NY_T 1867—2010 土壤腐殖质组成的测定焦磷酸钠－氢氧化钠提取重铬酸钾氧化容量法（可编辑）
NY_T 1867—2010 土壤腐殖质组成的测定焦磷酸钠,氢
氧化钠提取重铬酸钾氧化容量法
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1867?2010
土壤腐殖质组成的测定
焦磷酸钠-氢氧化钠提取
重铬酸钾氧化容量法
Determination of humus content in soil
2010-05-20 发布 2010-09-01实施
前言本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位:全国农业技术推广服务中心、中国农科院农业资源与农业区划研究所、中国农业大学资源与环境学院、太原土壤肥料测试中心。本标准主要起草人:杜森、李秀英、李花粉、郭延峰、孙立艳、杨帆、马常宝。
土壤腐殖质组成的测定
焦磷酸钠-氢氧化钠提取重铬酸钾氧化容量法
1 范围本标准规定了焦磷酸钠-氢氧化钠提取,重铬酸钾氧化容量法测定土壤腐殖质组成的方法。本标准适用于各类土壤腐殖质组成的测定。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单不包括勘误的内容或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 85 土壤有机质测定法
3 原理土壤腐殖质按其溶解度分为可溶性腐殖质胡敏酸和富里酸及不溶性腐殖质胡敏素。用0.1
mol/L焦磷酸钠氢氧化钠混合液提取可溶性腐殖质,采用重铬酸钾氧化容量法测定胡敏酸和富里酸总
量。提取液经酸化沉淀分离胡敏酸,并测定其含量,计算可得富里酸含量。测定土壤样品总碳量,减去
胡敏酸和富里酸含量即为胡敏素含量。
4 试剂和材料本标准所用试剂在未注明规格时,均为分析纯试剂。本标准用水应符合GB/T 6682中三级水之
规定。
4.1 氢氧化钠0.1 mol/L -焦磷酸钠0.1 mol/L混合提取液pHl3:称取4.0 g
氢氧化钠和44.6 g
焦磷酸钠Na4P2O7?10H2O溶于水,稀释至1 L。
4.2 氢氧化钠溶液:cNaOH =0.05 mol/L,称取2.0 g氢氧化钠溶于水,稀释至1 L。
4.3 硫酸溶液:c1/2H2SO4 =1 mol/L,吸取30 mL硫酸ρ1.84 g/mL,缓缓加入水中,冷却后稀释至1 L。
4.4 硫酸溶液:c1/2H2SO4 =0.05 mol/L,吸取1 mol/L,硫酸溶液50 mL,加入水中,冷却后稀释至1 L。
4.5 其他试剂:同NY/T 85中第4章。
5 仪器与设备
5.1 分析实验室通常使用的仪器设备。
5.2 恒温水浴锅。
5.3 振荡机控温25??2?,满足180 r/min?20 r/min的振荡频率或达到相同效果。
5.4 其他设备同NY/T85中第3章。
6 分析步骤
6.1 腐殖质总量的测定按NY/T 85土壤有机质测定法规定测定,按
7.1公式计算腐殖质总量。
6.2 胡敏酸和富里酸含量的测定
6.2.1 试样溶液的制备称取过0.25 mm孔径筛的风干试样5.00 g于250 mL 三角瓶中,加入100 mL氢氧化钠-焦磷酸钠
混合提取液,塞紧瓶塞后于25??2?、在恒温振荡机上振荡30 min?2 min,稍静止后,微微转动三角
瓶,用上清液洗下黏在瓶壁上的土粒,静置约24 hN度约25?,将溶液充分摇匀进行过滤或离心,使
滤液清澈,弃去残渣,滤液收集于三角瓶中。
6.2.2 胡敏酸和富里酸含量的测定吸取试样溶液2.00 mL~10.00 mL视滤液颜色深浅而定于150 mL三角瓶中,用1 mol/L硫酸溶
液中和至pH7.0可用pH试纸检验,放入水浴锅中蒸干,按NY/T 85中6.1~6.4规定测定碳量,为
胡敏酸+富里酸含量。
6.2.3 胡敏酸含量的测定吸取试样溶液20.0 mL~50.0 mL视滤液颜色深浅而定于200 mL烧杯中,在加热条件下逐滴加
入1 m01/L硫酸溶液,使pH为1~1.5可用pH试纸检验,此时应出现胡敏酸絮状沉淀。将烧杯放入
约80?恒温水浴中保温30 min后静置过夜,使胡敏酸与富里酸充分分离。次日用慢速滤纸过滤或离
心,用0.05 m01/L硫酸溶液洗涤沉淀,至洗涤液无色为止约150 mL洗涤液,弃去滤液,将沉淀用热的
0.05 mol/L氢氧化钠溶液少量多次快速洗涤溶解至25 mL~100 mL容量瓶中视沉淀多少而定,用
0.05 m01/L氢氧化钠溶液定容。吸取5.00 mL~20.00 mL视胡敏酸含量多少而定于150 mL三角瓶
中,用1 m01/L硫酸溶液中和至pH7.0可用pH试纸检验,放入水浴锅中蒸干,按NY/T85中6.1~
6.4 规定测定碳量,为胡敏酸含量。
7 结果计算
7.1 腐殖质总碳量X0以质量分数计,数值以克每千克g/kg表示,按式1计算:
……………………………1 式中: V0??空白试验时,
消耗硫酸亚铁标准溶液的体积,单位为毫升mL; V??样品测定时,消耗硫酸亚铁标准溶液的体积,单位为毫升mL; c??硫酸亚铁标准溶液的浓度,单位为摩尔每升mol/L;
0.003??1/4碳原子的毫摩尔质量,单位为克每摩尔g/mol; m??试样的质量,单位为克g。
7.2 胡敏酸+富里酸总碳量X1以质量分数计,数值以克每千克g/kg表示,按式2计算:………………………………2 式中: V01??空白试验时,消耗硫酸亚铁标准溶
液的体积,单位为毫升mL; V1??样品测定时,消耗硫酸亚铁标准溶液的体积,单位为毫升mL;c??硫酸亚铁标准溶液的浓度,单位为摩尔每升mol/L;
0.003??1/4碳原子的毫摩尔质量,单位为克每摩尔g/mol;
D1??测定胡敏酸+富里酸含量时分取倍数;m??试样的质量,单位为克g。
7.3 胡敏酸碳量X2以质量分数计,数值以克每千克g/kg表示,按式3计
算: …………………………………3 式中: V02??空白试验时,消耗硫酸亚铁标准溶液的体积,单位为毫升mL;V2??样品测定时,消耗硫酸亚铁标准溶液的体积,单位为毫升mL;c??硫酸亚铁标准溶液的浓度,单位为摩尔每升mol/L;
0.003??1/4碳原子的毫摩尔质量,单位为克每摩尔g/mol; D2??测定胡敏酸含量时分取两次的倍数;m??试样的质量,单位为克g。
