柑橘黄龙病LAMP快速检测方法的建立及应用_黄丽

柑橘黄龙病菌亚洲种微滴数字PCR检测方法的建立
宋晓兵;黄峰;崔一平;彭埃天;岳茂峰
【期刊名称】《农学学报》
【年(卷),期】2024(14)1
【摘要】柑橘黄龙病是世界柑橘产业的毁灭性病害,带病苗木、带菌接穗和田间病株是病害的初侵染源,建立一套病原菌超灵敏检测方法对柑橘黄龙病的早期预警及防控具有重要意义。

根据柑橘黄龙病亚洲种16S rDNA基因序列设计特异引物,建立基于微滴数字PCR技术的检测方法,并评价该方法的灵敏度和检测准确性。

结果表明,研究建立的柑橘黄龙病亚洲种微滴数字PCR检测方法特异性强、灵敏度高,其检测灵敏度是荧光定量PCR的10倍。

建立的微滴数字PCR检测技术为柑橘种质资源的早期黄龙病检测提供了一种新方法。

【总页数】5页(P39-43)
【作者】宋晓兵;黄峰;崔一平;彭埃天;岳茂峰
【作者单位】广东省农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广东省植物保护新技术重点实验室;广东石油化工学院
【正文语种】中文
【中图分类】S41
【相关文献】
1.三种 PCR 方法检测柑橘黄龙病菌的效果比较
2.1种布鲁氏菌微滴式数字PCR检测方法的建立
3.柑橘黄龙病菌亚洲种16S rDNA和16S-23S rDNA间隔区的
PCR-RFLP及序列分析4.畜禽养殖粪污中典型致病菌的三重微滴式数字PCR定量检测方法的建立5.柑橘黄龙病菌双重实时荧光PCR检测方法的建立
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柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定柳州市是广西重要的柑橘生产基地之一，然而柑橘黄龙病是严重威胁柑橘产业的一种重要病害。

柑橘黄龙病是由黄龙病杆菌引起的一种传播较快的细菌性病害，其在柳州市柑橘园中的发生频率较高。

对柑橘黄龙病的快速检测及代谢物鉴定具有重要意义。

QPCR（Quantitative PCR）是一种快速准确的分子生物学方法，可用于检测柑橘黄龙病病原体的存在及数量。

QPCR方法结合了PCR技术和荧光探针技术，能够在短时间内明确检测到目标DNA的数量，并且还可以区分出不同的细菌菌株。

QPCR技术被广泛应用于植物病原体的检测中。

针对柳州市柑橘黄龙病的QPCR检测，首先需要针对黄龙病杆菌的DNA进行提取。

提取后的DNA样品可以直接用于QPCR检测，通过引入特定的引物和探针，配合荧光检测系统，即可在PCR反应过程中定量检测病原体DNA的存在量。

通过对已发病和未发病柑橘叶片进行QPCR检测，可以判断病原体在植物体内的数量，从而评估病害的程度和传播速率。

除了快速检测柑橘黄龙病病原体的存在数量外，还有必要对患病柑橘的代谢物进行鉴定。

病害对植物的影响不仅仅局限在外部症状上，还会影响植物内部的代谢活动。

通过代谢物鉴定可以全面了解患病柑橘的生化变化，为病害防治提供更多的参考信息。

代谢物鉴定的方法有很多种，包括色谱-质谱联用技术（GC-MS、LC-MS）、核磁共振技术（NMR）、红外光谱技术（IR）等。

这些方法都能通过分析样品中不同代谢物的特征峰或峰面积，鉴定出代谢物的种类和含量，从而揭示植物的生化变化。

对于柑橘黄龙病，代谢物鉴定可以分析出植物叶片中的酚类化合物、萜类化合物、胺类化合物等代谢产物的变化情况。

这些化合物的变化不仅反映了植物的生理状态，还可以作为植物对病害的抗性指标。

通过代谢物鉴定，可以找到与抗性相关的代谢产物，为后续的遗传改良和植物保护提供重要的信息。

柳州市柑橘黄龙病的QPCR检测及代谢物鉴定是一项有益的研究工作。

柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定【摘要】柑橘黄龙病是柑橘树的一种严重病害，对柳州市的柑橘产业造成了严重威胁。

