基于DNA甲基化的宫颈癌基因治疗进展

实用妇科内分泌杂志Journal Of Practical Gynecologic Endocrinology 2018年2月C第5卷/第6期Feb. C. 2018 V ol.5, No.64・综述・高危型HPV DNA整合致宫颈癌的机制及检测进展梁 银，张守桃（右江民族医学院，广西百色 533000）【摘要】高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染属于宫颈癌的一个致病因素，临床认为病毒DNA的整合至宿主基因组这种是引发宫颈癌的关键性原因。

尤其高危型的HPV DNA整合会致使E1和E2区中断或是大部分的缺失，E6、E7致癌的基因则会出现过表达，激活宿主致癌的基因。

本文主要分析了HPV的整合位点，深入研究高危型HPV DNA整合致宫颈癌的机制，提出检测方法，现进行以下综述。

【关键词】高危；HPV DNA；宫颈癌；检测【中图分类号】R711.74 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8803.2018.6.4.02The mechanism and detection progress of high-risk HPV DNAintegrated cervical cancerLIANG Yin,ZHANG Shou-tao(Youjiang Medical College For Nationalities, Guangxi Baise 533000,China)宫颈癌指的是发生在宫颈部与子宫颈阴道的一种恶性肿瘤，属常见妇科肿瘤，发生率仅次于乳腺癌。

在近30年，宫颈癌发病率每年上升0.6%，全世界每年有20万人因宫颈癌死亡，国内每年将近5万人因为宫颈癌而死。

根据病理学描述性的诊断方法把宫颈癌前病变划分成高度鳞状上皮内病变（HSIL）与宫颈癌前病变分为低度鳞状上皮内病变（LSIL），也就是浸润性宫颈癌（ICC）、宫颈上皮内瘤变（CIN）与宫颈原位癌等。

1 HPV的整合位点通常病毒整合的位置经常会随机产生，倾向E1、E2、E4、E5区，上述区域区域被侧翼宿主细胞中DNA所中断。

KAP1在恶性肿瘤发生、发展及治疗中作用的研究进展刘秀文1，2，曹锟1，刘新光11 广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞523808；2 广东医科大学基础医学院摘要：恶性肿瘤是当前威胁人类健康的重要疾病，其整体发病率和死亡率均较高，并且呈现逐年上升趋势。

深入研究恶性肿瘤的发病机制对其早期诊断和治疗以及预后改善至关重要。

KRAB相关蛋白1（KAP1）是一个多功能蛋白质，能够参与基因转录抑制、DNA损伤修复、免疫调节、胚胎发育以及病毒感染等。

越来越多研究发现，KAP1在多种恶性肿瘤细胞中高表达，并通过调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学行为，参与恶性肿瘤的发生、发展，同时在肿瘤治疗耐药和免疫治疗中发挥一定作用。

但目前KAP1促进恶性肿瘤发生、发展的机制尚不完全清楚，仍需进一步研究。

关键词：恶性肿瘤；KRAB相关蛋白1；恶性生物学行为；耐药性；免疫治疗doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.25.026中图分类号：R730 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）25-0099-04恶性肿瘤是当前威胁人类健康的重要疾病，其整体发病率和死亡率均较高，并且呈现逐年上升趋势。

早发现、早诊断、早治疗能够有效延长恶性肿瘤患者生存时间，改善生存质量。

因此，寻找有效的生物标志物成为恶性肿瘤早期诊断和靶向治疗的关键。

KRAB相关蛋白1（KAP1）又称三重基序蛋白28、转录中介因子1β，最早于1996年由费雷德曼团队采用亲和层析法分离得到［1］。

KAP1属于TRIM蛋白家族的重要成员，能够参与基因转录抑制、DNA 损伤修复、免疫调节、胚胎发育以及病毒感染等［2］。

越来越多研究发现，KAP1在多种恶性肿瘤细胞中高表达，并通过调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学行为，参与恶性肿瘤的发生、发展。

