奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项

2021年第4期（总第285期） 畜牧生产13提高奶牛性控冻精配种受胎率的技术与管理措施柳明训（山东省莱西市河头店人民政府，山东 莱西 266621）中图分类号：S823.9+1 文献标识码：B 文章编号：1007-1733（2021）04-0013-02 近年来，奶牛性控冻精在奶牛生产中已得到了广泛的应用，用性控冻精配种，可使母牛的产犊效益显著提高。

由于性控冻精成本比普通冻精高出十多倍，而且每剂精液中有效精子数量也比普通冻精要少得多，能取得较高受胎率的难度较大，这就使奶牛性控冻精的应用受到了很大的限制。

因此，为了应用奶牛性控冻精能够取得较为理想的使用效果，根据笔者多年工作经验，总结出如下技术要求。

1 性控冻精应用技术1.1 精液品质检查 解冻所需盛温水的器具最好采用容量较大的容器，如用铝饭盒、广口保温瓶等。

解冻前先将镊子尖端接触液氮预冷，再将盛放细管冻精的提筒（内盛细管冻精纱布袋），提到距离颈管上口以下约8 cm 处，然后迅速镊住一支细管冻精放入盛有40 ℃ 温水的器具内，用镊子夹住细管轻轻摇动30~40 s ，使管内冻精迅速融化。

将细管从温水中取出，用灭菌纸巾擦干，立即用剪子将细管密封一端剪齐，挤出一小滴精液于载波片上，盖上盖玻片，用放大400倍的显微镜进行镜检。

凡用于输精的细管精液，精子活力不应低于30 %，有效精子数应在200万个以上。

1.2 奶牛选择 首先是奶牛的选择，应选择中、高产奶牛及其后代作为使用对象。

其次是年龄和胎次，首选初配母牛和生产3胎以内的母牛。

再次是营养和健康状况，要求膘情适中，健康无疾病和繁殖疾病史。

1.3 搞好发情鉴定，做到适时输精 奶牛适时输精的时间主要是根据母牛卵巢上的卵泡发育成熟情况与外部发情表现相结合，进行综合判断。

一般是在发情末期到发情结束后3~4 h 为宜。

外部表现：阴户肿胀减退，生殖道排出黏液量少而黏稠。

输精时要做到输精部位准确，一般输到子宫体。

每个情期输精1~2次，1支/次细管冻精，两次输精的间隔时间为8 h 左右，输精时要掌握慢参考文献[1] 张震, 闫磊, 闫跃飞, 等. DHI 助推奶牛养殖水平大幅提高[J]. 中国畜牧业, 2016（23）: 27-29.[2] 河北省人民政府关于加快推进奶业振兴的实施意见[J].北方牧业, 2019（13）: 4-5.[3] 郑国生, 施正香, 滕光辉. 中国奶牛养殖设施装备技术研究进展[J]. 中国畜牧杂志, 2019, 55（7）: 169-174. [4] P. Zappavigna, P. Liberati, U. Chiappini. Feeding ControlSystem for Dairy Cows[J]. Journal of Agricultural Engineering Research, 1998, 71（4）.[5] Gupta G S, Barlow P, Chapman R. Development ofanautomated cattle feed mixer: sixth ieee international symposiumon electronic design, test and application[C]. Queenstown: Ieee, 2011.[6] 翟改霞, 贺刚, 戴晓军, 等. 智能化犊牛饲喂系统及国外典型机型[J]. 农业工程, 2015, 5（4）: 5-8.[7] Pastell M, Takko H, Grohn H, et al. Assessingcows’welfare: weighing the cow in a milking robot[J]. Biosyst Eng, 2006, 93（1）: 81-87.[8] Hogeveen H, Ouweltjes W, Koning C J A.M, et al .Milkinginterval, milk production and milk flow-rate in an automaticmilking system[J]. Livest Prod Sci, 2001, 72（1-2）: 157-167.[9] Pan L, Yang S X. Analysing livestock farm odour usinganadaptive neuro-fuzzy approach[J]. Biosyst Eng, 2007, 97（3）: 387-393.[10] 乔希. 山东省奶牛养殖场（户）清洁生产行为实证研究[D]. 泰安: 山东农业大学, 2019.（收稿日期：2021–01–06）山东畜牧兽医 2021年第42卷14 插、适深、轻注、缓出，防止精液倒流。

