鸡致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

鸡大肠杆菌病病原的分离鉴定及药敏试验作者：荆丽珍来源：《农家致富顾问·下半月》2019年第08期摘要本试验目的是采用6种常用抗菌药物进行药敏试验，再筛选出敏感药物，为预防和治疗大肠杆菌病提供理论依据并指导临床用药。

方法是对送检的病死鸡和濒死鸡进行了剖检、病理学诊断和病原检测，无菌采取的病死鸡组织进行细菌的分离鉴定，并通过药敏纸片法对其纯化培养物进行药敏试验。

关键词大肠杆菌；分离与鉴定；药敏试验鸡大肠杆菌病是由某些致病性血清型大肠埃希菌引起的鸡的不同类型疾病的总称。

大肠杆菌致病性菌株的致病因子是由侵袭力、感染力和致病性这三个主要特征决定。

大肠杆菌主要有菌体抗原、荚膜抗原、鞭毛抗原三个病原类型，这三种抗原形成了众多的血清型。

该菌对外界抵抗力比较弱，一般高压蒸汽灭菌锅121℃30min便可将其杀死，对一般消毒药的抵抗力也很弱，常用的消毒药水均能将其杀死。

本实验对海阳六合鸡场送检的濒临死亡的鸡只和病死鸡进行了解剖检查，并且进行了病理学诊断和病原检测，确诊该海阳鸡场发生了大肠杆菌病。

通过做药敏试验，选择出几种药物，而这些药物通常是对此致病菌比较敏感的，然后進行药物治疗，以此达到控制疫情效果。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 病料及实验动物所有病料来自海阳六合养殖场送检的疑似大肠杆菌病的病鸡、濒临死亡鸡40只，已经死亡鸡只的死亡时间不超过18h。

实验动物为：20只健康小白鼠和20只7日龄健康雏鸡。

1.1.2 仪器与设备恒温箱，光学显微镜，全自动高压灭菌器，超净工作台，美国微量移液器、剪刀、试管等。

1.1.3 培养基与试剂伊红美兰琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、普通肉汤培养基、营养琼脂培养基。

卡那霉素、新霉素、庆大霉素、青霉素、链霉素和四环素等药敏片，硝酸盐还原剂、氧化酶试剂、微量生化试验管。

1.2 方法1.2.1 外部观察和病理剖检根据大肠杆菌病的流行病学特点，表现出来临床症状，以及对送检的40只病死鸡和濒临死亡的鸡只进行的病理临床剖检及相关病理症状观察，根据表现出来的相关剖检特征，可以对大肠杆菌病作出初步诊断。

