球虫实验

鸡球虫病的诊断与防治鸡球虫病是由球虫寄生于鸡的唾液腺和皮肤引起的一种寄生虫病。

该病具有较强的传染性和致死性，严重威胁了鸡的健康和养殖业的发展。

及时诊断和有效防治鸡球虫病对于保障鸡的健康，促进养殖业的稳定发展具有重要意义。

本文将介绍鸡球虫病的诊断和防治措施。

1. 临床症状鸡球虫病主要通过观察鸡的临床症状来进行初步诊断。

患病鸡的主要症状包括：唾液腺肿大、饮水困难、啄食无力、体温升高、羽毛蓬松、生长迟缓、消瘦和死亡等。

饲养密集的鸡群更容易发生鸡球虫病，对于密集饲养的鸡群需要加强观察，及时发现并进行诊断。

2. 实验室检测除了观察临床症状外，还可以通过实验室检测来明确诊断鸡球虫病。

常用的实验室检测方法包括：唾液腺组织切片检查，皮肤切片检查，唾液腺针吸检查和血清免疫学检测。

这些检测方法可以帮助饲养员明确鸡群是否患有球虫病，有针对性地进行防治工作。

3. 疫情调查在发现鸡球虫病病例后，需要及时进行疫情调查，了解疾病的传播情况、患病鸡的数量和分布等。

通过疫情调查可以帮助饲养员判断疫情的发展趋势，有针对性地采取防治措施，防止疫情扩大。

1. 环境卫生鸡球虫病主要是通过鸡舍和饮水器等环境传播的，保持鸡舍的清洁卫生和饮水器的清洁卫生是预防鸡球虫病的重要措施。

饲养员应定期清理鸡舍，清洁饮水器，保持环境卫生，减少球虫的传播。

2. 防疫措施饲养员在日常管理中需要加强鸡的防疫工作，定期进行疫苗接种，提高鸡的免疫力，预防球虫病的发生。

对于患有球虫病的鸡群，需要及时隔离治疗，防止疫情扩大。

3. 药物防治当发生鸡球虫病疫情时，需要根据实际情况选择合适的药物进行防治。

常用的药物包括：杀球虫剂、抗寄生虫药物和抗菌药物等。

在使用药物进行防治时，需要严格按照药品说明书上的使用方法和剂量进行施药，避免滥用药物导致药物残留和药物抗性的产生。

4. 合理饲养管理对于密集饲养的鸡群，饲养员需要注意合理的饲养管理，减少鸡群的应激反应，保持鸡的健康状态，降低鸡球虫病的发生风险。

动物粪便中球虫卵囊的检测方法1 目的（适用范围）本方法适用于猪、禽、兔、犬、猫球虫病感染的检测。

2 依据（参考）标准《动物球虫病诊断技术》（GB/T 18647-2002）3 原理卵囊通常存在于宿主粪便中，从粪便中分离球虫卵囊最常用的方法为饱和食盐溶液漂浮法。

饱和食盐溶液密度高于卵囊密度，而低于粪便中大多数杂质，经离心或静置沉淀后，大部分杂质沉淀在容器底部，卵囊漂浮在悬浮溶液的表面，然后收集表层漂浮物；由于卵囊比重大于水的比重，所以表层漂浮物用自来水稀释离心后，卵囊沉淀富集于离心管底部即可得到大量球虫卵囊。

4 材料4.1 被检样品被检动物的新鲜粪便不少于30 g。

4.2 试剂耗材饱和食盐水、60目筛网、50 mL和100 mL烧杯、玻璃棒、15 mL离心管、自制铁丝吊环（或细菌接种环）、载玻片、盖玻片、香柏油、麦克马氏计数板。

4.3 仪器设备电子天平、托盘天平、低速离心机、1 mL移液器、显微镜、手动计数器。

5 检测方法5.1 定性检查5.1.1 取被检动物的新鲜粪便5 g，放入50 mL烧杯中，加入3倍体积的水，用玻璃棒搅拌均匀，经60目筛网过滤。

5.1.2 将滤液移入离心管中，在天平上平衡，于离心机上以3000 r/min离心3 min，弃上清液，在沉淀中再加入适量水，将沉淀吹起，平衡离心同上，弃上清液，如此重复2~3次至上清液清亮，弃上清液。

5.1.3 在沉淀中加入5倍体积的饱和食盐水，用玻璃棒将沉淀搅拌均匀，在天平上平衡，于离心机上以3000 r/min离心5 min，小心快速用铁丝吊环蘸取液膜，抖于载玻片上，盖上盖玻片，于100~400倍镜下检查。

