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针对中药川乌的多成分同时检测并评价其药动学的分析进展摘要：中药川乌属于一种常见药物，其主要成分即为二萜生物碱。
文章主要从相关学者的研究报道中总结了中药川乌含量检测与药动学情况，现作以下的综述。
关键词：中药川乌；成分检测；药动学；进展1.前言川乌属于毛茛科植物乌头（AconitumcarmichaeliiDebx.）干燥的母根，大毒，主要功效是温经止痛与祛风除湿，在心腹冷痛、风寒湿痹与关节疼痛等病症中比较常用。
川乌的化学成分比较复杂，包含生物碱类的成分，而有效的成分为二萜生物碱，在中枢神经、抗炎、心血管、镇痛以及镇静方面有较好的作用。
近几年，越来越多学者开始研究二萜生物碱，并且发表了不少报道，为川乌的医学应用提供了参考。
2.川乌含量的测定液相色谱-质谱联用法（LC-MS）与高效液相色谱法（HPLC）在中药的质量控制之中应用越发广泛，而中药饮片与复方制剂之中的化学成分使得人们开始重视多指标与多成分的检测。
相关研究[1]中采取HPLC方法，经对新乌头碱、双酯型生物碱乌头碱以及次乌头碱总量限度进行控制，确保川乌药材质量，川乌制药主要经对苯甲酰次乌头原碱以及双酯型生物碱乌头碱等进行控制，确保川乌有效性以及安全性。
有学者[2]经HPLC方法构建乌头汤、川乌与制川乌三类双酯型新乌头碱、生物碱的乌头碱以及次乌头碱定量分析的方法，然而，使用容易损毁色谱柱固定相强碱性流动相的三乙胺与二乙胺，并且只可以定量分析双酯型的生物碱。
有学者[3]把A相[乙腈-四氢呋喃（25∶15）]-B相[0.1mol/L醋酸铵]当作流动相，实施梯度的洗脱，构建新乌头碱、乌头碱以及次乌头碱等定量分析的方法，这种方法可以防止三乙胺与二乙胺等强碱性的流动相损坏了流动相对色谱柱，同时可以同时测定单酯型与双酯型的生物碱。
3.评估二萜生物碱的药动学3.1生物样品前处理3.1.1液液的萃取方法乌头二萜生物碱属于脂溶性的生物碱，置于合适溶剂之中，其溶解度比水相之中溶解度要大，在尿样与血样等生物的样品之中，含有诸多内源性的杂质，并且是强极性水溶性的杂质，而采取适当有机溶剂能够将大部分的杂质去除。
分光光度法测定新疆乌头属植物总生物碱的含量刘淑敏;聂继红;潘荣;赵翡翠【摘要】目的考察新疆乌头属植物总生物碱含量测定的方法.方法用分光光度法测定新疆乌头属植物中总生物碱的含量.以乌头碱为对照品,溴甲酚绿为酸性染料,缓冲溶液pH(3.0±0.1)条件下,三氯甲烷萃取45 min,于415 nm波长处测定其吸光度.结果乌头碱在11.76~27.44 mg/L浓度范围内线性关系良好,回归方程Y=21.403 X+0.003 5,r=0.999 1,精密度良好,RSD=0.99%;样品溶液显色后4 h内稳定,RSD=1.27%.本法测定的重复性良好,RSD=1.37%;平均加样回收率为100.89%,RSD=1.82%.新疆伊犁不同地区分布的白喉乌头和准噶尔乌头较多,其总生物碱含量平均值分别为0.236%和0.238%.结论分光光度法简便、准确,可用于新疆乌头属植物中总生物碱的含量测定.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2012(035)002【总页数】4页(P193-196)【关键词】分光光度法;新疆乌头属;生物碱;乌头碱;含量测定【作者】刘淑敏;聂继红;潘荣;赵翡翠【作者单位】新疆医科大学中医学院中药制剂教研室,乌鲁木齐,830000;新疆医科大学附属中医医院药学部,乌鲁木齐,830000;新疆医科大学附属中医医院药学部,乌鲁木齐,830000;新疆医科大学附属中医医院药学部,乌鲁木齐,830000【正文语种】中文【中图分类】R284.1乌头属植物是毛茛科(Ranunculaceae)中的一类重要植物，我国约有200种，其中约76种可供药用[1-2]。
其性味辛、苦、热，有大毒，有祛风除湿、温经止痛的功能。
生物碱类成分是乌头属植物的主要有效成分和毒性成分，包括双酯型生物碱、单酯型生物碱、氨醇型生物碱和其他类生物碱等[3]。
乌头属药用植物具有抗炎、镇痛、镇静、解热、免疫抑制、抗肿瘤作用及强心、降血压、扩张血管等药理作用[4]。
四川道地产区乌头药材不同部位6种生物碱含量对比研究摘要目的：研究四川道地产区6种乌头生物碱在不同部位的分布差异，比较母根、子根基于化学成分的区别。
方法：采用超高效液相色谱法（UPLC）测定19批四川道地乌头药材母根、子根、须根中6种乌头生物碱含量，并结合SPSS 统计软件对数据进行显著性差异、聚类分析和主成分分析研究。
结果：6种乌头生物碱在3个部位的分布差异各不相同。
母根、子根中苯甲酰新乌头碱、新乌头碱含量有显著性差异，为两者的差异性指标成分。
聚类分析、主成分分析也将供试样品分成母根、子根两大类。