性控冻精对同期发情奶牛输精效果观察近年来，随着畜牧业的发展，性控技术逐渐成为农牧业生产中的重要手段之一。

在牛群中，冻精技术被广泛应用于牛种改良和优化繁殖效果。

而与此同时，同期发情奶牛输精效果对于性控冻精技术的应用也具有重要的影响。

本文将就性控冻精对同期发情奶牛输精效果进行观察和分析。

一、性控冻精技术的基本原理性控冻精技术是一种通过人工干预的方式，使精液中的某种性别的精子比例增加，从而达到选择性别的目的。

其基本原理是通过控制某种精子的活性或存活期，使其具有更高的受精能力。

性控冻精技术主要利用了X精子和Y精子的生物学特性差异，通过调整精液处理方法或添加特殊的冷冻液，使得特定性别的精子在冻精过程中更具竞争力，从而选择性别。

二、同期发情奶牛的输精效果观察1. 性控冻精对同期发情奶牛的繁殖效果同期发情奶牛是指在特定的时间段内同时发情的一群母牛。

在进行性控冻精时，我们可以针对同期发情的奶牛群体进行选择性别的精子注入。

通过观察和记录，可以得出性控冻精对同期发情奶牛的繁殖效果。

2. 同期发情奶牛输精的操作难度性控冻精需要在确保精子质量的基础上，实施针对性别的筛选和冻存处理。

对于同期发情奶牛的输精操作，由于需要在短时间内完成大量的输精工作，操作难度较大。

因此，针对同期发情奶牛的性控冻精需要更高的技术要求和操作经验。

三、性控冻精对同期发情奶牛输精效果的影响因素分析1. 配种时间的选择同期发情奶牛的配种时间对于性控冻精的输精效果具有重要影响。

一般来说，选择在发情后的最佳受精时机进行输精操作，可以提高性控冻精的效果。

2. 精子存活率与受精能力性控冻精的目的是通过调整精子的活性和存活期，使特定性别的精子在冻精过程中相对竞争优势。

因此，精子的存活率和受精能力是影响性控冻精对同期发情奶牛输精效果的关键因素。

3. 精液处理方法和冷冻液的配比性控冻精的精液处理方法和冷冻液的配比，对于特定性别精子的质量和受精能力具有重要影响。

不同的处理方法和配比，可能导致精子受损或失去选择性别的能力，进而影响输精效果。

奶牛性控冻精应用的要点作者：王会恩来源：《现代畜牧科技》 2015年第5期王会恩�（黑龙江省杜尔伯特蒙古族自治县畜牧兽医局 166200）性别控制是指人为地干预雌性动物而繁殖出人们所需的性别后代的一种新的繁殖技术。

奶牛XY精子分离性别控制技术是根据精液中精子分别含有X染色体和Y染色体，使其DNA含量有所不同，从而使这两种类型的精子可以进行有效的分离，并将其中含有X染色体的精子进行分装冷冻，然后在牛人工授精中使用，最终使母牛所产后代为母牛犊，这就称为性控冻精。

�1 应用意义�奶牛母、公犊牛的价格一般相差1000元以上，母牛在相同的饲养管理成本和妊娠时间条件下，采用性控冻精进行配种，能够显著提高妊娠母牛的产犊效益。

奶牛进行性控冻精与常规冷冻精液配种相比，可以使其产出的后代是母犊牛，从而显著增加母牛数量和提高产奶量，最终提高生产效益。

此外，通过性控冻精可使母牛产出更多高产优质的母牛后代，从而加快整个牛群的淘汰速度，使生产效率得到提高。

�2 母牛的选择�使用对象要选择中、高产奶牛及其后代，选择的初配母牛最好是有两个以上发情周期为正常的母牛或者产胎次数在3胎以内的母牛，且其未患传染病和繁殖系统疾病，特别是未患布氏杆菌病的健壮青年母牛，同时膘情适中，泌乳性能良好，从未发生过流产、胎衣停滞和难产，产犊性能良好的奶牛。

