淀粉样物质染色液(Bennhold刚果红法)使用步骤及注意事项

他用来染细胞质时， 能把 胶 胚胎材料等。刚果红 可以跟苏 所以洗涤和脱水 处理要迅速。

三、常用染料介绍

（一）天然染料

1、苏木精

苏木精是从南美的苏木 （热带豆科植物） 干枝中用乙醚浸制出来的一种色素， 是最常用的染 料之 一。 苏木精不能直接染色， 必须暴露在通气的地方， 使他变成氧化苏木精 （又叫苏木素） 后才能 使用，这叫做“成熟” 。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力 愈强。被染材 料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。 所以在配制苏木精染剂时都要用媒 染剂。常用的媒染剂 有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。

苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体， 易溶于酒精， 微溶于水和甘油， 是染细胞核的优良 材 料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。 分化时组织所染的颜色因处理的情 况而异， 用酸性溶液 （如盐酸—酒精） 分化后呈红色，

水洗后仍恢复青蓝色， 用碱性溶液 （如 氨水）分 化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。

2、洋红

洋红又叫胭脂红或卡红。 一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末， 提取出虫红，再用明 矾处 理，除去其中杂质， 就制成洋红。单纯的洋红不能染色， 要经酸性或碱性溶液溶解后才 能染色。常 用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。

洋红使细胞核的优良染料， 染色的标本不易褪色。 用作切片或组织块染都适宜， 尤其适宜于 小型 材料的整体染色。 用洋红配成的溶液染色后能保持几年。 洋红溶液出现浑浊时要过滤后 再用。

（二）人工染料

人工染料， 即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多， 应用极广。 它们的缺点是经日光照射容易 褪 色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也 能经几年不 褪色。

1、酸性品红 酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（ 0.3% ）。他是良好的

细胞制

染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。 他跟甲基 绿同染，能显示线粒体。

刚果红染色原理

刚果红是一种常用的生物染色剂，它在生物学实验和临床诊断中有着广泛的应用。那么，刚果红是如何发挥作用的呢？接下来，我们将深入探讨刚果红染色的原理。

首先，我们需要了解刚果红的化学结构。刚果红是一种有机化合物，化学名称为4-（二甲氨基）苯基-3，3-二甲基-（1-苯基-5-吡咯烷基）-2-吡唑啉酮。它的分子结构中含有苯基、吡咯烷基和吡唑啉酮等基团，这些基团赋予了刚果红特殊的染色性质。

刚果红的染色原理主要是通过与细胞内的核酸发生作用。在生物学实验中，刚果红通常用于染色细胞核和染色体。刚果红分子中的苯基和吡唑啉酮基团可以与DNA的碱基发生氢键作用，从而使DNA分子与刚果红结合形成复合物。这种复合物在显微镜下呈现出红色或粉红色的颜色，从而使细胞核和染色体清晰可见。

除了与DNA发生作用外，刚果红还可以与其他细胞组分发生相互作用，如与细胞膜脂质发生结合。这使得刚果红在细胞的染色过程中能够提供额外的信息，帮助研究人员观察细胞结构和功能。

在临床诊断中，刚果红也有着重要的应用。例如，在组织病理学检查中，刚果红可以用于染色肿瘤组织，帮助医生诊断疾病。此外，刚果红还可以用于检测细菌和真菌等微生物，通过染色观察它们的形态和结构特征，有助于鉴定致病微生物的种类。

总的来说，刚果红染色的原理是通过与细胞内的核酸和其他细胞组分发生作用，从而实现对细胞结构和功能的染色和观察。它在生物学实验和临床诊断中发挥着重要的作用，为科研人员和医生提供了有力的工具，促进了细胞学和病理学领域的发展。

通过对刚果红染色原理的深入了解，我们可以更好地应用和理解这一生物染色剂的作用机制，为科学研究和临床诊断提供更精准的技术支持。希望本文能够对您有所帮助，谢谢阅读！

浅谈淀粉样变性肾病的染色方法体会

摘要 目的 探讨淀粉样变性肾病的染色方法及体会。方法 对15例淀粉样变性肾病患者的活检标本进行常规染色、刚果红、高锰酸钾氧化刚果红染色后以偏振光显微镜观察， 同时予以免疫荧光、免疫组化染色， 使用透视电镜观察，

