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非洲山毛豆叶片中鱼藤酮的提取方法

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　　收稿日期:2001-03-19 作者简介:黄继光(1976-),男,现为华南农业大学在读硕士研究生.

　基金项目:高等学校骨干教师资助项目[教技司(2000)65号];中华农业科教基金人才基金资助项目(93-03-B-06)

文章编号:1001-411X(2001)04-0029-04

非洲山毛豆叶片中鱼藤酮的提取方法

黄继光,徐汉虹,周利娟,刘新清,江定心(华南农业大学昆虫毒理研究室,广东广州510642)

摘要:用索氏、冷浸和振荡抽提3种方法和6种不同的溶剂对非洲山毛豆叶片进行了提取研究,并用HPLC测定了提取物和植物叶片干粉中鱼藤酮的含量.结果表明,用氯仿振荡抽提紫花品种叶片得到的粗提物中鱼藤酮的含量最高,w为9.70%;丙酮索氏抽提紫花品种叶片所求得的植物干粉中鱼藤酮的含量最高,w为0.72%.中等极性溶剂如氯仿、苯、乙酸乙酯、丙酮等对鱼藤酮的提取率较高,建议实验室内提取溶剂用氯仿或丙酮,工厂化生产时用苯较好.

关键词:非洲山毛豆;提取;鱼藤酮含量中图分类号:S482.39 文献标识码:A

非洲山毛豆(TephrosiavogeliiHookf.)是属于豆科灰叶属的一种有效杀虫植物,其主要活性成分为鱼藤酮及其类似物[1～4].植株的叶片、茎秆、豆荚、根、种子等部位都含有活性成分,其中叶片中鱼藤酮类似物的含量最高,w可达4.25%[4～6].以前人们用比色法[7],测定的是提取物中鱼藤酮及其类似物的总量,结果的准确度不高.为准确测定鱼藤酮这一主要有效成分在非洲山毛豆中的含量,本文用不同提取方法和不同溶剂对非洲山毛豆叶片干粉进行提取,并用高效液相色谱(HPLC)法对叶片和提取物中的鱼藤酮含量进行测定.1　材料与方法1.1　材料非洲山毛豆紫花和白花品种叶片采于华南农业大学昆虫毒理研究室杀虫植物标本园内,烘干(45～50℃),粉碎.鱼藤酮纯品(w为97%),由Sigma公司生产.1.2　方法1.2.1　提取方法　用石油醚、氯仿、苯、乙酸乙酯、丙酮、甲醇等6种极性不同的有机溶剂按下列方法进行提取(所有溶剂均为分析纯).每处理重复3次.(1)索氏抽提法:分别称取紫花和白花品种的植物干粉20g,用滤纸包好放入索氏提取器中提取,回流至溶剂为无色时停止.将提取液浓缩,得粗提物.(2)冷浸法:称取20g干粉,加入400mL的有机溶剂置于避光暗处(24～25℃)浸提48h,过滤出溶剂,再加入200mL溶剂浸提24h,过滤.用100mL溶剂冲洗滤渣,合并3次的滤液,浓缩得浸提粗提物.(3)振荡提取法:称取20g干粉,加入400mL的溶剂置于恒温摇床上振荡抽提48h,以下步骤同冷浸法.

1.2.2　提取物的配制　根据提取率准确称取一定量的粗提物,用丙酮定容至每mL含1g植物干粉,逐级稀释100倍,即0.01g/mL,密封待测.

1.3　鱼藤酮的定性和定量测定用美国惠普公司生产的1100型HPLC配置:四元梯度泵、紫外可见光检测器、手动进样器、惠普化学工作站、ODS柱(5μm,125mm×4mm).测定条件:

流动相为甲醇∶水=69∶31(v∶v)

;流速0.8mL/min;

进样量10

μ

L;检测波长299nm;柱温室温;检测灵敏

度AUFS=0.001.

1.3.1　定性　根据标样的出峰时间(保留时间)进行定性.

