内源性凝血途径

一、实验目的1. 了解兔凝血机制的基本原理。

2. 掌握兔凝血实验的操作方法。

3. 观察兔凝血过程中各种凝血因子的作用。

二、实验原理兔凝血实验是研究兔凝血机制的重要手段。

兔凝血过程包括内源性凝血途径和外源性凝血途径。

内源性凝血途径是指从凝血因子X激活开始，到纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程；外源性凝血途径是指从凝血因子III激活开始，到凝血因子X激活的过程。

在本实验中，我们将通过加入不同凝血因子，观察兔血液凝固的情况，从而了解兔凝血机制。

三、实验材料1. 实验动物：健康成年兔1只，体重2-3kg。

2. 实验器材：剪刀、镊子、注射器、针头、无菌生理盐水、凝血因子溶液（如凝血酶、组织因子等）、凝血时间测定仪、计时器、无菌试管、酒精灯、无菌棉球等。

3. 实验试剂：肝素钠、抗凝剂、凝血酶、组织因子等。

四、实验步骤1. 实验动物准备：将兔置于安静环境中，适应环境后，用酒精棉球对兔耳部进行消毒，选择兔耳静脉作为穿刺部位。

2. 静脉穿刺：在兔耳静脉上，用剪刀剪一小口，然后用镊子夹住血管，用注射器抽取少量血液作为对照。

3. 加入凝血因子：向试管中加入肝素钠，使血液呈抗凝状态。

随后，分别向试管中加入不同浓度的凝血酶、组织因子等凝血因子，同时记录各试管中血液凝固所需时间。

4. 观察凝血现象：观察各试管中血液凝固现象，记录凝固时间，并与对照组进行比较。

5. 结果分析：分析各凝血因子对兔凝血过程的影响，总结兔凝血机制的特点。

五、实验结果1. 对照组：兔血液在加入肝素钠后，凝固时间为5-7分钟。

2. 加入凝血酶：在凝血酶浓度为0.1mg/mL时，兔血液凝固时间为2-3分钟；在凝血酶浓度为0.5mg/mL时，兔血液凝固时间为1-2分钟。

3. 加入组织因子：在组织因子浓度为0.1mg/mL时，兔血液凝固时间为3-5分钟；在组织因子浓度为0.5mg/mL时，兔血液凝固时间为2-3分钟。

六、实验讨论1. 本实验结果表明，兔凝血过程受多种凝血因子的影响，其中凝血酶和组织因子对兔凝血过程有显著的促进作用。

血栓凝血功能指标血栓是指常在血管内形成的血凝块，它会引起血液的堵塞，从而导致周围组织缺血、坏死、甚至死亡。

凝血功能指标是指用来检测血液凝血功能的一些参数，这些指标是评估血液循环系统健康状况的重要依据。

1. 凝血酶原时间（PT）凝血酶原时间（PT）是检测外源性凝血系统功能的常用指标。

该指标主要用于评估凝血因子包括凝血酶原在内的外源性凝血途径的功能。

外源性凝血途径是指外伤导致的凝血，也称为“组织因子凝血途径”。

当外伤使得血管内壁发生损伤时，细胞外基质中的组织因子就被释放出来，形成凝血酶原，随后引起凝血过程的启动。

凝血酶原时间可以作为评价外源性凝血途径功能改变的关键指标。

活化部分凝血时间（APTT）是检测内源性凝血系统功能的指标。

该指标主要用于评估凝血因子包括第十一、十二、九、八、十、五、二等内源性凝血途径中的功能。

内源性凝血途径也被称为“接触因子凝血途径”。

当血管内壁发生损伤，血液中的成分与细胞外分子相接触，就启动了接触因子凝血途径。

APTT是Eli Lily社于1945年首次提出的，具有较高的敏感性和特异性。

APTT延长提示血液凝血功能降低，但并不意味着血液凝血无力。

3. 纤维蛋白原（FIB）纤维蛋白原是血浆中最主要的高分子蛋白质之一。

当血管内壁发生损伤时，纤维蛋白原会被凝聚成纤维蛋白，这是维持血管内壁的稳定性和止血功能的核心。

纤维蛋白原水平的变化是评估血液凝血功能的重要依据。

当纤维蛋白原水平过高或过低时，都会影响血液凝血功能。

纤维蛋白原常规检测值为2.0~4.0g/L。

4. D-二聚体（D-D）D-二聚体是一种特殊的纤维蛋白降解产物。

当血管内壁发生破坏时，纤维蛋白聚集成小块，随后被溶解，并在这个过程中放出了D-二聚体。

D-二聚体的增加表明血管内壁受损和凝血功能异常。

D-二聚体检测通常用于肺栓塞等疾病的筛查和诊断，同时也可以用于监测血液凝血功能能力。

凝血酶时间（TT）是血液凝血过程的末端阶段。

当凝血酶原、纤维素及其衍生物相互结合时，就产生了凝血酶，这时的凝血过程也将结束。

问题：人体出血后为何会凝血？凝血不利为何容易导致发炎感染？用电场能让凝血加速吗一.凝血概念即：血液凝固，是指血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程，是生理性止血的重要环节。