2014年第09期1病原学大肠杆菌为革兰氏染色阴性的短小杆菌,为兼性厌氧菌,不形成芽孢和荚膜,大多数菌株有周鞭毛,具有运动性。

在普通培养基上生长良好。

部分菌株在血液培养基上培养,可出现溶血现象。

用麦康凯培养基上培养时,生长出圆形、隆起的红色菌落;在伊红美蓝琼脂上培养,大多数菌落呈黑色,并由金属光泽。

大肠杆菌对干燥的抵抗力很强,在鸡舍、粪便、尘埃、垫料、孵化器内的绒毛、破壳蛋等环境中可存活数周或数月之久,成为环境中的常在菌。

兽医上常用的消毒药可以杀灭大肠杆菌。

2流行病学本病四季均可发生,但以冬春寒冷和气温多变季节多发。

在自然条件下,本病可发生于各种年龄的鸡,但多发生于雏鸡,特别是3～6周龄内的雏鸡最为易感。

发病率一般在30%～69%之间,死亡率42%～75%,致死率可高达100%。

随粪便污染蛋壳的E.coli 可感染鸡胚,造成鸡胚在孵化期死亡。

或者被感染的鸡胚虽可孵出雏鸡,但在第1周内即死于脐炎或以卵黄感染而引起生长缓慢。

一般情况下,养殖场的大肠杆菌病可通过呼吸道感染而引起。

本病常与某些细菌及病毒同时感染。

Randall.C (1984)曾从大肠杆菌病死雏病理材料中同时分离到变形杆菌、葡萄球菌和假单胞菌、呼肠孤病毒和腺病毒。

本病的传染源主要是被上述血清型的致病病性E.coli 所污染的卵、病鸡及其分泌物、排泄物,被污染的饲料、饮水、垫草和尘土等。

感染途径为消化道和呼吸道,鼠和臭虫是该病病原体的携带者。

3临床症状病禽精神不振,不爱活动,常呆立于禽舍一隅,羽毛松乱,两翅下垂,食欲减少等一般性病状。

由于大肠杆菌病的临诊病型不同,可以出现肠炎、败血症、呼吸道炎、输卵管炎、眼炎、关节炎、神经症状、肿头综合征等为主的相应的症状。

4药敏试验禽大肠杆菌病(avian colibacillosis )是由一定血清型的大肠埃希氏菌引起的一种传染病。

由于该病病型较多,其临诊表现也有差异。

其特征有心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、大肠杆菌性肉芽肿和脐炎等病变。

2018年第2期鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的表现多种临床症状及病理变化的一类疾病，该病在养鸡业中很常见，给养鸡业造成一定的经济损失。

现在养鸡形式多以集约化饲养为主，养殖密度的增大加剧了该病的发生及流行，另外抗菌药物使用不当时有发生，使耐药性的产生更趋严重，给大肠杆菌病的防治带来诸多困难。

笔者分别从不同养鸡厂的病死鸡中分离出9株大肠杆菌，对分离出的9株大肠杆菌进行培养、染色、形态与生化特性及药敏试验，以期为临床防治鸡大肠杆菌病提供一定的参考依据。

1材料及方法采取自天津蓟县周边不同肉养鸡厂具有典型病变病死鸡的心血及脏器。

普通琼脂平板，营养肉汤，麦康凯平板，微量发酵管，M-R 试剂，V-P 试剂。

1日龄健康雏鸡。

（1）氧氟沙星；（2）盐酸环丙沙星；（3）乳酸环丙沙星；（4）沙拉沙星；（5）恩诺沙星；（6）洛美沙星；（7）培氟沙星；（8）双氟沙星。

均为原粉，市购，含量均达到90%以上，按试验要求配制成所需浓度，4℃保存备用。

采取症状典型病死鸡的心血、肝脏和脾脏，接种于麦康凯琼脂平板，37℃培养24h 。

挑取麦康凯琼脂平板上的粉红色菌落，按常规方法进行涂片、革兰氏染色、镜检。

1.6.1生化试验挑取麦康凯琼脂平板上的粉红色菌落，接种于肉汤37℃培养18h 。

然后将肉汤培养物接种于微量发酵管进行发酵试验，并进行生化反应试验。

1.6.2致病性试验选取10只10日龄健康雏鸡并分成2组，每组5只，第1组按照0.5mL/只的剂量腹腔接种肉汤培养物，第2组按照0.5mL/只的剂量腹腔注射生理盐水，观察各组发病情况。

判定标准：抑菌圈直径平均值小于10mm 为抗菌；10mm 轻度敏感；11~15mm 中度敏感；16~20mm 高度敏感。

2结果分离培养及纯培养结果表明其培养特性具有共同的特点，在普通琼脂平板上为灰白色、半透明、圆形光滑的中等大小菌落；在普通肉汤中可使肉汤均匀浑浊有腥臭味，试管底有沉淀物呈灰白色，轻摇后呈云雾状散开；在麦康凯平板上为砖红色、圆形微凸、边缘整齐、光滑湿润的小菌落。

年第期实验研究E-m a i l :j r x m s y @126.c o m今日畜牧兽医摘要:自保定博野发病肉鸡群分离到1株大肠杆菌。

药敏试验结果显示,这株大肠杆菌分离物具有多重耐药性,仅对阿米卡星和黏菌素抗生素极敏或高敏。

动物试验结果表明,该大肠杆菌对小白鼠具有高度致病性。

关键词:肉鸡;大肠杆菌;致病性;分离;鉴定鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的一种鸡的细菌性疾病,包括大肠杆菌性败血症、肉芽肿、气囊炎、肿头综合征、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、全眼球炎及脐炎/卵黄囊感染。

