。

【试剂盒组分】1.2.未提供组分：淋巴细胞分离液、RPMI1640、生理盐水、离心管、PCR 反应管等耗材试剂。

3.本试剂盒中的参比品、阳性对照品和临界对照品均为克隆质粒DNA 。

4.不同批号试剂盒中的各组分不要交叉使用，以影响结果。

【适用仪器】ABI PRISM 系列Real Time PCR 仪； BIO-RAD iCycler Real Time PCR 仪； ROCHE LightCycler Real Time PCR 仪。

【样本要求】1. 本试剂盒适用于骨髓标本检测。

2. 骨髓2~3ml ，建议采用枸橼酸钠或EDTA 抗凝，不能使用肝素抗凝。

3. 建议采用进口无菌离心管及移液吸头，使用无RNase 的耗材和试剂。

北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176 北京经济技术开发区宏达北路10号万源商务中心5001室 邮编：100176电话：4006501950 传真：************-816电话：4006501950 传真：************-816【检验方法】1．骨髓单个核细胞分离注意事项：a. 淋巴细胞分离液应置于4℃保存，使用前应从冰箱拿出待恢复至室温后使用。

Calcein/PI 细胞活性与细胞毒性检测试剂盒产品简介：碧云天生产的Calcein/PI 细胞活性与细胞毒性检测试剂盒(Calcein/PI Cell Viability/Cytotoxicity Assay Kit ，或Calcein/PI Live/Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit)是一种非常便捷的基于Calcein-AM (钙黄绿素)和PI (碘化丙啶)双荧光染色法检测动物细胞死活的试剂盒。

本试剂盒使用便捷，荧光染色和检测仅需约30分钟。

本试剂盒染色30分钟后，就可进行后续的荧光显微镜拍照、流式分析或者荧光酶标仪定量等荧光检测和分析。

本试剂盒的原理是两种探针可分别检测细胞内酯酶活性和细胞膜完整性，从而反映细胞活性与细胞毒性。

其中Calcein AM 染色活细胞，呈现绿色荧光；而碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色死细胞，呈现红色荧光。

本试剂盒用于检测动物细胞活性与细胞毒性效果参考图1。

图1. Calcein/PI 细胞活性与细胞毒性检测试剂盒用于HT-29(人结肠癌细胞)细胞活性与细胞毒性检测的效果图。

HT-29细胞(C6410)在明场视野下仔细观察可以看到有明显的坏死细胞(图A)；绿色荧光标记的即为Calcein 染色的活细胞(图B)，红色荧光标记的即为PI 染色的死细胞(图C)；Calcein和PI 双染叠加(merge)后可以非常清晰地观察到活细胞和死细胞的荧光染色差别(图D)。

在本实验中，HT-29细胞经TSZ 处理4小时。

TSZ 为TNFα、SM-164和Z-V AD-FMK 组成的细胞程序性坏死诱导试剂(C1058)。

实测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

Calcein AM (Calcein Acetoxymethyl Ester ，中文名称为钙黄绿素AM或钙黄绿素乙酰氧基甲酯)，是一种可以对活细胞进行荧光染色的细胞染色试剂，Calcein AM 是在Calcein (钙黄绿素)的基础上增加了乙酰氧基甲酯(AM)基团，加强了疏水性，因此能够很容易穿透细胞膜。

南京建成GPX试剂盒说明书一、产品简介南京建成GPX试剂盒是一种用于测定谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活性的试剂盒。

谷胱甘肽过氧化物酶是一种重要的抗氧化酶，在生物体内起到清除自由基的作用。

该试剂盒采用酶促反应原理，通过检测GPX酶催化反应的速率，反映样品中GPX活性的强弱。

二、试剂盒组成1.GPX试剂盒2.GPX标准品3.过氧化氢（H2O2）稀释液4.反应底物液5.转化液6.二恶吖啶试剂7.芳醛显色剂液8.脱氧胆酸液三、操作步骤步骤一：样品处理1.将待测样品离心收集沉淀，去除杂质；2.取适量样品，加入过氧化氢（H2O2）稀释液，混匀；3.将处理后的样品转移至离心管，进行离心提取。