7.4 富里酸碳量X3以质量分数计,数值以克每千克g/kg表示,按式4计算: X3 = X1-X2 (4)
7.5 胡敏素碳量X4以质量分数计,数值以克每千克g/kg表示,按式5计算: X4 = X0-X1 (5)
8 允许差
平行测定结果的相对误差不大于8%。
不同实验室间测定结果的相对误差不大于15%。
土壤腐殖质与腐植酸的区别与关系 “土壤腐殖质”。土壤有机质的主要部分。是黑色的无定形的有机胶体。腐殖质是具有酸性、含氮量很高的胶体状的高分子有机化合物。腐殖质在土壤中，在一定条件下缓慢地分解，释放出以氮和硫为主的养分来供给植物吸收，同时放出二氧化碳加强植物的光合作用。 土壤有机质在微生物作用下形成的复杂而较稳定的大分子有机化合物。腐殖质是土壤有机质的主要组成部分，一般占有机质总量的50～70％。腐殖质的主要组成元素为碳、氢、氧、氮、硫、磷等。 腐殖质并非单一的有机化合物，而是在组成、结构及性质上既有共性又有差别的一系列有机化合物的混合物，其中以胡敏酸与富里酸为主。 胡敏酸是一类能溶于碱溶液而被酸溶液所沉淀的腐殖质物质，其分子量比富里酸大，分子组成中各元素的百分含量分别是：C50～60，H2.8～6.6，O 31～40，N2.6～6.0。胡敏酸比富里酸的酸度小，呈微酸性，吸收容量较高，它的一价盐类溶于水，二价和三价盐类不溶于水，这对土壤养分的保持及土壤结构的形成都具有意义。 富里酸是一类既溶于碱溶液又溶于酸溶液的腐殖质物质，其分子量比胡敏酸小，分子组成中各元素的百分含量分别是：C40～52，H4～6，O 40～48，N2～6。富里酸呈强酸性，移动性大，吸收性比胡敏酸低，它的一价、二价、三价盐类均溶于水，因此富里酸对促进矿物的分解和养分的释放具有重要作用。 腐殖质在土壤中可以呈游离的腐殖酸和腐殖酸盐类状态存在，也可以呈凝胶状与矿质粘粒紧密结合，成为重要的胶体物质。腐殖质不仅是土壤养分的主要来源，而且对土壤的物理、化学、生物学性质都有重要影响，是土壤肥力指标之一。 腐植酸（Humic Acid，简写HA） 腐植酸（Humic Acid，简写HA）是动植物遗骸，主要是植物的遗骸，经过微生物的分解和转化，以及一系列的化学过程和积累起来的一类有机物质。它是由芳香族及其多种官能团构成的高分子有机酸，具有良好的生理活性和吸收、络合、交换等功能。它广泛存在于土壤、湖泊、河流、海洋以及泥炭（又称草炭）、褐煤、风化煤中。按自然界分类，它可以分为三类，即土壤腐植酸、水体腐植酸和煤炭腐植酸。九十年代初，用发酵法，通过接种，可提取生化腐植酸或生化黄腐酸等有机酸物质。 我国腐植酸有组织的研究始于五十年代末，主要是从泥炭利用开始的。六十年代，全国掀起了利用腐植酸肥料和改良土壤的热潮，声势很大。真正受到国家重视和推动则是七十年代中期以后。当时，国务院副总理王震同志还亲自抓，国务院先后于1974年和1979年两次以国发110号和200号文件，全面推动了我国腐植酸的综合开发和利用。八十年代，随着全国腐植酸事业的不断发展，国家经贸委于1987年批准成立了“中国腐植酸工业协会”，负责统一组织和协调全国的腐植酸工作。一些腐植酸资源贮量大的省、市，还纳入了政府工作序列，为此专门成立了腐植酸办公室。 我国腐植酸资源非常丰富，它储量大，分布广，品位好。据有关资料统计，有泥炭124．8亿吨，居世界第四位；褐煤1265亿吨，还有大量的风化煤。在利用生物工程方面，进一步筛选优良菌种，加快开发定向菌种，这样，研制生化腐植酸或生化黄腐酸类产品的资源利用就会无穷无尽。
土壤全磷测定法GB 9837—88 1 主题内容与适用范围本标准对土壤全磷测定的原理、仪器、设备、样品制备、操作步骤等做了说明和规定。 本标准适用于测定各类土壤全磷含量。 2 测定原理土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，用分光光度法定量测定。 3 仪器、设备 3.1 土壤样品粉碎机； 3.2 土壤筛：孔径1mm 和0.149mm； 3.3 分析天平：感量为0.0001g； 3.4镍（或银）坩埚：容量＞30mL 3.5高温电炉：温度可调（0?1000C）; 3.6分光光度计：要求包括700nm波长； 3.7 容量瓶：50、100、1000mL； 3.8 移液管：5、10、15、20mL； 3.9 漏斗：直径7cm； 3.10 烧杯：150、1000mL； 3.11 玛瑙研钵。 4 试剂所有试剂，除注明者外，皆为分析纯，水均指蒸馏水或去离子水。 4.1 氢氧化钠（GB 629）； 4.2 无水乙醇（GB 678）； 4.3 10% （M/V）碳酸钠溶液：10g无水碳酸钠（GB 639）溶于水后，稀释至 100mL, 摇匀； 4.4 5%（V/V）硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸（GB 625, 9 5.0?98.0%，比重1.84）缓缓加入90mL 水中，冷却后加水至100mL；
4.5 3mol/L 硫酸溶液：量取168mL 浓硫酸缓缓加入到盛有800mL 左右水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，再加水至1000mL； 4.6 二硝基酚指示剂：称取0.2g 2，6-二硝基酚溶于100mL 水中； 4.7 0.5%酒石酸锑钾溶液：称取化学纯酒石酸锑钾0.5g溶于100mL水中； 4.8硫酸钼锑贮备液：量取126mL浓硫酸，缓缓加入到400mL水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵（GB 657）10g溶于温度约60°C300mL水中，冷却。 然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入0.5%酒石酸锑钾溶液（ 4.7）100mL，冷却后，加水稀释至1000mL，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1%，硫酸 2.25mol/L ； 4.9钼锑抗显色剂：称取1.5g抗坏血酸（左旋，旋光度+21?22°溶于100mL 钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，宜用时现配； 4.10磷标准贮备液：准确称取经105C下烘干2h的磷酸二氢钾（GB 1274，优级纯）0.4390g,用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至1000mL。