近来,鸡大肠杆菌病在保定市养殖场及散养户中频繁发生,且有发病早、流行快、耐药性强、死亡率高及混合感染等特点,为了有效控制该病的发生,最大程度地减少经济损失,笔者对保定市博野肉鸡场疑似大肠杆菌病例进行了病原分离与鉴定、药敏试验和动物试验,现将结果报告如下。

1材料与方法1.1病料无菌采取保定博野发病鸡场送检病鸡的心脏、肝脏、脾脏。

1.2主要试剂1.2.1培养基及生化试剂普通营养琼脂培养基(购自杭州天和微生物试剂有限公司)、麦康凯琼脂培养基(购自北京双旋微生物培养基制品公司)、三糖铁琼脂培养基(购自杭州天和微生物试剂有限公司)。

葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、枸橼酸盐、硫化氢、明胶、尿素九种细菌生化微量鉴定管及M .R 试剂、V-P 试剂(甲液、乙液)等购自杭州天和微生物试剂有限公司。

吲哚试验、动力实验所需培养基,吲哚试剂:由河北农业大学药理实验室提供原料。

1.2.2抗菌药物氟苯尼考、氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、新霉素、阿米卡星、泰乐菌素、阿奇霉素、替米考星、蒽诺沙星、利福平、强力霉素、粘菌素、青霉素、新诺明、红霉素、四环素、阿莫西林(以上药物由保定市冀农动物药业公司提供);注射用硫酸链霉素(100万IU/支)和硫酸庆大霉素注射液(2毫升,8万IU/支)为华北制药股份有限公司生产。

1.3实验动物健康14日龄雏鸡20只,购自河北省保定市某肉鸡场。

肉鸡大肠杆菌病病原分离、鉴定及药敏试验作者：韩金宏葛晨晨李太元来源：《科学与财富》2020年第14期摘要：本文对延吉地区某鸡场送来的10例肉鸡大肠杆菌疑似感染病例进行病原分离与鉴定、菌株致病性试验和药物敏感性试验等。

就实验结果进行分析，有8株疑似菌株，呈短杆状，革兰氏染色阴性菌，形态特征及生化鉴定符合大肠杆菌特性，确定为大肠杆菌菌株，具有较强的致病性，对β-内酰胺类、四环素类、氯霉素类药物均有较强的耐药性，但对喹诺酮类药物的敏感性较强。

关键词：大肠杆菌;鉴定;肉鸡;药敏试验大肠杆菌病是由致病性大肠埃希杆菌引起的一种较为常见的传染性疾病，可造成人和畜禽的腹泻、出血性胃肠炎，严重的可造成死亡，易对畜牧养殖业造成严重损害。

目前，临床上防控大肠杆菌传染常使用抗生素，而抗生素的滥用不仅会使耐药菌大量产生，还会使得抗生素及耐药菌株跟随食物链进入人体，对人体健康造成一定程度的威胁。

同时，全世界各地区流行的大肠杆菌菌株对于抗生素的耐药性均有不同程度的差异，也给大肠杆菌的防控带来了困难。

本文通过一系列试验并对结果进行分析，以期为大肠杆菌病的防控防治工作提供参考依据。

1.材料与方法1.1肉鸡病例延吉某鸡场送来5只疑似大肠杆菌感染致死的肉用鸡及5只未死的同笼鸡待检。

鸡群出现流行病学症状后曾使用该养殖场常用的头孢类药物，但未能有效控制疾病传播。

1.2主要药品和试剂实验所用LB肉汤、麦康凯培养基、伊红美兰培养基及琼脂粉均购自北京奥博星生物技术有限公司，革兰氏染液购自河南柯炫生物技术有限公司，生化鉴定管购自杭州微生物试剂有限公司。

1.3主要仪器压力蒸汽灭菌器（MSL.N型），生物显微镜（BX53型），净化工作台（SW-CJ-2FD 型），电热恒温培养箱（HH-B11？600-S型）。

1.4临床观察及采集样品病死鸡剖检可见：小肠、泄殖腔等粘膜弥漫性出血，有不同程度的出血点、出血斑;胆肿大;心外膜有黄白色胶冻样纤维性渗出物附着;心包液增多、肝脏肿大、质脆、呈暗红色或土黄色;就肝脏部分进行无菌采样，进行实验室诊断。