�3 发情的观察与发情周期的把握�奶牛发情的行为变化表现出烦躁不安，步行数和活动量是未发情奶牛的5倍以上，并寻找其他发情母牛；下巴依托于其他奶牛臀部并进行摩擦，嗅闻其他母牛的外阴；压捏腰背部下陷；有的奶牛出现产奶量下降和食欲减退的现象；接受其他牛爬跨或爬跨其他牛，其中前者是奶牛发情鉴定重要特征。

�奶牛发情的身体变化表现出有时体表潮湿，有蒸腾状；阴户肿胀，阴道黏膜红润，外阴潮湿；外阴流出线状、透明的黏液，或于外阴周围黏附；尾根、臀部有接受他牛爬跨造成的秃毛斑或小伤痕。

�4 操作要点�保定与检查。

将发情母牛固定于保定栏内，将牛尾拉向一侧，先用清水清洗外阴部，之后用0.1%的新洁尔灭溶液进行冲洗，然后用灭菌温水将消毒液冲洗干净，最后用经过消毒的毛巾擦干外阴，注意每头母牛每次单独使用一条毛巾，或者可先用清水清洗外阴部，之后用浸有75%酒精的棉球反复擦洗，稍等挥发晾干即可进行检查。

养殖技术-性控冻精的使用技术X/Y精子分离技术是通过流式细胞分离仪将公牛精液中的X、Y精子进行分离，从基因和性染色体的角度来实现性别控制，是目前最先进、最经济和生产中应用最为广泛的性别控制手段，是继冻精授配和胚胎移植之后，家畜繁殖技术的第三次革命。

美国于2000年将此项技术成功从实验室引入商业化生产，奶牛情期受胎率平均为53%，青年母牛达60%以上，母犊率高达93％；阿根廷、日本、巴西、墨西哥、英国等国家也已将此项技术应用于奶牛生产；我国主要有中国种畜进出口（天津）有限公司、新疆金牛生物股份有限公司及内蒙、河北等省从事奶牛X精液的生产销售，奶牛授配试验情期受胎率为58％—72％，平均约为65％。

该技术在现代奶牛生产中广泛应用，可实现奶牛连续产母犊的愿望，不仅能显著提高奶牛的产母率，加快奶牛群的扩繁速度，而且可有效提高奶牛的种群质量及其繁殖效益，但与常规冻精相比，其存活时间、受精能力存在差异，主要表现在保持受精能力的时间稍短（8—10小时）和情期受胎率降低（约5—10个百分点）。

因此，为了更好地使用性控冻精，收到理想效果，在奶牛生产实践中应特别注意如下操作要点。

1、选择合适的受体。

应选择营养均衡、体质健康、发情正常且无生殖疾病的育成牛和低胎次青年母牛参加配种，高胎次奶牛由于卵巢囊肿、卵巢静止、持久黄体及慢性子宫炎等生殖系统疾病相对较多，且其机体新陈代谢机能下降，激素分泌能力减弱，都会导致母牛长期不发情、卵泡发育迟缓、不排卵，最终导致母牛受胎率下降。