该溶液含磷100mg/L，放入冰箱可供长期使用； 4.11 5mg/L磷标准溶液：吸取5mL磷贮备液（4.10），放入100mL容量瓶中，加 水定容。该溶液用时现配； 4.12 无磷定性滤纸。 5 土壤样品制备 取通过1mm孔径筛的风干土样在牛皮纸上铺成薄层，划分成许多小方格。 用小勺在每个方格中提取出等量土样（总量不少于20g）于玛瑙研钵中进一步研磨，使其全部通过0.149mm孔径筛。混匀后装入磨口瓶中备用。 6 操作步骤 6.1 熔样 准确称取风干样品0.25g,精确到0.0001g,小心放入镍（或银）坩埚（3.4）底部，切勿粘在壁上。加入无水乙醇（ 4.2）3?4 滴，润湿样品，在样品上平铺2g 氢氧化钠（ 4.1）。将坩埚（处理大批样品时，暂放入大干燥器中以防吸潮）放入高温电炉（3.5），升温。当温度升至400C左右时，切断电源，暂停15min。然后继续升温至720C，并保持15min,取出冷却。加入约80C的水10mL，待熔块溶解后，将溶液无损失地转入100mL 容量瓶（ 3.7）内，同时用3mol/L 硫酸溶液
土壤腐殖质组成测定 土壤腐殖质事土壤有机质的主要成分。一般来说，它主要是由胡敏酸（HA)和富里酸（FA)所组成。不同的土壤类型，其HA/FA比值有所不同。同时这个比值与土壤肥力也有一定关系。因此，测定土壤腐殖质组成对于鉴别土壤类型和了解土壤肥力均有重要意义。 实验方法：用0.1M焦磷酸钠和0.1M氢氧化钠混合液处理土壤，能将土壤中难溶于水和易溶于水的结合态腐殖质络合成溶于水的腐殖质钠盐，从而比较完全的将腐殖质提取出来。 实验操作步骤： 1、称取0.25mm相当于2.50g烘干重的风干土样，置于250ml三角瓶中，用移液管准确加入0.1M焦磷酸和0.1M氢氧化钠混合液50.00ml，震荡5分钟，塞上橡皮套，然后静置13——14小时（控制温度在20℃左右），旋即摇匀进行过滤，收集滤液（一定要清亮）。 2、胡敏酸和富里酸总碳量的测定 吸取滤液5.00ml，移入150毫升三角瓶中，加3mol／L H2SO4约五滴（调节ph为7）至溶液出现浑浊为止，置于水浴锅上蒸干。加0.8000mol／L（1／6K2Cr2O7）标准液5.00ml，用注射筒迅速注入浓硫酸5ml，盖上小漏斗，在沸水浴上加热15分钟，冷却后加蒸馏水50ml稀释，加邻啡罗林指示剂3滴，用0.1mol∕L硫酸亚铁滴定，同时作空白实验。 3、胡敏酸量测定 吸取上述滤液20.00ml于小烧杯中，置于沸水浴上加热，在玻璃搅拌下滴加3mol∕L H2SO4酸化（约30滴），至有絮状沉淀析出为止，继续加热10分钟使胡敏酸完全沉淀。过滤，以0.01mol∕L H2SO4洗涤滤纸和沉淀，洗至滤液无色为止（即富里酸完全洗去）。以热的0.02mol∕L NaOH溶解沉淀，溶解液收集于150ml三角瓶中（切忌溶解液损失），如前法酸化，蒸干，测碳。（此时的土样重量w相当于1g） 结果计算： 1、腐殖质总碳量（%）= [ 0.8000*5.00*（V0-V1 ）*0.003/V0 ]*100/W 式中：V0--5.00毫升标准重铬酸钾溶液空白实验滴定的硫酸亚铁毫 升数。 V1--待测液滴定用去的硫酸亚铁毫升数 w--吸取滤液相当的土样重（g） 5----空白所用K2Cr2O7毫升数
自然地理学 实验指导书 林惠花、肖宝玉、陈秀玲、刘强编 2007．8
自然地理气象实验部分 实验一气象观测场和温度的观测一目的与要求 了解气象观测场地的建立条件及掌握常见的温度观测方法 二主要内容 1 观测场地的选择要求和观测场内的仪器布置； 2 百叶箱的结构与作用； 3 常用的温度观测仪器与观测方法； 三气象观测场的建立要求及测温仪器构造及原理 （一）观测场地的选择要求 地面气象观测的主要项目都是在观测场内通过各种仪器进行的，观测场地的选择是否适宜，对观测资料的代表性、准确性和比较性影响很大。观测场地的选择关键在于站址的选择。站址应选择在能代表大范围的天气、气候特点的地区，除某些根据特殊需要而建立的专业台站外，一般要求建在平坦空旷，四周没有高大建筑物、树林和大水库的地方。这是因为：在复杂地形影响下，风、云、温度、湿度等要素均有显著差异，不能真实反映这个地区自由大气的实际变化情况；树林及建筑物等障碍物对辐射、温度、降水，特别是风都有显著影响，如建筑物密集的城市，由于建筑物吸热和散热都较快，人类活动频繁，使得城镇温度比农村偏高，湿度较农村偏低，同时建筑群会影响空气的运行，既减小风速，也能改变风向。此外，城镇空气固体悬浮物多，能削弱太阳辐射，使能见度下降，这对日辐射和日照观测均会造成影响；如果台站设在工业城市最多风向的下风方，经常受吹来烟尘的影响，将会影响资料的代表性。因此观测场地距障碍物应保持一定的距离。通常观测场离的距离应视障碍物的性质而定：孤立的障碍物离观测场地的距离应在3倍以上障碍物的高度；连续的或成片的障碍物离观测场地的距离应在10倍以上障碍物的高度。 场地的选择总体要求是要有代表性，避免局地因素的影响。 观测场地不宜过小，否则场内安置的仪器难以保持一定的间隔，容易彼此遮挡，影响通风。普通观测场有25m*25m和20m*16m两种规格。 观测场地要求平整。由于一般地区绿色植物分布的面积最广，所以观测场内应种植浅草（不长草的地区例外），以更好代表这一地区下垫面特征。为了保护场地和仪器设备，四周最好围有1.2m 通风围栏。围栏的北面正中开一小门，以便出入。场内还应铺设宽约0.4—0.5m的小路，以利于保护草层，保持场内整洁，方便行走。