本文通过QPCR技术和代谢物鉴定方法，对柳州市柑橘黄龙病进行检测和研究。

在病原鉴定方法探讨中，探讨了QPCR技术在柑橘黄龙病检测中的应用，并详细介绍了代谢物鉴定在研究中的重要作用。

实验方法部分详细描述了柑橘黄龙病代谢物鉴定的步骤和流程，结果分析部分对代谢物鉴定结果进行了详细的分析。

结论部分总结了柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定的重要意义，并展望了未来的研究方向。

通过本文的研究，将为柑橘黄龙病的防控提供重要的实验依据和理论支持。

【关键词】关键词：柳州市、柑橘、黄龙病、QPCR检测、代谢物鉴定、病原鉴定、技术应用、实验方法、结果分析、研究意义、未来展望。

1. 引言1.1 柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定的背景柳州市位于广西壮族自治区，是我国重要的柑橘产区之一，然而近年来，柳州市柑橘黄龙病的发生严重影响着柑橘产业的发展。

柑橘黄龙病是由类花叶病毒引起的一种病害，严重危害柑橘树的生长和果实的品质。

除了病原检测外，代谢物鉴定也扮演着重要的角色。

通过分析柑橘树受到黄龙病侵染后的代谢物变化，可以深入了解病程的发展和机制，为寻找防治病害的新方法提供参考。

本研究就是基于QPCR技术和代谢物鉴定方法，探讨柳州市柑橘黄龙病的病原鉴定和机制研究，旨在为柑橘产业的健康发展提供科学依据和技术支持。

1.2 研究目的研究目的：本研究旨在探究柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定的方法和应用，旨在提高黄龙病的检测准确性和效率，为柑橘黄龙病的防控提供科学依据。

具体目的包括：1. 探讨柳州市柑橘黄龙病病原鉴定方法，提高病原检测的灵敏度和特异性；2. 研究QPCR技术在柳州市柑橘黄龙病检测中的应用，评估其在实际检测中的准确性和稳定性；3. 探讨代谢物鉴定在柳州市柑橘黄龙病研究中的作用，揭示病原与寄主之间的代谢互作机制；4. 探讨柑橘黄龙病代谢物鉴定的实验方法，总结代谢物鉴定的关键步骤和注意事项；5. 分析代谢物鉴定结果，揭示柑橘黄龙病的代谢物特征和变化规律。

柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定柳州市是中国柑橘产业的重要基地之一，柑橘黄龙病是造成柑橘感染的一种病害，严重影响了柑橘的产量和品质。

为了及时发现柑橘黄龙病的感染情况并对其进行有效的控制，近年来，柳州市开展了柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定工作。