5.1.4 结果判定：（1）若发现球虫卵囊，判为阳性，说明该动物已感染球虫，并可根据附录卵囊形态特征，初步确定为哪一属的球虫。

（2）若未发现球虫卵囊，需重复检查5次，仍未见球虫卵囊，本粪样可判为阴性。

5.2 定量检查5.2.1 对定性检查中呈现阳性的粪样进行定量检查。

兔球虫病是由多种艾美尔球虫寄生于兔的肝脏和肠道，引起以消瘦、贫血、下痢为主要症状的寄生虫病。

近年来，随着龙岩市规模兔场的增多，该病成为困扰养兔业发展常见且危害严重的疾病。

笔者现将一例兔球虫病的诊治情况报告如下。

1发病情况2010年3月20日，龙岩市某规模兔场450头50日龄左右的幼兔陆续出现食欲减退、消瘦、下痢。

发病3天后，食欲废绝，个别病兔出现四肢痉挛或麻痹，头向后仰，发出惨叫，迅速死亡。

场主认为发生急性胃肠炎，对病兔使用庆大霉素和环丙沙星等抗菌素治疗，未见明显好转，发病5天死亡幼兔75头，病情还有加重趋势。

2临床症状整个兔场的幼兔精神沉郁，食欲减退，剩料明显，轻赶伏卧不动，被毛粗乱，眼鼻分泌物增多，腹围增大，腹部臌胀，下痢，腹泻。

粪便呈褐色、有腥臭味，肛门和后肢的被毛粘着一些稀粪，部分笼底可见血痢粪便。

病兔虚弱、脱水、消瘦、贫血，可视黏膜苍白，对肝区触诊有痛感。

观察中发现有3只病兔突然出现转圈、翻滚、四肢痉挛划动、头向后仰等神经症状，尖叫几声倒地死亡。

3病理变化5只对已死兔和3只出现神经症状的病兔进行解剖，可见胃膨胀，内充满大量的液体和气体。

十二指肠、空肠、回肠和盲肠的肠壁血管充血，肠腔充气，呈急性卡他性肠炎，肠壁增厚，黏膜上可见充血、出血，肠黏膜有化脓性与坏死性病灶。

腹腔内有充满稀薄带有血色的液体。

肝脏肿大，肝表面及实质内有数量不等的白色或淡黄色，米粒至碗豆大结节性病灶，沿胆小管分布。

胆囊胀大，胆汁浓稠色暗，其他脏器未见病变。

4实验室检查无菌取病兔的肝、心直接涂片，经革兰氏染色后镜检未发现细菌。

无菌采集的肝、心病料接种于普通琼脂和麦康凯琼脂平板上，37℃培养24~48小时，镜检均未见细菌生长。

取病兔肝的结节病灶制成涂片，镜检可见大量不同发育阶段的球虫卵囊。

粪便中卵囊检查方法是取10克兔粪置于200亳升烧杯中，加饱加食盐水15亳升，用玻棒将粪便捣碎后，再加入180毫升饱和食盐水，混匀后用双层纱布过滤到其他烧杯内，静置45分钟后，用直径6~8毫米的小铁丝圈水平接触液面，沾取水膜，移放置载玻片上，盖上盖玻片，在40倍显微镜下观察，镜下可见有大量椭圆形，双层膜外壳，一端具有1个孔、中央内含1个原生质团块，大小为26~40微米×16~25微米不等的球虫卵囊。

粪便中卵囊的收集和纯化简介球虫感染鸡后，在宿主体内经裂殖生殖、配子生殖后形成带有卵囊壁的未孢子化卵囊，随粪便排出体外。

粪便中的卵囊由于密度小于饱和盐水，因而可以被后者漂浮起来；而卵囊的密度又大于稀释的盐水溶液，故而可以从稀释的盐水中沉淀下来。

根据此原理，利用饱和盐水漂浮粪便中的卵囊，然后将含卵囊的饱和盐水用水稀释后离心沉淀，即可将卵囊从粪便中分离和纯化。

材料塑料盆若干个（视所收集的粪便量而定）80目（60目、100目也可）和160目（或者180目）金属筛各一个搅拌用塑胶软铲一个不锈钢铲子一个1L塑料烧杯1-3个，100ml、500 ml塑料烧杯各一个离心罐（低速大容量离心机因平衡需要，需在任何离心时将6个罐平衡后全部放到支架上）报纸若干张尖头吸管玻璃棒（粗）或药品勺（不锈钢制）吹气软管（以上物品需在烤箱中80℃烘烤2h后使用）秤（婴儿秤）一台电子天平（普通天平也可）一台吹气设备饱和盐水（自来水加入过量食盐煮沸，冷却后分装至塑料桶或500 ml瓶中，注意防冬天温度过低造成盐水不饱和）2.5% 重铬酸钾溶液步骤1.用塑料盆收集接种后6.5-8天的粪便（本时间选取是针对柔嫩艾美耳球虫的，其他虫种请查阅文献，确定收集时间），搅拌均匀（若鸡只数目少，应在6.5天时在粪便收集盘中洒一些重铬酸钾溶液以保持粪便湿润），称重；2.称取2g粪便至塑料小烧杯中，加入60ml饱和盐水，搅拌均匀，充入改良麦克马氏板记数室，静止3min后在显微镜下计数；计算粪便的OPG（计数所的读数×200），估算粪便中卵囊总数；3.将粪便中加入5-10倍体积的自来水，搅拌均匀，然后用80目筛子进行过滤；此过程中需用塑胶软铲不停搅动，使大部分的水溶液滤过筛网，收集至一塑料盆；滤后的粪渣置于另一塑料盆；4.粪渣再加入自来水，如步骤3过滤；此过程重复2次（针对粪便量少者，可以增加一次以提高卵囊收集率），最后弃去粪渣；5.将所有的滤过液用160目的筛子进行二次过滤，滤液收集至塑料盆中；6.滤液静止3h或更长（不宜过夜，长时间浸泡对卵囊活力有影响；需过夜再继续操作者，应在滤液中添加重铬酸钾，至浓度在1-2.5%），然后快速倾去大部分上清（动作既快又稳，小心不得将沉淀倒掉）；7.将所得到的混悬液离心（3000rpm，8-10min或3600rpm，5min；以下离心均采用此设置），收集所有沉淀；8.用玻棒搅匀沉淀，加入少许饱和盐水，搅匀，再次添加并搅拌，至形成均匀的混悬液（一般加入的饱和盐水的体积为粪便沉淀的5倍，采用步骤10（2）时可以将加至离心罐容积上限）；9.离心漂浮卵囊；（后续的操作步骤10有两种，粪便沉淀量少者可采用第一种10（1），量大者可采取第二种10（2））10.（1）所得的含卵囊上清倒入一个大烧杯中，重复步骤8，离心后同样将上清收集至烧杯；并再重复一次，合并3次所得上清；将上清均匀分配至离心罐中，加入至少3倍体积的自来水，然后离心沉淀卵囊；10. (2) 用尖头吸管吸取上清表层漂浮的卵囊，所吸液体收集于一个烧杯中；至表层大部分卵囊漂浮物被吸走后，将剩余上清转移至另一大烧杯；沉淀搅匀后，倒回转移的饱和盐水，少量多次并搅拌，同步骤8，可补加盐水以弥补上清吸取转移走的盐水；如此再重复2次，合并3次所吸取的表层卵囊溶液，加入至少3倍体积的自来水，然后离心沉淀卵囊；11.所得卵囊沉淀因含有大量粪便等杂质，需再次用饱和盐水离心漂浮一次（若卵囊数量少于1千万，此步骤推荐用50ml离心管进行操作，以免丢失过多）；随后离心沉淀；12.两次漂浮沉淀后得到的卵囊沉淀用重铬酸钾溶液重悬，转移至小锥形瓶或盐水瓶中（重铬酸钾的体积根据卵囊的数量决定，每毫升所含卵囊不得超过100万，但可以多加）；13.接好吹气装置，置于28℃温箱或自制孵化箱中通气孢子化，时间为48小时（注意24h时添加水，补偿吹气孵化所蒸发的水）；孢子化完毕，将卵囊做好标记保存于4℃；14.做好善后事宜，如操作台和离心机的清洁、所用物品的清洁与归位、鸡只的剖杀与笼具的清洗等。