步骤二：制备标准曲线1.取GPX标准品不同浓度的工作液，依次加入反应孔；2.使用空白对照孔作为空白对照；3.分别加入转化液和反应底物液，混匀。

步骤三：反应过程1.加入样品提取液和转化液，混匀；2.加入反应底物液，混匀；3.加入二恶吖啶试剂，混匀；4.加入芳醛显色剂液，混匀；5.加入脱氧胆酸液，混匀。

步骤四：测定吸光度使用酶标仪在450nm波长下测定样品、标准品和空白对照的吸光度值。

四、结果判读根据标准曲线，计算出样品中GPX活性的浓度，进行数据分析。

根据浓度值的高低，可以判断出样品中GPX活性的强弱。

五、注意事项1.试剂盒的各组分应在4℃保存，开封后应尽快使用；2.不同批次的试剂盒不能混合使用；3.操作前，必须严格按照说明书操作，确保实验的准确性；4.不同样品的处理方式可能不同，请参照具体样品类型的处理方法；5.操作过程中应佩戴实验手套，避免接触试剂；6.尽量避免阳光直射，保持试剂的保存质量。

六、故障排除1.若标准曲线呈线性上升趋势，则说明实验条件符合要求，结果可信；2.若标准曲线呈非线性趋势，则可能是试剂盒保存不当或过期，需更换新的试剂，重新进行实验；3.若实验结果不符合预期，可能是样品处理不当或操作过程中出错，请检查并重新进行实验。

精子细胞氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途精子细胞氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂是一种旨在通过自由基探针鲁米诺和强化剂的参与下，精子细胞中的活性氧族使发光物氧化降解并发光，在化学发光仪（Luminometer）的帮助下定量检测精子细胞活性氧族（过氧化氢）的生成和数量的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

适用于动物和人体精子细胞的活性氧族的检测。

可以被用于细胞凋亡、衰老、代谢和营养学，以及发育生物学（男性不育）等的研究。

产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定，检测敏感。

技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，甚而导致诸如男性不育、冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。

鲁米诺（luminol），又称氨基邻苯二甲酰肼（luminol;3-aminophthalic hydrazide 5-amino-2,3-dihvdro- 1,4-phthalazinedione），是一种脂溶性的发光剂，氧化后生成鲁米诺自由基而化学发光，具有460nm左右峰值的带状光谱，肉眼可观察到鲜明的紫蓝色。

荧光定量PCR基因表达检测试剂盒说明书(通用版)前言随着荧光定量PCR技术的成熟和荧光定量PCR仪的普及，用传统的半定量方法检测目的基因表达量的升高或者降低，已经远远不能满足当前科研的需要，针对当前研究的热点基因，闪晶生物及时地从美国biosuper公司引进不同物种、不同基因的荧光定量PCR检测试剂盒。

该试剂盒包含了目的基因和管家基因的引物、taqman探针(荧光探针)、反转录试剂、荧光定量PCR试剂、操作说明书等，用户只需将提好的RNA加入就可以进行荧光定量PCR实验，操作方便简单、适合多种荧光定量PCR仪，同时也避免了自己设计、合成引物探针的烦恼。

基本原理先用随机引物将RNA反转录成cDNA，然后设计特异性的引物和荧光探针(TaqMan探针),进行荧光定量PCR检测。

TaqMan探针是一种寡核苷酸探针，它设计为与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。

荧光基团连接在探针的5’末端，而淬灭剂则在3’末端。

当完整的探针与目标序列配对时，荧光基团发射的荧光因与3’端的淬灭剂接近而被淬灭，但在进行延伸反应时，qTaq聚合酶的5’外切酶活性将探针进行酶切，使得荧光基团与淬灭剂分离,荧光强度得到检测。

随着扩增循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累，因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。