土壤全磷测定 氢氧化钠熔融——钼锑抗比色法 1 方法提要 土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液中的磷酸根与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比，通过分光光度法定量测定。 2 适用范围 本方法适用于各类土壤全磷含量的测定。 3 主要仪器设备 3.1 分光光度计或紫外－可见分光光度计； 3.2 高温电炉：可升温至1200℃，温度可调； 3.3 镍（或银）坩埚：容量≥30mL ； 3.4 具塞三角瓶：50mL 。 4 试剂 4.1 氢氧化钠； 4.2 无水乙醇； 4.3 碳酸钠[ρ（Na 2CO 3）=100g ·L -1]溶液：称取10.0g 无水碳酸钠溶于水，稀释至100mL ； 4.4 5％硫酸溶液：吸取5mL 浓硫酸缓缓加入90mL 水中，冷却后加水至100mL ； 4.5 硫酸溶液[c (2 1H 2SO 4)=3mol ·L -1]：量取168mL 浓硫酸缓缓加入到盛有约800mL 水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，稀释至1L ； 4.6 二硝基酚指示剂：称取0.2g 2，6-二硝基酚溶于100mL 水中； 4.7酒石酸锑钾溶液[ρ（K(SbO)C 4H 4O 6·2 1H 2O ）=5g ·L -1]：称取酒石酸锑钾0.5g 溶于100mL 水中； 4.8 硫酸钼锑贮备液：量取153mL 浓硫酸，缓缓加入到400mL 水中，不断搅拌，冷却。另称取钼酸铵［(NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O ］10.0g 溶于温度约60℃的300mL 水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入5g ·L -1酒石酸锑钾溶液100mL ，冷却后，加水稀释至1L ，摇匀，贮于棕色瓶中；
【百科】腐殖质（英文称Humus)定义：已死的生物体在土壤中经微生物分解而形成的有机物质。是土壤有机质在微生物作用下形成的复杂而较稳定的大分子有机化合物。腐殖质是土壤有机质的主要组成部分，一般占有机质总量的50～70%。腐殖质的主要组成元素为碳、氢、氧、氮、硫、磷等。腐殖质并非单一的有机化合物，而是在组成、结构及性质上既有共性又有差别的一系列有机化合物的混合物，其中以胡敏酸与富里酸为主。 腐殖质虽是较稳定的化合物，但可被缓慢的分解，为植物生长提供有效的养分。其分解速度与温度、湿度和通气状况等因素密切相关。陆地生态系统中，通常纬度高、湿度小的地区，分解速度就越慢，有利于有机物的积累。如，热带稀树草原的分解速率比温带草原快得多，一般看不到凋落层，土壤中也很少有腐殖质的积累。（夏老师例说生态学几则疑点) 罗吧“动物粪便和动植物遗体残骸,经过细菌、真菌的分解而变为土壤中的腐殖质，使土壤更肥沃，为植物根系的发育提供各种营养物质”教材中的这段话没有错。 腐殖质的形成一定是要经分解者的作用。但是分解者的分解作用是有强有弱之分，太强了就无法形成腐殖质的中间产物状态，而是直接形成水、二氧化碳和无机盐。 1、动物粪便和动植物遗体残骸—→腐殖质→水、二氧化碳和无机盐。 2、动物粪便和动植物遗体残骸—→水、二氧化碳和无机盐。 分解者的分解作用的强弱又与水分和温度两个条件十分密切，必需两者都适应才能发挥最佳效果。 土壤有机质通过微生物作用形成复杂、较稳定的大分子有机化合物——腐殖质的过程。基本上分为两个阶段，第一阶段产生构成腐殖质主要成分的原始材料，即由各种形态和状态的有机物质组成的混合物，在微生物作用下分解为各种简单的化合物；第二阶段为合成阶段，即由微生物为主导的生化过程，将原始材料合成腐殖质的单体分子，进而再通过聚合作用形成不同分子量的复杂环状化合物。
土壤中全磷的测定 本文拟采用磷钼蓝分光光度法测定土壤中的全磷。（或本文拟比较A 法，B法对C的测定） 测定原理 土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，用分光光度法定量测定。仪器、设备 1.筛：孔径1mm和0.149mm；（一套） 2. 分析天平：感量为0.0001g；（一台） 3. 镍（或银）坩埚：容量≥30mL；（两个） 4.马弗炉：温度可调（0～1000℃）；（一台） 5.分光光度计：要求包括700nm波长；（一台） 6 容量瓶：50mL（8个）、100mL（3个） 7 移液管：1、5mL；(各2支) 8 漏斗：直径7cm；(一个)
9 烧杯：100mL(两个)、250mL (两个) 500mL(一个)； 10细口试剂瓶：100mL (5)个, 200mL(1个) 11.棕色试剂瓶：500 mL 一个 12 玛瑙研钵。(一套) 试剂 所有试剂，除注明者外，皆为分析纯，水均指蒸馏水或去离子水。 1. 氢氧化钠；4克 2. 无水乙醇；10mL 3. 10％（M/V）碳酸钠溶液：10g无水碳酸钠溶于水后，稀释至100mL，摇匀； 4. 5％（V/V）硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸缓缓加入90mL水中，冷却后加水至100mL； 5. 3mol/L硫酸溶液：量取34mL浓硫酸缓缓加入到盛有160mL左右水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后使用，再加水至200mL； 6. 二硝基酚指示剂：称取0.2g 2，6-二硝基酚溶于100mL水中； 7. 0.5％酒石酸锑钾溶液：称取化学纯酒石酸锑钾0.5g溶于100mL 水中；
腐殖质的测定 (焦磷酸钠提取重铬酸钾法) 一般来讲，土壤腐殖质由胡敏酸、富里酸和存在于残渣中的胡敏素等组成。腐殖质的含量取决于有机质总量和土壤质地及土壤类型等。 1．方法选择 测定土壤腐殖质酸一般用0.1M的氢氧化钠多次提取、蒸干，用标准重铬酸钾溶液氧化测定碳量。然而这种方法必须经过脱钙，手续繁琐。0.1M焦磷酸钠(Na4P207·10H2O)和0.1M 氢氧化钠混合液一次提取剂可省去脱钙手续，适宜于大批样品的分折。 2．方法原理 土壤中腐殖质由难溶于水的钙离子、镁离子、铁离子、铝离子等络合的腐殖质，易溶于水的钾、钠等离子结合的腐殖质，以及极少量游离态存在的腐殖质等组成。 采用0.1M焦磷酸钠和0.1M氢氧化纳混合液提取腐殖质，在强碱性的介质中具有极强的络合能力，能将士壤中的难溶于水和易溶于水的结合态的腐殖质，一次络合成易溶于水的腐殖质钠盐，从而比较完全地将腐殖质提取到溶液中来，其反应式如下所示。再将溶液中的碳量用测定土壤有机质的方法(重铬酸钾法)，测得腐殖质酸碳量。 现分别介绍胡敏酸、富里酸和残渣中的胡敏素的测定。 3．试剂与主要仪器 [试剂] (1)0.1Ｍ焦磷酸钠与０．４Ｍ氢氧化钠混合提取剂：称取分析纯焦磷酸钠(Na 4P ２ O ７ ·１ ０Ｈ ２ Ｏ)44．6克和4克分析纯氢氧化钠，加蒸馏水溶解后定容至1升，此溶液的pＨ为13左右。 (2)０.１Ｎ氢氧化钠溶液：称取2克分析纯氢氧化钠溶于水中，冷却后立即定容至1升。 (3）0.05N硫酸溶液：取28毫升1：1硫酸加入到800毫升左右水中，并用水定容到１升。 (4)1N硫酸溶液：取56毫升1：1硫酸加入到200毫升左右水中，待冷后用水定容到1升。 (5)0.8000N重铬酸钾标淮溶液：称取经过130℃烘3～4小时的分析纯重铬酸钾(K ２ Cr 2O 7 ）39.225克，溶解于４00毫升水中，必要时可加热溶解，冷却后稀释定容到1升，摇 匀备用。 (6)0.2N 硫酸亚铁溶液：称取化学纯硫酸亚铁(FｅＳＯ ４·7Ｈ ２ Ｏ）55.6克(或硫酸亚 铁铵78．4克)，加6Ｎ硫酸30毫升溶解，加水稀释定容到1升，摇匀备用。 (7)邻啡啰啉指示剂：称取化学纯硫酸亚铁０．６９５克和分析纯邻啡啰啉1．486克溶于100毫升水中，此时试剂与硫酸亚铁形成红棕色络合物．即［Fe(C１２H３N２)３］＋＋。 (8)石蜡(固体)或植物油。