为抗体阴性。

在进行阻断率检测时，每次检测血清为采血当天检测，多次检测结果均出现负值，可能是试剂盒
各厂家猪瘟疫苗免疫后抗体阻断率呈明显上升趋势。

各组平均抗体阻断率
上述实验中，D组为A厂猪瘟活疫苗+B厂稀释液，免疫效果与A组和B组相比没有明显的差别。

表明B厂稀释液并没有达到其所宣传的增强免疫效果的作用。

上述实验中，B厂猪瘟活疫苗为三种疫苗中病毒含量最高的，但在免疫效果上并没有明显的优势，因此对
鸡场球虫病调查
江苏省常州市金坛区金城兽医站
过的病鸡，长期不得康复，生长发育受到严重的影响。

一些感染鸡群不产生明显的临床型球虫病，造成的隐性感染所带来的损失可能更大。

据统计，我国每年用于防治鸡球虫病的药费达数亿元人民币，占鸡病全部防治费用的近三分之一，而全球养禽业每年因为球虫病造成的损失高达数十亿美元。

一、材料与方法
（一）粪样采集
笔者以群体采样法，在常州某畜禽有限公司5个养鸡场不同的点采集粪便(四周和中央共五点)，每个粪样重100～200 g，共采集5个鸡群5个粪样，按时间分两次采样，总计10个样品。

第1次采样鸡群日龄20～30 d，鸡群大小1～2万只，共7.7万只鸡；第2次采样鸡群日龄40～50 d，鸡群大小1～2万只，共7.7万只鸡。

（二）卵囊计数
每个样品取2 g粪便，加入10 ml水搅拌均匀,再加入50 ml饱和盐水，过滤至小试管中,滴一滴。

雏鸡球虫病的实验室诊断与防治措施高建新【摘要】鸡球虫病是由艾美尔属的球虫寄生在鸡体内引起的一种原虫病,该病主要发生在鸡的肠道,该病是危害养鸡业发展的重要传染病之一。

鸡球虫病是养鸡场常见的一种寄生虫病。

各种年龄的鸡均可感染该病,但雏鸡最易感。

近年来,该病在我市呈散发状态。

下面笔者结合临床病例就鸡球虫病的实验室诊断与防治体会介绍如下,仅供养殖户和同行们参考。

【期刊名称】《新农民》【年(卷),期】2019(000)003【总页数】1页(P96-96)【关键词】雏鸡球虫病;诊断;防治措施【作者】高建新【作者单位】[1]河南省武陟县动物卫生监督所,河南武陟454950【正文语种】中文【中图分类】S858.311 发病情况2018年8月10日，河南省焦作市陟县某一鸡场饲养的60日龄的雏鸡突然发生了一种以贫血、血便、消瘦和生长缓慢等为主要特征的疾病。

发病后该养殖户给发病鸡群应用了常用的土霉素等抗生素进行治疗几天后，效果不明显，而且发病鸡只和死亡鸡只不断增加。

该养鸡户共饲养3000只雏鸡，截止2018年6月15日，该场共发病500只，死亡300只。

经流行病学调查、发病情况、临床特征、病理变化和实验室诊断，确诊为鸡球虫病。

2 临床症状临床可见病雏鸡鸡冠和肉髯苍白，消瘦，羽毛凌乱，缩头；精神沉郁，食欲减退或废绝；间歇性拉稀，粪便暗红色；有的病雏鸡不喜欢运动，扎堆，双翅下垂，有的两肢轻瘫；个别病雏鸡出现神经症状，厌食，渴欲增强，嗉囊内有大量液体。

