冬虫夏草的人工栽培
- 格式:doc
- 大小:37.00 KB
- 文档页数:5
冬虫夏草仿野生养育环评(最新版)目录1.冬虫夏草的概述2.仿野生养育的背景和意义3.冬虫夏草仿野生养育的环境评估4.存在的问题和挑战5.未来发展前景正文1.冬虫夏草的概述冬虫夏草,学名为 Cordyceps sinensis,是一种珍贵的中草药,拥有很高的药用价值。
它既是一种滋补强壮的药材,也是一种具有较强抗病作用的药物。
在我国,冬虫夏草主要生长在青海、西藏等地的高海拔地区。
由于其生长环境的特殊性,冬虫夏草的资源十分有限,市场供需矛盾十分突出。
2.仿野生养育的背景和意义为了保护冬虫夏草的资源,同时满足市场需求,我国科研人员经过多年的研究,成功实现了冬虫夏草的仿野生养育。
仿野生养育是指在人工条件下,模拟天然环境,使冬虫夏草在其生命周期中得以生长发育。
这种方法不仅可以有效地保护野生冬虫夏草资源,还可以提高其产量,满足市场需求。
3.冬虫夏草仿野生养育的环境评估冬虫夏草仿野生养育的过程中,需要对其生长环境进行严格的控制,包括温度、湿度、光照、土壤等。
此外,还需要对使用的培养基、菌株等进行严格的筛选和检测,以保证其品质。
因此,冬虫夏草仿野生养育的环境评估十分重要。
4.存在的问题和挑战尽管冬虫夏草仿野生养育取得了一定的成果,但仍然存在一些问题和挑战。
首先,仿野生养育的技术难度较大,需要投入大量的人力、物力和财力。
其次,由于冬虫夏草生长环境的特殊性,容易导致病虫害的发生,影响其生长发育。
最后,市场竞争激烈,产品质量参差不齐,影响了冬虫夏草的市场信誉。
5.未来发展前景随着科技的不断发展,冬虫夏草仿野生养育技术将会得到进一步的完善和提高。
冬虫夏草仿野生养育环评
摘要:
1.冬虫夏草的简介
2.仿野生养育的概念
3.冬虫夏草仿野生养育的环评标准
4.冬虫夏草仿野生养育的优点
5.冬虫夏草仿野生养育的挑战和问题
6.结论
正文:
冬虫夏草,是一种在我国广泛应用的中药材,因其具有极高的药用价值和营养价值,被誉为“中华草本之宝”。
然而,由于其生长环境的特殊性和生长过程的复杂性,导致了其资源的极度稀缺。
为了保护和合理利用这一珍贵的资源,我国开始推行冬虫夏草的仿野生养育。
仿野生养育,就是模拟野生环境,进行人工培育。
这种方式不仅能够有效地保护野生资源,还能够通过科技手段,提高培育效率,保证产品的质量和产量。
对于冬虫夏草的仿野生养育,其环评标准主要包括土壤环境、气候环境、培育技术和管理等方面。
只有当这些条件都能达到冬虫夏草生长的需求时,才能够进行仿野生养育。
冬虫夏草仿野生养育的优点主要体现在以下几个方面:一是能够有效地保护野生资源,二是能够提高培育效率和产品质量,三是能够通过科技手段,优
化培育过程,提高培育效率。
然而,冬虫夏草仿野生养育也面临着一些挑战和问题。
比如,如何模拟出完全符合冬虫夏草生长的环境,如何有效地控制病虫害,如何保证培育出的冬虫夏草的质量等。
总的来说,冬虫夏草仿野生养育是一种有效的保护和利用冬虫夏草资源的方式。
冬虫夏草的人工驯化与栽培王晓云【摘要】冬虫夏草与人参、鹿茸齐名,是著名的三大补品之一,其药用价值早已家喻户晓。
近代医学研究认为:冬虫夏草具有抑制肿瘤、调节免疫力、抗菌、抗肝炎、肾炎、抗缺氧、抗惊厥、升血小板、降低胆固醇、增加冠状动脉流量和镇静等作用,能影响机体核酸及蛋白质代谢,同时对肺气肿、高血脂症、【期刊名称】《现代农业》【年(卷),期】2012(000)004【总页数】1页(P3-3)【关键词】冬虫夏草;人工驯化;栽培;降低胆固醇;蛋白质代谢;药用价值;抑制肿瘤;冠状动脉【作者】王晓云【作者单位】吉林省通化农业学校【正文语种】中文【中图分类】S567.35冬虫夏草与人参、鹿茸齐名,是著名的三大补品之一,其药用价值早已家喻户晓。