分析淀粉样变性肾病的染色方法及效果。结果 15例标本可见淀粉样蛋白沉积区HE呈均质、淡染的嗜伊红状， PASM染色呈毛刷样结构， 刚果红染色呈砖红色、偏振光下呈青绿色。免疫组化染色中AA染色均为阴性， κ染色显示14例为阴性， λ染色显示14例为阳性。电镜下观察有纤维状结构且排列紊乱。结论

对淀粉样变性肾病需采用多种染色方法结合效果较好， 使用碱性刚果红染色较为便利使用， 使用免疫组化染色后透视电镜观察有助于发现早期不典型病变。

关键词 淀粉样变性肾病；病理技术；染色方法

肾脏是淀粉样变性常见的受累器官， 约占肾活检的1.25%， 多发生于年龄在50岁以上的老年人群中。淀粉样变性肾病是指淀粉纤维大量沉积于肾脏引起的病变， 随着我国人口老龄化的进程不断加快， 其发病率也呈逐年上升的趋势[1]。而关于淀粉样变性肾病的诊断率一直较低， 确诊率低， 更需要探寻更佳的病理技术进行诊断。本文主要探讨淀粉样变性肾病的染色方法及体会， 旨在提高病理技术， 报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取本院2012年3月～2014年12月收治的淀粉样变性肾病患者的活检标本共15例作为本次实验的实验标本。

1. 2 方法

1. 2. 1 对15例标本进行常规染色及特殊染色。①标本的常规处理。首先使用10%福尔马林进行固定， 并给予梯度酒精脱水， 每个步骤进行30 min， 使用二甲苯透明10 min×2， 给予60℃浸蜡后进行石蜡包埋。切片厚度为5 μm， 并置于45℃水浴展开， 干燥时间为20 min。脱蜡至水。②染色配置分别为：HE、储备液、碱性工作液、碱性刚果红工作液、酸性高锰酸钾溶液、5%草酸溶液。③碱性刚果红染色方法：使用mayer氏苏木素液进行内染色10 min后蒸馏水洗，

淀粉样物质染色液(改良 Stores 刚果红法)

说明书

本产品仅供体外研究使用，不得用于临床诊断

产品简介：

淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质，可存在于不同的组织、器官导致的疾病

称为淀粉样变，淀粉样物质主要是由蛋白质构成，该蛋白大部分排列成反向的β-折叠层结

构，在电子显微镜下淀粉样物质呈原纤维排列，病例材料中为大量细胞外的、不分支的细丝，

大多随机排列。用于识别淀粉样物质的组织学方法有甲紫染色、刚果红染色、偏振光显微镜

观察等，目前研究发现传统的甲紫染色法灵敏度低、特异性差，经典的而且有效的方法是刚

果红染色，1922 年 Bennhold 发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质的鉴别，并应用到

组织切片，后来经过 Highman 改良，染色效果更好。

淀粉样物质染色液(改良 Stores 刚果红法)主要由 Stores 刚果红染色液和苏木素染色液组成，

碱性刚果红染色无分化步骤，但保存时间较短。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断

或其他用途。

产品组成：

产品名称 规格 保存条件 说明书 有效期

淀粉样物质染色液(改良 Stores 刚果红法) 4×50ml RT 避光 1 份 6 个月

试剂(A): Stores 刚果红染色液 50ml RT 避光 1 份 6 个月

试剂(B): Leagene 苏木素染色液 50ml RT 避光 1 份 6 个月

试剂(C): 酸性分化液 50ml RT 1 份 6 个月

试剂(D): Stores 返蓝液 50ml RT 1 份 6 个月

自备材料：

1、10%中性福尔马林固定液

2、蒸馏水

3、系列乙醇

操作步骤(仅供参考)：

1、常规固定，常采用10%的中性福尔马林固定液，常规脱水包埋。

2、切片厚度4μm，常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水。

3、入Stores刚果红染色液浸染25～30min，弃余液。

5、无需分化，自来水冲洗5min。

6、入苏木素染色液，浅染细胞核1～2min或更短时间。