因此，要尽量避免有生殖道疾病和高胎次母牛使用性控冻精。

2、科学配比日粮，规范饲养。

要强化奶牛场的规范化管理，提高动物福利，做好高胎次牛、屡配不孕牛、低产牛的淘汰和疾病治疗工作，保证奶牛充足的光照和适当运动。

日粮要依据不同产奶阶段做到精、粗料合理搭配，科学配比，对缺乏的矿物质、维生素及微量元素等要适当添加，确保日粮营养全面均衡，促进奶牛正常发情和排卵。

3、准确掌握输精时机。

性控精液人工授精技术北京奶牛中心自然情况下，奶牛繁殖过程中人为无法进行性别控制，公、母犊出生比率大约各占一半。

由于奶牛业以产奶为主，一半的后代没有饲养价值，造成资源的浪费和养殖者的经济损失还降低了良种奶牛种群的扩繁速度，无法满足快速发展的高产奶牛市场需求。

通过高新技术手段决定出生犊牛的性别，实现良种奶牛种群快速扩繁，降低生产成本满足市场需求，是当今奶牛养殖者的期盼，也是生殖生物学领域的重要研究课题。

利用性控精液进行人工授精，实现奶牛生殖的性别控制，是避免资源浪费、迅速扩大种群、实施品种改良较易普及和被市场接受的生物高新技术。

因此性别控制技术在全国有非常好的发展前景。

应用性控精液，大大加快了良种奶牛的培育步伐，在较短的时间内，大幅度扩大奶牛群的规模，增加良种奶牛的比例，加速提高整个奶牛群的产奶水平。

它是当今世界最先进性别控制技术的产物，代表了动物遗传育种的发展方向，可以说应用性控精液人工授精是奶牛繁育改良史上的又一次革命。

（1）性控精液的生产原理：根据X、Y精子其DNA含量的不同，由于X精子比Y精子含有较多的DNA，在用荧光染料染色时，X精子吸收的染料多，发出的荧光也强，就此可以分辨出X与Y精子，然后再利用计算机控制使荧光强的X精子带上正电荷，Y精子带上负电荷，在通过高压电场时便向不同的方向偏转，从而达到分离目的，分辨率可达90%以上。

分离后X精子的精液进行冻精各项指标检测，达标的精液封装冷冻保存；分离产生的Y精子精液和废精都弃掉不要（见图1）。

（2）牛分离精液的技术指标表1牛分离精液的技术指标指标常规精液分离精液精子活力0.3-0.50.3-0.4有效精子数2000万个/0.25ml200万个/0.25ml分离纯度--90%-95%存活时间20-24小时8-10小时情期受胎率55%-75%45%以上（3）性控精液的特点①可以使后代犊牛90%以上为母犊；②解冻后精子活率要比常规冷冻精液高，其主要原因是奶牛X性控精液在分离的过程中，除了保留X精子、筛除Y精子外，还将原精液中的死精子和部分畸形精子筛除掉；③有效精子数约为200万个/0.25m1,远低于常规精液的有效精子数。

[2007/12/15] 性控冻精使用和操作的要点及注意事项[折叠]性别控制是指雌性动物通过人为地干预而繁殖出人们所期望性别后代的一种繁殖新技术。

奶牛XY 精子分离性别控制技术是指将牛的精液根据含X 染色体和Y 染色体精子的DNA 含量不同而把这两种类型的精子有效的进行分离后，将含X 染色体的精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，而使母牛怀孕产母牛犊的技术；这种根据精子X 、Y 染色体的不同而分装冷冻的冻精就叫性控冻精；使用我公司的牛性控冻精产品对发情母牛进行配种可以使90% 以上的受配怀孕母牛产母牛犊。

一、奶牛性控冻精在生产中使用的重要意义（一）奶牛公、母犊牛的价格差一般在1000 元以上，母牛同样的饲养管理成本和怀孕时间，用性控冻精冷配，可以使怀孕母牛的产犊效益显著提高。

（二）使用性控冻精可以显著的提高母牛数和群体产奶量，这是因为与常规冷冻精液配种相比，使用性控冻精，可以大量的繁殖出母牛后代，最终使母牛数和产奶量都得到提高，从而提高生产效益。

（三）使用性控冻精可繁殖出大量的优质高产的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生产效率。

以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛产业的生产效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使牛的品种改良一步到位。

二、性控冻精的特点（一）解冻后精子活力要比常规冷冻精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分选时被筛除；（二）性控冻精细管分装精子的密度显著地低于非性控冻精（性控：230 万个/0.25ml ，非性控：2500 万个/0.25ml ）；（三）奶牛含X 染色体性控冷冻精液的存活时间相对于常规冷冻精液要短。

三、使用性控冻精进行人工授精的母牛的选择按下列步骤和标准执行首先是品种的选择，选择中、高产奶牛及其后代做为使用对象；其次是年龄和胎次，首选初配母牛和生产三胎内母牛；最后是营养和健康，膘情适中健康无疾病和繁殖疾病史。