试剂盒规格25 次100次试剂盒组成序号 名称 25次 100次1 RT-buffer 325 ul 1300 ul2 Mix enzyme 50 ul 200 ul3 T-probe 25 ul 100 ul4 T-fluo-PCR buffer 650 ul 2600 ul5 I-probe 25 ul 100 ul6 I-fluo-PCR buffer 650 ul 2600 ul7 qTaq polymerase100 ul 400 ul8 DEPC-H2O 1支 1支9 说明书 1份 1份试剂说明：RT-buffer:含有dNTPs、oligo(N)等Mix enzyme:含有反转录酶、RNA酶抑制剂等T-probe:检测目的基因的荧光探针，5’端fam标记，3’端tamra标记T-fluo-PCR buffer:含有目的基因的特异性引物、dNTPs等I-probe:检测管家基因的荧光探针，5’端fam标记，3’端tamra标记I-fluo-PCR buffer: 含有管家基因的特异性引物、dNTPs等RNA的提取请参照Trizol说明书，本试剂盒不提供RNA提取试剂和操作流程。

DNase检测试剂盒(荧光探针法)盒操作手册DNase检测试剂盒基于荧光基团标记的DNA探针，其一端标记有荧光报告基团分子（Fluor），另一端标记有淬灭基团。

当样本中不含DNase活性时，该探针稳定存在，淬灭基团的物理接近会将荧光报告基团中的荧光淬灭到极低水平，不会产生荧光信号；当样本中含有DNase活性时，探针被降解，荧光报告基团和淬灭基团在溶液中的空间上发生分离，产生逐渐增强的荧光信号；荧光信号增加的速率与酶的数量和活性成正相关。

一．主要组成成分及储存条件名称HBP002902（192T）HBP002903（48T）储存温度DNA探针1管1管-25~-15℃TE缓冲液 2.0mL0.5mL-25~-15℃DNase I标准品20μL10μL-25~-15℃(2U/μL)标准品稀释液12mL6mL-25~-15℃无DNase无DNase水25mL25mL-25~30℃二．预期用途可定量或定性检测单个环境，试剂或者耗材样品中的DNase，判断样本是否被DNase污染。

三．实验环境1.操作过程中需全程穿戴实验服，手套和口罩，严格控制DNase污染；2.为了防止操作过程中引入外源的DNase，前期加样请在超净工作台中进行，实验前用核酸酶清除剂清洁超净工作台中的操作表面，并打开超清洁工作平台紫外照射30分钟；3.其他工作区域在整个实验开始前，也先使用核酸酶清除剂对实验环境进行处理。

四．客户自备耗材仪器210μL移液器桌面离心机3100μL移液器qPCR仪/酶标仪4200μL移液器5DNase DNase free枪头6200μL EP管72ml棕色EP管8黑色平底酶标板/PCR96孔板（高管）9核酸酶清除剂10无酶水11离心管架本实验操作根据酶标仪增益功能不同，分为3种类型进行详细说明，用户可根据自己酶标仪的具体功能，选择对应的实验操作方法。

1.具备自动优化+手动设置增益值的酶标仪，以下以Tecan Spark为例；2.只能选择自动优化或者高中低增益值的酶标仪，以下以SpectraMax iD5为例；3.对于不具备自动优化的酶标仪，比如Fluoroskan FL，这种酶标仪不推荐使用，此时建议使用具有FAM通道的qPCR仪，以下以Thermofisher7500为例。

荧光定量PCR基因表达检测试剂盒说明书(通用版)前言随着荧光定量PCR技术的成熟和荧光定量PCR仪的普及，用传统的半定量方法检测目的基因表达量的升高或者降低，已经远远不能满足当前科研的需要，针对当前研究的热点基因，闪晶生物及时地从美国biosuper公司引进不同物种、不同基因的荧光定量PCR检测试剂盒。

该试剂盒包含了目的基因和管家基因的引物、taqman探针(荧光探针)、反转录试剂、荧光定量PCR试剂、操作说明书等，用户只需将提好的RNA加入就可以进行荧光定量PCR实验，操作方便简单、适合多种荧光定量PCR仪，同时也避免了自己设计、合成引物探针的烦恼。