这一过程所需时间称为凝血时间。

血液凝固的实质就是血浆中的可溶性+纤维蛋白原变成不可溶的纤维蛋白的过程。

人体的凝血过程是一个平衡的过程二.血流在血管内不凝固的原因：（1）血流速度快，（2）血管内膜光滑，（3）血浆中存在天然抗凝物质和纤维蛋白溶解系统血小板作用1.维护血管壁完整性的功能。

2.参与生理止血功能。

（1）血小板粘附、聚集形成松软止血栓，防止出血。

（2）血小板分泌ADP、5-羟色胺、儿茶酚胺等活性物质，ADP使血小板聚集变为不可逆，凝血——血小板对凝血的作用1.收缩血管,有助于暂时止血。

血小板能释放5-羟色胺,儿茶酚按等血管收缩素,使受损伤血管不同程度地紧闭,同时管内血流量减少,防止血液流失。

2.形成止血栓,堵塞血管破裂口。

血小板容易粘附和沉积在受损血管所暴露出来的胶原纤维上, 聚集成团,形成止血栓；血栓直接墙塞在血管裂口处,除了起栓堵作用外,还可维护血管壁的完整性。

3.释放促使血液凝固的物质,在血管破裂处加速形成凝血块.受到损伤的血管或组织处于产生一些因子,启动内源性和外源性血凝系统,在血小板所释放的不同因子的综合作用下,数分钟内完成了一系列酶促生化连锁反应,最终导致血浆内可溶性的纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白。

4.释放抗纤溶因子, 抑制纤溶系统的活动。

血浆中的纤维蛋白在纤溶系统的作用下,容易降解。

由于血小板含有抗纤溶因子、抑制了纤溶系统的活动, 使形成的血凝块不致于崩溃。

当组织受伤出血时，血小板常成群聚集，促进血液凝固而起止血作用。

三. 人体出血后凝血具体过程.1.人体受物理损伤后，血小板会受到损伤部位激活因素的刺激，出现血小板的聚集，成为血小板凝块，——初级止．．．。

．．．血作用2.接着血小板又经过复杂的变化产生凝血酶，使邻近血浆中的纤维蛋白原变为纤维蛋白，互相交织的纤维蛋白使血小板凝块与血细胞缠结成血凝块，即血栓。

血液凝固和影响血液凝固的因素一、实验目的及原理：通过测定某些条件下的血液凝固时间，加深理解影响血液凝固的因素。

内源性凝血和外源性凝血途径，影响血液凝固的因素。

内源性凝血是指参与血液凝固的凝血因子全部存在于血浆中；外源性凝血是指在组织因子参与下的血凝过程。

本实验采用动物颈动脉放血取血，血液几乎未与组织因子接触。

因此，凝血过程主要是内源性凝血系统的作用。

肺组织浸润液中含丰富的组织因子，加入试管观察外源性凝血系统的作用。

二、实验材料：家兔；石蜡油，冰块，肝素，草酸钾，氨基甲酸乙酯；试管，动脉夹，动脉插管，恒温水浴槽，秒表三、实验方法：1.用200g/L氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉，将兔仰卧固定于手术台上。

2.切开颈部皮肤后，分离一侧颈总动脉，头端用线结扎，向心端夹上动脉夹。

用剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”形小口，向心方向插入动脉插管，用线结扎固定。

以备取血之用。

3.取试管8支，编号。

按下实验条件准备完毕。

试管编号实验条件凝血时间(结果）1 空管、对照管18分04秒2 粗糙面放棉花少许7分18秒3 石蜡油涂管内壁65分26秒每管加血2 ml 4 NaCl 2ml42分45秒5 温度置于冰浴槽中不凝6 加肝素8单位（加血后摇匀）不凝7 加38g/L草酸钾3滴（加血后摇匀）不凝8 加肺组织浸液0.1ml（加血后摇匀）15秒小烧杯放血10ml 放血时用竹签不断搅动，2~3min后血液不凝,用水冲洗竹签后观察之竹签上有丝状纤维小烧杯放血10ml 对照血液凝固4.立即用秒表计时，每隔15s将试管倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状时，记下所历时间。

5.实验观察记录各管的凝血时间。

四、实验结果：（如上表所记录，数据为班上各组的平均值。

）五、实验讨论：1，室温基准时间，一号及其他管血液凝固，是因为血液与管壁接触，启动了内源性凝血过程2，试管内有少量棉花比1时间短，血液和物体表面接触面越粗糙，凝血越快3，试管壁涂有石蜡油比1时间长，血液和物体表面接触面越光滑，凝血越慢4，生理盐水2ml 比1时间长，因为血液被稀释了，凝固时间加长5，有冰块的烧杯比1时间长，关于凝血的生物酶的在低温下活性低6，加肝素8单位比1时间长，肝素是抗凝剂，能增强抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的亲和力，加速凝血酶失活；抑制血小板粘附、聚集7，加草酸钾3滴比1时间长，草酸钾是抗凝剂，与血中钙离子结合形成难解离的草酸钙沉淀，钙离子是凝血过程中所需的物质之一，减少钙离子，抑制凝血过程8，肺组织浸液0.1ml 比1时间短，肺组织浸液含组织因子，启动外源性凝血过程，加速血液凝固9，竹丝搅拌影响血液凝固,就是用竹丝表面（毛糙）把因子I（纤维蛋白原）迅速的变成纤维蛋白并卷走，失去纤维蛋白，血液的凝血过程打断，血液就不会凝固了。

