第二章免疫电泳技术（Immunoelectrophoresis technique）一、基本概况（一）原理蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。
每种蛋白质都有它自己的等电点。
等电点的高低取决于蛋白质的性质，在等电点时，蛋白质所带的正负电荷相等。
在pH大于等电点溶液中，羧基解离多，此时蛋白质带负电荷，带负电荷的蛋白质在电场中向正极移动。
反之，在pH小于等电点的溶液中，氨基解离多，此时蛋白质带正电荷，在电场中向负极移动。
这种带电质点在电场中向着带异相电荷的电场移动，称为电泳。
带电质点所以能在电场中移动以及具有一定的移动速度，取决于其本身所带的电荷、电场强度、溶液的pH值、粘度以及电渗等因素。
（二）影响电泳的因素不同带电质点在同一电场中的迁移率（或泳动度）不同，影响迁移率的因素有：①带电质点的性质：即颗粒所带净电荷的量，颗粒大小及形状等。
带电荷越多，分子越小，泳动速度越快；②电场强度：电场强度是单位厘米的电位差。
电场强度越大，带电质点泳动速度越快。
反之亦然；③溶液中pH值：溶液的pH值决定了带电质点的解离程度，也决定了物质所带电荷的多少。
对蛋白质、氨基酸等两性电解质而言，pH值离等电点越远，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越快。
反之则越慢。
蛋白质在酸性溶液中易变性，在偏碱溶液中比较稳定，所以蛋白质电泳大多用pH8.2～8.8的巴比妥或硼酸缓冲液，在这种pH中，血清蛋白一般都带负电荷；④溶液的离子强度：溶液的离子强度越高，颗粒泳动速度越慢，反之越快。
血清电泳一般最适宜离子强度在0.025～0.075之间。
离子强度越低，缓冲液的电流下降，扩散现象严重，使分辨力明显降低。
离子强度太高，将有大量的电流通过琼脂板，由此而产生的热量使板中水分大量蒸发，严重时可使琼脂板断裂而导致电泳中断。
溶液中离子强度与溶液的浓度成正比。
μ=1/2∑CZ2(μ为离子强度，C为克分子浓度，Z为离子的价数)；⑤电渗作用：电渗是在电场中液体对于固体支持物的相对移动。
