大豆多肽的分离纯化技术

超滤在大豆多肽分离纯化中应用邓成萍;薛文通;孙晓琳;全明海【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2006(027)002【摘要】本试验应用超滤技术对大豆多肽进行分离,研究了超滤系统几个主要参数对膜通量的影响.研究结果表明:截留分子量30000Da的超滤膜应在压力0.12MPa、温度40℃、pH值7.0下运行40min为一个周期,膜通量为19L/m2·h左右;截留分子量10000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度＜45℃、自然pH值下运行60min为一个周期,膜通量为25L/m2·h左右;截留分子量5000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度＜45℃、自然pH值下运行80min为一个周期,膜通量为22L/m2·h左右;经分离得到分子量＞30000Da的大豆多肽约占13.21%,分子量10000～30000Da的大豆多肽约占4.05%,分子量5000～10000Da的大豆多肽约占6.41%,分子量＜5000Da的大豆多肽约占76.11%.【总页数】4页(P192-195)【作者】邓成萍;薛文通;孙晓琳;全明海【作者单位】中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083;保定味群食品工业有限公司,河北,保定,071000;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083【正文语种】中文【中图分类】TS214.2【相关文献】1.超滤技术在蛋白质分离纯化中应用 [J], 李国军;姜媛媛;王莹;李郑武;2.超滤-纳滤技术在金毛狗脊黄酮分离纯化中的应用 [J], 韩伟;蒋一帅;魏雨恬3.超滤技术在蛋白质分离纯化中应用效果 [J], 葛亚娜4.超滤技术在蛋白质分离纯化中的应用研究 [J], 于群5.超滤技术在蛋白质分离纯化中的应用研究 [J], 于群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一种酶解大豆肽的制备方法大豆肽是由大豆蛋白质经过酶解而得到的一种多肽混合物。

