营养实验一
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实验一 电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量
氨基酸有氨基及羧基两性基团,它们相互作用形成中性内盐,利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出来酸性,用氢氧化钠标准溶液滴定后定量,根据酸度计指示pH值,控制终点。
试剂
1、甲醛(36%)。
2、氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]
仪器
1、酸度计2、20mL移液管;3、碱式滴定管;4、100mL容量瓶;
5、250mL烧杯;
测定方法
1、吸取5mL试样,置于100mL容量瓶中,加水至刻度,混匀,备用。
2、吸取上述稀释液20.00mL置于200mL烧杯中,加水60mL水,插入电极,开动磁力搅拌器,用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH)=0.050mol/L]滴定至酸度计指示pH8.2,记录消耗氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升数,(可计算总酸含量)。
3、向上述溶液中准确加入10.0mL甲醛溶液,混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]继续滴定至pH9.2,记录加入甲醛后滴定所消耗氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升数。
4、取80mL水,先用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]滴定至酸度计指示pH8.2,再加入10.0mL甲醛溶液,混匀,再用氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]滴定至pH9.2,记录加入甲醛后滴定所消耗氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=0.050mol/L]的毫升数。
六、数据记录与计算
(一)数据记录:见下表
表:氨基酸态氮测定记录表
项目 样品 空白
加入甲醛后滴定所消耗
氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数
标准氢氧化钠溶液浓度(mol/L)
(二)结果计算
试样中氨基酸态氮的含量为:
1001005014.0321VCVVX
式中:X—试样中氨基酸态氮的含量,g/100Ml;
V1—测定用试样稀释液加入甲醛后消耗标准碱液的体积,mL;
V2—测定空白试验加入甲醛后消耗标准碱液的体积,mL; C—氢氧化钠标准溶液的浓度,mol/L;
V3-试样稀释液取用量
0.014—与1.00 mL氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH )=1.000mol/L]相当的氮的质量,g;
七、注意事项
1、加入甲醛后放置时间不宜过长,应立即滴定,以免甲醛聚合,影响测定结果。
2、由于铵离子能与甲醛作用,样品中若含有铵盐,将会使测定结果偏高。
3、计算结果保留两位有效数字。
八、实验结果与分析讨论
(一)检测结果及质量评价
说明检测结果,根据检测结果和产品质量标准,对试样质量作出评价。
(二)分析讨论
试分析实验中可能导致误差的因素及应对措施?