基因工程 是指按照人们的愿望,进行严格的 设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋 予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人 们需要的新的生物类型和生物产品.(又叫DNA 重组技术)
考点一、基因工程诞生的理论基础:
(1)DNA是生物的主要遗传物质。 (2)基因是控制生物性状的基本单位。 (3)遗传信息的传递遵循中心法则。 (4)生物界共用一套遗传密码子多DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受 体菌
直接分离: 鸟枪法 人工合成 反转录法
2)噬菌体或某些动植物病毒
三、基因的载体 —“分子运输车”
3、载体的种类:
质粒是一般专指细菌、酵母菌和放线菌等生 物中核区以外的环状DNA分子。
质粒是基因工程最常用的运载体。
最常用的质粒是 大肠杆菌的质粒, 其中常含有抗药基 因,如四环素的标 记基因。质粒的存 在与否对宿主细胞 生存没有决定性作 用,但复制只能在 宿主细胞内成。 • 大肠杆菌的质粒:
※ 利用PCR技术扩增目的基因
二、基因表达载体的构建 (核心)
1、基因表达载体的作用 a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并 遗传给子代
b、同时使目的基因能表达和发挥作用
二、基因表达载体的构建
2、基因表达载体的组成
目的基因 启动子 终止子
标记基因
二、基因表达载体的构建
化学合成
目的基因
比较上述三种目的基因提取方法的优缺点
优点 鸟枪法
操作简便 成本低
缺点
工作量大,盲目,分 离出来的有时并非一 个基因 操作过程麻烦,mRNA 很不稳定,要求的技 术条件较高 仅限于合成核苷酸 对较少化学合成 专一性最强 法
※ 利用PCR技术扩增目的基因
前提:一段已知目的基因的核 苷酸序列(合成引物) 原理:DNA的复制 条件:模板DNA、引物、四种脱 氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶等。 过程:变性→复性(退火)→延伸 结果:目的基因的数量呈指数增加(2n)