3 病理变化剖检可见病死雏鸡尸体消瘦，全身皮下、浆膜和黏膜有出血点和出血斑；血液稀薄，凝固不良；小肠中段气胀，肠壁增厚，并有白色斑点和瘀斑，肠黏膜充血、出血或有坏死；肠内容物血样，内含碎片或脱落的黏膜，其它内脏器官病理变化不明显。

4 实验室检验根据发病情况、临床症状和病理变化可作出初步诊断，确诊需要借助实验室。

（1）直接涂片镜检法将病鸡的粪便或病变部位的肠粘膜刮取物少许，放载玻片上与甘油饱和盐水（即500ml水加食盐180g等量混合波）1～2滴混匀，再加盖玻片，置显微镜下观察，球虫的卵囊呈圆形或椭圆形，卵囊壁有两层厚薄不一的轮廓，卵囊内有一团球形原生质，根据卵囊这些特征，可初步鉴定为球虫。

兔球虫病诊断方法兔球虫病防控的研究进展-养兔技术兔球虫病是一种常见的寄生虫病，目前尚未研制出兔球虫疫苗，国内外防治兔球虫病的主要方法仍然是应用抗球虫药。

南于兔球虫对各种化学性抗虫药很容易产生抗药性，且不同地区球虫株之间存在差异，患兔生长发育受阻，体重可减轻12％～29％，死亡率高达80％以上，造成经济损失大。

下面具体来了解一下：兔球虫病诊断方法兔球虫病防控的研究进展。

1、常规诊断实验室诊断一般根据季节因素、环境、年龄、临床症状和病理剖检后的典型病变可进行初步诊断。

确诊需进行实验室检查，常用饱和食盐水浮集法和直接抹片法对粪便进行检查，值得注意的是，当患急性兔球虫病时，粪便检查往往会看不到卵囊，则必须进行病例剖解。

可取肝脏和小肠坏死灶，进行镜检，观察是否有椭圆形卵囊或透明的呈香蕉型的裂殖子，如发现即可确诊为球虫病。

如果要确诊感染球虫的种类，还需对球虫卵囊的寄生部位、孢子化时间、孢子化卵囊的大小、形态结构以及潜隐和致病性等特征进行研究，有时还需进行人工感染动物实验来确诊。

在11种公认的兔球虫中，只有斯氏艾美耳球虫寄生在肝脏，具有高致病性，潜伏期为14天；黄艾美耳球虫和梨形艾美耳球虫寄生在大肠，其中黄艾美耳球虫寄生在盲肠近端和结肠，属于高致病性，梨形艾美耳球虫寄生在结肠，属于中度致病性，这两种球虫潜伏期均为9天；剩下八种分别寄生在小肠的结肠段、空肠、回肠、十二指肠以及肠道相关淋巴组织处，只有肠艾美耳球虫具有高致病性，潜伏期4.5-10天不等。

2、分子生物学诊断Fernandez等人通过一组序列特征扩增区域标记技术作为艾美耳球虫属的特异性鉴定。

Carvalho等人用20个卵囊就能准确的鉴定7种主要感染的艾美尔球。

PCR作为常规的诊断技术可以有效的检测畜禽中艾美耳球虫的波动，对预防寄生虫方面减少了不必要的工作。

Myung-JoYou采用多重PCR扩增ITS1序列，对柔嫩艾美耳球虫、堆形艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫进行诊断，仅Spg的DNA进行多重PCR就可以对艾美耳球虫属的球虫进行检测，因此多重ITS-PCR方法敏感度较高，只需要很少量的DNA样本即可。