结论：母根、子根的物质基础有差别，可为临床正确使用提供参考。
关键词UPLC；乌头；母根；子根；乌头生物碱；区别1 材料1.1 仪器超高效液相色谱系统（ACQUITY UPLC，美国Waters公司，包括二元梯度泵、真空脱气机、自动进样器、柱温箱、TUV检测器、Empower2工作站），电子天平（XS205，瑞士METTLER TOLEDO公司），粉碎机（MF10，德国IKA 公司），高速冷冻离心机（ST16R，美国Thermo公司），平行溶剂蒸发仪（Q-101，瑞士BUICH公司），Milli-Q超纯水系统（美国Millipore公司）。
1.2 药品与试剂苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱（纯度和批号分别为99.6%，111795-200901；96.5%，111794-201102；99.5%，111796-200901；100%，110799-200505；100%，110720-200410；99.5%，110798-200805；均购于中国食品药品检定研究院）；乙腈、甲醇（色谱纯，德国Merck公司）；醋酸铵（优级纯，天津市光复科技发展有限公司）；碳酸氢铵（优级纯，天津市元力化工有限公司）；醋酸（色谱纯，天津市康科德科技有限公司）；异丙醇、醋酸乙酯（分析纯，天津市化学试剂二厂）；氨水（分析纯，天津市化学试剂三厂）；超纯水（Milli-Q制备）。
大鼠血清中乌头类生物碱含量测定方法的研究
肖凤霞;周莉玲;李锐
【期刊名称】《食品与药品》
【年(卷),期】2005(007)10A
【摘要】目的建立大鼠血清中乌头类生物碱含量的测定方法。
方法采用高效液相色谱法测定大鼠静脉注射给药后不同时间点乌头类生物碱的血药浓度。
结果大鼠给药后0．0833，0．167，0．333，0．5，0．75，1．0，1．5h乌头尖生物碱的血药浓度分别为1．5112，1．1129，1．0015，0．9258，0．7956，0．7178，0．4953μg／ml。
结论用本方法测量大鼠血清中乌头类生物碱含量，简便易行，能较好体现出乌头类生物碱在大鼠体内不同时间的含量变化。
【总页数】4页(P47-50)
【作者】肖凤霞;周莉玲;李锐
【作者单位】广州中医药大学中药学院,广东广州510405
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.大鼠血清中乌头类生物碱含量测定方法的研究 [J], 肖凤霞;周莉玲;李锐
2.乌头类中药化学成分及其生物碱含量测定方法的研究概况 [J], 周玲
3.草乌中乌头类生物碱提取方法比较研究 [J], 随志刚;陈明玉;刘志强;皮子凤;刘忠英
4.川乌、附片中乌头类生物碱含量测定方法的比较研究 [J], 邓建平;彭波;杨华元
5.川乌、草乌、附子及其复方制剂中乌头类生物碱的含量测定研究概况 [J], 陈巧玲
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dl：10.3969/j.X n u106-4939202900.016超高效液相色谱串联质谱法同时测定走川骨剌酊中3种乌头类生物碱含量*庞小莲1,刘吉成2A,林生5，周成忠5,曾海清1(9广西壮族自治区玉林市食品药品检验检测中心，广西玉林537000；2.广西壮族自治区南宁市食品药品检验所，广西南宁530003；3.广西实正药业有限公司，广西玉林537000)摘要：目的建立同时测定走川骨刺酊中3种乌头类生物碱含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法。
方法色谱柱为AC QUIP Y UPLC®BEH Ci8柱(50mmx0.1mm,95im)，流动相为0.1%甲酸溶液-乙腈(梯度洗脱)，流速为0.25mL/min,柱温为35弋，进样量为10iL；采取电喷雾离子源(ESI),正离子模式，采集方式为多反应监测(MRM)。
结果乌头碱、次乌头碱、新乌头碱质量浓度分别在0.918〜999800//mL(厂二0.9938,n二3),9048〜104.800//mL(厂二0.9934,n二3),9268〜16.800//mL(厂二07998,0=3)范围内与峰面积线性关系良好，加样回收率分别为14.20%,15.05%,104.34%,丘SD分别为3.13%,963%,960% (n=6)。
结论该方法操作简便,精密度、重复性好,专属性高,结果准确,可用于同时测定走川骨刺酊中3种乌头类生物碱的含量。