土壤DNA 纯化难点——腐殖质 土壤，是由一层层厚度各异的矿物质成分所组成大自然主体。土壤和母质层的区别表现在于形态、物理特性、化学特性以及矿物学特性等方面。由于地壳、水蒸气、大气和生物圈的相互作用，土层有别于母质层。它是矿物和有机物的混合组成部分，存在着固体，气体和液体状态。疏松的土壤微粒组合起来，形成充满间隙的土壤的形式。这些孔隙中含有溶解溶液（液体）和空气（气体），因此，土壤通常被视为有多种状态。 提取土壤中微生物、动植物遗体等的DNA是在分子水平上研究生态、环境保护与修复及菌种筛选等的基础。土壤的成分包括矿物质、粘土等无机物、植物及植物的遗体、腐殖物质等土壤有机物以及在土壤中存在的微生物，其中绝大部分的微生物都是无法直接培养进行繁殖和研究，从土壤样品中提取DNA是研究土壤微生物最为有效的方法。 在整个提取的过程中，腐殖质是最大的干扰因素。腐殖质是已死的生物体在土壤中经微生物分解而形成的有机物质，含有植物生长发育所需要的一些元素，能改善土壤，增加肥力。主要方法是帮助增加可以让空气和水进入的空隙，也同样产生植物必须的氮，硫，钾和磷。动植物残体在微生物作用下形成简单化合物的同时又重新合成复杂的高分子化合物。但是由于腐殖物质的性质与DNA十分相似，从土壤中提取的DNA的同时也会将将腐殖质等物质一起纯化，因而采用一般的DNA提取方法很难除去腐殖物质等抑制因子，再加上这些腐殖物质会抑制聚合酶链式反应（PCR）及限制性酶切等，因此，彻底去除腐殖物质等抑制因子是整个操作过程中的重点，也是难点。 目前从土壤样品中提取微生物DNA的方法主要有直接法和间接法。直接法是指将土壤样品放在裂解液中，经过有效的破壁方法使微生物的DNA全部释放到裂解液中，然后再进行分离提取的方法。间接法是指将土壤放在一种的缓冲液中，如Buffer PBS等，把微生物从土壤中分离出来，然后再进行DNA的提取。间接法可大大降低土壤中腐殖酸，重金属盐对DNA提取带来的影响，但是这种方法会丢失许多微生物，得到的DNA并非土壤样品中的全基因组(宏基因组)，间接法使用的已经很少了。 目前市面上对于去除腐殖质工艺做的最好的试剂盒，就是MPbio公司的土壤DNA提取试剂盒，该试剂盒能够有效去除土壤样本中的腐殖质，极大提高目标DNA的提取浓度，很多土壤相关工作人员都选用该试剂盒。不过优秀的产品也会有短板，MP试剂盒在有效去除腐殖质的过程中难免会造成目标DNA的损失，操作过程略显繁琐，同时作为一个进口的产品，价格因素可以说是该产品最大的短板。 杭州新景生物试剂开发有限公司作为新手福音，业界良心，经过一系列的研究，终于开发了一种高效的去腐殖酸缓冲液，最大限度的去除土壤样本中的腐殖质，保留目标DNA，结合硅胶柱纯化的技术，得到高纯度的土壤微生物DNA。 我们的操作方法和一般的提取土壤DNA试剂盒有所不同，先要进行样本的前处理，将土壤样本经过去腐缓冲液洗涤，然后进行DNA提取得到高纯度且不含腐殖酸的土壤DNA。我们可以将多达500 mg的土壤样本放入含有陶瓷颗粒的2.0 ml试管中，首先使用去腐缓冲液洗涤，离心去上清后使用高效裂解液裂解所有土壤生物，包括之前难以裂解的种类，如真细菌孢子和芽孢、革兰氏阳性菌、酵母、藻类、线虫和真菌。离心后取上清与结合液结合，过硅胶柱进行DNA纯化即可得到高纯度DNA。 实验室将MP的试剂盒和公司的试剂盒做了一个平行实验，验证了新产品的结果。
实验报告 课程名称： 土壤学实验 指导老师： 廖敏 成绩：__________________ 实验名称： 土壤全磷测定 同组学生姓名： 张逸涵 一、实验目的和要求 二、实验内容和原理 三、实验材料与试剂 四、实验器材与仪器 五、操作方法和实验步骤 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析 八、讨论、心得 一、 实验目的和要求 1. 掌握土壤全磷的测定方法及其原理； 2. 了解土壤磷在作物生长中的作用，对土壤磷肥力营养状况评价及合理施肥。 二、 实验内容和原理 1. 土壤全磷（P ） 是指土壤中各种形态磷素的总和。土壤全磷含量的高低，受土壤母质、成土作用和耕作施肥的影响[1]。土壤中的磷可以分为无机磷和有机磷：无机磷以吸附态和钙、铁、铝等的磷酸盐为主，有机磷组成和结构较为复杂，尚不可知，但大多数以高分子形态存在。 2. 土壤样品的分解（HClO 4—H 2SO 4消煮法） 利用HClO 4分解样品，其为强酸和强氧化剂，能氧化有机质，分解矿物质。利用H 2SO 4提高反应温度，防止消化过程中溶液蒸干。 本法用于一般土壤样品分解率达97%～98%，但对红壤性土壤样品分解率只有95%左右。 3. 溶液中磷的测定（钼锑抗-硫酸比色法） 1） 原理 采用钼锑抗-硫酸体系测定。一定酸度下，正磷酸与钼酸盐络合形成磷钼酸多杂物，反