四、性控冻精输精技术的操作要点和注意事项（一）准确的发情观察（步骤）1. 每天早晚对放牧或在运动场运动牛群进行至少半小时的观察，记录接受爬跨的牛号；2. 不能放牧或不能在运动场运动的牛，等到牛吃草挤奶后静卧休息时，观察其尾部分泌物的粘性和颜色，记录牛号；3. 对外阴红肿爬跨其它牛只骚动不安的牛只记录牛号；4. 对上述三种情况记录的牛只在观察完成后立即查阅繁殖记录，剔除产后时间不合适、正在进行繁殖疾病治疗和其它不适合进行配种的牛只；5. 对观察到上述症状的适合冷配的空怀牛只，在10-12 小时后进行直肠检查，首先判断子宫的大小和质地，然后检查两侧卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根据卵泡的大小和质地推测排卵时间，判断在8 小时之内排卵并适合进行冷配的牛只立即进行配种，对适合使用性控冻精的牛只（本手册第三条）用性控冻精配种，不适合的用常规冻精配；并做好包括子宫、卵巢情况和发情时间及输精时间和部位等内容的详细记录；（二）输精操作要点n1. 使用性控冻精配种时，配种时间尽量控制在排卵前6 小时之内或排卵后4 小时之内；使用性控冻精时，尽量缩短解冻与输精之间的时间，最好是解冻一支输一支；2. 解冻方法：从液氮罐中取冻精时，提漏中的冻精不可超过液氮罐口，如果10 秒钟内还没有将冻精取出，应将冻精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重复操作；单支冻精取出后在空气中先停留 5 秒左右，然后放入38 -40 摄氏度清水中10 秒中后取出用干脱脂棉擦干后剪断封口，装入输精器准备输精；3. 输精器最好是使用一次性外套的，输精时要保证输精器的无菌和与输精器接触的部位及器具的干净卫生；输精部位一般在排卵侧子宫角或者是采用子宫体后拉法，也就是说，如果能够准确判断出排卵侧并能使输精器顺利的放到排卵侧子宫角就采用子宫角输精，否则，采用子宫体输精器后拉发法输精，保证两侧子宫角都能有精子进入和受精。

2021年第5期 吉林畜牧兽医59·草食动物·CaoShi DongWu奶牛性控冻精人工授精技术关键点艾斯卡尔•吾斯曼1 ，阿米娜•毛依冬21.新疆阿克苏地区温宿县畜禽品种改良站，新建温宿 843100；2.新疆阿克苏地区温宿县畜牧兽医站，新疆温宿 843100奶牛性控授精技术就是通过人为干预使母牛繁殖出人们所需要性别后代的繁殖技术。

具体就是将公牛精子分离，对包含X 染色体的精子分装并置于冷冻状态，后期通过人工授精使母牛生产出母犊牛的技术。

1 选择受配母牛受配母体应为高产奶牛、中产奶牛或其后代；初配母牛及三胎母牛为最佳，若选择初配母牛，其最佳月龄为16～18个月，体重超过成年母牛标准体重70%；选择膘情适中、发情正常、无传染性疾病及生殖道疾病、不存在流产史的母牛。

2 授配母牛发情鉴定2.1 外部观察发情初期，母牛兴奋不安、爬跨、追逐、敏感，一些母牛情绪低迷，此状态可持续半日。

早期发情后，母牛可接受其它牛爬跨，具体表现为体温略微升高、食欲不佳、持续低迷或兴奋不安、摇动耳朵、阴门血肿可见透明黏液、尾根毛乱、接受爬跨。

2.2 阴道黏液测试发情初期，母牛黏液量较少，可流动，偏酸性，呈稀薄透明状；发情中期，黏液呈半透明状并增多；发情后期，黏液黏稠并较少，偏碱性，牵缕性较强。

躺卧状态下，阴门流出大量透明黏液，体积可达300～500 mL，站立状态下黏液在阴门外悬吊，此时即可认定母牛发情。

因非发情期母牛及受孕母牛有时也可出现少量黏液，还需检测黏液pH 值。

2.3 直肠检查工作人员将手臂深入到直肠内，通过手触摸卵巢及卵泡。

若母牛处于发情期，触摸过程中卵泡明显波动，壁较薄，一触即破。

结合外部发情征兆可明确卵泡发育程度，确定排卵时间，进而判定配种时期。

3 输精操作技术要点3.1 保定及检查在保定栏内，采用清水清洗并用0.1%新洁尔灭冲洗外阴，接着冲去消毒液，用消毒毛巾擦净。

母牛发情时间一般为20～22 h。

第一部分性控技术和性控冻精的概况一、性控技术的概念和在畜牧业生产中的重要意义性别控制：通过人为的干预使雌性动物繁殖出人们所期望的性别后代的一种繁殖新技术。

奶牛XY精子分离技术是指将公牛的精液根据精子自身X染色体和Y染色体的DNA含量不同，把这两种类型的精子通过物理方法、计算机技术等进行有效的分离，将X精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，使母牛怀孕的技术，母牛率可以达到90％以上；根据精子自身X、Y染色体中DNA含量的不同而有效分离的冻精就叫性控冻精。