基本原理先用随机引物将RNA反转录成cDNA，然后设计特异性的引物和荧光探针(TaqMan探针),进行荧光定量PCR检测。

TaqMan探针是一种寡核苷酸探针，它设计为与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。

荧光基团连接在探针的5’末端，而淬灭剂则在3’末端。

当完整的探针与目标序列配对时，荧光基团发射的荧光因与3’端的淬灭剂接近而被淬灭，但在进行延伸反应时，qTaq聚合酶的5’外切酶活性将探针进行酶切，使得荧光基团与淬灭剂分离,荧光强度得到检测。

随着扩增循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累，因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。

试剂盒规格25 次100次试剂盒组成序号 名称 25次 100次1 RT-buffer 325 ul 1300 ul2 Mix enzyme 50 ul 200 ul3 T-probe 25 ul 100 ul4 T-fluo-PCR buffer 650 ul 2600 ul5 I-probe 25 ul 100 ul6 I-fluo-PCR buffer 650 ul 2600 ul7 qTaq polymerase100 ul 400 ul8 DEPC-H2O 1支 1支9 说明书 1份 1份试剂说明：RT-buffer:含有dNTPs、oligo(N)等Mix enzyme:含有反转录酶、RNA酶抑制剂等T-probe:检测目的基因的荧光探针，5’端fam标记，3’端tamra标记T-fluo-PCR buffer:含有目的基因的特异性引物、dNTPs等I-probe:检测管家基因的荧光探针，5’端fam标记，3’端tamra标记I-fluo-PCR buffer: 含有管家基因的特异性引物、dNTPs等RNA的提取请参照Trizol说明书，本试剂盒不提供RNA提取试剂和操作流程。

SuperStar超敏ECL化学发光试剂盒使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装EK-5008-100ml Super Star ECL Solution A50ml Super Star ECL Solution B50ml 使用说明书1份【保存条件】4℃避光保存12月【概述】超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。

用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。

由于采用了独特的发光底物系统，SuperStar ECL超敏发光液是目前最灵敏的商业化荧光ECL检测试剂（具有极高灵敏度和高信噪比）；可在日光灯下进行发光操作；发光迅速，荧光可使X光胶片感光达12小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测；可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:10000)，极其节省抗体。

【特点】⏹飞克级灵敏度-在硝酸纤维素或PVDF膜上检测低至飞克量的目标蛋白量⏹高信号稳定性-孵育印迹在关键的4小时时间内提供稳定的信号持续时间，在最佳条件下可产生长达24小时的光输出⏹稳定的试剂-在4℃下1年的试剂盒稳定性⏹更经济的抗体用量：0.2至1.0μg/mL一抗（从1mg/mL原液中1：1000至1：5000稀释）10至50ng/mL二级抗体（从1mg/mL原液中1：20,000至1：100,000稀释）【操作方法】1.执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。

注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。

2.Western Blot最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取A:B=1:1混合（如需要1ml 发光液则取500ul ECL A液和500ul ECL B液混合），放入干净容器中混合。

建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3.用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。

将膜完全浸入发光工作液(0.125ml发光工作液/cm2膜)中，与发光工作液充分接触。

第一章基因组DNA的提取DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物学技术中最重要、最基本的操作之一。

然而通过传统的提取技术不仅花费时间长而且提取效率低，但是通过使用Karroten试剂盒可以快速提取目的基因，从而大大提高工作效率。

一：基因组DNA提取的原理：DNA与组蛋白构成核小体，核小体缠绕成中空的螺旋管状结构，即染色质丝，染色质丝再与许多非组蛋白形成染色体。

染色体存在于细胞核中，外有核膜及胞膜。

从组织中提取DNA必须先将组织分散成单个细胞，然后破碎包膜及核膜，使染色体释放出来，同时去除与DNA结合的组蛋白与非蛋白。

二：基因组DNA提取的方法：a : 样品预处理从各种不同来源样品(如细菌、酵母、血液、动物组织、植物组织和培养细胞)，或同一来源的不同形式（如新鲜冷冻血液、血凝块和干血迹等）中提取高纯度的基因组DNA，因细胞结构及所含成分不同，样品预处理的方式也各有差异。