本文结合文献就KAP1在恶性肿瘤发生、发展及治疗中作用的研究进展作一综述。

1 KAP1的分子结构及其生物学功能人类KAP1的编码基因定位于染色体19q13.43，全长6 254个碱基，包含17个外显子。

SOX14基因甲基化水平在宫颈癌诊断中的应用价值曹会玲;赵敬;范永娟;吴尚为;王蓉【摘要】目的探讨SOX14基因甲基化定量检测对宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌诊断的临床应用价值.方法采用荧光定量甲基化PCR(QMSP)检测101例宫颈液基细胞样本(包括正常细胞27例,CIN2期24例,CIN3期33例,宫颈癌17例)中SOX14基因的甲基化水平,通过Kruskal-Wallis H检验分析其在正常、CIN2期、CIN3期及宫颈癌分组中的甲基化水平差异,并采用ROC曲线分析SOX14甲基化对宫颈癌的临床诊断效能.结果 SOX14基因甲基化水平随宫颈病变程度的升高而逐渐升高,各期间差异有统计学意义(H=52.55,P<0.01).当cut off值为87.21时,SOX14基因甲基化水平诊断宫颈癌的敏感性和特异性分别为94.12％和96.30％.结论 SOX14基因甲基化水平与宫颈病变程度具有一定相关性,宫颈脱落细胞样本SOX14基因甲基化水平可能作为宫颈癌诊断的潜在指标.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2018(036)007【总页数】3页(P510-512)【关键词】甲基化;SOX14;宫颈癌【作者】曹会玲;赵敬;范永娟;吴尚为;王蓉【作者单位】天津医科大学医学检验学院,天津 300203;天津医科大学总医院妇产科,天津 300052;天津市第一中心医院妇产科,天津 300192;天津医科大学医学检验学院,天津 300203;天津医科大学医学检验学院,天津 300203【正文语种】中文【中图分类】R446;R730.2宫颈癌常用的筛查方法包括薄层液基细胞学和人乳头瘤病毒(HPV)检测，但薄层液基细胞学筛查法的灵敏性较低，HPV用于宫颈癌筛查的特异性较差[1-2]。

近年来，鉴定并筛选肿瘤相关的甲基化标志物是肿瘤表观遗传学领域的研究热点。

2013年，Senchenko等[3]利用Notl微序列法从人类3号染色体筛选出7个与宫颈癌变相关的甲基化标志物，其中包括性别决定区域Y14(sex determining region Y-box 14，SOX14)基因。

高危型HPV感染、FHIT甲基化与宫颈癌研究进展徐又先;濮德敏【期刊名称】《湖北科技学院学报（医学版）》【年(卷),期】2015(029)006【总页数】2页(P547-548)【关键词】宫颈癌;甲基化;高危型人乳头瘤病毒;脆性组氨酸三联体【作者】徐又先;濮德敏【作者单位】柳州市人民医院妇产科,广西柳州545001;华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R737.33宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤，分子流行病学及临床研究证明：宫颈癌是高危型HPV持续感染的结果，引起世界范围内宫颈癌的大约70%型别是HPV16/HPV18两个致癌类型。

但并不是所有感染HPV的女性都一定发展为宫颈癌，且也有少部分宫颈癌患者HPV检测为阴性，因而推测，宫颈癌的发生发展还可能有其它的因素参与或存在一定的遗传易感性。

表观遗传学的研究发现，基因的甲基化，特别是抑制基因甲基化在宫颈癌的发生发展中具有重要作用。

FHIT 基因是近年来发现的抑癌基因，研究发现FHIT基因的染色体脆性位点与某些肿瘤的发生发展有关，特别是在调节细胞周期和细胞凋亡过程中发挥重要的作用，而且可能与宫颈癌的发病相关。

现将HPV、FHIT甲基化与宫颈癌关系进行综述。

HPV为环状双链DNA病毒，直径55nm，分子量约5 MD，其基因组长度大约为7 200～8 000bp。

HPV主要感染人的上皮细胞，持续的HPV感染会引发感染部位发生病变，到目前为止，已鉴定出的HPV亚型约有200余种，其中约40多种型别可引起生殖道感染，约有20多种型别与宫颈上皮组织的恶性病变有关。