由于其具有丰富的氨基酸组成和生物活性，被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。

酶解大豆肽的制备方法是通过加入适量的酶来降解大豆蛋白质，从而得到所需的大豆肽。

一种常用的酶解大豆肽的制备方法是采用酸性酶解法。

具体步骤如下：1. 原料准备：选择优质的大豆作为原料，经过清洗、浸泡和磨浆等处理，得到大豆浆。

2. 酶的选择：根据需要得到的大豆肽特性，选择适合的酶进行酶解。

常用的酶包括胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。

酶的选择要考虑其活性、稳定性和成本等因素。

3. 酶解反应：将大豆浆加热至适宜的温度，然后加入适量的酶。

酶解反应的时间和温度要根据酶的特性和大豆肽的需求来确定。

一般来说，酶解反应时间较长，温度较高，得到的大豆肽含量较高。

4. 反应停止：通过加热、酸化或酶的不活化等方法停止酶解反应，以防止过度酶解或酶的不受控制活性。

5. 分离和纯化：通过离心、过滤或超滤等方法将酶解液中的大豆肽分离出来。

根据需要，可以进一步进行纯化和浓缩处理。

6. 干燥和粉碎：将分离出的大豆肽进行干燥处理，以去除水分。

然后进行粉碎，得到所需的酶解大豆肽。

酶解大豆肽的制备方法中，酶的选择和酶解条件的控制是非常关键的。

不同的酶具有不同的底物特异性和酶解特性，因此需要根据需求选择合适的酶。

同时，酶解反应的时间、温度和pH值等条件也会对酶解效果产生影响。

合理控制这些条件可以提高大豆肽的产率和质量。

在酶解大豆肽的制备过程中，还可以通过添加助剂或利用超声波、微波等辅助技术来提高酶解效果。

这些方法可以加速酶解反应、提高酶的活性和提高大豆肽的产率。

酶解大豆肽的制备方法是一种有效的手段，可以通过酶的作用来降解大豆蛋白质，得到所需的大豆肽。

在制备过程中，酶的选择和酶解条件的控制十分重要，可以通过合理调控来提高大豆肽的产率和质量。

此外，辅助技术的应用也可以进一步提高酶解效果。

酶解大豆肽的制备方法具有广泛的应用前景，可以满足人们对高质量大豆肽的需求。

多肽的分离纯化方法一、引言多肽是由氨基酸组成的生物大分子，其具有广泛的生物学功能和应用场景。

多肽的研究需要对其进行分离纯化，以获取高纯度的多肽样品。

本文将介绍多肽的分离纯化方法。

二、多肽的提取1. 细胞裂解法：将细胞裂解后，通过离心等方法去除细胞碎片和脂质等杂质，得到含有目标多肽的上清液。

2. 酸性水解法：将含有目标多肽的蛋白质样品加入酸性溶液中，在适当温度下进行水解反应，得到含有目标多肽的水解液。

三、分离方法1. 层析法：利用不同化学性质或大小形状等差异对混合物进行分离。

包括凝胶层析、离子交换层析、亲和层析等。

2. 电泳法：利用电场作用下不同电荷或大小形状等差异对混合物进行分离。

包括SDS-PAGE、IEF等。

3. 薄层色谱法：将混合物均匀地涂在薄层色谱板上，通过不同的溶剂系统进行分离。

4. 超滤法：利用超滤膜对混合物进行筛选，根据分子量和形状等差异进行分离。

四、纯化方法1. 透析法：将混合物放入透析袋中，在适当条件下通过半透膜进行渗透扩散，去除杂质，得到目标多肽。

2. 再结晶法：通过溶液浓缩、结晶等步骤得到高纯度的多肽样品。

3. 活性剂法：利用表面活性剂或有机溶剂等对混合物进行解聚和去除杂质。

五、检测方法1. 比色法：利用多肽与某些化学试剂发生反应产生显色物质来检测多肽样品。

2. 质谱法：通过质谱仪对多肽样品进行检测，得到其分子量和组成信息。

3. 免疫学方法：利用特异性抗体对多肽样品进行检测。

六、结论多肽的分离纯化方法有很多种，选择合适的方法需要考虑到目标多肽的特性以及实验室条件等因素。

在分离纯化过程中，需要注意对样品的保护和操作的规范性，以获取高质量的多肽样品。

大豆肽的生产工艺流程英文回答：The production process of soy peptide involves several steps. First, soybeans are cleaned and sorted to remove impurities. Then, the soybeans are soaked in water to soften them. After soaking, the soybeans are cooked under high pressure to break down the proteins into smaller peptides. This process is called hydrolysis.Once the hydrolysis is complete, the mixture isfiltered to remove any solid particles. The resultingliquid is then concentrated through evaporation to increase the peptide content. This concentrated liquid is further purified using techniques such as ultrafiltration or ion exchange chromatography to remove any remaining impurities.After purification, the soy peptide solution is spray dried to convert it into a powder form. This powder can be used directly as a dietary supplement or as an ingredientin various food and beverage products. The final product is typically packaged and labeled for distribution.It is important to note that the specific production process may vary depending on the manufacturer and the desired quality of the soy peptide. Some manufacturers may also add additional steps, such as enzymatic hydrolysis or fermentation, to enhance the peptide content or improve the taste and texture of the final product.中文回答：大豆肽的生产工艺流程包括几个步骤。

纳滤膜+超滤膜为大豆蛋白肽纯化带来一套“组合拳”大豆蛋白肽是从豆粕或大豆分离蛋白中提取，经蛋白酶水解、纯化而成的一种天然营养素。

其分子量小于1000，由多种小分子多肽组成。

大豆蛋白肽的氨基酸与大豆蛋白完全相同。

它含有所有必需氨基酸。

成分完整，配比合理，必需氨基酸平衡丰富。

大量研究表明，大豆蛋白肽是当今食品工业中一种优质的功能性蛋白质添加剂。

超滤是利用膜的选择性渗透性对膜的两侧施加驱动力，通过溶液中各组分通过膜的不同迁移速率实现非均相体系的分离。

采用不同分子量的超滤膜分离大豆肽溶液。

有研究表明，在一定的操作条件下，分子量>30000da 的大豆肽占13.21%，分子量10000-30000da的大豆肽占4.05%，分子量5000-10000da的大豆肽占6.41%，分子量<5000da的大豆肽占76.11%，证明超滤可以有效分离大豆肽。