下面将介绍柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定的相关情况。

柳州市柑橘黄龙病QPCR检测的工作原理是利用定量PCR技术对柑橘叶片中的黄龙病菌进行快速、准确的检测。

QPCR技术是在传统PCR技术基础上发展而来的一种新型PCR技术，其最大特点是能够实现对目标DNA的定量检测，具有高灵敏度、高特异性、高准确性等优点。

通过QPCR检测，可以快速获得柑橘叶片中黄龙病菌的数量信息，为进一步的病害防控提供科学依据。

针对柳州市柑橘黄龙病的QPCR检测工作，相关部门首先对柑橘树叶采样进行标本处理，提取出叶片中的DNA。

随后，利用QPCR仪器进行PCR扩增反应，通过实时监测扩增曲线，得出黄龙病菌DNA的数量。

根据检测结果，对不同地区、不同柑橘品种的黄龙病感染情况进行分析，及时采取相应的防控措施，保障柑橘产量和品质。

除了QPCR检测外，柳州市还开展了柑橘黄龙病代谢物鉴定工作。

柑橘黄龙病是由黄龙病细菌引起的一种植物病害，其感染会导致柑橘叶片内部代谢物的显著变化。

通过对柑橘叶片进行代谢物分析，可以发现黄龙病感染对柑橘植株代谢活动的影响，为进一步研究其发病机制提供重要参考。

在柑橘黄龙病代谢物鉴定工作中，柳州市相关部门首先对不同状态的柑橘叶片进行采样，采用色谱质谱联用技术对其代谢物进行分析。

通过比对感染和未感染的柑橘叶片代谢物谱图，可以鉴定出感染黄龙病后柑橘叶片中代谢物含量的变化情况，进而揭示柑橘黄龙病的发病机制和传播途径。

通过柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定工作，柳州市已经取得了显著的成效。

QPCR检测技术的应用大大提高了柑橘黄龙病的检测效率和准确性，为病害的防控提供了可靠的数据支持。

快速检测柑桔黄龙病病原的研究
邓晓玲;梁志慧;唐伟文
【期刊名称】《华南农业大学学报》
【年(卷),期】1999(000)001
【摘要】应用PCR技术对柑桔黄龙病病原DNA进行体外扩增,可建立一套快速、准确、有效的检测该病原的方法.研究结果表明:PCR技术对柑桔黄龙病病原的检测具有很强的特异性,只有感染了黄龙病病原的样品,PCR才呈阳性反应.文章报道了应用PCR技术能检测已带病但尚未显症状的柑桔黄龙病病株.该检测技术可以对柑桔黄龙病进行早期诊断,及早地控制带病苗木的传播,这对选育无病苗木及病害的综合治理具有很高的应用价值.
【总页数】4页(P1-4)
【作者】邓晓玲;梁志慧;唐伟文
【作者单位】华南农业大学资源环境学院,广州,510642;华南农业大学食品科学系;华南农业大学资源环境学院,广州,510642
【正文语种】中文
【中图分类】S432.42
【相关文献】
1.应用PCR技术检测柑桔黄龙病病原的研究 [J], 邓晓玲;唐伟文
2.柑桔黄龙病病原和检测方法研究进展 [J], 邹敏;周常勇
3.利用PCR检测柑桔黄龙病病原研究 [J], 邓晓玲;唐伟文
4.美研究人员即将完成柑桔黄龙病病原基因排序 [J], 海青
5.柑桔黄龙病病原遗传多样性研究进展 [J], 谭锦;周常勇
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柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定柳州市柑橘黄龙病（HLB）是柑橘类植物的一种严重病害，由快速生长的细菌引起，会导致柑橘树的叶片变黄、树干萎缩，最终导致果实变小、变形、产量减少甚至死亡。

目前，该病在世界范围内造成了巨大的经济损失，因此对其进行有效的检测和防治是非常重要的。

在柳州市柑橘黄龙病的QPCR检测中，首先需要从疑似感染的柑橘树叶片上提取DNA，并使用特定的引物和探针进行PCR扩增和检测。

通过实时监测PCR反应产生的荧光信号，可以得到目标基因的拷贝数，并且可以量化到非常低的水平。

这种方法可以大大提高病害的早期诊断率，有助于采取及时的防治措施，减少病害的传播。

二、柳州市柑橘黄龙病代谢物鉴定在了解柑橘黄龙病病原菌对柑橘植物的侵染机制时，代谢物鉴定显得尤为重要。

病原菌在侵染宿主植物时，会释放特定的代谢产物，并且这些代谢产物能够对宿主植物的生长和发育产生影响。

对柑橘黄龙病病原菌的代谢产物进行鉴定，可以揭示其对柑橘植物的侵染机制，有助于进一步防治该病害。

通过质谱技术和色谱技术，可以对柑橘黄龙病病原菌释放的代谢产物进行鉴定和分析。

质谱技术主要包括质谱-质谱联用技术（MS-MS）和气相色谱-质谱联用技术（GC-MS），可以高效、快速地对复杂的代谢产物样品进行鉴定和分析，从而揭示病原菌的侵染机制。