应式如下： H 3PO 4+12H 2MoO 4→H 3[PMo 12O 40]+12H 2O 此体系试剂成分为H 2SO 4为5.5mol·L -1（H +），钼酸铵为10 g·L -1，酒石酸氧锑钾为0.5 g·L -1，抗坏血酸为1.5 g·L -1。在磷较少的情况下，一般都用更灵敏的钼蓝法，即在适宜试剂浓度下，加入适当的还原剂，使磷钼酸中的一部分Mo 6+离子被还原为Mo 5+，生成钼蓝，这是钼蓝比色法的基础。蓝色产生的速度、强度、稳定性等与还原剂的种类、试剂的适宜浓度特别是酸度以及干扰离子等有关。 抗坏血酸之所以作为还原剂，是因其能与Fe 3络合，保持溶液的氧化还原势。添加的催化剂酒石酸氧锑钾能在常温下加速显色，提高反应灵敏度，简化操作手续，使该方法有利于大批量样品分析。 2）配置 A 溶液（5 g·L -1酒石酸氧锑钾溶液）：取酒石酸氧锑钾[K(SbO)C 4H 4O 6]0.5g ，溶解于100mL 水中。 B 溶液（钼酸铵—硫酸溶液）：取钼酸铵[(NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O]10g ，溶于450mL 水中，缓慢加入153mL 浓H 2SO 4，边加边搅。再将上述A 溶液加入到B 溶液中，最后加水至1L 。充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。临用前（当天），称取抗坏血酸（ C 6H 8O 5，化学纯）1.5g ，溶于100mL 钼锑混合液中，混匀，此即钼锑抗试剂。 4. 土壤全磷计算公式 土壤全磷（P ）（g·kg -1）= 31 2 10-??? V V m V ρ 式中：ρ——待测液中磷的质量浓度（g·kg -1）； V ——样品制备溶液的mL 数； m ——烘干土质量（g ）；
土壤腐殖质的提取、分离与纯化综述 大车神 [摘要] 腐殖质（humic substances; HS）是一类呈棕黑色或棕褐色、无定形、酸性、亲水性、多分散的有机物质，广泛存在于土壤、水体(如河流、湖泊、海洋和地下水等)以及沉积物中， 根据溶解性，腐殖质可分为3类：腐殖酸(HA,又称胡敏酸，只溶于碱不溶于酸)，富里酸(FA， 又称黄腐酸，既溶于酸又溶于碱)和胡敏素(Humin，又称腐殖素、腐黑物，酸碱都不溶) 殖酸、富里酸广泛存在于土壤、水体以及沉积物中，对有金属离子、机污染物、及水处理过程中消毒副产物的形成有重要的影响。本文通过查阅文献，总结目前学者对于腐殖酸的提取、分离与纯化的相关技术进行阐述。 【关键词】腐殖酸、富里酸、胡敏酸、胡敏素、分离提纯 一、概述 土壤是人类赖以生存的物质基础,是人类不可缺少、不可再生的自然资源[1,2]。土壤有机质是土壤的重要组成部分,在土壤肥力、环境保护、农业可持续发展等方面都具有重要作用。其主要成分包括有机质及其他有机物，其中腐殖质类物质占有机质总量的85%～95%。腐殖质（humic substances; HS）是一类呈棕黑色或棕褐色、无定形、酸性、亲水性、多分散的有机物质，广泛存在于土壤、水体(如河流、湖泊、海洋和地下水等)以及沉积物中[3]。根据溶解性，腐殖质可分为 3类：腐殖酸(HA,又称胡敏酸，只溶于碱不溶于酸)，富里酸(FA，又称黄腐酸，既溶于酸又溶于碱)和胡敏素(Humin，又称腐殖素、腐黑物，酸碱都不溶)[4,5]，其中可提取腐殖质(HA+ FA)组成复杂，存在氨基、羟基、醌基、羰基和甲氧基等多种基团，能够对水体中各种机污染物和重金属的迁移转化进行影响和控制[6-8]。 富里酸( Fulvicacid，简称 FA)属于腐植酸的一种，别名为黄腐殖酸，是土壤腐植质的组成成分之一。颜色较浅，多呈黄色。主要由碳、氢、氧和氮等元素 构成，碳氢比值较低，分子式为C 14H 12 O 8 [9,10]。溶解能力强，移动性大，对某些土 壤的淋溶和沉积起很大作用，可以改善土壤环境。特性为低分子量和高生物活性。由于低分子量的特性，它能很好的粘贴及融合矿物质和元素到它的分子结构中，拥有很好的溶解性和流动性。 胡敏酸（Humic Acid，HA），由芳香核和脂肪族侧链组成，含有羧基、羟基、
1、测定意义： 磷的贮量及供给状况反映土壤肥力，指导施肥；为磷在土壤中的吸附、固定、转化提供定量数据；磷作为生态环境重要因素，其迁移、富集过程是以土壤为介质，可以为研究磷的面源污染提供基础。 全磷大部分呈无机矿物态，而有机磷在短时间内是相对无效的，只有少量无机矿物态磷对作物有效 不同地区全磷含量 我国土壤中一般含量为： -1.0g 南方酸性低于： 0.56g.kg-1 黄土母质： -0.7g 新疆栗钙土高于： 2.0g.kg-1 酸性黄、红壤： 0.4g.kg-1 2、方法及原理 方法：硫酸、高氯酸酸溶-钼锑抗比色法 原理：在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与H2SO4 、HClO4 强氧化剂作用下，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。 高氯酸作用，氧化有机质，分解矿物质，有助于胶状硅脱水，络合三价铁离子，抑制硅铁干扰。 主要仪器 紫外可见分光光度计、消煮炉、万分之一天平、百分之一天平 试剂
（1） H2SO4：硫酸（ H2SO4，密度1.84g/ml，分析纯） （2） HClO4：高氯酸（HClO4，60~70%，分析纯） （3） 4 mol L-1NaOH溶液：氢氧化钠溶于蒸馏水中，用水定容至100ml。（4） L-1 H2SO4溶液：吸取浓硫酸，缓缓注入水中，并用水定容至1l。 （5） 2，4-二硝基酚指示剂：2,4-二硝基酚0.2g于100 mL 水中。 此指示剂的变色点约为PH3，酸性时无色，碱性时呈黄色。（6）钼锑抗试剂： A 5 g?L-1酒石酸氧锑钾: 取酒石酸氧锑钾 0.5g 溶于100mL水中 B钼酸铵-硫酸溶液：称取钼酸铵10 g, 溶于 450 mL水中，缓慢加入153mL浓H2SO4，边加边搅。 C将A 加入到B 溶液中，最后加水至1L,充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混和液。 （7）钼锑显色剂： 临用前（当天），称取1.5克抗坏血酸（C6H8O5, 分析纯），溶于100ml 钼锑抗混合液中，混匀，此即为钼锑抗试剂。有效期24小时，如藏于冰箱中则有效期较长。此试剂中H2SO4为l，钼酸铵为10g/l，酒石酸锑钾为0.5g/l，抗坏血酸15g/l。（此液应现用现配） （8）5ug/ml磷（p）标准液 磷标准溶液：准确称取在105℃烘箱中烘干的KH2PO4（分析纯）g，溶解在400mL水中，加浓H2SO45 mL（加H2SO4防长霉菌，可使溶液长期保存），转入1 L容量瓶中，加水至刻度。此溶液为50 μg·mL-1P