1.3.2　定量　根据已知浓度标样鱼藤酮的吸收峰面积和样品鱼藤酮吸收峰面积与它们各自的含量成正比的关系测定试样中鱼藤酮的含量,计算公式如下:

C样=

S样×C标

S标

S标和S样

分别表示标样和样品的吸收峰面积;

C标和C样

分别表示标样和样品的浓度.

粗提物中的鱼藤酮含量=干粉中的鱼藤酮含量提取率×100%.2　结果与分析 用不同溶剂和不同方法提取非洲山毛豆不同品种叶片后所测定的结果见表1～6.

　第22卷第4期 2001年10月 华南农业大学学报JournalofSouthChinaAgriculturalUniversity

Vol.22,No.4

　Oct.2001　在索氏、冷浸和振荡提取中,紫花品种叶片干粉中鱼藤酮含量最高的依次是丙酮、氯仿、丙酮作提取溶剂,w分别为0.72%、0.63%、0.68%;白花品种叶片干粉中鱼藤酮含量最高的依次是苯、丙酮和丙酮3种溶剂,w分别是0.57%、0.48%、0.43%,其中振荡提取中白花品种丙酮和乙酸乙酯提取计算求出的植物干粉中的鱼藤酮含量相同.在索氏提取和冷浸法提取中,紫花和白花品种提取物中鱼藤酮含量最高的都是苯和石油醚提取物,w分别是8.01%、6.34%和6.73%、4.74%.石油醚提取物中鱼藤酮含量虽然比较高,但是它的提取率较低,w分别只有5.41%和4.58%,可能是因为提取出来的杂质较少,而使提取物中鱼藤酮的含量增高的缘故.而振荡抽提中,紫花和白花品种提取物中鱼藤酮含量最高的分别是氯仿提取物和丙酮提取物,含量分别为9.70%和6.43%.

表1　索氏抽提紫花品种叶片的结果1)Tab.1　ResultsofrotenoneinleavesofpurplevarietyextractedbySohxletextraction

溶　剂solvents

提取率

extractionrate/%ρ(样品中鱼藤酮rotenoneinsample)/(g・mL-1)w(干粉中的鱼藤酮rotenoneindrypowder)/%w(粗提物中的鱼藤酮rotenoneincrudeextracts)/%

石油醚petroleumether10.523.4150.34b3.25

苯benzene8.246.6190.66a8.01

氯仿chloroform10.275.4060.54a5.26

乙酸乙酯ethylacetate7.305.5590.56a7.68

丙酮acetone9.067.1840.72a7.95

甲醇methanol20.132.9940.30b1.49

　1)表中同列数据后字母相同者,表示在5%水平上无显著差异(DMRT)

表2　冷浸抽提紫花品种叶片的结果1)Tab.2　Resultsofrotenoneinleavesofpurplevarietyextractedbycoldextraction

溶　剂solvents

提取率

extractionrate/%ρ(样品中鱼藤酮rotenoneinsample)/(g・mL-1)w(干粉中的鱼藤酮rotenoneindrypowder)/%w(粗提物中的鱼藤酮rotenoneincrudeextracts)/%

石油醚petroleumether5.413.4310.34b6.34

苯benzene10.386.0260.60a5.78

氯仿chloroform11.656.3020.63a5.41

乙酸乙酯ethylacetate13.504.3910.44ab3.26

丙酮acetone13.535.5570.56a4.18

甲醇methanol26.871.1870.12c0.46

　1)表中同列数据后字母相同者,表示在5%水平上无显著差异(DMRT)

表3　振荡抽提紫花品种叶片的结果1)Tab.3　Resultsofrotenoneinleavesofpurplevarietyextractedbyvibratingextraction

溶　剂solvents

提取率

extractionrate/%ρ(样品中鱼藤酮rotenoneinsample)/(g・mL-1)w(干粉中的鱼藤酮rotenoneindrypowder)/%w(粗提物中的鱼藤酮rotenoneincrudeextracts)/%