纳滤膜的分子量为100-1000da，主要用于浓缩和纯化过程。

纳滤膜对二价离子、功能性糖、小分子色素、多肽、头孢菌素等物质的截留率在98%以上，对一些单价离子、小分子酸碱、醇等具有30-50%的通透性。

常用于液体物质的分离、纯化、浓缩，如溶质的分类、溶液中低分子物质的洗脱、离子组分的调整、溶液体系的浓缩脱盐等过程。

大豆多肽对热敏感，加热易破碎。

传统的纯化方法难以除去低分子量的盐，影响了产品的纯度。

纳滤浓缩不仅可以降低能耗，而且可以去除有机污染物和盐类，从而提高产品质量。

纳滤膜+超滤膜“组合拳”工艺通常在室温下进行，适用于热敏物质的分离和浓缩。

分离效率高，能有效去除杂质，减少有效成分的损失。

工艺简单，可分阶段进行，易于连续自动操作，缩短生产周期。

可以有效去除细菌和热原。

有效回收溶剂，节约资源，减少环境污染。

双酶复合法制备大豆多肽工艺的研究大豆多肽是从大豆蛋白酶水解产物中提取得到的一种寡肽，具有多种生物活性，如抗氧化、降血脂、抗菌、免疫调节等作用。

因此，大豆多肽被广泛应用于保健品、功能性食品等领域。

然而，目前大豆多肽的工艺制备存在着一些问题，例如产量低、纯度低等。

因此，本文采用双酶复合法来提高大豆多肽的制备效率和纯度。

双酶复合法是指在蛋白酶催化水解大豆蛋白时，加入一种辅酶来促进大豆蛋白的水解反应。

具体来说，本研究选择了三种常用的辅酶：N-碘乙酰基组胺（IEA）、N-溴代乙酰基组胺（BEA）和N-氯代乙酰基组胺（CEA）。

同时，本研究采用了两种蛋白酶：胃蛋白酶和胰蛋白酶。

实验分为两步：第一步是大豆蛋白水解，第二步是多肽的分离和纯化。

第一步，大豆蛋白水解。

首先，将大豆蛋白粉加入1M NaOH中，使其pH值大于12。

然后，将辅酶IEA、BEA和CEA加入水解液中，最终浓度为10-5 mol/L。

加入胃蛋白酶和胰蛋白酶，最终浓度为0.1%，并在37℃下恒温反应12小时。

第二步，多肽的分离和纯化。

首先，将反应液经过10000rpm离心15分钟，将上清液收集。

然后，将上清液经过逐步浓缩和逆渗透膜分离技术，最终获得多肽纯化物。

通过分析实验结果，可以得出如下结论：双酶复合法能够提高大豆蛋白的水解效率和多肽的产量。

同时，随着辅酶浓度的增加，多肽产量也会增加。

此外，胰蛋白酶在水解反应中起到了更为重要的作用，能够显著提高多肽的产量和纯度。

最后，通过分离和纯化技术，可以获得高纯度的多肽产品。

综上所述，双酶复合法是一种有效的方法来制备大豆多肽。

这种方法能够提高多肽产量和纯度，对大豆多肽的生产具有重要的意义。

抗氧化大豆多肽制备和纯化的研究的开题报告题目：抗氧化大豆多肽制备和纯化的研究一、选题背景和意义近年来，随着人们生活水平的提高，日常饮食和生活习惯的变化，人们对于健康的关注和需求也日益增加。