近代医学研究认为:冬虫夏草具有抑制肿瘤、调节免疫力、抗菌、抗肝炎、肾炎、抗缺氧、抗惊厥、升血小板、降低胆固醇、增加冠状动脉流量和镇静等作用,能影响机体核酸及蛋白质代谢,同时对肺气肿、高血脂症、肾功能衰竭及更年期综合征有较好的疗效。
冬虫夏草生长在青藏高原海拔3000~5000米的高山草甸地区,整个生长过程处于严酷的高寒条件下。
由于野生资源遭到掠夺式采集,濒临枯竭,价格已经成百上千倍地上涨。
因此,人工栽培成为解决这一难题的重要途径之一。
冬虫夏草人工培育子实体难度极大,涉及菌种分离、寄主昆虫饲养、寄主侵染和子实体形成条件等较为困难的技术难题。
现将冬虫夏草的人工驯化与栽培技术介绍如下。
一、冬虫夏草的生长发育条件冬虫夏草是一种偏低温型真菌,菌丝体最适温度为15~18℃,经培养有少部分菌株对于稍高温度表现出一定的适应性,在21℃下也能生长。
在PPDA培养基上菌丝生长缓慢,菌落初为白色绒毛状,渐渐变灰白色,有黑色素分泌到培养基中。
1.营养氮源。
人工培养的最佳氮源是奶粉,其后依次为黄豆粉、酵母粉、麦麸,最差的为蛋白胨和硝酸铵。
碳源。
对它的影响较小,最佳的是葡萄糖、蔗糖、果糖,其次是乳糖、淀粉等。
中国食用菌 2007,26(5):11~13ED IBLE FUNG I O F C H I NACN 53-1054/Q ISS N 1003-8310 作者简介:朱斗锡,食用菌专家、高级工程师、四川省绵阳市食用菌研究所所长。
30多年来一直从事食用菌选育分离,驯化等新品种的科学研究。
已发表和出版了许多有价值的论著,有相当丰富的经验。
收稿日期:2007-06-17中国冬虫夏草人工栽培研究进展朱斗锡,何荣华,周俊承,王 洋,赵晓燕,杜荟秋(四川省绵阳市食用菌研究所, 绵阳 621000)摘要:针对全国各地研究冬虫夏草的情况,包括功能作用、市场情况、菌种分离、蝙蝠蛾幼虫的繁殖饲养、接种与感染、栽培出草、技术难点、研究进展、发展前景等方面都作了介绍。
关键词:冬虫夏草;研究进展中图分类号:S 646.9 文献标识码:A 文章编号:1003-8310(2007)05-0011-031 冬虫夏草简介1.1 冬虫夏草功能作用中国医药界一直流传的“中药三宝”分别是人参、鹿茸、冬虫夏草。
几百年来冬虫夏草在医药方面的药效是公认的,它具有补肺益肾、止血化痰。
主治咳嗽、咳血、阳萎遗精、病后体弱、老年慢性咳嗽等疾病。
现代医学证明,冬虫夏草的治疗范围广,具有对人体新陈代谢的调节作用和免疫功能,能用于许多人体系统的疾病,如神经系统、免疫系统、心血管系统、呼吸系统、消化系统、泌尿系统、生殖系统等的治疗。
对肾功能衰竭、肝炎、炎症、慢性心血管疾病、肺气肿、肿瘤、癌症、器官移植、头晕耳鸣、失眠健忘、性功能减退有特殊的效果。
1.2 冬虫夏草市场状况冬虫夏草在目前天然药材中,已经处于濒危灭绝的边缘,产量和产地都非常有限,全世界仅有中国和尼泊尔有野生的冬虫夏草。
我国主要分布在青藏高原,主要产于西藏、青海、四川等地,全国的冬虫夏草产量由80年代最高年产9000kg 下降到现在年产仅4000kg ,20多年来产量下降了近60%,而市场价格由1985年的每公斤600多元上涨到2007年的每公斤12万元,22年来冬虫夏草的价格涨了200多倍,平均每年上涨10多倍。
