Western 印迹法检测蛋白质

糖凝胶电泳，将含有DNA片断的凝胶放入变性 溶液变性后，将硝酸纤维膜(NC)膜放在胶上， 上面放吸水纸巾，利用毛吸作用使胶DNA转移 质NC膜上，然后利用杂交技术检测NC膜上的 DNA片断。 基因组中基因的定性及定量分析，基因突变分 析及限制性片断长度多态性（RFPL）分析。
RNA印ห้องสมุดไป่ตู้技术
Northern blotting 与Southern blotting相似，但不需要限制 性内切酶切割。
应用 用于基因表达的特异性分析和定量分析。
② ③ ①
分子杂交实验
蛋白质免疫印迹法
Western blotting: 免疫印迹法是检测蛋白质 混合溶液中某种特定目的蛋白质的定性方 法，也可以作为确定同一蛋白质在不同细 胞或者同一种细胞不同条件下的相对含量 的半定量方法。由于其检测往往需要抗体， 所以也被称为免疫印迹技术。
免疫印迹只能检测目的蛋白的相对含量 测定相对含量时，需要内参照 选择合适的反应条件：SDS-PAGE胶浓度；
转移膜的选择；转移时间的选择 注意电极的正负极 抗体反应时，注意驱除反应袋内气泡 操作要轻柔。
蛋白质免疫印迹法
应用 1 检测样品中特异蛋白存在与否 2 细胞中特异蛋白的半定量分析 3 蛋白质分子相互作用的研究
蛋白质免疫印迹法
实验操作 1 细胞裂解物的准备； 2 细胞裂解物的蛋白定量； 3 细胞裂解物的SDS-PAGE； 4 蛋白质的转移； 6 目的蛋白质的检测。
蛋白质免疫印迹法
蛋白质免疫印迹法
Western 印迹法检测蛋白质
印迹技术
1975，Edwen Southern提出分子印迹概念。 概念：将存在于凝胶中的生物大分子转移
（印迹）于固定化介质上并加以检测分析 的技术。目前主要应用于DNA,RNA，蛋 白质的检测。
DNA印迹技术
Southern blotting 基因组DNA经限制性内切酶消化后，进行琼脂