生化综述

生化药物的综述第一组：孙飞一、生化药物的定义中国药典分化学药品、生化药品、抗生素、放射性药品、生物制品。

生物制品系指以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织作为起始材料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备，并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量制成的生物活性制剂。

包括疫（菌）苗、毒素、类毒素、免疫血清、血液制品、免疫球胆白、抗原、变态反应原、细胞因子、激素、酶、发酵产品、单克隆抗体、DNA重组产品、体外免疫诊断试剂等，供某些疾病的预防、治疗和诊断用。

生化药物一般是系指从动物、植物及微生物提取的，亦可用生物-化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质，如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、辅酶、多糖、核苷酸、脂和生物胺等，以及其衍生物、降解物及大分子的结构修饰物等。

二、生化药物的分类三、生化药物的特点1.分子量不是定值生化药物除氨基酸、核苷酸、辅酶及甾体激素等属化学结构明确的小分子化合物外，大部分为大分子的物质（如蛋白质、多肽、核酸、多糖类等），其分子量一般几千至几十万。

对大分子的生化药物而言，即使组分相同，往往由于分子量不同而产生不同的生理活性。

例如肝素是由D-硫酸氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸组成的酸性粘多糖，能明显延长血凝时间，有抗凝血作用；而低分子量肝素，其抗凝活性低于肝素。

所以，生化药物常需进行分子量的测定。

2.需检查生物活性在制备多肽或蛋白质类药物时，有时因工艺条件的变化，导致蛋白质失活。

因此，对这些生化药物，除了用通常采用的理化法检验外：尚需用生物检定法进行检定，以证实其生物活性。

3.需做安全性检查由于生化药物的性质特殊，生产工艺复杂，易引入特殊杂质，故生化药物常需做安全性检查，如热原检查、过敏试验、异常毒性试验等。

4.需做效价测定生化药物多数可通过含量测定，以表明其主药的含量。

但对酶类药物需进行效价测定或酶活力测定，以表明其有效成分含量的高低。

5.结构确证难在大分子生化药物中，由于有效结构或分子量不确定，其结构的确证很难沿用元素分析、红外、紫外、核磁、质谱等方法加以证实，往往还要用生化法如氨基酸序列等法加以证实毕业论文格式的写作顺序是：标题、作者班级、作者姓名、指导教师姓名、中文摘要及关键词、英文摘要及英文关键词、正文、参考文献。

生物化学总结资料一、蛋白质化学（L-α-氨基酸，除甘氨酸无不对称碳而不分D,L）蛋白质元素：C, H, O, S, N（16%）→凯氏定氮法：每克样品中含氮克数*6.25*100=100克样品中蛋白质的含量氨基酸理化性质：1、等电点PI：早某种PH环境中，AA可能不节里，或解离成阳性离子或阴性离子的程度及趋势相等，成为兼性离子，在电场中它既不向阴极，也不向阳极，此时AA所处的环境的PH称为PI。

计算：PI=1/2 *(pK1+pK2)2、芳香族aa的紫外线吸收：色氨酸〉酪氨酸〉苯丙氨酸280nm 区别于核算的260nm3、茚三酮反应：蓝紫色570nm最大吸收峰黄色440nm 脯氨酸，羟脯氨酸棕色天冬酰胺分类单纯蛋白质/结合蛋白质Family: 蛋白质特定结构域domain或氨基酸基序motif常与某种生物学功能相联系，根据结构与供讷讷国的关系，将具有相同或类似domain或motif的蛋白质归为一大类或一组，分别称为superfamily, family 或subfamily, 分类范围越小，居于同一类别中的蛋白质或多肽的同源性越高，相似的结构成分越多，功能越接近。

结构（重点）1、肽键：两分子氨基酸可借以分子氨基酸的氨基与另一分子的羧基脱去一分子水缩合产生新的酰胺键。

性质：1、-CO-NH-中四个原子和与之相邻的两个α碳原子位于同一刚性平面构成一个肽单元；2、抬肩上的-NH-的H与C=O上的O的方向总相反3、N-C不能自由旋转，因为有部分双键的性质4、有方向性，N→C2、一级结构：氨基酸在多肽链中的排列顺序及其共价连接，肽键是其基本结构单位，有些还含有二硫键3、二级结构：在一级结构基础上形成的特殊结构形式，包括α-helix, β-pleated sheet, β-turn,random turn1、α-helix：由α碳，羧基碳，氨基氮联合，绕假象的中轴沿特殊方向旋转形成。