北冬虫夏草液体菌种培养及栽培技术吐I北冬虫夏草也称蛹虫草,分类学属子囊菌亚门,麦角菌科,虫草属,是一种药用及滋补功效为一体的食、药用 真菌。
其富含蛋白质、氨基酸、维生素等营养成分外,还含有丰富的虫草素、多糖、过氧化物歧化酹等与天然冬 虫夏草相似、且含量高于天然冬虫夏草的生理活性成分,其性质平和,不寒不燥,具有增强人体免疫力、滋肺补 肾等功效,2009年根据《中华人民共和国食品卫生法》和《新资源食品管理办法》规定,被批准为新资源食品,2014年变更为新食品原料,为其规模化生产的迅速发展奠定了基础。
辽宁省微生物科学研究院是我国专业从事微生物科学研究与应用的科研单位之一。
多年来致力于北冬虫夏草、桑黄等珍稀食、药用蕈菌研究与开发,在北冬虫夏草优良菌种选育、液体菌种生产及观模化栽培技术等方面取得重大突破。
选育的生产母种生长周期短、活力强、菌龄一致、不易变异,生物转化率80%以上;所获子实体条形好,色泽金黄,草香浓郁,尤其大翹子头北冬虫夏草泡子丰富、泡子头大而饱满;利用液体深层发酵技术生产的液体菌种成罐率90%以上,出草率100%,技术水平达到国内先逬。
1、 菌种供应:提供北冬虫夏草生产母种或液体菌种。
2、 技术培训:研究院拥有北冬虫夏草菌种选育、生产及栽培技术研究所需的设备、设施及栽培示范基地,面向社会开展北冬虫夏草人工栽培技术培训。
3、技术转让:研究院利用液体深层发酵技术,建立了北冬虫夏草液体菌种批量生产工艺及技术规程,对发酵罐生产液体菌种技术逬行整套技术转让。
单位:辽宁省微生物科学研究院地址:辽宁省朝阳市双塔区龙山街四段820号邮编:122000联系人:李剑梅电话:************E-ma i 1: 84386120@qq. com网址:http : //www. I nswsw.com。
冬虫草栽培关键技术探讨我们于2001年从科研单位引进菌种进行冬虫草栽培试验,并获得成功,于2004年通过了市级科研鉴定,获市科技进步三等奖。
在此基础上,扩大规模,继续生产,由于多年自繁育种,菌种退化较明显,导致出草率低,干草质量下降,商品率降低等问题。
通过探索研究,我们针对冬虫草栽培关键技术上采取相应的措施,取得了较好的效果,现在干草质量提高了,出草率稳定了,年产干草保持在150公斤。
一、冬虫草菌种的提纯复壮从科研单位引进冬虫草菌种,直接扩繁作栽培菌种,出草率低,生产效率差,继代繁殖栽培更难于进行。
因此必须进行菌种提纯复壮,培育纯正健壮的母种,才能进行扩大生产,减少损失,保障生产效率。
引进的母种,首先用斜面培养基进行划线接种,引进的一支试管斜面种可以划线接种8~12支,然后挑选菌丝蔓延好,见光后易着色的菌种进行扩接液体原种,再利用液体原种扩大培养液体生产种。
然后以消毒后的新鲜活蚕蛹再作培养基用注射接种培养,栽培出草后,挑选健壮肥大、子囊果(粉)多的子实体作材料,用组织培养方法进行斜面培养获取提纯复壮的母种。
在菌种保藏中应注意母种保藏不超过20天,原种保藏不超过15天,生产种保藏不超过5天。
在制备各级培养基中,都要用20~30%的蚕蛹。
斜面培养基最好采用新鲜活蛹作氮源。
二、液体菌种制作技术一般采用摇床振荡培养制种,然后兑水稀释后作生产种。
采用这样的方法相对安全,不易感染,但制种量少,时间长,兑水稀释栽培后,培养基内生长点少、发菌慢,培养基易感染,并且容易造成培养基内上下菌龄不同,影响出草质量。
我们采用补氧振荡培养,只要在补氧方法上注意各个细节,达到无菌操作,就不会出现感染杂菌,由于给予氧气,振荡培养的菌球分生迅速,活力增强,浓度高,制成后不再稀释而直接生产使用。