石油醚petroleumether8.683.6540.37b4.21

苯benzene6.385.3880.54a8.44

氯仿chloroform6.406.2070.62a9.70

乙酸乙酯ethylacetate6.605.7520.58a8.72

丙酮acetone7.746.8260.68a8.82

甲醇methanol24.133.2950.33b1.37

　1)表中同列数据后字母相同者,表示在5%水平上无显著差异(DMRT)

03 华　南　农　业　大　学　学　报第22卷表4　索氏抽提白花品种叶片的结果1)Tab.4　ResultsofrotenoneinleavesofwhitevarietyextractedbySohxletextraction

溶　剂solvents

提取率

extractionrate/%ρ(样品中鱼藤酮rotenoneinsample)/(g・mL-1)w(干粉中的鱼藤酮rotenoneindrypowder)/%w(粗提物中的鱼藤酮rotenoneincrudeextracts)/%

石油醚petroleumether9.623.0780.31b3.20

苯benzene8.475.7320.57a6.73

氯仿chloroform10.995.3450.53a4.82

乙酸乙酯ethylacetate8.445.3790.54a6.40

丙酮acetone8.605.2970.53a6.16

甲醇methanol19.052.8170.28b1.47

　1)表中同列数据后字母相同者,表示在5%水平上无显著差异(DMRT)

表5　冷浸抽提白花品种叶片的结果1)Tab.5　Resultsofrotenoneinleavesofwhitevarietyextractedbycoldextraction

溶　剂solvents

提取率

extractionrate/%ρ(样品中鱼藤酮rotenoneinsample)/(g・mL-1)w(干粉中的鱼藤酮rotenoneindrypowder)/%w(粗提物中的鱼藤酮rotenoneincrudeextracts)/%

石油醚petroleumether4.582.1690.22b4.74

苯benzene9.253.6730.37ab4.00

氯仿chloroform9.794.1780.42a4.29

乙酸乙酯ethylacetate14.434.1590.42a2.91

丙酮acetone12.094.7860.48a3.97

甲醇methanol25.021.1070.11c0.44

　1)表中同列数据后字母相同者,表示在5%水平上无显著差异(DMRT)

表6　振荡抽提白花品种叶片的结果1)Tab.6　Resultsofrotenoneinleavesofwhitevarietyextractedbyvibratingextraction

溶　剂solvents

提取率

extractionrate/%ρ(样品中鱼藤酮rotenoneinsample)/(g・mL-1)w(干粉中的鱼藤酮rotenoneindrypowder)/%w(粗提物中的鱼藤酮rotenoneincrudeextracts)/%

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生物碱的提取方法

生物碱的提取方法

生物碱的提取方法
生物碱是一类含有碱性氮原子的天然化合物，可以从植物、动物等生物体中提取得到。

以下是生物碱的提取方法：
1.酸碱萃取法：生物碱通常是存在于植物的根、茎、叶、花、果实等部位的。

首先，将生物组织研磨，加入适量的酸性溶液进行萃取，将生物碱中的酸性残留物溶解。

然后，加入适量的碱性溶液进行中和，生物碱与碱性溶液中的酸性离子结合形成盐状物质，通过离心分离出生物碱。

2.溶剂萃取法：将生物组织研磨，加入溶剂（如乙醇、乙醚、丙酮等），使生物碱溶于溶剂中。

然后，通过蒸馏或蒸发浓缩将溶剂去除，得到含有生物碱的浓缩物。

最后，通过结晶、过滤等操作将生物碱纯化。

3.色谱分离法：利用色谱柱中吸附剂对生物碱进行分离。

通常采用薄层色谱、柱层析、液相色谱等，根据生物碱的不同特性选择不同的分离方法。

以上是三种常见的生物碱提取方法，根据具体情况选择不同的方法进行提取。

植物提取简易方法

植物提取简易方法

植物提取简易方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：植物提取是一种常见的实验方法，用于从植物中提取出有益成分。