围绕中心轴，每隔3.6个aa上升一圈，每个aa残基上升0.15nm，故螺距为0.54nm人体的都是L-α-aa，右手螺旋，侧脸R集团神像螺旋外侧才稳定。

微污染物-微生物活性的微流控芯片直接检测1. 研究的目的和意义环境监控已越来越为人们所需要，这就要求有合适的实时检测设备。

微流控芯片（Microfluidic Chip）将化学、生物、医学等领域所涉及的样品的选择、制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成到一个几平方厘米（甚至更小）的微芯片上，通过微通道结构来控制流体流动，从而完成不同的化学或生物反应过程，并对其产物进行分析，它为生化分析新局面的开创提供了一个新的研究平台。

通俗点，就是将实验室搬到微芯片上，微流控芯片为环境监控提供了一种合适的分析监测设备。

本文介绍了以色谱纸为基材制作了纸基微流控芯片的基本概况、芯片的发展现状、芯片的制作、芯片检测方法，并将纸基微流控和微污染物-微生物的活性相结合，对微污染物-微生物活性的微流控芯片直接检测进行了初步研究。

2. 微流控芯片的基本概况一种新兴的芯片技术——微流控芯片技术以其快速分析、低消耗、微型化和自动化等特点发展非常迅速。

微流控芯片（又称芯片实验室）是一种以在微米尺度空间对流体进行操控为主要特征的科学技术。

它具有将化学和生物实验室的基本功能微缩到一个几平方厘米芯片上的能力，已经显示了重要的应用前景。

该技术是在分析化学领域发展起来的，它以分析化学为基础，以微机电加工技术、微流体驱动或者控制、检测技术为依托，以微通道网路为结构特征，以化学和生命科学为主要应用对象，把整个实验室的功能集成到芯片上，而且制作简便，作为一种新兴的科学技术，微流控研究已经涉及化学、生物学、工程学和物理学等诸多领域，学科交叉性强，分析化学则是其第一轮也是最直接的一个应用领域[1]。

近年来，微流控研究发展迅速，技术创新层出不穷，应用领域不断拓宽。

3. 微流控芯片的发展现状微型全分析系统（Miniaturized Total Analysis Systems,μ-TAS）的概念是1990年Manz和Widmer等人首次提出来的，目前已经发展为世界上最先进的科学技术之一。

降钙素原（PCT）的检测与临床应用降钙素原（procalcitonin,PCT）是一种由116个氨基酸组成、相对分子质量约13000的糖蛋白，是降钙素(calcitonin)的前肽物，无降钙素样的激素活性，其分子由降钙素、下钙素和一个含57个氨基酸的N-末端碎片组成。

降钙素原的半衰期为25~30h，在体内稳定性很好，由位于11号染色体上（11P15,4）的单拷贝基因编码［1］。

近年来研究表明，降钙素原对全身细菌性感染诊断和鉴别，治疗效果及预后的判断，比C-反应蛋白（CRP）和各种炎症反应因子更敏感、更具有临床实用价值。

目前PCT已是世界上常用的炎症诊断指标，它的检测已被广泛应用于ICU病房，肿瘤科，外科，急诊科，呼吸科等各个科室。

与其它炎症指标相比，PCT有着许多独特的优势，被公认为是目前最敏感和最特异性的脓毒指标。

1 降钙素原的检测方法1.1 放射免疫分析法：检测的是游离降钙素原、结合型降钙素原和降钙素基因相关肽前体的混合物，而不能区分上述3种物质。

其检测灵敏度为4ng/L，线性范围为10-17ng/L。

该法检测耗时长为（19~22h），而且有放射性元素的污染，使用受到限制。

1.2 双抗体夹心法：使用2个单克隆抗体，一个为单克隆降钙素抗体，另一个为单克隆抗降钙素抗体，分别结合到降钙素原分子的2个部位，这样可以排除交叉反应。

其检测最低限值为0.1g/L。

该法操作简便、特异性强、敏感度高，2h可以出结果。

1.3 胶体金比色法：一种半定量检测降钙素原的方法，是专门制备好的PCT-Q 检测卡，简便快捷，整个检测过程不超过30min，结果分四级：正常<0.5ng/mL；轻度升高>0.5ng/mL；明显升高>2ng/mL；显著升高>10ng/mL。

此法不依赖仪器、操作简便、快速，适合床旁检测。

1.4 透射免疫浊度法：该测定方法简便、快速，可自动化，适合于批量检测。

虽然免疫透射比浊的方法学籍临床应用尚需做进一步的验证，但其应用前景非常看好。