毛细管电泳_质谱联用技术的新进展(重要)

21世纪初毛细管管电色谱-质谱联用法（CEC-MS）发展起来， CEC可以不用含有非挥发性缓冲盐的流动相，仍然具有的高选择性及 高分离能力的特点而言，有望解决背景电解质的问题。
CE-MS的发展
•CE-MS质谱类型的研究进展
在MS方面,几乎各种不同类型质量分 析器的质谱仪都可与CE联用,其中三重四极杆 质谱( TQ-MS )和离子阱质谱( IT-MS )以其 仪器简单、分析速度快的特点应用最为广泛;
总结和展望
• 对于CE-MS未来的发展趋势, 主要仍将集中在提高CE的分离能力、新 接口技术以及应用研究方面。
(1)毛细管涂层材料的发展:通过对毛细管进行涂层可有目的地减弱非 特异性吸附, 同时还可控制电渗流(EOF) , 提高分离效率和重现性。
(2)通过在线富集或者与其他提取富集技术联用,进一步提高CE-MS的选 择性和灵敏度。
CE-MS 的联用
虽然 CE在柱效方面比HPLC更好，但CE如果用对照品比对 定性时存在重复性差、UV检测限低等缺点；
而质谱(MS)检测不仅有较高的灵敏度, 同时具有较强的 定性能力,能够提供样品的结构信息.所以CE-MS是在改进CE的缺 点基础上实现的强强联合，为近年来的研究热点。
CE-MS的发展
• 无鞘液接口技术由于不存在任何稀释效应而逐渐受到研究者的青睐。
• Fana li等设计了一种加压的液接型接口。液接型接口是无鞘液接口 技术中比较特别的一种。与其他无鞘液接口相比, 液接型接口可以 通过液接液体来改变CE 运行缓冲液的组成, 使其满足电喷雾离子源 的要求。
芯片CE与ESI-MS联用的方法主要分为两类: 一类是将ESI源和CE 微芯片整合在一起, 另一类 是把毛细管喷雾器附加在CE 微芯片内。后者的应 用更为广泛, 其优势在于更有利于装置的微型化。

毛细管电泳技术及应用（生物化学与分子生物学专业）摘要：本文对毛细管电泳技术及其在氨基酸分析检测、多肽分析检测及药物检测中的应用作了综述。

关键词：毛细管电泳；氨基酸；多肽；药物Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｅｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｐｒｉｎｃｉｐｌｅ,ｓｅｐａｒａｔｉｎｇｍｏｄｅａｎｄｄｅｔｅｃｔｉｎｇｔｅｃ-ｈｎｏｌｏｇｙｏｆｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｗｅｒｅａｎａｌｙｓｅｄ.Ａｒｅｖｉｅｗｗａｓｍａｄｅｏｎｔｈｅｒｅｃｅｎｔａｄｖａｎｃｅｓｏｆｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｉｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆa min o a c id、ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ、p r o te in s an d me d ic in e s ,ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎ,ｐｕｒｉｔｙｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ,ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎａｌｙｓｉｓ,ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃｐｏｉｎｔｄｅｔｅｒ-ｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:Ｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ; a min o a c id;Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ; p r o te in s ; me d ic in eｅｐａｒａｔｉｏｎ;Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,ＣＥ)是Neuhoff等人于1973年建立的毛细管均一浓度和梯度浓度凝胶用来分析微量蛋白质的方法，是一类以毛细管为分离通道,以高压直流电场为主要驱动力的液相分离技术。

相比传统电泳和高效液相色谱(ＨＰＬＣ),它具有高效、快速、高灵敏度、高度自动化等特点,并且所需样品量和溶剂消耗少、运行成本低、对环境污染小,在一台ＣＥ仪器上可兼容多种分离模式,因此适用样品范围广,已被广泛应用于生物、化学、医药、食品、环保等领域。

近年来，随着科学技术的不断发展，各种分析检测技术也得到长足发展，基于毛细管电泳技术的各种分析检测方法发展迅速。

大。

（1）高效塔板数目在105-106 片/m 间，当采用CGE 时
系统和数据处理系统。

定性，pH在4-10之间，硅醇基的解离
间过短，峰面积太小，分析误差
作用力的协同作用。

这种相
5）某些质谱技术可以给出多电荷离子，对分析大分子如糖
芯片和微流控分析芯片）。

1994年始，美国橡树岭国家实验室Ramsey等在M
药物合成中带入的杂质和药物的降解产物通常与药物有相似
向和课题。

可喜的是，这方面的工作已开始启动，CE一HPLC、CE一MS联用己取得高效率、高质量的分析成果。

经过科学工作者的不懈努力，一个药物分析领域的新技术快速发展时期即将到来。

电极槽和毛细管内的溶液为缓冲液，可以加入有机溶剂作为改性剂，以及加入表面活性剂，称作运行缓冲液。 运行缓冲液使用前应脱气。电泳谱中各成分的出峰时间称迁移时间。胶束电动毛细管色谱中的胶束相当于液相色 谱的固定相，但它在毛细管内随电渗流迁移，故容量因子为无穷大的成分最终也随胶束流出。其他各种参数都与 液相色谱所用的相同。
此外，还有一类基于芯片的二维分离系统主要应用于蛋白质酶解物的分离分析。
除上述分离模式外，芯片自由流电泳也是芯片电泳分离蛋白质的重要方法。芯片自由流电泳是指在芯片中通 过外加电场使样品随缓冲液连续流动的同时沿电场方向进行电迁移，从而按照电泳淌度不同实现分离的电泳分离 模式。Raymond等采用芯片自由流电泳模式分离了人血清蛋白、缓激肽和核糖核酸酶A，其分离长度为3.1 cm，流 出时间为62 S。Kobayashi等采用自由流电泳的分离模式在一个体积为56.5 mm×35 mm×30 mm的微分离室 (60uL)中实现了持续的蛋白质分离，并用羟丙基甲基纤维素涂覆来抑制蛋白质吸附，在25 min内有效分离了细胞 色素C和肌红蛋白。最近，Kohl．heyer等H 3。制作了一种自由流等电聚焦分离蛋白质的玻璃芯片，成功地将人 血清白蛋白(pI=4.4)与等电聚焦标记物(pH 3和9)分离。
仪器要求
所用的仪器为毛细管电泳仪。正文中凡采用毛细管电泳法测定的品种，其所规定的测定参数，除分析模式、 检测方法(如紫外光吸收或荧光检测器的波长、电化学检测器的外加电位等)应按照该品种项下的规定外，其他参 数如毛细管内径、长度、缓冲液的pH值、浓度、改性剂添加量、运行电压或电流的大小、运行的时间长短、毛细 管的温度等，均可参考该品种项下规定的数据，根据所用仪器的条件和预试验的结果，进行必要的调整。
检测方法
毛细管电泳通常用到的检测方法有吸收光谱，荧光光谱，热镜，拉曼光谱，质谱和电化学方法。