这些植物提取物可以应用于医药、化妆品、食品等领域，具有广泛的应用价值。

在实验室中，常用的方法有多种，其中包括溶剂提取、热水提取、超声波提取等。

本文将介绍一种简易的植物提取方法，并详细讲解其步骤和注意事项。

准备工作是选择合适的植物材料。

一般来说，新鲜的或干燥的植物部位都可以用于提取，如叶片、根茎、果实等。

在选择植物材料时，应根据需要提取的成分种类和用途来进行选择。

如果需要提取植物的挥发性成分，就应选择新鲜叶片；如果需要提取植物的色素成分，就应选择干燥果实。

接下来是提取物的准备工作。

将选好的植物材料洗净，并进行粉碎或切碎处理，以增加表面积，有利于提取。

粉碎后的植物材料应尽快进行提取，以避免挥发性成分的损失。

然后是提取方法的选择。

本文介绍一种简易的溶剂提取方法。

将粉碎后的植物材料加入合适的溶剂中，如乙醇、丙酮等。

溶剂的选择应根据植物材料和目标成分的溶解度来确定。

然后，将混合物加热至适当温度，常规的温度范围为60-80摄氏度，持续搅拌一段时间，以促进目标成分的溶解。

接着，将混合物进行过滤或离心处理，将提取物从植物残渣中分离出来。

在实验过程中，需要注意一些问题。

首先是溶剂的选择，应选择对人体无害的食品级或药品级溶剂，以避免有毒物质残留在提取物中。

其次是提取温度的控制，过高的温度会导致目标成分的破坏或挥发，影响提取效果。

最后是提取时间的控制，过长的提取时间会导致植物材料中的不良成分被提取出来，影响提取物的品质。

植物提取是一种简单而有效的方法，可以从植物中提取出有益的成分，具有广泛的应用前景。

通过选择合适的植物材料和溶剂，控制好提取条件，可以得到高质量的提取物，为后续的实验和应用打下良好的基础。

希望本文的介绍可以帮助读者更好地了解植物提取方法，为相关领域的研究和应用提供参考。

第二篇示例：植物提取是一种常见的科研技术，通过这种方法可以从植物中提取出有效成分，用于医药、食品、化妆品等领域。

鱼腥草叶中总黄酮的提取与含量测定

鱼腥草叶中总黄酮的提取与含量测定

中国科技期刊数据库 医药2015年16期 103鱼腥草叶中总黄酮的提取与含量测定楼 颖1 陈 津21.浙江大学医学院附属儿童医院，浙江 杭州 3100002.杭州广州默尼医疗技术有限公司，浙江 杭州310000摘要：目的 探讨鱼腥草总黄酮的提取及含量测定方法。

方法 以乙醇为溶剂，采用索氏回流法提取鱼腥草叶中黄酮类化合物，并采用分光光度法测定其黄酮含量。

结果 以80％的乙醇水溶液为溶剂，固液比为1：40，提取温度80℃、回流提取时间3h ，在此工艺条件下进行试验，黄酮提取率可达90%以上。

测得样品中总黄酮的含量C =6.56%，回收率为93.2%。

结论 用乙醇提取鱼腥草中的黄酮化合物，方法简单、实用，提取率好。

该方法采用全物理过程，提高了黄酮的提取率，是提取鱼腥草黄酮类物质的有效途径。

关键词：鱼腥草叶；总黄酮；提取；测定 中图分类号：S567.239 文献标识码：A 文章编号：1671-5837（2015）16-0103-01鱼腥草为一年生草本植物，系三白草科蕺菜属植物蕺菜的全草，紫赤色，自古以来供食药两用，被国家卫生部正式确定为“既是食品，又是药品”，极具开发潜力。

现代药理研究表明：鱼腥草有抗病毒、抗菌、解热、抗炎镇痛、升白细胞等作用。

鱼腥草含有丰富的黄酮类物质，黄酮类化合物有降脂、抗血栓、抗氧化、抗衰老、抗心率失常、抗肿瘤、抗过敏、预防龋齿等作用。

黄酮类化合物的提取主要采用热水浸提法，由于黄酮类化合物中黄酮甙能溶于水，乙醇，甲醇等极性溶剂，而黄酮体的甙元不溶于水，只溶于乙醇等有机溶剂，所以采用水提法不能将鱼腥草叶中的黄酮全部提取出来。