依据HPV型别可分为：低危型，如HPV6、11、42、43、44等，常引起外生殖器湿疣等良性病变；高危型，如HPV16、18、31、33、39、45、52、58等，与宫颈癌及子宫颈上皮瘤变相关[5,6]，其中，HPV16和18型感染率最高。

持续性高危型HPV感染是宫颈癌发生的必要条件。

40
遗 传 HEREDITAS (Beij ing)2005 27 卷
期发现有癌变倾向的细胞 , 还可作为分子指标 , 预测 对化疗的反应和判定预后等[ 4] 。 p 16 基因的研究已 成为当前肿瘤分子生物学和分子遗传学研究的热点 之一 。
本研究表明 , p 16 的失活存在于多种人类恶性 肿瘤 , 然而探讨宫颈癌发生过程中 p 16 基因异常表 达及其 5′CpG岛的甲基化状态的研究较少 , 特别是 综合分析 p 16 基因异常表达与病理类型 、临床分期 关系的研究更少见 , 对这些变化过程及相互作用的 了解仍不完善 。
取 2 μg 模板 DNA 蒸馏水定容至 50 μL , 加入新 配置 2 mol/ L 的 NaOH 液 5 .5 μL(使终浓度为 0 .3 mol/ L), 置 于 37 ℃孵 育 20 min 。 加 入 30 μL 10 mmol/ L 氢醌(Sigma), 见溶液呈黄色 。 加入 520 μL 新配制的 3 mol/ L 亚硫酸氢钠(Sigma S-8890)。 充 分混匀 后 , 离心 , 上盖矿物油 。 50 ℃孵育 16 h 。 次 日 , 经修饰的 DNA 用 Wizard DNA Clean-Up System (Promega A7280)纯化 。 纯化后的 DNA 于 4 ℃或 20 ℃保 存 。 在每离心 管中加入 5 .5 μL 的 3 mol/ L NaOH, 室温孵育 15 min 。加入 10 mol/ L 醋酸氨 33 μL 中和后 , 加入 3 体积的乙醇沉淀 DNA(-20 ℃过 夜 , 摇匀 30 min), 用 70 %乙醇洗涤 , 干燥后 , 用 20
Abst ract :To detect hypermethylation and aberrant expression of the p16 gene in cervical carcinoma (CC), methylation-specific PCR(MSP)was used to determine the methylation status of 5′CpG islands of the p16 gene, loss or decrease of p 16 expression was analyzed by immunohistochemistry (IHC), and homozygous deletion of exon 1 (E1)and/ or exon 2 (E2)was determined by PCR in 60 cases of CC at different pathological grades and clinical stages.The results showed absence of methylation and presence of normal expression of the p 16 gene in the control and adjacent tissues of CC.Hypermethylation, loss or decrease of expression and deletion of the p 16 gene were detected in 21.67 % (13/ 60), 51.67 %(31/ 60)and 15 .00%(9/ 60)of the tumor tissues, respectively.The rate of p16 expression markedly reduced with the increase of clinical stages.Our data suggested that inactivation of the p 16 gene was a frequent event and positively correlated with pathological grades in CC, and that methylation of the p 16 gene was an important event in carcinogenesis of CC. Key words :cervical carcinoma ;p16 gene expression ;methylation