而在维护健康方面，抗氧化剂的作用越来越受到重视。

抗氧化剂能够清除自由基，延缓衰老、预防疾病，因此引起了人们极大的兴趣。

目前市面上的抗氧化剂种类繁多，如维生素C、E、多酚、类黄酮等。

而大豆多肽也被发现具有较强的抗氧化活性，且其来源广泛，丰富的氨基酸结构也为其赋予了更多的生物活性。

大豆多肽的制备与纯化一直是研究热点，常用的方法包括酶解法、酸解法、碱解法和超声波法等。

其中，酶解法成为大豆多肽制备与纯化的主要方法，其产品质量较高，操作简便，且能够得到具有一定生物活性的肽类。

因此，本文以酶解法为主要研究方向，旨在探究大豆多肽的制备和纯化方法，为其在生命科学、医学领域中的应用提供技术支持。

二、研究内容和方法1. 研究大豆多肽的制备方法，根据酶的种类、用量、pH值、温度等条件，探究制备具有较高抗氧化活性的大豆多肽。

2. 研究大豆多肽的纯化方法，通过分子筛吸附、反渗透、凝胶过滤等方法，对酶解后的产物进行纯化，并检测其抗氧化活性和生物活性。

3. 通过FT-IR、HPLC等技术手段，分析大豆多肽的结构和组成成分，探究其生物活性和抗氧化机制。

4. 应用研究成果，探究大豆多肽在生物制品、保健品、美容品等领域的应用前景。

三、预期成果1. 建立合适的大豆多肽制备和纯化技术。

2. 获得抗氧化活性较高的大豆多肽产物，并对其结构和组成成分进行分析。

3. 研究大豆多肽在生物制品、保健品、美容品等领域的应用前景。

四、研究难点和解决方案1. 大豆多肽制备的酶种和用量选择问题。

采用多种酶类筛选，通过比较产物的抗氧化活性和其他生物活性确定最适合的酶种和用量。

2. 大豆多肽纯化过程中，如何在保证产品质量的前提下，提高产率并控制成本。

采用多种纯化方法的组合，根据酶解产物的特性选择合适的分离技术，通过合理排列各分离步骤，达到最佳纯化效果的同时，控制成本和提高产率。

食品中生物活性多肽的提取与分离随着人们对健康饮食的重视程度不断提高，对食品中生物活性物质的关注也日益增加。

生物活性多肽作为一类具有生物功能的小分子肽链，在食品中广泛存在，并且被认为对人体健康具有诸多益处。

因此，提取和分离食品中的生物活性多肽成为了一个备受关注的研究领域。

提取食品中的生物活性多肽是一个复杂而繁琐的过程。

首先，需要选择合适的食品原料。

一般来说，动物源性食品（如肉、蛋类等）和植物源性食品（如豆类、谷类等）中含有丰富的生物活性多肽。

然后，需要选择合适的提取方法。

目前常用的提取方法包括水浸提、酶解提、酸解提等。

水浸提是一种简单而常用的方法，它通过将食品原料浸泡在适量的水中，使多肽从食品基质中溶解出来。

酶解提是利用特定酶类对食品原料进行酶解，从而使多肽释放出来。

酸解提是通过将食品原料与酸性溶液进行反应，使多肽脱离食品基质。

不同的提取方法具有各自的优势和适用范围，研究人员应根据实际需求选择合适的方法。

在提取食品中的生物活性多肽的基础上，需要进一步进行分离和纯化。

分离和纯化生物活性多肽的目的是得到单一的活性肽或纯化活性肽的混合物，以便进一步研究其生物功能及应用。

常用的分离和纯化方法包括透析、色谱层析、电泳等。

透析是一种根据溶液中溶质的性质和大小差异而进行的分离技术。

色谱层析是一种将混合物按照其在固定相中吸附和解吸的速度差异进行分离的方法，常用的色谱层析方法包括凝胶过滤层析、高效液相色谱等。

电泳是根据生物大分子在电场中的移动性差异进行分离的方法，常用的电泳方法包括凝胶电泳和毛细管电泳等。

提取和分离食品中的生物活性多肽不仅有助于研究其生物功能，还有助于发现新的生物活性多肽。

在提取和分离的过程中，研究人员不仅应重视多肽的结构和功能，还应关注其生物利用度和稳定性。

多肽的生物利用度和稳定性对于其在食品、药品等领域的应用具有重要意义。

因此，研究人员不仅需要关注提取和分离方法的选择，还需要重视多肽的生物性质及其与其他成分的相互作用。

大豆多肽的加工工艺一、工艺流程脱脂大豆粕→浸泡→磨浆分离→胶体磨→精滤→超滤→预处理→酶水解→分离→脱苦、脱色→脱盐→杀菌→浓缩→干燥二、工艺要点说明超渺茫地生产大豆分离蛋白，用于生产大豆分离蛋白的原料必须是低变性的脱脂大豆粕，要经过弱大碱浸泡，磨浆分离、细磨、精滤和超滤得到一定浓度的大豆分离蛋白溶液，与传统的碱提酸沉法相比，该法获得的大豆分离蛋白溶液，可溶性糖分少，离子含量少，灰分少，是目前较为先进的生产大豆分离蛋白的方法。

1、预处理因为大豆球蛋白分子具有相当紧密的结构，这种极其致密的结构对酶水解具有很强的抵抗力，所以在酶解大豆蛋白时必须适当进行预处理，使其中的蛋白质复杂结构被打开而形成一条直链，那些原来在分子内部包藏而不易与酶发生作用的部位，由于分子结构的松散而暴露出来，从而使蛋白水解酶的作用点大大增加，加快了蛋白质的酶解，试验证明：在90℃下加热10min，既可防止大豆蛋白溶液粘度升高又可大大提高其水解度。

2、蛋白酶水解为了确定最佳的酶解反应条件，我们固定反应时的pH值为7.5，以酶添加量、反应温度、反应时间及底物浓度为试验因素，各取三水平，以水解度DH为指标，选用L9（34）正交表安排试验。