关键词：走川骨刺酊;超高效液相色谱串联质谱法；乌头碱；次乌头碱;新乌头碱;含量测定中图分类号：R932;R2864文献标志码：A文章编号：1006-4931(2021)02-0059-04Content Determination or Three Kinds or Acanitinc AlUaloins in ths Zouchuan Gucl Tincthrrby UPLC-MS/MSPANG Xiaolian1,LIU Jicheng2,LIN Sheng3,ZHOU Chengzhong3,ZENG Haiqing1(1.Yulia Cen/r far Fool o0Drug Coatroi,Yulia,Guangxi,China537000; 2.Nanninn Fool o0Dmg Insped/n Inst/ute,Nanninn,GuaTinxi,China530007; 3.Guangxc Shizheng Pharmaceutical Co.,LU.,Yulin,Guangxi,China5377001Abstrrct:Objective To estabUsh an ultra-performance UpuiX chromamucpha(UPLC)-MS/MS methop We the coutext determixatiou o-three gixUs o-aconitine alUaloiXs in the Zouchuan Guci Tincture.Methods The chromatouraphic column was AC Q UIP Y UPLC®BEH C1c(Pum/(54mm x0.1mm,95im),the moUite phase was07%formic aOU soluPou一acetoui t rile(5raUiebt eluPou),the Wow rate was0.25mL/mix,the column temperature was35弋,the injecPou volume was10iL,the eUctcsprya iouizaPou source(ES))was apopted with posiUve iou mope,an/the collechou mope was multi一respouso mouitoring(MRM).Results The Uneac ranaos o-hT/hi/e,hyphouhixe an/mesacomtixe were0.518-999800ng/mL(o=07938,n=3),9043-104700ng/mL(厂二0.9934, n=3)an/9268-126.800ng/mL(u二0.9998,n=3),cpeOheU The receve/es were104.20%,105.25%an/104.34%,an/the RSDs were 3.13%,963%,960%(n=6).Conclusion The methop h simple,has goop precisiou,rexeataPiXh,specihcim an/acchracy,an/ can be used We the8X11/00/)determixatiou of acouhi/e alUaloiXs in Zouchuan Guci Tincture.Key words:Zouchuan Guci Tincture g UPLC-MS/MS;acom/xog dypacouiti/e gmesacomtixe gcoutext determixatiou中成药走川骨刺酊由天南星、水半夏、草乌等3味药材经渗漉法提取而成，主要功效有活血祛瘀、通络止痛，常用于瘀血阻滞所致骨痹（骨质增生症、，症见关节疼痛或刺痛，痛处固定，活动不利，面色晦暗，唇舌紫暗,脉沉或细涩等。
HPLC法测定两种乌头药材中生物碱的含量
柳文媛
【期刊名称】《西北药学杂志》
【年(卷),期】1998(000)001
【摘要】高效液相色谱法测定湖北两种乌头药材中乌头碱、次乌头碱、中乌头碱的含量。
采用ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＯＤＳ柱，以甲醇－水－氯仿－三乙胺（６０：４０：２：０．１）为流动相，联苯为内标。
【总页数】1页(P8)
【作者】柳文媛
【作者单位】中国大学药物分析教研室;中国药科大学天然药化教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.HPLC-Q-TOF-MS法测定不同厂家小金丸中9种乌头类生物碱的含量 [J], 黄阳;曹益鸣;张小龙;卜红闽
2.HPLC法测定附子及其样品中6种乌头类生物碱的含量 [J], 栾永福;孙蓉
3.HPLC法测定新疆准噶尔乌头不同炮制品中单酯型生物碱的含量 [J], 付玲;吴超;赵翡翠
4.RP-HPLC法测定蒙药那如-3丸中乌头类生物碱含量 [J], 陶淑娟;邵太丽;毕开顺
5.酸性染料比色法测定乌头属不同药材中乌头生物碱含量 [J], 张敏敏;蔡晓丹;李耿;肖日平;阮永队;马春玲;陈长青;赖小平