Ｍｅｔｈｏｄｓ
Ｈｕｍａｎ ｃｅｒｖｉｃａｌ
ｃａｎｃｅｒ
ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ Ｈｅｌａ ｗａｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ
ａｇｅｎｔ ｆｏｒ ５ ｗａｓ
５－Ａｚａ－ＣｄＲ（５，１ ０ ａｎｄ ２０Ｉｒｔｍｏｌ／Ｌ），ａ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ
ｄａｙｓ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＩＣ一１
中南大学 硕士学位论文 HIC-1基因在宫颈癌Hela细胞中的表达及其甲基化调控 姓名：刘雅琼 申请学位级别：硕士 专业：妇产科学 指导教师：陶光实 20080501
硕十学位论文
中文摘要
中文摘要
目的：检测甲基化抑制剂处理前后宫颈癌Ｈｅｌａ细胞增殖、凋亡 改变，及ＨＩＣ．１、ＨＰＶ表达的变化，初步探讨去甲基化对宫颈癌中 ＨＩＣ．１基因及ＨＰＶ表达的影响。 方法：分别用不同浓度５．氮杂脱氧胞苷（５－Ａｚａ－ＣｄＲ）干预细胞 ５ｄ。提取细胞的ＲＮＡ，采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ．ＰＣＲ）方法检测 ＨＩＣ．１ｍＲＮＡ、Ｐ５３ｍＲＮＡ、卸）Ｖ１８Ｅ６ｍＲＮＡ在干预后表达变化情况； 用直接记数法和四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）显色法检测细胞生长曲线与 细胞增殖实验。 结果： （１）凝胶图像分析仪分析ＲＴ－ＰＣＲ产物：实验组５－Ａｚａ－ＣｄＲ（终 浓度分别为５９ｍｏｌ／Ｌ、１０９ｍｏｌ／Ｌ、２０９ｍｏｌ／Ｌ）作用Ｈｅｌａ细胞５ｄ前后，
ｍｅｔｈａｂｅｎｚｔｈｉａｚｕｒｏｎ（ＭＴＴ）ａｓｓａｙ．
Ｔｈｅ ｄａｔａ
Ｒｅｓｕｌｔｓ
ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｗｉｔｈ ＳＰＳＳ １ １．５ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｓｏｆｔｗａｒｅ． ｗａｓ
Ａｆｔｅｒ ５．Ａｚａ－ＣｄＲ
ａｄｄｅｄ
ｉｎｔｏ
ｏｕｔ
Ｈቤተ መጻሕፍቲ ባይዱＬａ

CHFR、PAxl、SFRP4、TSLCI、
DEN、FHIT的甲基化水平，其中 PAXl是7个被研究基因中DNA甲基化
程度最高的。
程媛，魏丽惠，王建六.PAxl基因及其甲基化在宫颈癌作用的分 子机制研究进展.[J]实用妇产科杂志2016年11月第32卷第11期
PART 04
PAX1 基因甲基化定量检 测在宫颈癌癌前病变诊断 中的应用价值
由qMSP（定量甲基化特异性聚合酶链 反应）检测到的甲基化水平Δ Cp作为控
制，以验证该方法的准确性，由图可
知，金纳米粒子标记的方法结果与使用 由qMSP检测到的甲基化水平的结果相似
结论：由qMSP检测到的甲基化水平 Δ Cp作为控制，以验证该方法的准确
性，由图可知，金纳米粒子标记的方法
结果与使用由qMSP检测到的甲基化水平 的结果相似
HPV DNA检测。
宫颈癌组织中的平均甲基化水平
Huang等研究分析结果
Huang等在73例宫颈
脱落细胞中，有14例宫
颈癌中检测出PAxl甲基 化水平为56.7，明显高 于CINⅢ的6.5和 cINⅡ、I、正常的平均 值1.0(P<0.0001)
Huang等研究分析结果
结论：
研究表明PAXl甲基化检测与
Background:
DNA methylation can induce carcinogenesis by silencing key tumor suppressor genes. Analysis of aberrant methylation of tumor suppressor genes can be used as a prognostic and predictive biomarker for cancer.In this study, we propose a colorimetric method for the detection of DNA methylation of the paired box gene 1(PAX1) gene in cervical scrapings obtained from 42 patients who underwent cervical colposcopic biopsy. DNA甲基化可通过沉默关键抑癌基因诱导肿瘤发生。肿瘤 抑制基因的异常甲基化分析可作为预测和预测癌症的生物标 记物。在这项研究中，我们提出了对配对盒基因1 DNA甲基 化检测的比色法（PAX1）在42例宫颈刮片宫颈阴道镜下活检 获得的基因。

《肿瘤DNA甲基化标志物检测及临床应用专家共识（2024版）》要点1 DNA甲基化标志物概述DNA甲基化是一种DNA的共价修饰，具体是指DNA甲基转移酶（DNMTs）将甲基加到DNA CpG序列中胞嘧啶的5'碳位，形成5-甲基胞嘧啶的过程。