色谱技术也可以用于对柑橘植物组织中代谢物的定量分析，这些代谢物包括糖类、植物激素和抗氧化物质等，有助于了解柑橘植物在感染柑橘黄龙病病原菌后的代谢变化。

通过对代谢产物的鉴定，可以深入了解柑橘黄龙病病原菌对柑橘植物的侵染机制，有助于发现植物病害的治理靶点，并为病害的防治提供重要依据。

柳州市柑橘黄龙病的QPCR检测和代谢产物鉴定技术将为该病害的早期检测和病原菌的侵染机制研究提供重要的技术支持，有助于保护柳州市的柑橘产业，促进柑橘产业的健康发展。

希望在科学家和农业专家的共同努力下，能够尽快找到有效的防治方法，减少柑橘黄龙病给柳州市柑橘产业带来的损失。

柳州市柑橘黄龙病QPCR检测及代谢物鉴定柳州市是广西柑橘生产重要区域之一，然而柑橘黄龙病（HLB）却给该地的柑橘生产带来了严重的危害。

为及时发现和防控HLB的传播，需要进行快速、准确、可靠的检测方法的研究和开发。

本文将介绍基于QPCR技术的HLB检测方法，并探究HLB病株和健康株柑橘代谢物差异的研究。

一、QPCR技术检测HLBQPCR技术是通过检测目标基因的转录本数量，利用光学原理进行实时检测的一种技术。

与传统PCR技术相比，QPCR技术具有高灵敏度、高特异性、高精确度和高可靠性等优势。

针对HLB检测，目前已经发展出多个QPCR检测方法。

其中，基于HLB病原体"Ca. Liberibacter asiaticus"16S rDNA基因的QPCR检测方法广泛应用。

该方法利用特异性引物和探针，鉴定目标DNA序列在PCR反应中的扩增情况。

检测结果可通过阈值周期数（Ct值）判定是否为阳性样本。

对于阳性样本，还可以通过浓度曲线法计算目标DNA的浓度，进一步确定感染程度。

二、HLB病株和健康株柑橘代谢物鉴定代谢物分析是研究生物学、生物化学和生物化学工程的重要手段之一。

针对HLB病株和健康株柑橘，可以通过代谢物分析鉴定它们之间的差异性。

近年来，大规模代谢组学研究发现，HLB病株与健康株柑橘在多种代谢物上存在显著差异。

例如，HLB病株的柑橘酸、谷氨酸和丙氨酸等氨基酸含量减少，而苹果酸等含量增加；HLB病株还存在乙酰半胱氨酸、橙皮素和橙皮酮等代谢物积累，这些代谢物与健康株柑橘相比明显偏高。