栽培后生长点多、活化快、发菌快、感染率低。
三、培养基制作的关键是保证原料的质量现在的栽培户主要用米饭(小麦)作培养基,这其中主要的原料是大米(小麦)、蚕蛹和微量元素。
蛹虫草人工栽培技术曹丽茹蛹虫草或称北冬虫夏草,是一种具有药用、滋补功能的珍贵中药材,其药用价值与冬虫夏草相似。
北冬虫夏草除了富含蛋白质、氨基酸、维生素营养物质及钙、铁、锰、锌、硒等微量元素外,还含有虫草酸、虫草素、虫草多糖和SOD等生物活性物质。
具有扩张血管、镇静、抗炎降血压等功效。
对慢性支气管炎、咳喘、糖尿病、心悸失眠、肝炎、心脏病、癌症等有显著的预防和治疗作用。
是一种极为理想的温性缓冲剂,具有增强机体免疫力和抗疲劳,抗衰老、润肌美容和延年益寿等医疗保健作用。
人工栽培工艺流程:北冬虫夏草母种(斜面)→二级菌种(摇瓶)→栽培草虫(罐头瓶)→采收1.培养基配方PDA培养基中添加10g蛋白胨、2.5g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁、维生素B11片。
将上述配方的培养基分装试管,加棉塞于15磅(1公斤/厘米2)压力下灭菌40分钟,取出放置斜面备用。
在灭菌条件下扩种,一般一支母种可扩接15-20支左右。
母种培养条件22-25℃恒温下,培养7-10天,待菌丝长满斜面,背面有黄色基内菌丝即为成熟。
2.二级摇瓶菌种为了扩大种源及缩短种子培养周期、二级种可采用摇瓶液体培养。
培养基配方成分同母种培养基不加琼脂。
将液体培养基分装入250ml盐水瓶中,每瓶装入培养液100ml,瓶口用塑料薄膜封好(1公斤/厘米2),灭菌40分钟。
将培养成熟的母种,在无菌条件下用接种钩接入盐水瓶培养基中,接种量,1支试管斜面菌种接4-6瓶为宜。
接完菌的盐水瓶培养在摇床上,室温控制在20-22℃,振荡培养4-5天,待形成菌球,培养液变清,即可使用。
3.罐头瓶栽培培养基:小麦粒、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、维生素B1等。
方法:每个罐头瓶装小麦粒30g、加营养液45-50ml、瓶口用聚丙烯薄膜封好,外用皮圈扎口,放置(1公斤/厘米2)压力下,灭菌50-60分钟,取出后放入接种室备用。
接种:用连续注射器接种,将摇瓶菌种用无菌水稀释,每瓶菌种可接200瓶,方法是1人拿菌种瓶,另一人往培养基中扎破塑料膜注射,每瓶注射5ml菌液,工人操作1小时可接种1000瓶左右,接完种罐头瓶移入培养室的培养架上进行培养。
冬虫夏草介绍 冬虫夏草又名中华虫草,简称虫草。生长在高寒地带,因蝙蝠蛾幼虫被虫草菌感染,死后尸体组织与菌丝结成坚硬的假菌核,在冬季低温干燥土壤里保持虫形不变达数月之久(故名冬虫),待夏季温湿适宜时从菌核长出棒子状实体并露出地面(故名夏草)。武汉农科金源
冬虫夏草是一种似虫非虫,似草非草的菌类生物,它是一种传统的名贵滋补中药材,有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳、滋阴壮阳、止血化痰等多种功效。它主要产生于我国青海、西藏、新疆、四川、云南、甘肃、云南、贵州等省的高寒地带和雪山草原,一般生长于海拔3000~5000米,自然寄生率低,对自然环境要求高。所以它本身的资源很有限。近年来又由于冬虫夏草主产地生态环境遭到破坏,人为严重开发,大量盲目不合理的采挖,致使资源日益减少,产量逐年下降。由于青海、西藏出产的冬虫夏草的品质比其他地方出产的要好,所以很受市场的欢迎,其售价很高(现在国内售价达30万/公斤)。 