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内蒙古中东部地区草乌乌头碱类含量分析锡林通嘎拉嘎;那生桑【摘要】目的:对内蒙古中东部地区生长的草乌药材有效成分乌头碱类的含量进行分析比较.方法:采用高效液相色谱法,Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A:乙腈-四氢呋喃(25∶15),B:0.1 mol·L-1乙酸铵溶液(每1000 mL加0.5mL冰乙酸);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:235 nm;进样量:10 μL;梯度洗脱VA:1～48 min=15 ～26,48 ～60 min =26 ～35,测定草乌有效成分乌头碱类的含量进行比较.结果:内蒙古中东部地区草乌总酯型乌头碱质量分数分别为10.899、7.841、12.729、8.399、8.625、8.461、7.515、15.283 mg·g-1,总乌头原碱质量分数分别为0.521、0.390、0.514、0.545、0.114、0.112、0.115、0.823 mg·g-1.结论:内蒙古中东部地区草乌有效成分含量差异较大,建立蒙药草乌统一标准需要进一步研究分析.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2015(017)005【总页数】4页(P458-461)【关键词】草乌;有效成分;乌头碱;内蒙古中东部地区【作者】锡林通嘎拉嘎;那生桑【作者单位】内蒙古自治区人民医院药学处,呼和浩特010017;内蒙古医科大学,呼和浩特010110【正文语种】中文·基础研究·草乌是我国广泛使用的毒性药材，也是最常用的传统蒙药，用途较广。
从国内外文献可以了解其基源、化学成分、炮制、药理临床的研究概况，但尚缺乏系统的研究，而且药材质量不稳定，品种混杂，这些都制约了蒙药产业化水平和发展。
产地较多、药材质量不一致，给用药带来了安全隐患，且各地采集加工和炮制工艺变异很大，缺乏专属性强的质量控制标准。
第49卷第8期2021年4月广州化工Guangzhou Chemical IndustryVol. 49 No. 8Apr. 2021高效液相色谱法同时测定雪上一枝蒿中6种乌头属生物碱含量曹红云I,何雨桐彳，牛延菲1,徐怡打陈丽1,游燕I（1云南省药物研究所/云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室，云南昆明650111；2云南省药品和医疗器械审评中心，云南昆明650106）摘 要：建立高效液相色谱法同时测定雪上一枝蒿中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱、乌头碱等6种乌头属生物碱的含量。
采用Thermo Acclaim 120 C 18色谱柱，以乙睛：四氢咲喃（25 ： 15）和0. 1 mol • L 醋酸钱溶液（每1000 mL 加冰醋酸0. 5 mL ）为流动相，进行梯度洗脱；流速l.OmL • min'1 ；柱温30 t ;检测波长235 nm o 结果显 示，6个成分分离度良好，平均回收率为93. 26% ~ 102. 03% , RSD 为0.23%~2.87%。
该方法简便准确，重复性好，适用于雪上 一枝蒿的质量控制与评价。
关键词：雪上一枝蒿；新乌头碱；次乌头碱；乌头碱；苯甲酰新乌头原碱；苯甲酰次乌头原碱；苯甲酰乌头原碱；高效液相色谱法；含量中图分类号：R917 文献标志码：A 文章编号：1001 -9677（2021）08-0093-04Simultaneous Determination of Six Aconitum Alkaloids inAconitum brachypodum by HPLC **基金项目：重大科技专项计划-生物医药重大专项（2018ZF011）。
第一作者：曹红云，女，高级工程师，主要从事中药分析。
通讯作者：游燕，女，正高级工程师，主要从事中药分析。
CAO Hong_yu 『,HE Yu-tong 2, NIU Yan-fei 1, XU Yi 1, CHEN L# , YOU Yan 1(1 Yunnan Institute of Materia Medica/Yunnan Province Company Key Laboratory for TCM and Ethnic Drug of New Drug Creation , Yunnan Kunming 650111 ； 2 Yunnan Drug and Medical DeviceEvaluation Center , Yunnan Kunming 650106, China)Abstract : An HPLC method for the