西南大学2011级分子生物学试题及答案 B卷
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西南大学课程考核雨蒙后
二、判断题(共8题,2分/题,共16分)
1、DNA模板链和后随链的复制过程中都需要引物,引物是一段短的RNA。
(×)
2、在原核生物复制子中用DNA聚合酶I完成DNA合成和缺口补平。
(×)
3、核糖体小亚基识别和结合的mRNA序列在原核生物中称为SD序列,在真核生物中则称为Kozak序列。
(√)
4.RNA既是遗传物质又是酶。
(√)
5.同一种限制性内切核酸酶切割靶DNA,得到的片段的两个末端都是相同的。
(√)
6、增强子就是启动子。
(×)
7、miRNA和siRNA都能在转录水平和翻译水平上抑制基因表达。
(√)
8.转录因子是指直接识别或结合在各类顺式作用元件上,参与调控靶基因转录的蛋白质。
(√)
三、简答题(共5题, 8分/题,共40分)
1.原核生物和真核生物mRNA的区别
信使RNA是由DNA经hnRNA剪接而成,携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核糖核酸。
①原核生物mRNA常以多顺反子的形式存在。
真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在。
②原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的,真核生物转录的mRNA前体则需经转录后加工,加工为成熟的mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作。
③原核生物mRNA半寿期很短,一般为几分钟,最长只有数小时(RNA噬菌体中的RNA除外)。
真核生物mRNA的半寿期较长,如胚胎中的mRNA可达数日。
④原核与真核生物mRNA的结构特点也不同。
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是先以病毒的RNA 分子为模板合成一个DNA 分子,再以DNA 分子为模板合成新的病毒RNA 。
前一个步骤被称为反向转录,是上述中心法则提出后的新的发现。
因此克里克在1970 年重申了中心法则的重要性,提出了更为完整的图解形式。
3.增强子
增强子(enhancer)指增加同它连锁的基因转录频率的DNA 序列。
增强子是通过启动子来增加转录的。
有效的增强子可以位于基因的5’端,也可位于基因的3’端,有的还可位于基因的内含子中。
增强子的效应很明显,一般能使基因转录频率增加10~200倍,有的甚至可以高达上千倍。
例如,人珠蛋白基因的表达水平在巨细胞病毒(cytomegalovirus ,CMV)增强子作用下可提高600~1 000倍。
增强子的作用同增强子的取向(5’一3’或3’一5’)无关,甚至远离靶基因达几千kb 也仍有增强作用。
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。
现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。
在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。
因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。
这样,lacZ 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。
然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。
如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养
12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。
②真核细胞的转录在细胞核中进行,蛋白质的合成在细胞质中进行,而原核细胞的转录与蛋白质的合成交联在一起进行。
③真核细胞有内质网、高尔基体、溶酶体、液泡等细胞器,原核细胞没有。
④真核生物中除某些低等类群(如甲藻等)的细胞以外,染色体上都有5种或4种组蛋白与DNA结合,形成核小体;而在原核生物则无。
⑤真核细胞在细胞周期中有专门的DNA复制期(S期);原核细胞则没有,其DNA复制常是连续进行的。
⑥真核细胞的有丝分裂是原核细胞所没有的。
⑦真核细胞有发达的微管系统,其鞭毛(纤毛)、中心粒、纺锤体等都与微管有关,原核生物则否。
⑧真核细胞有由肌动、肌球蛋白等构成的微纤维系统,后者与胞质环流、吞噬作用等密切相关;而原核生物却没有这种系统,因而也没有胞质环流和吞噬作用。
⑨真核细胞的核糖体为80S型,原核生物的为70S型,两者在化学组成和形态结构上都有明显的区别。
⑩真核细胞含有的线粒体,为双层被膜所包裹,有自己特有的基因组、核
酸合成系统与蛋白质合成系统,其内膜上有与氧化磷酸化相关的电子传递链。
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姓名 班 年级 专业 学院。