鸡球虫抗药性测定法与判定标准抗药性测定法与判定标准有方郭广富陈会良(安徽技术师范学院,安徽凤阳233100)中图分类号:$858.31文献标识码:B文章编号:1008-0414(2004)01—0O6O一03 鸡球虫病是养鸡业中危害最严重的疾病之一,全世界因为球虫病造成的损失高达数十亿美元….当前鸡球虫病的防治仍以药物为主,几乎每一种药都有其抗药性的野外分离虫株,并表现一定程度的交叉抗药性或多药抗性.尽管世界各国对抗药性的现象进行了大量的研究,但球虫抗药性的机理至今仍不清楚,也没有很好的阻止抗药性产生的办法,用敏感的药物替代已经产生抗药性的药物是养鸡场减少因抗药性而造成损失的最主要的方法.检测现场鹏球虫抗药性的最常用方法是鸡体测定法,但不同研究者住测定球虫抗药性时采用的判定指标和标准不尽相同.现综述如下.1测定方法将供试药物按一定比例与饲料或饮水均匀混合后饲喂幼雏经一定时间后接种球虫,最后通过某些指标和标准判定球虫抗药性:1.1宿主1～3周龄雏鸡(一般用2周龄者).由于不同品种和品系的鸡对球虫的易感性不同,必须认真选择和恒定地使用同品种和品系的鸡.为了使试验开始时各处理组体重均等,应备养试验所需数2倍以上的鸡只.试验开始时,每只鸡分别称重,随机分组并调整使各处理组间的总体重一致.各处理组鸡数一般不少于5～10只.试验中还应设感染不给药对照组和不感染不给药对照组.当考虑药物本身对鸡的增重,食欲等的影响时,尚应设不感染给药对照组.1.2饲养管理试验鸡自出壳至试验结束均应在严格隔离,消毒的环境中喂养,严防球虫污染及其他疫病传人.笼具,饲料和饮水等均应严格消毒1.3药物供试药物一般在感染前1～2d(有的在当天)均匀拌入饲料或稀释于饮水中连续喂服,直至试验结束.测定球虫对药物是否产生抗药性或寻找有效的药物,可只用标准推荐量;如欲测定抗药程度,则以标准推荐量为最低浓度,再以比较小的等级差设数个较高浓度级.收稿日期:2003一l1—17基金项目:安徽省优秀青年科技基金和安徽省高校中青年学科带头人培养对象基金资助(o6)作者简介:顾有方(19,男,安徽全椒人,博士,教授,主要从事寄生虫学的教学和研究工作～…{■…*…*…r?c…1.4球虫用于感染的卵囊从现场鸡粪或肠道采集,多含几种球虫卵囊.但各种卵囊所占比率不一.感染量以5xlO4-10xlO4个为合适.如采集的卵囊量不足,需经鸡体传代增殖后,从盲肠或粪便获得所需量卵囊时再感染.对单虫种卵囊的抗药性测定.每只鸡的适宜接种量为:Eimeriatenella,5x104～lOx104~E.∞eulina,E.praecox,Emitis和Em/vati,1×10;E.ma~ima和E brunetti.1×105～2x1o5;E.necatr/x,2x104～3x104,卵囊混旋液量以每只鸡0.2～0.3ml为宜.若以卵囊产量作为抗药性判定指标.卵囊接种量为每只鸡5×10或1×1o3I.1.5观察项目依所采用的判定指标而异.一般应观察记录鸡的体况,发病(率),病死(率),粪便状态,出血程度等.每天收集粪便检查卵囊数;粪检时间因虫种而异,多定为感染后4-8d.接种卵囊前2d或1d或当天称重作为初重,试验结束时称重作为末重, 并计算增重率及相对增重率.试验结束时扑杀,检查肠道病变,进行病变记分,并计算各处理组平均病变记分及病变值. 若为E.tenella,还应计算各处理组平均每只鸡盲肠内容物中的卵囊数,并计算卵囊值.2抗药性判定指标与标准2.1卵囊产量以感染后一定时间内(一般高峰前后2-3d)随粪便排出的卵囊数为指标判定抗药性.主要有以下4种指标.2.1.1每克粪便卵囊数(Oocystspergramfeces,OPG):Hamet1以OPG≥50000判为具有抗药性,<50000为敏感的标准,对1975—1984年从法国肉鸡场收集的60个现场分离株对9种药物的抗药性进行了检测.结果,76%的虫株具有抗药性.2.1.2感染用药组排出的卵囊总数与感染不用药对照组排出卵囊总数的比率:Warren等旧在进行抗药性检测时,以感染后第4～l1d的卵囊产量比率来评价.如果感染用药组排出的卵囊总数/感染不用药对照组排出卵囊总数x100%≥5%,判为具有抗药性,<5%为敏感.结果,所检测的6种药物无1种能控制262个现场分离物的全部虫株,其中87%的E.acervulina 虫株对2种以上药物有抗药性,20%对6种药物有抗药性. 2.1.32倍推荐量用药后有无卵囊产生:Oikawa等在对粪便样品中5种球虫对6种药物的抗药性进行检测时,以2倍推荐量用药,不论服药的试验鸡有无球虫病症状和肠道病变,凡有卵囊排出者即判为具有抗药性.结果E.acervulina,E maxima,E.pracecox,E.tenella,Enecatr/x抗药虫株发生率分别为97%,71%,88%,59%和31%,且多数抗药虫株同时对2种或2种以上的药物具有抗药性.2.1.4不同处理组间卵囊产量的差异显着性:Champan(对从肉鸡场和种鸡场分离的球虫对莫能霉素和拉沙菌素进行敏感性检测时,计数接种后第4-8d粪便中的卵囊数,对感染用药组与感染不用药对照组的卵囊产量作方差分析,差异不显着者判为有抗药性.结果,37个肉鸡场和9个种鸡场分离株均对2种药物具有抗药性.2.2病变记分2.2.1病变记分减少率(Reductionoflesionscores,PLS): McDougald等19.】Ol以感染用药组与感染不用药组的病变记分计算出用药组的RLS,来判定球虫对药物的抗药性.RLS=(感染不用药对照组平均病变记分一感染用药组平均病变记分)/感染不用药对照组平均病变记分x100%.感染后第6d或第7d扑杀试验鸡,按Johnson等所述方法进行病变记分.