simultaneous determination ofsix kinds of Aconitum Alkaloids in Aconitum brachypodum : benzoylmesaconine , benzoylhypaconine , benzoylaconitine , mesaconitine , hypaconitine and aconitinewas established. Samples were analyzed on an Thermo Acclaim 120 C lg column withthe mobile phase of acetonitrile : tetrahydrofuran (25 : 15) and 0. 1 mol • L _1 ammonium acetate solution (0. 5 mL acetic acid in per 1000 mL) in a gradient elution. The flow rate of the mobile phase , detection wavelength and column temperature were set at 1. 0 mL • min -1, 253 nm and 30 £ , respectively. The results showedthat the resolution of 6 components determined was good, the recoveries were 93.26% ~ 102.03% , and RSD were 0.23% ~ 2. 87% . The method is simple , accurate and reproducible , and it is suitable for the quality control and evaluation of Aconitum brachypodum.Key words ： aconitum brachypodum ； mesaconitine ； hypaconitine ； aconitine ； benzoylmesaconine ； benzoylhypaconine ； benzoylaconine ； HPLC ； contents雪上一枝蒿为毛萇科植物短柄乌头Aconitum brachypodum Diels.的干燥块根⑴。
药学与临床研究Pharmaceutical and Clinical Research 药学研究一测多评法同时测定制川乌中9种生物碱的含量*陈洪岩\孙晓2,张小龙i，3,姚晨旭\姜燕1连云港市食品药品检验检测中心，连云港222006;2连云港市第一人民医院，连云港222002;3南京中医药大学，南京210023摘要目的：建立一测多评法同时测定制川乌中9种乌头类生物碱含量。
方法：采用高效液 相色谱四级杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q TO F-M S)法。
色谱柱为Agilent ZO RBAX Extend-C18 R R H T(2.1mm x50mm，1.8|x m);甲醇为流动相A,以水（含0.1°%甲酸和2.5 mmol.L-1醋酸铵溶液）为流动相B,梯度洗脱；流速为0.21 mL.mm-1;柱温为30 °C。
以乌头碱为内参物，测定次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌 头原碱对于其的相对校正因子，并对相对校正因子进行重现性考察。
利用相对校正因子计算其它 8种生物碱成分的含量，同时利用外标法测定这9种成分，比较两种测定方法的差异，验证一测多 评法的准确性和可行性。
结果：建立Q A M S法测定乌头类中药材9种生物碱的含量，其测定值与 计算值无显著差异。
结论：经方法学验证，本方法可用于制川乌药材中9种生物碱的含量测定。
关键词制川乌；一测多评法；乌头类生物碱;相对校正因子；外标法；含量测定中图分类号 R927.2 文献标志码 A文章编号 1673-7806(2017)02-113-05毛茛科乌头属是一类非常重要的药用植物。
乌头属植物常见人药的约有40种。
《中国药典》2015 年版中收载了草乌（北乌头干燥块根）、草乌叶（北 乌头干燥叶）、制草乌（草乌的炮制加工品）、川乌 (乌头的干燥母根）、附子（乌头的干燥子根）和制川 乌（川乌的炮制加工品）。
中药乌头碱限度法规
根据中国药典，乌头碱是中药乌头的主要有效成分，具有镇痛、抗炎、止痛等功效，但同时也具有一定的毒性。
为确保用药安全，中国国家药典委员会规定了乌头碱的限度以及相应的法规。
根据《中华人民共和国药典》2015年版，乌头碱的限度为：
每克乌头中乌头碱的含量不得超过1.0毫克。
此外，乌头总生