例如：b : 细胞裂解c : DNA分离纯化纯化要求：①核酸样品中不应存在对酶（如内切酶、DNA聚合酶）有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子②其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降到最低程度③排除其他核酸分子的污染，如提取DNA分子时应除去RNA，相反亦是纯化方法：细胞破碎后，经常使用吸附材料结合方法去除杂质和纯化DNA，主要有硅基质吸附材料、阴离子交换树脂和磁珠等。

因硅基质吸附材料可可特异吸附核酸DNA，使用方便、快捷，不需用有毒溶剂如苯酚、氯仿等，使得提取基因组DNA像过滤一样简单，因此硅基质材料成为大规模分离纯化DNA，去除蛋白、多糖、盐类和有机溶剂等杂质的通用方法。

硅基质吸附原理：主要利用DNA与硅基质材料在高盐中结合，低盐条件下脱离的特征，其机理为高浓度盐离子破坏硅基质水分子结构，形成阳离子桥，当盐被清除后，再水化的硅石破坏了基质和DNA之间的吸引力，因此DNA从硅基质上洗脱下来。

线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）说明书产品货号：CA1310产品规格：100T产品内容：产品名称包装JC-10（200×）100μL/管，共5管超纯水90mLJC-10染色缓冲液（5×）80mLCCCP（10mM）20μL保存条件：-20℃避光保存，尽量避免反复冻融，有效期一年。

超纯水和JC-10染色缓冲液（5×）也可4℃保存。

产品简介：线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）是一种以JC-10为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。

JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。

可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。

在线粒体膜电位较高时，JC-10聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-10不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-10为单体，可以产生绿色荧光。

这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。

常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。

线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。

通过JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。

JC-10单体的最大激发波长为515nm，最大发射波长为529nm；JC-10聚合物的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。

实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。

对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。

操作步骤：1、JC-10染色工作液的配制：六孔板每孔所需JC-10染色工作液的量为1mL，其他培养器皿的JC-10染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100万细胞需0.5mL JC-10染色工作液。

Qubit dsDNA HS 定量试剂盒1 范围本文件规定了Qubit dsDNA HS定量试剂盒的组成、规格、适用范围、要求、试验方法、检验规则、标志、标签和说明书、包装、运输和贮存等内容。

本文件适用于Qubit dsDNA HS定量试剂盒的生产与检验。

2 规范性引用文件下列文件中内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 191 包装储运图示标志YY/T 0466.1 医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号第1部分：通用要求3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。

4 组成、规格和适用范围4.1 组成由Qubit dsDNA HS标准品1、Qubit dsDNA HS标准品2和Qubit dsDNA HS工作液组成。

4.2 规格100反应/盒或依照客户需求而定。

4.3 适用范围用于定量双链DNA的浓度，与Qubit荧光计配合使用。

5 要求5.1 外观试剂外观应符合下列要求：a) Qubit dsDNA HS 标准品 1、Qubit dsDNA HS 标准品2 应为无色透明液体，无异物；b) Qubit dsDNA HS 工作液应为淡黄色透明液体，无异物。

5.2 装量装量应不少于标示值。

5.3 pH 值和紫外浓度Qubit dsDNA HS工作液的pH值应在7.50±0.20范围内，Qubit dsDNA HS标准品2的紫外浓度应在10.0 ±1.0ng/μL范围内。

5.4 DNA 浓度测试将厂家是ThermoFisher的Lambda DNA配制成2.5ng/ μL、5ng/ μL、10ng/ μL、25ng/ μL、50ng/ μL，测试值与理论值用线性回归方法计算，斜率应在1.0±0.1范围内，R2应不小于0.98，测试值与理论值误差应在±20％范围内。