而采用乙醇提取，选择性好，渗透性强，浸出率高，能较为彻底地将黄酮提取出来，且有食用安全性高，易回收等优点。

笔者在该研究中以乙醇为溶剂，采用索氏回流法对鱼腥草中的黄酮进行提取，旨在获得最佳提取条件，为鱼腥草的综合利用提供理论依据。

1721紫外分光光度计（上海第三分析仪器厂），FC104电子天平（上海精科天平公司），市售新鲜鱼腥草，芦丁对照品（中国药品生物制品鉴定所），DF 一101S 集热恒温磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司），索式提取器，亚硝酸钠溶液，氢氧化钠溶液22.1 鱼腥草中总黄酮的萃取工艺流程为鱼腥草→粉碎→称重→水浸泡→微波处理→过滤→稀2.2 鱼腥草的前处理将鱼腥草茎叶分开，均先用自来水洗净，再用纯化水冲洗后晾干，于602.3鱼腥草中黄酮提取条件的优化取鱼腥草叶子，切碎，放人去离子水中浸泡0.5h ，沸水中煮沸5min ，用清水漂洗数次，洗至沥液接近无色为止，沥干，置烘箱（70%左右）中烘干，碾碎成粉末状。

植物的提取方法有哪些

植物的提取方法有哪些

植物的提取方法有哪些植物提取是从植物中分离和提取有效成分的过程。

它是研究和开发植物药物和天然产物的重要步骤。

随着现代科技的发展，植物提取方法也在不断改进和创新。

本文将详细介绍常用的植物提取方法。

1. 水蒸气蒸馏法：水蒸气蒸馏法是最传统的植物提取方法之一。

它利用水蒸气的温度和压力来提取植物材料中的挥发性成分。

该方法适用于提取茶叶、香草和花卉等含有挥发性成分的植物材料。

2. 溶剂萃取法：溶剂萃取法是最常用的植物提取方法之一。

它利用溶剂将植物材料中的有效成分溶解出来。

常用的溶剂包括醇类、醚类和酮类等。

溶剂萃取法适用于提取大部分非挥发性的成分，如植物油、生物碱和多糖等。

3. 超临界流体萃取法：超临界流体萃取法是一种高效的植物提取方法。

它利用超临界流体（通常为二氧化碳）的特殊物理和化学性质来提取植物材料中的化学成分。

超临界流体萃取法提取效果好，对环境友好，并且能够避免溶剂残留。

4. 微波辅助提取法：微波辅助提取法是一种快速、高效和环保的植物提取方法。

它利用微波加热和植物材料中的水分子之间的作用力来提取植物中的化学成分。

微波辅助提取法节省时间和溶剂使用量，并且提取效果好。

5. 超声波辅助提取法：超声波辅助提取法是一种应用超声波振动来促进植物提取的技术。

超声波的振动作用可以破坏细胞壁，促进有效成分的释放和提取。

超声波辅助提取法具有高效和短时间的特点。

6. 气相色谱法：气相色谱法是一种分离和分析挥发性成分的方法。

它将植物提取物中的化学成分分离后，通过气相色谱仪进行分析和鉴定。

气相色谱法广泛应用于植物精油、香料和芳香化合物等的提取和分析。

7. 液相色谱法：液相色谱法是一种分离和分析非挥发性成分的方法。

它通过将植物提取物中的化学成分溶解在流动相中，在固定或液态填料上进行分离和分析。

液相色谱法适用于提取多糖、多酚和蛋白质等非挥发性成分。

8. 固相萃取法：固相萃取法是一种选择性提取特定化合物的方法。

它利用特定的固相材料将目标化合物从复杂的植物提取物中富集和分离。