物碱的含量不得超过2.0毫克。
在中国，乌头及其制剂属于剧毒药物，严禁未经正规医生或中药师指导下私自使用。
根据《中华人民共和国药品管理法》和《中华人民共和国药品管理法实施条例》，未经批准或许可的单位和个人不得生产、销售、使用乌头及其制剂。
此外，根据《中华人民共和国药品管理法》和《中华人民共和国药品管理法实施条例》，乌头及其制剂的生产、销售、使用等活动必须符合相关的药品监管法规和规定，包括药品生产许可、药品经营许可等。
总而言之，乌头碱的限度和相关法规对于确保乌头的安全使用起到了重要的作用。
在使用乌头时，建议咨询医生或中药师，并严格按照医生或中药师的指导使用。
藏药美丽乌头本草考证及其生物碱含量测定
甲央娜美;尼珍;格桑顿珠
【期刊名称】《亚太传统医药》
【年(卷),期】2024(20)3
【摘要】目的:对藏药美丽乌头进行系统考证,同时测定该药所含乌头类生物碱的含量。
方法:查阅历代本草、藏医药典籍和现代文献资料,对藏药美丽乌头进行系统考证。
应用HPLC检测方法,对美丽乌头中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、去甲乌头碱的含量进行测定,同时测定诃子炮制美丽乌头前后去甲乌头碱的含量。
结果:在美丽乌头中未检测到毒性较大的乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的成分,有少量的去甲乌头碱。
经过加诃子粉末炮制后,美丽乌头的去甲乌头碱成分含量明显降低。
结论:美丽乌头是乌头属中的无毒性药材,证实了藏药传统理论记载的无毒性药材的可信性,通过加诃子粉末前后的测定结果,充分说明了藏药配伍具有一定的科学性。
【总页数】5页(P36-40)
【作者】甲央娜美;尼珍;格桑顿珠
【作者单位】西藏藏医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R281
【相关文献】
1.HPLC测定乌头汤提取物中3种乌头类生物碱的含量
2.浅谈藏药美丽乌头、船盔乌头中乌头类双酯型生物碱含量的检测
3.高效液相色谱法测定藏药榜那中次乌头
碱的含量4.人参四逆汤质量控制方法的研究——乌头类生物碱的鉴别、含量测定及乌头碱的限量检查5.酸性染料比色法测定乌头属不同药材中乌头生物碱含量
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高乌头药材常规项检查及高乌甲素、冉乌头碱含量测定目的对高乌头药材进行常规项检查并测定高乌甲素、冉乌头碱含量，为建立高乌头药材质量标准提供参考。
方法采集不同产地高乌头药材，采用薄层色谱法进行定性鉴别，按药典水分测定法（烘干法）、灰分测定法、浸出物测定法测定水分、灰分和浸出物，采用HPLC测定高乌甲素和冉乌头碱含量。
结果薄层色谱斑点清晰，分离度好；暂定高乌头药材中水分、总灰分及酸不溶性灰分分别不得过11.0%、12.0%、7.0%，水溶性浸出物和醇溶性浸出物分别不少于18.2%、10.6%；高乌头药材中冉乌头碱和高乌甲素含量分别不少于0.125%、0.815%。
结论本研究所建立的方法准确可靠，可用于高烏头药材质量评价。
Abstract：Objective To study the routine examination of Aconitum sinomontanum Nakai and determine the contents of lappacontine and ranaconitine；To provide basis for establishing the quality standard of Aconitum sinomontanum Nakai. Methods Aconitum sinomontanum Nakai were collected from different areas.A method of TLC was used for qualitative discrimination. The methods in the Chinese Pharmacopoeia were adopted for the determination of moisture content，ash content and extractives. Determination of lappacontine and ranaconitine were performed by HPLC. Results The TLC showed that the spots were clear and the separation was good. Individual provisional standards：the moisture，total ash and acid-insoluble ash content