实验证明：酶用量为E/S=4%，水解反应温度为45℃，作用时间为12h和底物浓度为4%。

3、分离该工序是通过调节蛋白酶解液的pH值为4.3，使未水解的蛋白质沉淀而去除，而分离得到纯净的酸性水解物溶液，试验表明在最佳反应条件下，水解率可高达95%。

4、脱苦、脱色经分离后的大豆蛋白酶解物是低分子肽类和游离氨基酸混合物，并且其中的带芳香侧链或长链烷基侧链的疏水性氨基酸的肽类是苦味肽，为了改善大豆多肽的口感和滋气味，必须除去苦味肽和游离氨基酸。

本工艺采用活性碳吸附法来进行脱苦、脱色，最佳反应条件是碳液=1：10，T=40℃，Ph=3.0经处理后，口味得到明显改善，色泽透明澄清，达到令人满意的效果。

5、脱盐由于在酶解过程中为了保证反应过程中的pH值保持不变，需要不断加入NaOH溶液进行滴定以及在分离工序中调节PH值到PH4.3以除去未水解的蛋白质而加入盐酸溶液时产生一定量的盐成分（主要是NaCl）所以水解液具有一定的咸味，为此需要进行脱盐处理，将一定体积的大豆蛋白酶解液以10倍柱体积/h的流速分别流经H+型阳离子交换树脂和OH-型阴离子交换树脂来脱除Na+和Cl-，大大降低了盐分含量，脱盐率在85%以上。

大豆肽制备工艺
1. 大豆蛋白的制备
将黄豆加水浸泡，清洗后放入压榨机进行榨汁，榨出的汁液加热至70度左右进行沉淀。

沉淀后将上层的杂质去除，留下沉淀物即为大豆蛋白。

2. 大豆蛋白水解
将大豆蛋白加入水中，放入反应釜中，在恒温下加入适量的酸或碱，搅拌后持续反应一定时间，使蛋白质水解变成小分子的肽和氨基酸。

3. 经过滤除杂
水解后的大豆肽液经过过滤除杂，去除残留的杂质和沉淀，得到纯粹的大豆肽液。

4. 浓缩和干燥
将大豆肽液加热至一定温度，浓缩至一定浓度后进行喷雾干燥，得到颗粒状或粉状的大豆肽制品。

大豆多肽提取工艺流程：大豆—低温脱溶豆粕—水提取—酸沉淀—洗脱—碱中和—酶水解—终止—超滤膜分离—活性炭处理—过滤一离子交换一真空浓缩一高压均质一喷雾干燥一过筛一成品136.一611.二9881．酸沉淀与洗脱：目的除去大豆蛋白中可溶性纤维、糖分、脂肪、矿物元素等。

此工艺对大豆多肽纯度至关重要。

在操作过程中，使用1mol／l HCI溶液精确控制pH值为4.5沉淀大豆蛋白质，采用无离子水对大豆蛋白质进行洗脱，收集大豆蛋白采用旋转式离心，转速控制在3000r·min，时问8min。

2．酶水解：采用双酶水，AS1389中性蛋白酶、木瓜蛋白酶用量分别为：1500U·g、1000U·g酶水解条件pH为7．2、温度过45℃、底物浓度8％，时间3h。

终止水解采用85℃、10min。

3．超滤膜分离：控制大豆多肽分子质量2000左右，对水解不到位大豆蛋白质进行载留，同时进一步纯化大豆多肽。

4．离子交换：采用阴、阳离子树脂对大豆蛋白酶解物进行处理。

目的是去除大豆多肽中的Na 、C1等离子。

5．喷雾干燥：经真空浓缩、高压均质后，大豆多肽溶液固形物达到38％一40％，即可进行喷雾干燥。

喷雾干燥条件：进口温度为125—13O℃，塔内温度为75—78℃，排风口温度为80一85℃。

大豆多肽离心喷雾干燥机，大豆多肽专用烘干设备，大豆多肽干燥机产品介绍：高速离心喷雾干燥机是一种新型高效干燥工艺装备，它可以使溶液、乳化液、悬浮液和糊状液的物料，经过喷雾干燥成为干粉状，细、中颗粒的制品。

它速度快、效率高、工序少、节省人力。

特别对于热敏物料，可以保持物料的色香味。

干燥产品质量优良、流动性、溶解性好、纯度高、环境卫生。

有利于提高产量并获得良限的技术、经济效益，在化工、轻工、建材、食品、林产化工、药物、生化等行业有广阔的前途。

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