与传统的肿瘤标志物相比，DNA甲基化标志物具有更早期、更无创、更精准等优点。

因此，可以通过非侵入性方式获得的痰液、血浆、血清或尿液等样本进行DNA甲基化标志物检测。

一些DNA甲基化异常发生在肿瘤形成的初始阶段，通过检测与肿瘤发展相关的甲基化标志物，可以辅助癌症早期诊断、评估进展风险。

DNA甲基化标志物甲基化水平的增加或降低与肿瘤预后密切相关，可用于治疗或根治性手术后评估肿瘤微小残留病灶（MRD）和监测复发。

此外，DNA甲基化标志物还可作为化疗敏感性的标志，某些特定基因的甲基化可能预示着癌症对治疗的反应，可用于判断化疗药物的疗效，以更好地指导治疗方案。

2 DNA甲基化标志物的临床检测2.1 临床样本前处理注意事项细胞基因组与游离DNA（cfDNA）均可用于肿瘤DNA甲基化检测，常采用组织、血液样本，也可采用尿液、浆膜腔积液、灌洗液、粪便、拭子等样本。

专家共识：各类样本经采集后，应尽可能减少转运环节与耗时，及早分离检测组分。

血液样本应避免溶血，不可使用肝素抗凝。

检测游离DNA时，采集量应充足，及早采用两步离心法分离无细胞血浆，分离前不可对含红细胞血样进行冻存。

新鲜体液及灌洗液样本如含较多血液成分可进行抗凝处理。

粪便样本推荐采用含防腐剂保存液。

（推荐等级：强推荐）2.2 DNA甲基化标志物检测技术方法2.2.1 DNA提取与纯化2.2.2 DNA转化2.2.3 DNA甲基化检测平台专家共识：抽提纯化所得DNA应根据样本类型制定质量合格标准并进行评价，包括浓度、纯度和DNA完整性。

cfDNA还应评估片段分布，以排除基因组DNA污染。

DNA甲基化检测需要针对不同的标本类型与检测应用选择适宜的转化方法，并关注转化技术的最新进展。

血浆RUNX3基因启动子甲基化检测对宫颈癌早期诊断的价值研究【摘要】血浆RUNX3基因启动子甲基化检测在宫颈癌早期诊断中具有重要价值。

研究围绕样本收集、处理，以及RUNX3基因启动子甲基化检测方法展开，通过临床应用验证了该方法在宫颈癌早期诊断中的有效性。

结果分析表明，基因启动子甲基化状态与宫颈癌的发生密切相关，且具有一定的预测价值。

讨论部分对研究结果进行深入探讨，并提出未来研究方向。

研究认为血浆RUNX3基因启动子甲基化检测对于宫颈癌早期诊断具有重要意义，有望成为一种新的生物标志物。

未来的研究应该进一步完善该方法并扩大样本量，以进一步验证其准确性和可靠性。

血浆RUNX3基因启动子甲基化检测对宫颈癌早期诊断具有重要意义，为宫颈癌的早期筛查和诊断提供了新的思路和方法。

【关键词】宫颈癌、早期诊断、血浆、RUNX3基因、启动子、甲基化、检测、临床应用、结果分析、讨论、研究背景、研究目的、意义、未来研究方向、总结1. 引言1.1 研究背景宫颈癌是全球范围内女性常见的恶性肿瘤之一，尤其在发展中国家具有较高的发病率和死亡率。