of Aconitum sinomontanum Nakai were not more than 11.0%，12.0%，and 7.0%，respectively；water soluble and alcohol soluble extractives were not less than 18.2% and 10.6%，respectively. The content of ranaconitine and lappacontine in Aconitum sinomontanum Nakai were not less than 0.125% and 0.815%，respectively. Conclusion The method established by the study is accurate and reliable，and can be used for quality evaluation of Aconitum sinomontanum Nakai.Key words：Aconitum sinomontanum Nakai；routine examination；HPLC；lappacontine；ranaconitine高乌头为毛茛科乌头属植物高乌头Aconitum sinomontanum Nakai的根，又名麻布七、辫子七、破骨七等，是我国甘肃等中西部地区民间习用中药，也是著名“七药”之一[1]，具有祛风除湿、理气止痛、活血散瘀的功效，用于治疗风湿痹痛、关节肿痛、跌打劳伤等。
综 述乌头生物碱含量测定方法现况河北医科大学中医学院 张国红 由会玲 刘云肖(石家庄050091)提要 综述了乌头生物碱的含量测定方法,并对各测量方法进行了分析和比较。关键词 乌头;生物碱;含量测定中图分类号:R28412 文献标识码:B 文章编号:1007-5615(2000)01-0045-03
川乌为毛茛科植物AconrtumcarmichaeliDe2bx的干燥母根,草乌为毛茛科植物AconitumKusnezoffii的干燥块根,为临床常用中药,具祛风除湿止痛的功效。临床多用于治疗风湿性关节炎。近年,又有用于抗癌止痛的倾向。但是,乌头有大毒,因此,对乌头中的有效成分和毒性成分进行含量测定,以确保临床用药的安全性和有效性,是很有必要的。生物碱类成份是乌头的主要有效成份和毒性成份。以下,对生物碱的含量测定方法做一综述。1 总生物碱成份的测定 111 中和法[1] 此法为测定生物碱的经典方法,为1990年版中国药典所采用。分为直接滴定法和回滴定法。直接滴定法终点突破不明显,难于判断;回滴定法灵敏度低,有较大误差。 112 交流示波极谱滴定法[2] 此法测定终点直观,准确,但受pH影响大,需特殊仪器。 113 酸性染料比色法[3～6] 是利用生物碱和酸性染料反应生成离子对而进行比色测定的方法。根据所用酸性染料的不同,又分为溴麝香草酚蓝法、溴甲酚绿法、甲橙提取比色法等。利用酸性染料比色法测定生物碱总量时,要注意符合比尔定律的含量范围,水相pH的选择,呈色的稳定性。从呈色稳定性考虑,甲橙提取比色法优于溴甲酚绿法。溴甲酚绿法优于溴麝香草酚蓝法。 114 导数分光光度法[7,8] 可设定不同的求导阶数以清除干扰组分的吸收。利用导数分光光度法,样品经乙醇提取后,不经分离即可直接测定,测定结果与药典法比较,无显著差别,但该法更灵敏、准确、简便,且提取溶剂乙醇比氯仿对人体更安全。以上4种总生物碱提取方法,以导数分光光度法最为简便,且分光光度计为常备仪器,
因此笔者认为该法对于测量总生物碱为最佳方法,适于药厂使用。乌头中总生物碱是有效部位,因此用总生物碱含量来衡量乌头的药效大小是可行的。但是,不能用总生物碱含量作为毒性指标。因为乌头总生物碱中包括双酯型生物碱、单酯型生物碱、氨醇型生物碱和其他类生物碱,这几种生物碱的毒性差异极大:单酯型生物碱为双酯型生物碱的1/5～1/10,氨醇型生物碱为双酯型生物碱的1/2000～1/4000,同样含量的总生物碱,若这几种生物碱的比例不同,总生物碱的毒性也不相同。因此,乌头的毒性指标应以双酯型生物碱含量为指标。2 乌头碱的含量测定 211 荧光薄层法[9] 该法灵敏度高,分析速度快,但需特殊仪器—荧光分光光度计。 212 纸上电泳分离—洗脱分光光度法[10] 该法对乌头碱的分离效果好,但所需时间长。
