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四、参与蛋白质合成的酶类
(一)氨基酰-tRNA合成酶 催化氨基酰-tRNA的合成,兼有酯
酶活性。具有校正功能(误差 <10-4) 氨基酰-tRNA合成酶使tRNA识别特 异的氨基酸。 氨基酸的活化形式:氨基酰-tRNA 氨基酸的活化部位:是羧基
原核生物肽链的起始氨酰-tRNA为甲酰蛋氨酰-tRNA ;而真 核生物肽链为蛋氨酰-tRNA
延长因子 释放因子
EF-Tu EF-Ts EF-G RF-1 RF-2 RF-3
促进氨基酰-tRNA进入A位,结合并水解GTP 调节亚基
CH3
S
THFA-CHO
FH 4
CH3 S
H2N
CH2 CH2
转甲酰基酶
CHC tRNAfMet
HN
CH2 CH2 CHC tRNAfMet
O
O O==CH
Met-tRNAfMet
fMet-tRNAfMet
(二)肽酰转移酶(peptidyl transferase)(核酶)
催化肽键生成,兼有酯酶活性 -原核23SrRNA;真核28SrRNA
OHC NH
五、主要的蛋白因子
1. 起始因子(initiation factor,IF)(真核起始因子, eukaryotic initiation factor,eIF):参与翻译的起始
2. 延长因子(elongation factor,EF):参与肽链的延长
3. 终止释放因子(releasing factor,RF)及核蛋白体释放 因子(ribosomal releasing factor, RRF):参与肽链 合成的终止
(二)核糖体上的主要功能部位
肽酰位(P): 结合肽酰-tRNA
催化肽键生成, 兼有酯酶活性
空载tRNA排除位 (真核无E位)
5′
50S
转
肽50S
酶
E PA
氨酰位(A): 结合氨酰-tRNA
3′mRNA
三、tRNA是运输氨基酸的工具
tRNA的特点:
分子量最小:60~90个碱 基
1. 含有较多的稀有碱基
3 ´端有20~250个 多聚腺苷酸(PolyA) 的“尾状”结构:具有 维持mRNA翻译模板的活 性 *(组蛋白除外)
翻译时是从mRNA编码区的起始密码子开始至终止密 码子结束。
遗传密码(genetic code):指mRNA分子中从5´→3´端记数, 三个相邻的核苷酸为一组,代表某中氨基酸或其它信息, 这相邻的三个核苷酸称为一个遗传密码。
mRNA
K+、 Mg2+
肽酰转移酶
转位 酶
一、 mRNA是蛋白质合成的直接模板
(一)mRNA的一般特点:
1. 种类繁多 2. 大小不一:500~6000
个碱基 3. 半衰期短:原核生物
1~3分钟,真核生物数 小时或几天 4. 占细胞总RNA:1%~2% 5. 真核mRNA的5´端有N7甲基鸟苷的“帽状”结 构:具有稳定mRNA及有 助于翻译起始的作用
第二节 肽链的生物合成过程
一、原核生物的肽链合成过程
原核生物翻译过程的各种蛋白质因子及其功能
种类
功能
IF-1 起始因子
IF-2
占据氨基酰位(A位),防止防止氨酰-tRNA过早地结合到A 位
促进fMet-tRNAifMet与核糖体30S小亚基结合
IF-3 结合核糖体30S小亚基,促进大、小亚基分离,提高肽酰位 (P位)对fMet-tRNAifMet的敏感性
第十三章 蛋白质的生物合成(翻译)
Biosynthesis of Protein or Translation
蛋白质生物合成的概况
1. 概念:以mRNA为模板合成蛋白质的过程,又称翻译。 2. 原料:20种氨基酸(1954年 Paul Zamecnik等) 3. 中介分子:tRNA、mRNA、rRNA 分子(1958年M.B.Hoagland等)。
1. 通用性(universality)
5.摆动性(wobble)
密码子与反密码子的摆动配对现象
tRNA反密码子的第1位碱基 I
U G AC
mRNA密码子的第3位碱基 U,C,A A,G U,C U G
二、核糖体(rRNA)是蛋白质合成的场所
(一)rRNA的特点 1. 种类:原核生物有
5S 、 23S、16S rRNA;真核生物有 28S、18S、5.8S、 5S rRNA 2. 含量最多:占细胞 总RNA 80%~90% 3. rRNA与蛋白质构成 核糖体
肽链合成方向:N→C
5′ AUG GGC
UAC C C G
O
~ H3C-S-CH2CH2-CH-C
OHC NH
HNH—CH2—CO~
3′mRNA
(三)转位酶催化核糖体移位
原核生物由延长因子G(80kD)催化 真核生物由延长因子2(100kD)起作用
5′ AUG GGC
UAC CCG
3′mRNA
O
~ H3C-S-CH2CH2-CH-C HNH—CH2—CO~
2.连续性(commalessness)
谷氨酰胺(CAG)
插入 谷氨酰胺(AAC) 缺失 精氨酸(AGU)
苏氨酸(ACA)
3 .简并性(degeneracy)
同义密码子: 脯氨酸:CCU、CCC、CCA、CCG
脯氨酸(CCU)
组氨酸(CAC)
4.通用性(universality)
遗传密码的特点
遗传密码供有多少个呢?
遗传密码类别
遗传密码
代表的信息 说明
起始密码:AUG
起始信号及氨 (真核)代表
基酸信息
Fra Baidu bibliotek蛋氨酸
(原核)代表
甲酰蛋氨酸
终止密码:UAA、UAG、UGA 终止信号
UGA还代表硒代 半胱氨酸
余下的密码
只代表氨基酸 信息
(二)遗传密码的特点
1. 方向性(directionality)
2. 5´端大多为pG, 3´端均为-CCA
3. 反密码子的第一位碱 基常出现次黄嘌呤 (I)
4. 细菌中有30~40种 tRNA;真核细胞中 有40 ~ 50种tRNA。
D臂: 氨酰-tRNA合成 识别位点
氨基酸臂: 与氨基酸结合
TψC环(臂): 与核蛋白体rRNA结合
反密码子: 识别并结合mRNA密码子
64个遗传密码(1961~1966Nirenberg等) 4. 合成方向:从肽链的N端到C端(1961年Howard Dintzis) 5. 合成场所:核糖体 6. 合成体系建立:(1973~1976年)
第一节 蛋白质生物合成的基本条件
20种aa
氨酰tRNA
ATP、GTP
合成酶
tRNA
各种因子
核糖体