什么是北虫草? 因为冬虫夏草是有极高的药物作用和保健功效,但这种虫草不易采集,售价居高不下,但市场需求量逐年增加,就促使人们将目光投向了对虫草的人工培植的研究试验中。 近年台湾等地率先开始发展培育冬虫夏草的人工养殖技术,之后在湖北、湖南及东北等内地也随之掀开了对该产品的技术研究和市场开发,目前一些敏锐的产业机构即开始将那个该项目的技术及产业模式推向市场,部分种植户生产出的产品也被人们接受,这种人工生产出的代替品与真正的野生冬虫夏草在药用功效和食补作用上毫无逊色,产品在市场上很抢手,而且价格节节攀升。为了区别于野生的冬虫夏草,人们将这种替代品叫北虫草。即将天然的冬虫夏草菌在試馆内进行采集、分离、纯化出冬虫夏草菌种,然后扩大繁殖,接种在培育基础上在特定的光照、温控、水分、空气与环境条件下,让菌丝生长发育,并长成成熟的虫草子实体,培养基的营养成分按天然虫草营养需求配制,使之长出跟冬虫夏草一样子实体。。 北虫草特性介绍:经检测,北虫草含有丰富的蛋白质,18种氨基酸,17种微量元素,12种维生素。自北虫草面世以来,经韩国、日本、加拿大各国及国内众多单位研究检测证明,北虫草是传统冬虫夏草最理想的替代品。 据查证,国家已确定“北虫草的子实体及其虫体可作为冬虫夏草入药”,在虫草属的60多个品种中,唯有冬虫夏草和北虫草的医疗价值最大,经济价值最高。所以,在冬虫夏草野生资源大幅度减少,且无法进行商品化人工栽培,市场极度匮乏的情况下,此虫草就成立国内外真菌界、医疗界、保健食品界、生物界与各行业(学科)多年研究开发的重点。
药食两用虫草参大田栽培技术概述虫草参是一种珍贵的中草药材和滋补食材,被誉为“药食两用”的珍稀中草药,具有滋补强身、延年益寿的功效,广泛用于中药材和滋补养生食品的制作。
目前,随着虫草参市场需求的不断增长,大田栽培虫草参的技术也逐渐成熟,成为农民脱贫致富的重要产业之一。
本文将从虫草参的特点、大田栽培技术和管理方法等方面进行介绍。
一、虫草参的特点虫草参,又称“冬虫夏草”,是一种地下真菌,寄生于蝗虫的幼虫体内,形成蛹壳,发芽成虫草菌丝节和子实体的生殖孢子。
其主要生长条件为温度在-5℃至25℃之间,湿度在85%至95%之间。
虫草参的主要活性成分有虫草素、虫草酸等,具有滋阴降火、补肾养血的功效。
虫草参除了作为中药材外,也可作为滋补食材使用,是市场上非常受欢迎的一种食材。
二、大田栽培虫草参的技术1. 地块选择栽培虫草参的地块应该选择平整、排水好、疏松肥沃的土地,土壤PH值应在6至7之间,对于土壤的肥力,可以施入有机肥来提高土壤肥力。
2. 种植方式虫草参的种植方式一般有两种,一种是自然播种,另一种是人工播种。
自然播种是在适宜的环境条件下,利用蝗虫的寄生方式进行虫草参的生长和繁衍。
人工播种则是通过人工埋藏虫草参的菌丝体,促进虫草参的生长发育。
一般来说,人工播种比自然播种效果更好,也更易于管理。
3. 环境调控在大田栽培虫草参过程中,要进行严格的环境调控,包括温度、湿度等。
在冷季节要进行保温,保持适宜的温度,在雨季需要保持排水良好,防止积水。
还需要进行适时的遮阳和通风,保证虫草参的充足光照和氧气供应。
4. 病虫害防治在大田栽培虫草参的过程中,需要做好病虫害的防治工作。
特别是在高温潮湿的环境中,虫草参容易受到病虫害的侵袭,如蚜虫、螨虫等。
此时需要采取及时的农药喷洒和病虫害的预防措施,保证虫草参的生长健康。
5. 收获管理一般来说,虫草参生长周期为三年左右,可以根据菌丝体和子实体的生长状态进行定期的收获管理。
在收获时要避免损伤子实体,保持其完整性,以保证其品质。
