改良罗氏结核杆菌液体培养基使用说明书
- 格式：doc
- 大小：32.00 KB
- 文档页数：2
改良罗氏结核杆菌液体培养基使用说明书
本产品在Middlebrook 7H9 液体培养基的基础上，添加了作为显色指示剂，开发用于结核杆菌检测的液体培养基。
结核杆菌将指示剂还原，在白色的固体上形成鲜红色的菌落，所以，可以目测很清楚地判断菌体有无繁殖。
因此，对于判断，不需要特殊的仪器设备。
[组成] 4m l×20支
[用途] 在咳痰、支气管洗净液、骨髓液、淋巴结、脓液、胸水的结核杆菌分离培养检查中、检测菌体的繁殖。
[测定方法（测定原理）]
在培养基中接种菌体，在菌增殖的同时指示剂被吸收到菌体内，指示剂因菌体内的还原酶被还原，变成难溶性的红色色素。
由此，增殖的菌落染成红色，所以以目测就可以很容易确认菌体的增殖。
[操作方法]
1、检体的调制（前处理法）
将供试于结核杆菌检测的检体以适当的方法进行前处理，将目标菌体以外的菌（杂菌）进行杀菌和除菌处理，同时使检体均等化。
●咳痰、支气管洗净液、骨髓液、淋巴结、脓液、尿液
对认为有杂菌混在的检体，通常进行以下的前处理。
I）检体中加入等量的2%NaOH溶液，以此为基础，加入前处理剂，搅拌15-20分钟后静置。
难以混合均匀的时候，加入少量NALC粉末或者NALC溶液即可。
II）磷酸缓冲液离心分离，弃去上清液，在沉淀中加入磷酸缓冲液悬浊作为检体。
●骨髓液、胸水
以无菌性的采集、认为不混杂菌的检体就没有必要进行前处理，但是有可能混杂有杂菌的时候，与上述I）、II）同样进行前处理。
2、检体的接种
将处理过的检体0.1-0.5ml接种到本产品中，接种检体附着在管壁上，不能全部进入培养基时，这部分检出率会下降，所以使培养基不沾到盖子的程度轻轻地搅搅拌。
3、培养
旋紧栓塞，通常放在36-37℃的孵化器或孵化室培养。
4、观察、判断
观察最好是每天进行，但是在检查室，以最适时间间隔进行观测，以目测进行。
在培养基的底部有白色指示剂，其上有红色菌落产生时作为菌阳性。
●至阳性产生的培养时间因检体中的菌的种类和菌量不同而有差异。
第
3-5日左右可以观察到杂菌的生长可快速的菌的繁殖。
第7日左右进
行第2次观察，尽量在这之后每隔2-3日观察一次。
一直观察到第8
周，在白色指示剂上还没有变化，作为最终的判定，判断为菌阴性。
5、确认
混入的杂菌也有可能形成红色菌落，所以检测为阳性的菌体必须用涂抹检查等方法进一步确认是否为结核杆菌。
●在后面的检查中需要大量的分离培养菌时，即使是微量生长，在菌落
确认后，搅拌培养基继续培养的话，能够培养达到必要量。
[使用上或或者处理上的注意点]
1）目的菌为结核杆菌，处理上要充分留意。
2）指示剂反应显示菌阳性时，必须用涂抹染色等方法进行确认是否为结核杆菌。
3）本产品遇强光，有时会变成红色，所以要保存在阴暗处。
[贮存及有效期限]
1）贮存：2-10℃阴暗处保存；
2）有效期限：4个月。
