食品中发酵酒中甲醛的测定作业指导书

乙酰丙酮法测定食品中甲醛的含量000 来源：中国色谱网 作者： 2007-5-18 00 本方法的基本原理是样品中的甲醛在PH为5.5—7.0条件下，与乙酰丙酮及铵离子，生

成黄色的3、5—乙酰基—1、4二氢吡啶二碳酸，在412nm波长下有最大吸收，用标准曲

线法定量00

1、 检测设备和试剂

1.1检测设备：UV-754分光度计（上海第三分析仪器厂制造） 1.2试剂

1.2.1乙酰丙酮溶液：吸取3.0ml乙酰丙酮（AR）用水稀释至200ml。

1.2.2乙酸—乙酸铵缓冲溶液：称取15.42g乙酸铵（AR）溶于300ml水中，加入2.3ml

冰醋酸，调PH值近5.75，用水稀释至400ml。

1.2.3 硫酸钠溶液：称取20g无水硫酸钠（AR）溶于250ml烧杯中，加入100ml水溶解。

1.2.4 乙酸锌溶液:称取20g乙酸锌（AR）加水溶解并稀释至200ml。

1.2.5 氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠（AR）于500ml烧杯中,加水溶解并稀释至500ml。

1.2.6甲醛标准溶液：10.0mg/ml（由国家标准物质研究中心购进）

1.2.7 甲醛标准使用液：由甲醛标准溶液稀释成10ug/ml甲醛标准使用液。 2、检测环境条件：常规室温

3、标准曲线的制作00

分别吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80ml甲醛标准使用液(相当甲醛含量为:0.00,2.0,4.0

,6.0,8.0ug甲醛)于10ml比色管中，加入2ml乙酸—乙酸铵缓冲溶液和1ml乙酰丙酮溶

液，加水至刻度，混匀，置70℃水浴中放置30min，取出冷却至室温后，用1cm比色杯，于412nm处以零号管调节零点，测定吸光度，以吸光度及甲醛的含量为纵、横坐

标，绘制标准曲线。

4、样品处理

称取面制品样品5.00g于50ml具塞比色中,加入35ml硫酸钠溶液,加塞,混匀,置60℃

水浴中放置一小时,并不断振摇,取出,冷却后,加入5ml乙酸锌溶液和3ml氢氧化钠溶液,用水定容至50ml,混匀,放置20min,3000r/min,离心,取上清液过滤,备用,同时做空白试

摘要: 测定甲醛没有固定的标准方法,应根据其可能的含量或浓度范围、潜在的干扰因素、检测方法的灵敏度、样品处理方式和现有的仪器设备条件,选择合适的分析方法。本文介绍了分光光度法、滴定法、气相色谱法、液相色谱法、流动注射法、极谱法等方法的原理及各自的优缺点。其中目前最常用的是乙酰丙酮分光光度法和色谱法。食品中甲醛的检测方法很多,主要有分光光度法、滴定法、气相色谱法、液相色谱法、流动注射法、极谱法等[1～4]，以及购买思乐智甲醛检测仪等等。在检测中,应根据其可能的含量或浓度范围、潜在的干扰因素、检测方法的灵敏度、样品处理方式和现有的仪器设备条件,选择合适的分析方法。