冬虫夏草的人工栽培冬虫夏草,是我国一味名贵药材,其功效可与人参、鹿茸媲美,是三大补品之一,畅销于世界各地,冬虫夏草主要分布在西藏、四川、云南、甘肃、青海、贵州等省区。
由于野生货源稀少,价格十分昂贵,每公斤1200元左右。
近年来,一些科研单位对冬虫夏草进行人工分离培养,并获得初步成功,现分四期综合介绍如下:一、冬早夏草的生物学特性1、形态特征冬虫夏草是一种属子囊菌纲、肉座菌目、麦角菌科、虫草属的真菌寄生于鳞翅目蝙蝠蛾幼虫的虫菌结合体。
整个外形由虫体和子实体相连接而成,外表黄棕色或黄褐色,虫体极似家蚕,细长圆柱形,长3-5厘米,粗约0.3-1厘米,有20-30个明显环节,腹部有足8对,尤以中部4对较为明显。
子实体是指延伸于寄主昆虫体外的、由菌丝反复纽结和分化后形成的肉眼可以识别的繁殖器官。
质地较脆,断面黄白色,头部红棕色,长有子座。
子座多单生,细长象棍棒一样,长4-10厘米,顶部膨大,表面棕褐色,质地略韧,断面黄白色且呈纤维状,子座的头部散生或密生着子囊壳,子囊壳中形成无数的子囊,子囊中就是能进行有性繁殖的子囊孢子。
2、冬虫夏草的生长过程冬虫夏草是冬虫草菌寄生于蝙蝠蛾的幼虫而形成的。
当虫草菌成熟以后,散发出子囊孢子,飞扬于大自然中,于冬前通过昆虫的体壁、气孔、口器或直接通过躯体的其它孔道进入体内,被感染的昆虫,初期行动迟缓,后期表现烦躁不安,数天后外壳出现明显褪色,由深褐黄转变淡黄色,以后便全身披上灰白色的菌丝,此时幼虫慢慢靠拢附近分布着的植物根系,并潜入地表表土4-8厘米深的地方,逐渐死亡僵化。
死亡时头向上,尾部向下。
到了次年夏天,气温回升,积雪融化,虫体内的菌核,从死虫的头部长出子座,露出地面,这就是所谓的“草”。
3、冬虫夏草生长的环境条件冬虫夏草的自然分布与地形、地貌、海拔的高低都有密切的关系。
经过多年的调查认为,冬虫夏草的寄主蝙蝠蛾一般生长在海拔3650-4250米的高山草甸地带,坡度15-30度左右,生长期间气候多变,常有雨雪,气温在0-23℃,20厘米深处的地温5-7.5℃,空气相对湿度为50-70%,土壤湿度为40-60%。
由此可见,蝙蝠蛾是生长在潮湿、低温、阳光充足、排水良好的地势和地貌上。
其植被主要由草本植物、小灌木丛及部分针叶林的林缘部分构成。
它的食物除了咬食珠芽蓼的地下茎外,也喜食头花蓼、萸氏属植物以及金老梅的根。
另外从解剖肠道中发现,它还直接啃食木质化的灌木或半灌木的地下部分。
蝙蝠蛾的生活史是:最后→龄幼虫→预蛹→蛹→成虫→卵→一龄幼虫→二龄幼虫→三龄幼虫。
在整个生活史中,幼虫期最长,最少需经历两年的时间才能化蛹,因此其幼虫一年四季都可以在土壤中找到,并能够越冬,一般分布于土壤10厘米深处以下。
每年5月下旬幼虫部分形成蛹,7月中旬化蛹达到最高峰,至8月初又大部分羽化成蛾。
蛹期一般分布于土壤10厘米深处以下。
蛹期一般分布于土壤表层。
成虫出现于6-7月下旬,蛾为黑灰色且有黑色斑块,雄蛾平均寿命72小时,一生仅交尾一次,活动力强。
雌蛾寿命80小时,一生交尾2次,活动力弱,产卵较集中,6-7月产卵于土表,大约两个月左右后便孵化入土,幼虫经过5-6次脱皮,经两年后成熟。
这类昆虫的天敌主要是一些飞禽及细菌、放线菌类。
二、冬虫草菌的分离一般应在无菌室或接种箱内进行。
无菌室在使用前要预先喷洒福尔马林溶液(1:40)进行消毒,然后经过紫光外光杀菌处理。
分离所用的工具都要进行严格消毒。
分离的方法有组织分离法和稀释分离法两种。