此外，HLB病株与健康株柑橘在某些生理代谢方面也存在差异。

例如，HLB病株光合速率减慢、呼吸率增加、叶绿素含量下降等。

这些代谢物和生理参数的变化不仅可以揭示HLB病株的生理和代谢状况，同时也为HLB的防治提供了一定的理论基础。

在HLB病株和健康株柑橘代谢物鉴定的研究中，液质联用技术是广泛使用的方法之一。

该技术利用质谱仪和色谱仪的联用特点，分析样品中的化合物。

工作犬搜索柑橘黄龙病训练及使用规范柑橘黄龙病是柑橘树的一种常见病害，严重影响柑橘产量和质量。

为了早期发现、及时防控柑橘黄龙病，训练和使用工作犬来柑橘黄龙病已成为一种有效的手段。

以下是工作犬柑橘黄龙病的训练和使用规范。

一、训练1.犬只选拔：选择聪明、善于嗅觉、耐力强、健康且没有过多攻击性的犬只作为工作犬。

2.基本训练：首先进行基本听从指令、行走、停留等基本训练，确保工作犬能够听从指令和轻松行走。

3.嗅觉训练：使用柑橘叶片或病变部位作为训练样本，逐渐让工作犬熟悉黄龙病的气味。

通过正确认识和鼓励，帮助工作犬建立对黄龙病气味的辨别能力。

4.场地训练：将工作犬带到柑橘园等实地进行训练，让工作犬适应实际工作环境。

通过逐步增加训练难度和区域，提高工作犬的能力和反馈准确性。

5.人员配合训练：与工作犬训练师、柑橘园管理人员等协同配合进行训练，使工作犬适应在柑橘园中并准确指出柑橘黄龙病。

二、使用规范1.工作犬证书：经过训练后，工作犬应取得相关的工作犬证书，证明其具备柑橘黄龙病的能力。

2.工作犬护理：柑橘黄龙病可能存在传染风险，工作犬在过程中需要保持健康，定期体检，并按时接种相关疫苗。

在工作结束后，对工作犬进行彻底的清洁和消毒，以避免传播病菌。

3.工作时间和环境：工作犬的工作时间和环境应得到合理安排和保障，避免过度劳累和恶劣环境对工作犬的伤害。

4.工作犬指令：工作犬应能够听从指令并准确指出柑橘黄龙病的所在位置，工作人员应熟悉与工作犬的沟通方式和指令，确保工作效果。

5.数据记录与分析：对工作犬结果进行数据记录和分析，及时了解进展和工作犬的准确性，为柑橘黄龙病的防控提供参考。

6.结果应用：根据工作犬结果，对发现的柑橘黄龙病进行标记和隔离，同时采取相应的防控措施，确保柑橘园的产量和质量。

总结起来，工作犬柑橘黄龙病需要经过系统的训练和使用规范。

工作犬需要具备能力和听从指令的素质，工作人员需要了解犬只的训练方法和指令，确保工作犬在柑橘园中发挥作用。

单克隆抗体-胶体金标记技术快速检测柑桔黄龙病
廖俊杰;陈建华;彭英;赵素兰;李进进
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2005(21)12
【摘要】应用单克隆抗体一胶体金标记技术,采用徒手切片法和斑点试验法检测柑桔黄龙病获得成功。

该方法检测速度快,操作简单,成本低,适合柑桔种苗大批量检测和田间普查。

采用单抗金标技术对田间栽培的柑桔品种、柑桔实生苗、试管微芽嫁接苗、热处理脱毒后的嫁接苗进行检测,结果表明田间栽培的6个柑桔品种不论是否显示黄龙病症状均检测到柑桔黄龙病病菌,而消毒种子播种所得实生苗及试管微芽嫁接苗为无病株,带病株经过30d 40℃恒温热处理后产生的新梢及其嫁接苗绝大部分也是无病株。

【总页数】3页(P336-338)
【关键词】柑桔黄龙病;单克隆抗体;胶体金;快速检测
【作者】廖俊杰;陈建华;彭英;赵素兰;李进进
【作者单位】广东轻工职业技术学院;汕头经济特区华茵生物工程有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】S436.661.1;S852.43
【相关文献】
1.快速检测柑桔黄龙病病原的研究 [J], 邓晓玲;梁志慧;唐伟文
2.基于可见与近红外光谱联用的柑桔黄龙病快速无损检测研究 [J], 刘燕德;肖怀春;
孙旭东;韩如冰;叶灵玉;黄亮;肖禹松;廖小红
3.柑桔黄龙病PCR快速检测技术的建立与应用 [J], 孟祥春;钟云;刘岩;易干军
4.毒品快速检测技术——胶体金标记苯丙胺单克隆抗体免疫快速检测板 [J],
5.柑桔黄龙病LAMP快速检测方法的建立 [J], 孔德英;孙涛;李应国;滕少娜;陆丽华;邓朝晖
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