用药组平均RLS≤30%判为具有抗药性,31%-49%为部分抗药性,≥50%为对药物完全敏感.2.2.2感染用药平均病变记分与感染不用药组平均病变记分的比:Jeffers以感染用药组的平均盲肠病变记分大于或等于感染不用药对照组的50%作为对莫能霉素抗药性的标准,检测了美国73个现场E.tenella分离株对100x10莫能霉素的敏感性,结果证明均无抗药性.2.3增重2.3.1感染用药组与感染不用药对照组增重之比率: McDougald等比较接种后6天试验期内感染用药和感染不用药对照组的增重,以感染用药组增重/感染不用药对照组增重X100%≥75%者判为敏感,<75%者判为抗药.2.3.2感染用药组与不感染不用药对照组,感染不用药对照组增重的差异显着性:Champan分别研究了E.maxima,E. acervulina,E.pracecox和E.mivati对6种化学合成药,莫能霉素和阿波杀(Arprinocid)的敏感性,计算接种后第3～8d的增重,方差分析处理结果;或计算接种前2d到接种后8d的增重或接种后3-8d的增重,t检验分析结果,比较感染用药组与感染不用药对照组,不感染不用药对照组的增重,以感染用药组与不感染不用药对照组增重无显着差异判为敏感,与感染不用药对照组增重无显着差异判为抗药,与2个对照组增重均有显着差异判为部分抗药.2.4最适抗球虫活性百分率(Percentofoptimumantico~idiala~ivity,POAA)Jeffers等在调查以E.meleagrrnitis为主的现场分离株对莫能霉素的敏感性和试验诱导E.memeagrimltis对莫能霉素抗药性研究中,计算接种前2d到接种后6d存活火鸡的增重,以存活火鸡增重与存活率(Growthandsurvivalratio,GSR)和POAA为指标判定对药物的敏感性.GSR=笼末重÷笼初重, POAA=(感染用药组GSR一感染不用药对照组GsR)÷(不感染不用药对照组GSR一感染不用药对照组GSR)x100%,以POAA≤50%判为具有抗药性,>5O%为敏感.2.5粪便记分比率Jeffers以感染用药组与感染不用药对照组的平均粪便记分比率作为判定E.tenella抗药性的指标.观察接种后4,5,6d的粪便,参考Morehouse等的方法,按以下标准进行粪便记分:0,正常;1,少量血便;2,中等量血便;3,许多血便;4,无正常粪便.以感染用药组的平均血便记分/感染不用药对照组平均血便记分x100%.结果≥5o%~J为抗药,<5O%为敏感.这种方法局限于E.tenella和Enecatr/x,而对于其它不造成肠道出血形成血便的球虫不适用.2.6抗球虫指数(Anticoccidialindex,ACI)ACI是包括增重,存活率,病变,卵囊产量,粪便记分等多项参数指标的判定球虫抗药性或药物效力的综合药效指标,但不同研究者在计划ACI时所采用的参数指标,计算方法和判定标准不尽相同.2.6.1AcI=(存活率+相对增重率)一(病变值+卵囊值):肠道病变记分按Johnson等I51的方法记分,病变值=各试验组平均病变记分(0～4)X10.卵囊值按下法计算:对于E.tenella和.necatrix,每只试验鸡盲肠匀浆中卵囊百分数<O.1,0.1～1.0,2.0～5.0,6.0～10.0和>11.0的,卵囊值分别为0,1,10,20和40.对于小肠球虫有2种方法,第1种方法:粪便匀浆中卵囊占感染不给药对照组的比例)<1.0,1-25,26-50,51-75,76-100的,卵囊值分别为0,1,10,2O和4O.第2种方法:卵囊值=每只鸡卵囊百万数÷感染不给药对照组卵囊百万数x0.4.以ACI≥180判为敏感,ACI=160—179判为部分抗药,ACI<160判为抗药.2.6.2ACI=(存活率+增重率)一(平均病变记分X1O+卵囊百分数xO.4)q:肠道病变记分按Johnson等(51的方法,卵囊数为接种后第6～10d的卵囊产量.以ACI≥160判为对药物敏感,ACI= 120～159为部分抗药,ACI<120为抗药.2.6.3ACI=增重率+病变记分减少率:以ACI≥160判为敏感,ACI=I20～159为部分抗药,ACI<I20为抗药.2.6.4ACI=(笼末重÷笼初重)一(平均粪便记分÷1O):接种后4,5,6d的粪便,按0,正常;1,轻度;2,中度;3,严重;4,最严重记分.或按0,正常;1,少量不正常;2,中等量不正常;3,很多不正常;4,无正常进行粪便记分.接种后当天和第7d分别逐只称重.ACI变动于0.4～1.60之间.ACI=I.35-1.60判为敏感,ACI=I.10～1.34为中度抗药,ACI<I.10为高度抗药.2_7以POAA,RLS和RoP三项指标综合判定孔繁瑶等(l在检测采自12个省区养鸡现场的粪便或盲肠的15个虫株对莫能霉素,氨丙啉,克球粉,氯苯胍和杀球灵5种药物的抗药性时使用了这种方法.以POAA≤50%为抗药(+),>5O%为敏感(一);RLS>/50%为敏感(一),<5O%为抗药(+);ROP≥15%为抗药(+),ROP<I5%为敏感(一).判断标准为:一为敏感,一+为轻度抗药,一++为中度抗药,+++为严重抗药.结果表明抗药株普遍存在.2.8以POAA,RLS,RoP和ACI四项指标综合判定黄兵等在检测上海地区球虫对6种药物的抗药性时使用了这种方法.其中POAA,RLS和ROP的判定标准同2.7,ACI≥160为敏感(一),ACI<I60为抗药(+).以4种指标中出现阳性指标的数量确定抗药程度.无抗药性(sensitive):4项指标均为阴性;轻度抗药(1ightresistant):4项指标有3项指标为阴性;中度抗药(middleresistant):4项指标有2项指标为阳性;完全抗药(completeresistant):4项指标有3项及3项以上指标为阳性.2.9综合抗药性指数(GIobalresistanceindex,GI)Stephan等在进行田间鸡球虫及单卵囊纯株抗药性检测时建立了一种综合死亡率,增重,饲料转化率,病变记分和半数卵囊指数5项指标的全新的综合评价指数(GI)来评价鸡球虫的抗药性程度.其计算公式为:GI=1%w[(×103一(0Ic一0IINc)一[(PIc-PI~x2卜(死亡率/2).