1 检测样品的前处理对于一般的固体或液体食品样品,均可用水蒸气蒸馏方法[5～7],即取5～10g样品,加适量水(20ml左右)和10ml10%磷酸进行水蒸气蒸馏,以预先装有10ml水的收集瓶收集至100～200ml,取适量收集液(根据样品中甲醛含量而定)检测分析。蒸馏过程如起泡沫,则加入215ml液体石蜡除泡。另外,也可采用水直接浸泡后直接测定[8,9]或全玻璃蒸馏器直接蒸馏后取接收液测定[10]。2 甲醛的定性测定目前我国卫生监督检测机构一般在抽样调查水产品中的甲醛时,采用定性或半定量测定的方法,统计样品合格率,估计市场中甲醛的使用情况。甲醛定性方面的研究主要依据甲醛与某些化学试剂的特异反应,主要包括间苯三酚法[9,11]、亚硝基亚铁氰化钠法[12]、三氯化铁法、亚硫酸品红法[13]、乙酰丙酮法[5]、变色酸氧化等方法,一般直接取水产品的浸泡液进行测定,方法简便易行,但灵敏度不高。分光光度法目前甲醛测定采用的分光光度法主要有乙酰丙酮法[14,15]、酚试剂分光光度法[16]、乙酰乙酸乙酯分光光度法[17]和变色酸氧化法[18]等。几种方法都是采用蒸馏法即在酸性介质中加热,将样品中的甲醛蒸馏出后经水溶液吸收,分别与显色剂作用,根据颜色的深浅,比色定量。乙酰丙酮法的原理是在过量铵盐存在下,甲醛与乙酰丙酮(2,42二酮)反应生成黄色化合物,在该有色化合物的最大吸收波长415nm处测定其吸光度值[15]。根据标准曲线计算出水样中甲醛的含量。其化学反应式如下[19]:2HCHO+NH3+2[CH32CO2CH22CO2CH3→CH32CO2CH22NCHCCCCHHCH22CH22CO2CH3+4H2O该方法测定时生成的颜色可稳定10小时,少量的酮、醇及其它醛类不干扰测定,该方法最低检出量为10μgPml[14]。国内多采用此法检测水产品和食品中的甲醛。卫生部发布的测定水产品中甲醛的方法即是此方法。此方法原理简单,操作简便,呈色稳定,费用少,检出限较低,但相对于仪器法来说,其灵敏度低,抗干扰差。分光光度法的相对误差为2%～5%,能满足一般检测机构监督检验之需,因此有很广的应用前景。变色酸法也称铬变酸法,原理为甲醛在浓硫酸溶液中可与变色酸(l,82二羟基萘23,62二磺酸)作用形成紫色化合物,该化合物最大吸收波长在580nm处,可用分光光度法进行分析测定[16]。改变变色酸浓度和采用不同的采样手段,可满足不同浓度甲醛检测需要。用011%变色酸286%硫酸溶液作吸收液,检测限可达20μgPL[17]。该法的优点是操作简便、快速灵敏;缺点是在浓硫酸介质中进行,不易控制,且醛类、烯类化合物及NO2等对测定有干扰。酚试剂分光光度法的原理是甲醛与酚试剂(MBTH)反应生成嗪,嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化成蓝色化合物,其颜色的深浅与甲醛含量成正比,与标准比较定量[16]。优点是灵敏度高,干扰少,当采样体积为10L,最低检出质量浓度为0101mgPm3。乙酰乙酸乙酯分光光度法的原理是在弱酸性溶液中乙酰乙酸乙酯与甲醛及氨反应,该化合物在375nm处有最大吸收;其吸光度与甲醛浓度符合比尔定律[17]。反应方程式如下:乙酰乙酸乙酯+甲醛+氨→2,62二甲基21,42二氢23,52吡啶二乙酸乙酯甲醛浓度为0108～410mgPL的样品适用该法检测,具有良好的精密度。10mgPL丙醛、丁醛、丙烯醛;≤8mgPL的乙醛;100mgPL苯酚都不会对该实验产生干扰[16]。3.2

食品中甲醛的快速测定

甲醛是一种毒性很强破坏生物细胞蛋白质的原生质物质，可引起人体过敏、肠道刺激反应、食物中毒等疾患。在食品生产、加工与运输环节，一般不容易被甲醛污染。某些食物本底存在微量的甲醛不足以对人体造成危害，如：大麦粉约24mg/kg，小麦粉2～14 mg/kg，绿豆粉约2 mg/kg，棉白糖4～7 mg/kg，白沙糖1～4 mg/kg，红塘1～3

mg/kg，腐竹4～6 mg/kg，粉丝约1mg/kg，鳕鱼肉13～48 mg/kg。其它一些海产品的肉质中也常有几毫克/公斤、甚至几十毫克/公斤的甲醛存在。

由于甲醛可以改变一些食品的色感并有防腐作用，在无知或金钱利益的驱使下，一些地区的不法分子在某些食品中加入了甲醛。本方法主要是针对水发产品的水中加入甲醛的检测。即使水发产品的本身每公斤存在有几十毫克的甲醛，其溶解到水中的量很少，除非蒸馏，本方法不容易观察出来，当人为加入甲醛时，本方法可迅速检测出来，检出线为20ｕg/5ml，相当于4mg/L。