1、组织分离法:是指直接切取虫草的子座部分或菌核部分的一小块组织,经过表面消毒和灭菌水洗以后,在无菌操作条件下,山虫草体上移到培养基上。
切取的组织大小要适宜,一般1毫米左右,组织切得过大,会增加杂菌污染的机会;切得过小,一方面在表面消毒过程中很容易将该组织杀死,另一方面也延长了虫草菌种的生长时间。
用这种方法培养4-6个月可得到冬虫夏草母种。
2、稀释分离法:是将能产生大量孢子的真菌或存留于寄主和其他基质上的孢子洗下,配制成孢子悬浮液,经稀释后与溶化并冷却到45℃左右的培养基混合,然后倒入灭过菌的培养皿中进行培养。
冬虫夏草多用此法进行培养:用硫酸纸或不易透水的其他纸制成小口袋套于天然生长但尚未成熟的冬虫草子座上,待冬虫夏草成熟后,子囊孢子即弹射出来。
附着于纸袋内壁上,取附有这些子囊孢子的纸袋100个,浸于1:10的土壤浸液中,2小时后用小刀仔细把子囊孢子从纸袋上刮出,收集于离心管中,离心10分钟后,弃去上清液,用土壤浸出液反复洗涤5次,再用10%、20%的蔗糖溶液分别洗涤3次,又用50%蔗糖溶液离心30分钟,收集含有子囊孢子的上浮液,放入含有庆大霉素(100单位/毫升)的1:1土壤浸出液中,在15-20℃的温度下培养3-5天,便可放在培养基上培养。
培养基的配方:燕麦片30克、琼脂17-20克、水1000毫升。
制法是:燕麦片加水后在水浴上加热1小时,用纱布过滤后加水补足1000毫升,加琼脂溶化后分装灭菌(121℃,20分钟)。
若琼脂用量增加到30克,培养基不容易干燥,可用于较长时间的培养,同时对促进虫草子囊孢子的产生有利。
虫草分离后放在上述培养基培养,几天后就可得出虫草菌种了。
三、菌丝体的培养指扩大由虫草组织分离而获得的菌丝体数量,以便进一步培养后使其发生分化,最后达到形成子座的目的。
1、虫草菌种的移植:虫草菌种的移植是虫草菌丝体培养的开端。
因为只有通过移植,才能扩大虫草的人工培养规模,同时移植可以避免菌种老化或生长不良以及杂菌的污染。
移植就是用经火焰灭菌的接种环把冬虫草的菌种由原来的培养基移植到新的培养基上,操作时要在火焰上进行。
具体方法是:左手把培养好的原种试管和待接试管并列拿住,右手把棉塞一边转动一边拔出,夹在右手小指和无名指中间及无名指与中指之间,这时注意不要接触到进入试管的接种环部位。
在整个操作中,试管口不要朝上而必须始终对着火焰的方向,用火焰烧管口,接种环用火焰灭菌后,立刻将尖端伸进待接的试管中,注意不要碰到试管内的琼脂。
要将接种环的前端浸到固体培养基斜面下部的冷凝水中,使之迅速冷却。
随后用接种环(或接种针)从虫草菌种试管内的斜面上,挑取谷粒或黄豆般大小的菌种一块,移出该试管后迅速转入另一支待接试管内,将菌种放在培养基表面的中央位置。
然后取出接种环,试管口经火焰烧后,用棉塞穿过火焰迅速塞紧试管。
2、菌丝体的培养:将分离和培养后所得的虫草菌种用上述方法移植到含有多性蛋白胨10克、葡萄糖100克、酵母膏1克、硫酸镁0.5克、磷酸二氢钾1克、琼脂粉20克、蒸馏水1000毫升及少量生长素的培养基上进行恒温(15-20℃)培养。
10天后可见芽管伸长,分枝并开始形成菌丝,1个月后就有细小无色的菌落出现,2个月菌落直径发展到2-6毫米,3个月便有很短的灰白色气生菌丝,4个月后菌落直径可达1-2厘米,菌落凸起且表面皱折不平,灰白至棕黄色,基内菌丝棕黑色,并有棕黑色色素扩散到培养基中。
菌丝体的培养方式一般是静置培养,其特点是在整个培养过程中,不需施加外来机械作用使其振荡的情况下诱导虫草子座的形成。
四、冬虫夏草的半人工栽培半人工栽培是指不脱离虫草生长的自然环境,或是利用自然界天然感染的方式来人为地培养虫草子实体的方法。