其中WG为增重率(%),F为饲料转化率(s/g),PI为病变记分(根据Johnson等[51方法判定),0I为半数卵囊指数,G为药物处理组,NNC为不感染不用药物组,INC为感染不用药物组.判定标准:GI≥9o%GI非常有效,≥80%GIr~~c有效,≥70%Glr~c低效,≥50%GLe,~部分抗药,<50%GI~抗药.3结语综上所述,不同研究者在鸡体检测球虫抗药性时所采用的判定指标不尽一致,而不同国家,地区,甚至动物的地理环境,鸡体状况,虫株活力,国家历史及方式等也不尽相同.应用时可根据当时当地的条件和目的,选择适宜的判定指标和标准.主要参考文献【l】李国清,曾振灵,李安兴,等,兽医寄生虫学. 广州:广东高等教育出版社,1999【2]-3L繁瑶,宁长申,殷佩云,等.15株柔嫩艾美耳球虫Eimeriatenella对五种抗球虫药的抗药性调查,北京农业大学,1994,20(3):302～307【3]DaugsehiesA,GassleinU,RommelM. Comparativeefficacyofanticoccidialsunderthe conditionsofcommercialbroilerproductionand inbatterytria1.V etParastitol,1998,76:163～171 【4]ffL繁瑶,宁长申,殷佩云,等.鸡球虫抗药性现场测定方法综述,中国兽医,1994,14 (1):90-95【5]HametN.Resistancetoanticoccidialdrugsin poultryfarmsinFrancefrom1975-1984,.1n: ResearchinAvianCoccidiosis.UnivGeorgia, Atlanta,1986【6]WarrenEW,BallSJ,MacKenzieDR.The incidenceofdrug-resistantstrainsofEimeria specieschickensinGreatBritainin1964/65,BrV etJ,1966.122:535-543【7]OikawaH,KawaguchiH,NakamotoK,eta1. Surveyondrugresistanceofchickencoccidian collectedfromJapanesebroilefarmsin1973,JapJV etSci,1975,37(4):357~362【8]Champ~HD,Sensitivityoffieldisolatesof Eimariaspeciestomonensinandlasalocidinthechicken.ResV etSci.1989.46:l14-1l7【9]McDougaldLR,FullerL,SolisJ.Drug—sensitivityof99isolatesofcoccidiafrombroilorfarms.AviDis.1986.30:690~694【10]McDougaldLR,DaSilvaJM,SolisJ,eta1.A surveyofsensitivitytoanticoccidialdrugsin60 isolatesofcoecidiafrombmilerchickensinBrazilandArgentina.AviDis,1987,31:287~292L/VESTOCKANDP0ULTRYlNDUSrl012Oo4中图分类号:$858,3l文献标识码:B文章编号:1008—0414(2004)01—0062—02 竹丝鸡是我国特有的珍禽,具有药用价值,其肉质高蛋白低脂肪,近几年发展很快,适于大规模养殖1.鸡球虫病是由艾美耳属的多种球虫寄生在鸡肠道黏膜内而引起的.其中盲肠球虫病多发生于l5~45日龄鸡,为最常见,危害最严重的球虫病.据养殖户反映,竹丝鸡的球虫病也较难防治,经常发生药物防治失败.为此,笔者对竹丝鸡的球虫病作了调查,并在某竹丝鸡养殖场采用免疫预防的方法进行控制,取得很好的防治效果.现报告如下.1材料与方法1.1球虫病调查2001年一2002年在广东7个怀疑发生球虫病的竹丝鸡养殖场进行调查.解剖患鸡,排除其它具有特征病变的疾病后,取有病变的肠道粘膜及其内容物经饱和盐水漂浮法或涂片,镜检球虫卵囊.根据患鸡的症状,病变及实验室诊断结果进行诊断.1.2免疫预防试验1.2,l试验场地:顺德某2个养殖场,分别养2000, 4000只3日龄竹丝鸡.1.2,2药物:球痢灵,由浙江某公司生产,推荐使用浓度为l25mg/kg;马杜拉霉素,由浙江某公司生产,推荐使用浓度为Img/kg.1.2-3球虫疫苗:为早熟弱毒球虫疫苗(配有助悬浮液),含柔嫩艾美尔球虫,堆型艾美尔球虫,巨型艾美尔球虫卵囊,由广东某单位提供,用于免疫预防试验.1.2.4免疫方法:设免疫组和药物对照组.免疫组鸡在3日龄通过饮水免疫球虫疫苗l头份,在lO日龄免疫0.5头份.免疫后7d在鸡舍中心和四角采集2O堆鸡粪,检测每克粪便含卵囊数(OPG),若能检测到一定数量的卵囊说明免疫成功,否则需再次免疫.药物组,在小鸡料中添加球痢灵,在中,大鸡料中添加马杜拉霉素,均按推荐剂量使用.发生球虫病,及时用磺胺类药物治疗.试验期间统计因球虫病死亡的鸡只数目,计算球虫病死亡率和60日龄总存活率.1.2.5攻虫试验:在32日龄时,从免疫组和药物组分别随机抽取3O只鸡,每只用lX105个孢子化卵囊柔嫩艾美尔球虫卵囊进行攻虫,观察攻虫后发病情况,统计死亡率.于攻虫后7.5d剖检盲肠,参照美国氰胺公司兽医助诊器——Johnson&Reid球虫病变记分系统进行病变记分2结果2.1临床症状与病变调查发现竹丝鸡在l5-50日龄易患球虫病.患鸡拉稀粪,泄殖腔周围羽毛被粪便污染,随后便中带血,严重者甚至排出鲜血.表现精神不振,羽收稿日期:2003--09—08竹丝鸡魏文康一温锦天吴汝森一fl_广东农科院兽医研究所广州一0640;.顺华饲料实业有限公司一的免疫预防研究。