从经济效益来讲，该技术的应用将直接为奶农带来更多的获得良种母牛机会，增加了奶农的收入。

其重要意义在于：1、产母犊效益提高良种母犊出生数量，使良种奶牛的繁育数量呈几何速度增长，加速牛群改良和更新，迅速达到良种化规模养殖，增加规模效益。

2、充分利用现有优质种公牛和高产奶牛的遗传潜力母牛一生能产6～7胎，平均可以留下3头母牛，采用性控冻精使高产奶牛一生可以产6～7头优质母牛。

3、提高生产性能加速低产奶牛的改良步伐，迅速扩大良种奶牛群，产奶性能得到快速提升，产奶效益不断增加。

以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛养殖的经济效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使奶牛的品种改良一步到位。

二、性控冻精在我国应用的重要性和在国内的应用及效果由于我国奶牛的品种质量较差，平均单产达不到 3500公斤/头，远低于世界平均单产5500公斤/头的水平，更达不到以色列、美国等奶业发达国家奶牛单产的一半。

因此从我国实际情况分析，全国各地对良种牛的需求量非常大。

奶牛是单胎动物，自然状态下，一头母牛一年只能繁殖一胎，终生平均也只能提供3头左右的母牛后代。

由于奶牛自然繁殖率低，繁殖速度慢，年增长速度仅为15%，使得国内现有高产、良种奶牛扩繁速度受到很大限制；若从国外大批引进良种奶牛不但成本高，而且受到国外牛源和国家检疫的限制；因此，高产纯种奶牛的缺乏成为目前我国奶业快速发展的主要瓶颈。

Breeding Consultant养殖顾问1奶牛细管式冷冻精液保管要制作储存明细表以准确掌握提桶内的细管式冷冻精液位置。

同时记录库存细管式冷冻精液数量，每次购入和使用时要严格核对。

操作时，每次提桶的取出、放入次数限定在最少。

不要把存有细管式冷冻精液的提桶提到距液氮罐口部太近处，要距口部5cm以下，不能再口部长时间滞留。

每一个提桶中尽量保存一头种公牛的细管式冷冻精液。

若保存2~3头种公牛精液时，为防止混杂，最好制作隔断，以便识别。

定期测量液氮罐中的液氮损耗量，如损耗严重或更新液氮罐及将液氮移入共池罐中时，最好把损耗较为严重的液氮罐作为添加液氮的运输传导工具，不要作为储存罐使用。

细管式冷冻精液在<-130℃时质量不会受影响，但温度一旦上升到>-130℃，再放回到液氮里保管时，精子活力就会下降。

液氮罐口部温度达>-130℃，细管式冷冻精液在此部位停留的时间过长会降低精液质量，细管式冷冻精液一旦暴露在空气中，不到10秒钟，细管式冷冻精液就会达到-130℃。

因此操作最好在5秒内完成。

特别是环境温度高时，必须在3秒内完成，如5秒以内不能完成，最好将细管式冷冻精液放回液氮中，然后再拿出来继续操作。

2奶牛细管式冷冻精液输精操作步骤奶牛实施人工授精时，应首先做好授精器具的灭菌消毒工作，然后按要求进行。

第1步：检查。

细管从液氮罐中取出之后，首先要检查管体是否完好。

以便确定解冻方法。

同时要检查细管上的种公牛号是否清晰，以便在配种卡片上填写与配公牛号。

第2步：解冻。

在杯子中准备好37~38℃的温水。

迅速确认所要使用的细管式冷冻精液，取出后立即放入温水杯中（注意要将细清式冷冻精液棉栓部朝下）。

过20~40秒钟待细管式冷冻精液融解后，从温水中取出，用洁净的纱布等擦掉水珠。

再用75%酒精棉消毒。

如果管体有裂隙或封口不严，可采取手搓法解冻。

第3步：剪口。

剪口要正，断面要齐，剪口偏斜容易导致精液倒流。

第4步：精子活力检查。