垂直地带性土壤的机械组成与土壤有机质的关系 ——以武夷山垂直地带性表层土壤为例 【摘要】以武夷山垂直地带性土壤表层的机械组成、土壤有机质为研究对象，对武夷山垂直地带性土壤通过机械组成分析、有机质分析、机械组成和有机制的相关性进行了研究。结果表明；武夷山垂直地带性土壤表层的机械组成上差异较大，从整体角度上看，随海拔梯度的增加，大团聚体比例增加，微团聚体减少。表明土壤的风化程度沿海拔高度增加而逐渐减弱；有机质差异也较大，总的来说有机质含量随海拔增加而增加；土壤的机械组成和土壤的有机质有一定的关系，初步判定粘粒和有机质之间负相关性，和粉粒之间正相关性，但和砂粒的相关性不明显，即有机质含量还受制于三种粒径的比例权重关系。 【关键字】土壤表层机械组成有机质关系武夷山 目录： 1、武夷山土壤概况……………………………………………………………………………. 2、研究方法…………………………………………………………………………………… 3、结果与分析……………………………………………………………………………….. 3.1武夷山垂直地带性土壤表层的机械组成……………………………………………… 3.2不同海拔高度土壤有机质分布状况……………………………………………………… 3.3武夷山垂直地带性土壤表层土壤的机械组成与有机质之间的关系……………………… 4、问题讨论及论文小结……………………………………………………………………….. 前言 土壤的机械组成对土壤的物理、化学和生物特性具有决定性的作用．不同土壤的机械组成不同，矿物组成上差异显著，其化学成分和其它各种性质也均不相同[1]。土壤有机质含量是土壤肥力大小的一个重要标志，因此分析和研究土壤机械组成、土壤有机质以及他们之间的关系是十分必要的。土壤中的养分状况和它对各养分吸附能力的强弱都与土壤的粒级组成有关，所以研究和了解土壤的颗粒组成对于指导土壤的耕作、种植、土壤改良以及了解植被的演替都有着极为重要的意义。并且，经读者查阅资料和书籍表明，现阶段，研究土壤机械组成和有机质之间关系的专家、学者比较少，有的也只是定性的阐述。武夷山植被覆盖总体较好，由于植被覆盖率对土壤有机质的制约性并非最重要，因此，研究机械组成和有机质的关系成为了可能。本文则以武夷山垂直地带性土壤表层的机械组成、土壤有机质为研究对象，对武夷山垂直地带性土壤表层的机械组成、有机质以及两者之间的相关特性进行了初步比较和探讨。 1、武夷山土壤概况 武夷山脉(地理坐标为北纬27°33～54’,东经117°27～51’)位于闽赣边界,呈东北—西南走向,平均海拔高度为1000～1100m ,北段地势最高,其中黄岗山海拔2158m ,是我国大陆东南部的最高峰[2]。在亚热带湿润季风气候的影响下, 本区水热充足, 年平均气温13℃～ 19 ℃, 年平均降水量1 600mm～ 2 200mm , 年平均相对湿度在70 %～ 85 % 以上[3]。区内森林植被茂密,植物种类繁多, 特别是拥有2. 9 m 2×108m 2 原生森林植被, 是中亚热带保留面积最大、保存最完整的森林生态系统[4]。植被和土壤呈现明显的垂直地带性分异, 从山麓到山顶依次为亚热带常绿阔叶林—针阔混交林—针叶林—中山苔藓矮曲林—中山草甸；普通山地红壤—黄红壤—黄壤—中山草甸土。本次实习由于客观原因没有到达中山草甸土，表一[5]为武夷山随海拔高度的垂直地带性土壤研究样地的相关信息。
摘要：实验对比分析黄土高原地区3种土地利用方式下（连作麦地、10年果园和20年果园）土壤中有机碳(TOC)、腐殖质组成特点。实验采用方法主要为重铬酸钾外加热法进行测定。结果表明:TOC平均含量为10.34g/kg。其中麦地TOC含量最高,平均值为10.74 g/kg,其次是20m年果园TOC平均值为10.26 g/kg,最后为10年果园，TOC含量平均值为10.01g/kg。同土地利用方式土壤腐殖质组成含量均为:胡敏酸碳<富里酸碳<胡敏素碳,胡敏素碳占TOC总量的比例为71%,腐殖酸碳占TOC总量的比例为29%。麦地、10年果园、20年果园的腐殖酸总碳量(胡敏酸碳与富里酸碳之和)含量分别为3.3、2.75、2.78g/kg。几种土地利用方式的土壤腐殖酸碳占土壤TOC总量的比例为麦地最高,依次为20年果园、10年果园。胡敏酸碳含量为:麦地>20年果园>10年果园;富里酸碳含量为:麦地>10年果园>20年果园。麦地、10年果园、20年果园的H/F比值分别为0.63、0.50、0.54。不同土地利用方式土壤TOC含量以及组成的差异与土壤环境特点、输入土壤的有机质性质以及人为耕作管理活动等有关. 0.引言 土壤腐殖质作为土壤有机质的主体,是土壤发生过程的产物,又是土壤发生过程的动力之一。土壤中的腐殖质多是与矿质部分结合形成的有机无机复合胶体,它是土壤中比较活跃的组成部分,对土壤结构的形成、土壤水分和养分的保持与供应都有重要影响等。研究认为,可用腐殖质指数来快速评估有机质的积累、土壤酸碱性和土壤生物活性。在由温室效应造成的全球变暖等环境问题的压力下,人们不仅希望通过增加土壤腐殖质的含量来改善土壤肥力,更希望能够固定更多大气中的CO2。本实验通过对比分析麦地、10年苹果园、20年苹果园几种土地利用类型中土壤有机碳、腐殖质组成及不同生长年限碳积累的差异，为进一步深入开展黄土高原地区土地利用变化影响土壤有机碳的研究和准确评价我国土地利用变化对土壤碳库的影响提供一些依据，为农民种植提供指导。 1 材料与方法 1.1 研究地区概况 研究区域选择在典型的黄土高原沟壑区长武塬，位于黄土高原中南部陕甘交界处，塬区平均海拔1200m，属温带半湿润大陆性季风气候区。塬区降水年内年际变化较大，多年平均降水量582mm。光照条件充足，年日照时数2230小时，日照率51%，年均辐射量为4837KJ/cm2，无霜期171天，年均气温9.1℃，≥10℃活动积温3029℃。塬区无灌溉条件，属典型的雨养农业区。黄土区土层深厚，
肥沃的土壤 【学习目标】 1．知道土壤的重要组成物质是腐殖质，腐殖质是由腐烂的动植物遗体变成的； 2．会做腐殖质形成的实验，能够制作肥料袋； 3．能够坚持长期观察，培养认真负责的探究态度。 【学习重点】 知道土壤的重要组成物质是腐殖质，腐殖质是由腐烂的动植物遗体变成的。 【学习难点】 会做腐殖质形成的实验，能够制作肥料袋。 【学习准备】 材料准备：塑料袋、水杯、土、果皮、菜叶等。 【学习过程】 一、预习导航 （一）思考引学。 为什么有的土壤寸草不生？有的土壤生机勃勃，郁郁葱葱？ （二）预习课文后，完成下列填空。 1．动植物遗体在土壤中腐烂分解后，形成了_______。 2．腐殖质是供植物生长的肥料。腐殖质越多，土壤颜色越_____，越_______。 3．不是所有的表层土都是肥沃的，如山体的表层土就因经常受雨水的冲刷而流失，所以山上的土壤往往比较_______。 4．人们常用_______、_______和_______等方法改良贫瘠的土壤。 二、问题探究 （一）观察土壤 1．土壤的结构是什么？土壤的表层和下层有什么不同？