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© 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 213 薄层扫描法[11] 该法具有专属性强,准确度高的特点。 214 乌头碱—PVC膜电极法[12] 该法操作简便,碱性水解产物对测定干扰少,电极的重现性好,如果采用盐酸法制备样品,不需要采用有机溶媒提取的繁琐过程。该法的缺点是:在方法学上还不够成熟,需要对浸泡时间及过滤等环节作进一步考证,且制备乌头碱—PVC膜电极比较麻烦。以上4种乌头碱含量测定方法,笔者认为以薄层扫描法为最好。该法操作简单,专属性强,准确度好,方法成熟。但是,仅以乌头碱的含量为指标,不能控制乌头的毒性,因为双酯型生物碱是乌头的主要毒性成分,乌头中所含的毒性生物碱有乌头碱、中乌头碱、次乌头碱等多种生物碱,这些双酯型生物碱的毒性相当。而乌头碱只是这些双酯型生物碱的组分之一。因此,单以乌头碱的含量为指标。无法真实反映乌头的毒性大小,而且不同产地的乌头中所含的双酯型生物碱的种类也不同。例如甘肃、广西乌头中只含中乌头碱,北京乌头中只含中乌头碱和次乌头碱,四川乌头中则3种生物碱都有[13]。如果仅以乌头碱含量为指标,则甘肃、广西、北京三地所产乌头应是无毒的,但事实并非如此。3 酯型总生物碱的含量测定 311 改良盐酸羟胺—高氯酸铁比色法[14] 反应原理为酯型生物碱与羟胺反应生成异羟肪酸,再与Fe+++生成紫红色的络合物,进行比色。该法在盐酸羟胺—高氯酸铁比色法的基础上进行了改良,即在异羟肪酸反应—高氯酸铁显色后,于异羟肪酸反应液中加入一定量pH值为015的高氯酸水溶液,使空白无色。改良后的盐酸羟胺—高氯酸铁比色法使空白在测量波长范围内的吸收消失,消除了其他组分的干扰,提高了检出灵敏度,使显色保持了良好的稳定性。利用酯型总生物碱含量为指标控制乌头的毒性,也是不合理的。因为酯型总生物碱包括单酯型生物碱和双酯型生物碱,而这两种生物碱的毒性大小不同,单酯型生物碱的毒性仅为双酯型生物碱毒性的1/5～1/10,如果这两类生物碱的配比不同,既使是相同量的酯型总生物碱也会表现出不同的毒性。41 双酯型生物碱的含量测定 411 反相高效液相法[15～20] 根据干扰组分的干扰情况,可分别采用普遍HPLC法。反相离子对HPLC法或TLC—HPLC法,对双酯型生物碱乌头碱、中乌头碱、次乌头碱进行分离测定。可控制流动相组成和配比,使各类双酯型生物碱达到基线分离,方法简便,分离效果好,重现性高。常用的流动相有甲醇—水—氯仿—三乙胺系统、甲醇—水—氯仿—二乙胺系统和甲醇—水—乙腈系统,可根据不同情况,
灵活选择流动相。乌头碱在二氯甲烷中比较稳定,而在甲醇中则不稳定,一个星期就发生分解,因此在用高效液相法测定双酯型生物碱含量时,用二氯甲烷做定容溶剂较好。另外,在样品提取过程中,应注意操作要迅速,如提取时间过长,则乌头碱水解,影响测定结果。 412 双波长薄层扫描法[21] 该法同样可以灵活选用展开剂,使乌头碱、中乌头碱、次乌头碱达到良好分离,且含量测定的结果准确可靠、精密度良好,回收率稳定,且操作简便、快速,不需特殊仪器,适于基层使用。线性范围为2～6μg。 413 高效毛细管电泳法[22] 该法与HPLC
相比,具有分离时间更短、杂质干扰更少、使用有机溶剂少、操作简便等优点,满足乌头类药材分析的要求,且获得的结果令人满意。该方法已被香港工业署组织的中药质量控制实验室用作有毒中药材的质量管理控制,是一种很有应用前景的分析方法。上述3种双酯类生物碱含量测定方法中,
双波长薄层扫描法操作简便、快速、不需要特殊仪器,适合基层单位使用。而反相HPLC法和高效毛细管电泳法则以用样品量少、快速、适合微量分析见长。随着分析方法的进步,含
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© 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.量测定方法有向微量、快速发展的趋势,因此未来的含量测定方法,将会越来越多地使用反相HPLC法和高效毛细管电泳法。上面的3种双酯类生物碱含量测定方法都是先将各个双酯类生物碱分离出来,分别加以定量,再将各个双酯型生物碱的含量相加,从而求得总的双酯型生物碱含量。用这样的双酯型生物碱含量作为控制乌头毒性的指标是可以的,它基本可以反映乌头类药物的毒性大小。但是,现在对双酯型生物碱的分离测定多局限于乌头碱、中乌头碱和次乌头碱3种,而乌头中所含的双酯型生物碱并不只是这3种,因此只用中乌头碱、乌头碱、次乌头碱3种双酯型生物碱的和作为控制乌头毒性的指标,似乎也有不妥。如果能将所有双酯型生物碱集中到一起,全部提取分离出来,测定其总量,作为控制乌头毒性的标准似为更好。另外,制乌头中双酯型生物碱发生水解,
产生单酯型生物碱、氨醇型生物碱,其中氨醇型生物碱的毒性为双酯型生物碱的1/2000～1/
4000,毒性极低,几乎无毒。而单酯型生物碱的毒性为双酯型生物碱的1/5～1/10,毒性虽然降低,但依然有相当的毒性。因此,在控制乌头的毒性时,应将单酯型生物碱的毒性也考虑进去,以(双酯型生物碱含量+1/5的单酯型生物碱含量)作为控制乌头毒性的指标似乎更为可靠。
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