宫颈癌的早期诊断对于提高治疗效果和提高生存率具有极其重要的意义。

而目前临床上对宫颈癌早期诊断主要依靠细胞学检测和宫颈液基细胞学检测，然而这些方法存在着一定的局限性，如准确率不高、易受检测环境等因素的影响。

为了探讨血浆中RUNX3基因启动子甲基化检测对宫颈癌早期诊断的价值，本研究拟进行相关研究，以期为宫颈癌的早期诊断提供新的方法和手段。

1.2 研究目的本研究的目的是探讨血浆RUNX3基因启动子甲基化检测在宫颈癌早期诊断中的价值，并评估其临床应用前景。

宫颈癌是妇女常见的恶性肿瘤之一，早期诊断对于提高治疗效果和预后至关重要。

目前，宫颈癌的早期诊断主要依靠宫颈细胞学检查和HPV病毒检测，但存在一定的局限性和误诊率。

血浆中的肿瘤标志物因其便捷、非侵入性和全身性等优势逐渐受到重视。

RUNX3基因是一种重要的肿瘤抑制基因，其启动子区域的甲基化水平与肿瘤的发生和发展密切相关。

0.029
0.863
有
16
10
6
无
64
39
25
HPV 感染
9.716
0.002
有
68
47
21
无
12
2
10
病理类型
0.054
0.973
鳞癌
53
32
21
腺癌
16
10
6
腺鳞癌
11
7
4
分化程度
11.256 0.004
低
20
17
3
中
35
23
14
高
25
9
16
肿 瘤 直 径 （cm）
5.269
0.022
≤4
48
24
宫颈癌的发病机制与基因启动子甲基化等表观遗传 学改变密切相关，目前发现越来越多的基因参与了宫颈癌 的发病，可作为宫颈癌病情及预后评估的标志物[1-2]。 Dickkopf 相 关 蛋 白 3 （Dickkopf-related protein 3，DKK-3） 基 因 具有抑制细胞增殖作用，与肿瘤的发生、发展、转移及预后 紧密相关，其基因启动子甲基化在多种肿瘤中可反映病情 及预后，成为肿瘤基因水平的标志物[3-4]。 本研究比较了宫 颈 癌 患 者 和 健 康 女 性 的 DKK-3 基 因 启 动 子 甲 基 化 状 态 ， 研 究 DKK-3 基 因 启动 子 甲 基 化 在 宫 颈 癌 中 的 临 床 意 义 ， 现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料
选择 2009 年 1 月～2012 年 12 月确诊的 80 例 宫 颈 癌 患者为研究对象，均经临床表现、体格检查、影像学检查、

·113·大 医 生D O C T O R2020年第22期作者简介：陈海涛，本科，主治医师，研究方向：临床病理组织学诊断。

通信作者：柴琳琳，硕士研究生，助理研究员，研究方向：肿瘤遗传学方向，E-mail：****************。

定量检测配对盒家族基因1甲基化诊断宫颈癌前病变的应用分析陈海涛 兰建云 胥传海 刘 水 徐林成 柴琳琳 [南通大学第四附属医院（盐城市第一人民医院），江苏盐城 224006]摘要：目的 分析定量检测配对盒家族基因1（pairedboxed gene1，PAX1）甲基化对宫颈癌前病变的诊断价值。

方法 选取2017年1月至2019年12月南通大学第四附属医院收治的125例高危亚型人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染者为研究对象，按照患者病理组织诊断的病变级别进行分组，分别为正常宫颈组29例、低级别病变组33例、高级别病变组35例与癌变组28例。

所有患者均完成PAX1甲基化定量检测，观察并分析PAX1甲基化检测结果。

结果 正常宫颈组PAX1甲基化水平为（1.75±0.19）%，低级别病变组为（2.71±1.31）%，高级别病变组为（3.56±1.49）%，癌变组为（4.75±1.57）%，组间比较有统计学意义（P ＜0.05）。