鹅球虫病的临床症状、实验室检查与防治措施作者：洪娟来源：《现代畜牧科技》 2017年第6期洪娟(黑龙江省海伦市畜牧事业站，黑龙江海伦152300)摘要：鹅球虫病主要是由于球虫寄生在机体肠道或者肾脏中而引起的一种原虫性寄生虫病。

病鹅主要症状是发生轻度腹泻和排出血便，阻碍生长发育，精神沉郁，食欲不振，羽毛蓬松杂乱。

任何年龄的鹅都能够感染该病，其中雏鹅最容易感染，具有较高的死亡率，即使耐过也会生长缓慢，应采取有效的防治措施。

关键词：鹅；球虫病；流行病学；临床症状；实验室检查；饲养管理；药物预防；药物治疗中图分类号：S858. 33文献标识码：B文章编号：2095-9737(2017)06-0098-011 流行病学全世界各地都能够有该病发生、流行，且任何品种的鹅都能够感染球虫，其中幼鹅具有很高的发病率和病死率。

在临床上，最早是6日龄的鹅感染该病，最大是73日龄感染，其中小于3周龄的鹅比较容易感染。

该病往往急性暴发，呈地方性流行。

发病率可高达90%-100%，死亡率在10%-96%不等，且鹅越小日龄感染具有越高的死亡率。

有些日龄较大的鹅或者成年鹅也能够感染该病，但一般呈慢性经过，且治愈后依旧携带球虫，从而导致其他健康鹅发生感染。

鹅感染球虫主要是通过口食入存在于饮水、饲料和土壤中的孢子化卵囊而导致发病。

鹅食入的孢子化卵囊在肠道内会发生脱囊，使其中的子孢子逸出，子孢子会侵入到肠上皮细胞并继续发育变成滋养体，通过裂殖生殖生成裂殖体，裂殖体发育成熟后会有大量的裂殖子被释放出来，之后裂殖子又会侵入到上皮细胞而继续发育成为大小配子体。

在大量裂殖子和小配子被释放时会导致肠上皮细胞被破坏，使血管发生破裂，且肠上皮细胞发生崩解，肠黏膜脱落，造成肠黏膜无法保持完整性，从而无法起到屏障作用，导致机体消化机能发生紊乱，影响营养物质的吸收，最终使其死亡。

圈舍简陋，饲养管理条件恶劣，没有及时清除地面上的粪便和污染的垫草，经常在低洼潮湿地放养等，都非常容易引起该病，并促使传播。

鸡球虫的分离与感染试验作者：戴银沈学怀张丹俊等来源：《安徽农业科学》2015年第06期摘要 [目的] 为探讨长期有效的鸡球虫病防控方法奠定基础。

[方法] 分离并培养鸡球虫卵囊，通过感染雏鸡试验研究其卵囊发育和感染的过程。

[结果] 分离到的球虫卵囊大多形态饱满，为宽椭圆形，少数为卵圆形，壁光滑，中间明显可见1个圆形核，原生质呈淡褐色，卵囊大小约为18.5～25.5 μm×16.7～22.5 μm。

正常的孢子化卵囊多能见到分化明显的4个孢子，18 h可看到部分卵囊孢子化，36 h孢子化达80%。

接种后发病雏鸡的体重缓慢增加，血便明显，死亡率较高，同时解剖可见盲肠病变明显，肠壁增厚，严重者因充满大量血液而盲肠肿大。

[结论]根据卵囊的形态、发病鸡的临床表现、卵囊寄生部位和盲肠病理变化等特征，初步判断分离的球虫主要为柔嫩艾美耳球虫。

关键词鸡球虫；卵囊；雏鸡感染特征中图分类号S852.72+3文献标识码A文章编号0517-6611（2015）06-151-02鸡球虫病（Chicken coccidiosis）是一种鸡常见且危害严重的寄生虫病，经常由一种或多种球虫联合引起的急性流行性寄生虫病[1-2]。

不同种类的球虫在鸡肠道内寄生部位有所差异，其致病力也有所不同，其中柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）寄生于盲肠，致病力最强[3]。

10～30日龄的雏鸡发病率最高，死亡率为20%～30%，严重时可高达80%[4]。

感染的雏鸡病愈后，生长发育受阻，体重增加缓慢，严重影响肉鸡饲料转化率及蛋鸡产蛋率。

成年鸡则一般不发病，但多为带虫者，增重和产蛋能力降低，是传播球虫病的重要病源之一。

该病在全球发病普遍，我国每年也因该病造成巨大的经济损失。

目前，使用抗生素类和化学合成药物是控制鸡球虫病的主要手段，这些药物对鸡球虫病的防治起到重要作用，但由于大部分养殖人员没有科学用药，再加上我国对抗球虫药物使用的监管力度不够，长期高剂量用药现象严重，导致大量耐药虫株的出现，使得一些抗球虫治效果降低甚至失效，因此对鸡球虫病防治工作越发困难[5-7]。