【血液学检验】知识点整理（第二部分）第一章绪论1、血液学（Haematology）是医学科学的一个独立的分支，它的研究对象是血液和造血组织.包括血液和造血组织的生理、病理基础和临床各个方面.2、临床血液学(Clinical hematology）是以疾病为研究对象;研究疾病的基础理论与临床结合的综合临床学科。

主要涉及源于血液和造血组织的原发性血液病以及继发于其他组织器官原发病的继发性血液病。

3、临床血液学及血液学检验（Clinical hematology and hematologyexaminations）是以血液学的理论为基础,以检验学的实验方法为手段，以临床血液病为研究对象而创建的一个理论－检验－疾病相互结合、紧密联系的新体系;且在临床实验中不断发展、完善和提高的新兴学科。

第二章造血基础理论1.造血(hematopoiesis):是造血器官生成各种血细胞的过程。

造血主要涉及造血器官、造血细胞、造血微环境、造血调节、和血细胞发育、成熟、释放等。

人体造血器官主要包括骨髓、胸腺、淋巴结、肝脾.2。

造血器官：能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为～。

3。

淋巴组织或淋巴器官:系指机体内以淋巴细胞（包括浆细胞）为主要细胞成份的组织结果而言。

4.血岛：人胚第二周末时，卵黄囊壁上的胚外中胚层细胞是一些未分化的、具有自我更新能力的细胞,这些细胞聚集成团，成为血岛。

5.妊娠月数造血部位图（记住）出生前血细胞的生长和分化：卵子受精后逐渐分为内、中、外三个胚层，造血细胞均发生于中胚层;根据胚胎发育过程中造血中心的转移可将出生前造血分为三个阶段。

①卵黄囊造血期最早，人胚第2周末；主要生成RBC（第3周开始），肯定不生成Lc，粒c 不确定。

第一代幼稚RBC，第二代幼稚RBC。

②肝造血期肝脏造血9—24周，肝造血的干细胞是由卵黄囊迁移来的；以RBC为主,肯定不生成Lc，有粒c,巨核c。

脾脏造血始于第3个月；早期以RBC和粒c为主，第5个月有Lc生成，出生后成为终生制造Lc的场所。

临床PT、APTT、TT指标定义、凝血途径及临床意义官方定义指标的定义：凝血酶原时间（PT）：血浆与凝血活酶试剂（例如组织因子和氯化钙）反应后发生凝固所需要的时间。

活化部分凝血活酶时间（APTT）：血浆与适量氯化钙、部分凝血活酶试剂（如白陶土）反应后发生凝固所需要的时间。

凝血酶时间（TT）：血浆中加入一定活性单位的凝血酶后形成纤维蛋白凝块所需要的时间。

凝血途径血液凝固是凝血酶作用于纤维蛋白原使其生成纤维蛋白，促使血液凝固的过程。

机体的凝血需要凝血系统、抗凝血系统和纤溶系统的共同参与。

如下图所示，凝血系统根据触发凝血方式的不同，凝血途径的上游分为外源凝血途径（粉红区域）和内源凝血途径（蓝色区域），下游为共同凝血途径（绿色区域）。

根据参与的凝血途径不同，可将凝血因子分类如下(a 代表活化)：备注：纤维蛋白原—因子I ；TF—因子III，；Ca2+ —因子IV；PL—磷脂根据定义，PT 实际上是指检测时加入了可以启动外源凝血途径的激活剂，若外源凝血途径或共同凝血途径（粉红色+ 绿色) 中需要的物质发生改变则会造成 PT 延长或缩短。

类似的，APTT 是指检测时加入了可以启动内源凝血途径的激活剂，若内源凝血途径或共同凝血途径(蓝色+ 绿色) 中需要的物质发生改变则会造成 APTT 延长或缩短。

PT 和 APTT 都是指在临床实验室模拟体内自然凝血的过程。

血浆凝固所需的时间反映了参与各自凝血途径的凝血因子的量或者功能改变。

区别点在于：◆PT = 外 + 共同◆APTT = 内 + 共同结合上面凝血因子分类表格，引起 PT 和 APTT 改变的凝血因子就显而易见了。

PT 检测时加入的激活物包含 TF 和 Ca2+，因此 PT 延长可见于的外源途径凝血因子（VII）或共同途径凝血因子（I、II、V、X）缺乏或者活性低下。

APTT 检测时加入的激活物包括Ca2+，因此 APTT 延长可见于内源性凝血因子（XI, IX, VIII，XII）或共同途径凝血因子（I、II、V、X）缺乏或者活性低下。