ROC 曲线显示PAX1甲基化定量检测诊断宫颈癌前病变的AUC 为0.76，最佳阈值为4.12%，灵敏度为89.42%，特异度为79.53%。

结论 定量检测PAX1甲基化可辅助诊断宫颈癌前病变。

关键词：PAX1甲基化；定量检测；宫颈癌；癌前病变Application of Quantitative Detection PAX1 Methylation in Diagnosis of Precancerous Lesions of Uterine CervixCHEN Haitao LAN Jianyun XU Chuanhai LIU Shui XU Lincheng CHAI Linlin[Fourth Affiliated Hospital of Nantong University（Yancheng First People's Hospital），Yancheng，Jiangsu 224006，China]Abstract：Objective To analyze the diagnostic value of pairedboxed gene1（PAX1）methylation in precancerous lesions of Uterine Cervix. Methods A total of 125 patients with high-risk subtype human papilloma virus（HPV）infection，who were admitted to Fourth Affiliated Hospital of Nantong University from January 2017 to December 2019，were enrolled and divided according to the pathological diagnosed lesion grade of the patients，which were 29 in the normal cervix group，33 in the low-grade lesion group，35 in the high-grade lesion group and 28 in the cancerous lesion group，respectively.Quantitative PAX1 methylation testing was completed in all patients，and PAX1 methylation testing results were observed and analyzed. Results The PAX1 methylation level in the normal cervical group was（1.75±0.19）%，the low-grade lesion group was（2.71±1.31）%，the high-grade lesion group was （3.56±1.49）%，and the cancer group was（4.75±1.57）%（P ＜0.05）. The ROC curve showed that the AUC of the quantitative detection of PAX1 methylation for the diagnosis of cervical precancerous lesions was 0.76，the optimal threshold was 4.12%，the sensitivity was 89.42%，and the specificity was 79.53%. Conclusion Quantitative detection PAX1 methylation can assist in the diagnosis of precancerous lesions of uterine cervix.Keywords：PAX1 methylation；quantitative detection；cervical cancer；precancerous lesions近些年，临床诊疗技术方法发展愈加丰富，人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）捕获杂交法、细胞学筛查的广泛应用，帮助不少宫颈癌前病变以及部分早期浸润宫颈癌患者在早期得到诊断并加以治疗，使得宫颈癌的病死率在一定程度上有所减低[1]。

（ Ｓ、 ＭＤ ） 黏膜 白斑 、 结肠息 肉是否存在 恶变 的潜能等
。
与传统诊断方法相 比， 甲基化检测具有早期 、 无创 、 快捷 、 灵 敏度高等特点 。而且 ， 近年来 ， 由于检测 技术 的不 断进 步 ， 肿瘤
１ Ｄ Ａ甲基化及其意义 Ｎ
Ｄ Ａ 甲 基 化 是 指 由 Ｄ Ａ 甲 基 转 移 酶 （ Ｎ ｅｈｈａ ｓ Ｎ Ｎ Ｄ Ａ ｍ ｔｙ ｒ － ｎ ｆ ａｅ ，Ｎ ） 化 ， 活 性 甲基 从 Ｓ腺 苷 蛋 氨 酸 转 移 至 胞 嘧 啶 ｅ ｓｓＤ ＭＴ 催 ｒ 将 ．
些基因（ 如抑 癌基 因） 启动子 Ｃ Ｇ岛区的高 甲基化 （ ｙｅｍ ｔｙ ｐ ｈｐｒ ｅｈ－
ｌ ｉｎ 。 ａｏ） ｔ
大量研究结果显示 ， 基因组 的低 甲基化是肿瘤 细胞 的基 癌 中的 Ａ Ｃ和 Ｅｃｄｅ ｎ以及 宫 颈 癌 中 的 ＭＹ Ｄ 、 Ｄ 全 Ｐ －ａｈｎ Ｏ １ Ｃ Ｈ１和
一
常见 ， 在结直肠癌 Ｄ ｋｓ ｕｅ 分期 Ｃ和 Ｄ的病例 中 Ｃ Ｋ ２ ｐ ６的 Ｄ Ｎ Ａ、１ 甲基化率比 Ａ和 Ｂ的高 Ｊ 。② Ｄ Ａ异常 甲基化可促进 肿瘤的 Ｎ
外显子 ， 这 些基 因通 常是管 家基 因和组 织表 达 特异性 基 而
因 。
侵袭和转移。Ｇ ｅ ｈｅ等研究 了 ６ ４例肝细 胞癌 中 Ｅｃｄｅｉ ．ａｈｒ ｎ甲基
出可 喜 的前 景 。
６ ２ ％ １％ 说 肿瘤表观遗传学是一 门新 兴学科 ， 主要包括 Ｄ Ａ甲基化 、 发生癌变者 上述基 因甲基化 率仅为 ３ ％ 、３ 、７ ， 明其 异 Ｎ 常甲基 化 与食 道癌 的发 生关 系密 切 。又 如通 过 检 测 ｐ５ １、
Ｍ ＭＴ ｈ ｌ Ｇ 、 ｍＨ１异 常 甲 基 化 ， 判 断 骨 髓 增 生 异 常 综 合 征 来