本方法也可用于其它食品（如面粉、竹笋等）中加入甲醛合次硫酸氢钠（俗称：吊白块、雕白块）的筛选测定，这些食品中本底存在的微量甲醛很难在10几分钟浸出。当检测出现阳性结果时，很可能人为加入了吊白块，应进行进一步的定量实验。

方法一、试剂包法 1. 指示剂配制

????试剂盒中有两种试剂，大包试剂用80 ml蒸馏水或纯净水溶解后，将小试剂管中的试剂加入其中溶解，并用水稀释到100ml，放入棕色瓶或裹有黑纸的瓶中备用，有效期为3个月，指示剂放置后会分层，使用前一定要轻轻摇动20下以上。（指示剂为强碱性，如果不慎溅入眼中，用清水冲洗）。

2. 测定方法

2.1水发产品：取5～10 ml水发产品的浸泡液或水发产品的淋洗液3～5ml于比色管或试管中，另取一只试管加入同等量的纯水或自来水，各管中加入甲醛指示剂1ml，摇匀后1分钟内对比观察结果。 对于有浅颜色的样品液体，可取同等量的液体，不加指示剂作为对照观察。对于深色溶液可以用活性碳脱色后进行实验。

操 作 规 程 文件编号：

版 本：A0

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标题：甲醛检测作业指导书

1 目的：检测待测物品或空间所含的甲醛浓度值，规范试验过程，确保试验结果的准确性和

科学性。

2 范围：家具产品或室内空气质量等。

3 设备：甲醛检测专用仪器（或称为空气采样器）ZK-2A、甲醛检测管、甲醛检测液等。

4 作业内容

4.1 确定检测方法：根据实际需要，选择以下两种方法之一进行检测。方法1—使用“室内空气甲醛检测剂”检测法，见4.2条；方法2—使用“甲醛检测专用仪器ZK-2A”检测法，见4.3条。

4.2 使用“室内空气甲醛检测剂”检测法

4.2.1 检测时提前半小时将需检测的目标空间的门窗关闭，把甲醛吸收液倒入甲醛吸收瓶中。

4.2.2 盖紧甲醛吸收瓶盖，上下摇动30秒左右。

4.2.3 打开瓶盖后，将其放在待测房间距离地面0.8至1.5米高的位置6小时，（检测家具时，放在家具内部2小时）。

4.2.4 检测时，将比色管封口打开，用手捏紧底部把其中空气排出，将其插入吸收瓶液体下，松动手，将溶液自动吸入比色管中。

4.2.5 将比色管的管口向上，左右摇动30秒。用手握住比色管下部，用体温加热5分钟。

4.2.6 把比色管和甲醛速测卡色阶比较，即可读出被测房间（或家具）中的甲醛浓度值。

4.2.7 判别标准：按国家卫生标准规定：室内空气甲醛浓度限值为0.10mg/m3.

4.3使用“甲醛检测专用仪器ZK-2A”检测法

4.3.1检测时提前半小时将需检测的目标空间的门窗关闭，把甲醛吸收液5ml倒入专用气体吸收管（为玻璃试管）中。

4.3.2 把气体吸收管放在采样器侧面的U 型金属架上，然后与仪器后侧吸气管接头相连。注意不能接反，以免吸收液倒进流量计内。

4.3.3 插上电源，打开采样器上的电源开关，红色电源指示灯亮，表示可以进行采样。拧动定时器，设定采样时间(用甲醛检测液，采样时间为10分钟；用甲醛固体试剂试管，