2．腐殖质的定义是什么？为什么说蚯蚓是“土壤天然的犁”和“改良土壤的能手”？ （二）改良土壤 阅读教材，说说教材中采取了哪几种方法来改良土壤？ （三）动手制作 试着简述一下制作肥料袋的基本流程。 三、拓展延伸 在管理、观察和记录肥料袋沤肥实验的过程中，我们可能会面临哪些困难？应该怎样来解决？试着简单阐述一下。 【学习小结】 通过本课的学习我们了解了腐殖质是最肥沃的，掌握了改良贫瘠土壤的方法。 【精炼反馈】 一、填空 1．动植物遗体在土壤中腐烂分解后，形成了______。 2．腐殖质是供植物生长的肥料。腐殖质______多，土壤颜色______，越______。 3．不是所有的表层土都是______的，如山体的表层土就因经常受雨水的冲刷而流失，所
土壤全磷的测定方法（高氯酸-硫酸法） 方法原理:在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。 操作步骤: 1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。 2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。 3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。 4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。 5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。 6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。 7.工作曲线的绘制。分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml容量瓶中，加水稀释至30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0，0.1，0.2,0.3，0.4，0.5，0.6mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。 结果计算 全P%=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100 式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L； 显色液体积—本操作中为50ml； 分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积； 106—将ug换算成g W—土样重(g)。 两次平行测定结果允许误差为0.005%。 仪器、试剂 1.主要仪器： 分析天平、小漏斗、大漏斗、三角瓶(50ml和100ml)、容量瓶(50ml和100ml)、移液管(5ml 和10ml)、电炉、分光光度计。 2.试剂： (1)0.5mol/L碳酸氢钠浸提液。称取化学纯碳酸氢钠42.0g溶于800ml水中，以0.5mol/L 氢氧化钠调节pH至8.5，洗入1000ml容量瓶中，定容至刻度，贮存于试剂瓶中。此溶液贮存于塑料瓶中比在玻璃瓶中容易保存，若贮存超过1个月，应检查pH值是否改变。 (2)无磷活性炭。活性碳常常含有磷，应做空白试验，检查有无磷存在。如含磷较多，须先用2mol/L盐酸浸泡过夜，用蒸馏水冲洗多次后，再用0.5mol/L碳酸氢钠浸泡过夜，在平瓷漏斗上抽气过滤，每次用少量蒸馏水淋洗多次，并检查到无磷为止。如含磷较少，则直接用碳酸氢钠处理即可。 (3)磷(P)标准溶液。准确称取45℃烘干4—8小时的分析纯磷酸二氢钾0.2197g于小烧杯中，以少量水溶解，将溶液全部洗入1000ml容量瓶中，用水定容至刻度，充分摇匀，此溶液即为含50mg/L的磷基准溶液。吸取50ml此溶液稀释至500ml，即为5mg/L的磷标准溶液(此
实验一、土壤机械组成的测定 一、目的意义 为什么要测定土壤的机械组成？因为通过测定土壤的机械组成，我们就可以知道土壤质地的粗细。土壤质地直接影响着土壤的理化性质和肥力状况，同时它还是土壤分类的重要依据，所以在研究土壤的形成、分布、分类及肥力状况时一定要先测定土壤的机械组成。 测定土壤机械组成（粒度分析）的方法有好几种。在野外因仪器、药品携带不方便，所以常用手测法（揉条法）。在室内则采用吸管法或比重计法。比重计法操作方法比较简单容易也比较准确。吸管法一般多用于科研等更精确的分析，因我们课时有限，所以我们实验是采用比重计法。 二、测定原理 测定土壤机械组成也就是测定土壤质地。土壤是由许多大小不同的土粒，按不同比例组合而成的，这些不同的土粒组合在一起所表现出来的土壤粗细状况，就称作土壤质地（soil texture）。 土壤机械组成分析原理，就是把土粒按其粒径大小分成若干级，并定出各级的量，从而得出土壤的机械组成。对于粒径>0.25mm砂粒，一般用过筛法，将砂砾逐级过筛称重。对于粒径小的土粒，则用分散剂法
将其充分分散，再使分散后的土粒在一定容积的悬液中自由沉降，一般颗粒愈大沉降速度愈快。 我们用的土样是过1mm筛的土样，用比重计法测定。在测定以前还要根据土壤pH值的不同选用不同的分散剂（请同学们看书第8页）。我们的分析土样pH值是酸性的，所以用0.5mol/LNaOH溶液做为分散剂,这是化学分散法,为了使其充分分散，还必须研磨，这是物理分散法。经过充分分散处理后的土样，要在一定容积的水溶液中自由的沉降，其原理是|：在一定温度下，颗粒越大沉降速度越快。（同学们可看书第7页原理部分）。当比重计放入制备好的悬液中时，比重计所排开的悬液体积等于其自身重量时，它浮在了一定位置上，这时我们就可以直接在比重计上读取克/升的数字，通过计算得出某粒级的土粒含量。这是土壤机械组成分析的原理部分。 三、比重计的使用 这种比重计称作甲种比重计，比重计上有0―60的刻度数字，从中可以读出到0.1克/升的小数。0以上为负值，0以下为正值。读取数字时，应该以悬液面形成的上弯月面顶部和比重计刻度相切的数字，精确到十位小数（0.1）。 四、测定方法和步骤 1.用粗天平称取过1mm筛孔的土样50克置瓷碗中，先加 0.5mol/LNaOH约20ml左右,用研棒研磨5分钟,使其分散呈糊状。再将