1、冬虫夏草寄主昆虫的饲养(1)饲料。
在没有植物饲料的情况下可以用人工配合饲料代替,蝙蝠蛾的配合饲料配方是:马铃薯淀粉(或甘薯淀粉)10克,脱脂大豆粉25克,干桑叶粉20克,蔗糖5克,琼脂10克,维生素B40毫克,氯霉素25毫克,金霉素0.1克,山梨酸0.3克,抗环血酸1.5克,蒸馏水(或冷开水)250毫升。
(2)饲养技术。
饲养冬虫夏草寄主的技术环节主要包括两个方面:一是对昆虫各个虫态的处理和操作,如虫卵消毒、接种、移虫、收集虫蛹等。
一是对饲料和环境的处理,如更换饲料、提供化蛹和产卵的场所、条件等。
1虫卵消毒:目的是为了防止附着于虫卵表面的细菌、放线菌和病毒等在培养中可能造成的污染,而且对虫卵消毒要比对昆虫的其他生活阶段进行消毒要方便和安全得多。
虫卵消毒时不能影响胚胎的发育,因此,必须慎重地选择杀菌剂。
虫卵消毒常用的杀菌剂有次氯酸钠、高锰酸钾、过氧化氢、氢氧化钠、氯化汞、福尔马林、酒精等。
氯化汞的杀菌力强,渗透性也很强,容易杀伤虫卵,故处理时间不宜过长,对于一些带有绒毛的卵块,连续使用几种杀菌剂比单用一种杀菌剂的消毒效果要好得多。
一般使用时的搭配比例为10%的甲醛(福尔马林)、2%的次氯酸钠、0.1%的氯化汞各浸泡5分钟。
不论用哪种杀菌剂或哪种方法,每次消毒之后都要用灭菌蒸馏水冲洗或漂洗多次,将残留在虫卵或卵块表面上的杀菌剂除去。
以防止药物对刚刚孵化出的幼虫产生毒害。
2接种:把消毒过的虫卵接到饲料中的过程称为接种。
接种要在无菌操作条件下进行。
但有些昆虫的卵在过湿的条件下不能孵化,这种昆虫不能把卵直接放在饲料中,而是将其置于容器壁上,或者预先在饲料的表面上放上一张灭过菌的纸,然后将虫卵或卵块放在纸上,并在所需的温度下培养。
3调换饲料:人工饲料很容易变质,所以不宜让昆虫长期在一次性添加的饲料中摄食。
如果饲养的时间短(一周内),可以不换饲料。
调换饲料时必须严格地按无菌操作的过程进行。
操作时要仔细,避免弄伤幼虫。
4化蛹:幼虫的化蛹过程如在饲料中进行,一方面不利于蛹的羽化,另一方面也不利于控制其交配和产卵,因此一般在化蛹之前,将老熟幼虫或预蛹收集起来转移到供化蛹的容器中。
化蛹时要保持空气相对湿度为70%左右。
5成虫的交配和产卵:成虫羽化前,将蛹按一定的性比和数量放到产卵笼中,使其羽化和交配。
羽化时以90%的相对湿度为好,保持黑暗或微光照条件对羽化很有利。
另外还应注意饲养过程中的卫生,养虫室和所用器械要消毒,禁止在饲养室内吸烟或带进刺激性的物质,以免影响幼虫的生长发育。
2、菌种的接种和栽培:冬虫夏草的寄主昆虫被虫草菌感染的时间在幼虫阶段,感染的方式是通过冬虫夏草菌子座顶端生长的子囊壳所释放出的子囊孢子,随风、雨等外界环境中的机械作用,粘附到虫草蝙蝠蛾幼虫的体表上来实现的。
因此我们可以在幼虫阶段时进行人工接种。
接种时,先把冬虫夏草的子囊孢子制成较浓的孢子悬浮液,利用微型喷雾装置把子囊孢子喷洒到幼蛾体上,为了获得较多的感染机会,还要在幼虫的食物中混入冬虫夏草菌丝体。
接种后数天可以通过虫体外壳的颜色检查和判断幼虫是否已感染上冬虫草菌,如果菌丝感染了幼虫后,虫体的外壳就明显的由深黄褐色转变成淡黄色,而且动作逐渐迟缓,最后全身披上灰白色菌丝而死亡僵化。
再经过一段时间的培养,便从病虫的头部生出子座,成为冬虫夏草。
五、冬虫夏草的人工栽培人工栽培就是强调栽培的各个环节都必须严格地在人为条件下完成,而几乎不依赖外界自然因素的作用。
(一)栽培条件冬虫夏草的人工栽培主要是准备菌种和昆虫两个条件。