利用BIOFOSUN系统鉴定常见曲霉

利用BIOFOSUN系统鉴定常见曲霉章强强;赵颖;李莉;朱均昊【摘要】目的评估BIOFOSUN系统鉴定临床常见曲霉的可靠性.方法采用常规形态学方法及分子生物学方法测定菌株rDNA保守区基因序列鉴定77株临床收集的曲霉,并与BIOFOSUN系统鉴定结果比较.结果 BIOFOSUN系统对构巢曲霉、杂色曲霉、寄生曲霉、棒曲霉、泡盛曲霉、焦曲霉、黄柄曲霉及日本曲霉种的鉴定符合率均为100%,对黄曲霉、烟曲霉、黑曲霉、土曲霉的鉴定符合率分别为92%、85%、75%及70%,对于土曲霉的鉴定符合率相对较差,利用BIOFOSUN系统提供的形态学图谱,观察其具有特征性的菌落外型及色素,可以帮助鉴定.使用BIOFOSUN系统可以将一些形态学特征接近,且又不能通过rDNA基因测序方法进行区分的曲霉作出鉴定.结论 BIOFOSUN系统可以利用计算机进行数据分析,自动化和标准化程度高,大大简化鉴定程序,为曲霉的标准化鉴定提供了一个有效的方法.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2010(025)007【总页数】4页(P515-518)【关键词】BIOFOSUN系统;真菌鉴定;曲霉;分子生物学鉴定;表型鉴定【作者】章强强;赵颖;李莉;朱均昊【作者单位】复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室,上海,200040;复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室,上海,200040;复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室,上海,200040;复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室,上海,200040【正文语种】中文【中图分类】R446.5曲霉感染越来越威胁着危重患者的健康与生命,已成为仅次于酵母菌病的真菌感染性疾病[1],我国曲霉病病死率高达 50%～100%[2]。

随着抗真菌药物的不断涌现及广泛应用,不同种的真菌对不同药物的敏感性也有差别,耐药问题日益显现。

因此,对病原真菌鉴定到种的水平具有临床治疗和流行病学研究的双重意义,解决这一问题的关键在于提高实验室的真菌鉴定水平。

曲霉检测标准
曲霉菌是一种真菌，腐生真菌，常见于霉变谷物、霉变谷物或其他霉变有机物中。

关于曲霉的检测标准，侵袭性曲霉病的临床诊断需符合1项宿主因素、1项临床标准和1项微生物学标准。

其中微生物学标准包括无菌标本微生物分析、无菌标本培养以及组织核酸检测等。

具体标准如下：
1. 无菌标本微生物分析：通过针吸或活检获得标本，进行组织病理学、细胞病理学或直接显微镜检，示菌丝或黑酵母样形态，同时伴随组织损伤证据。

2. 无菌标本培养：从临床或影像学显示的病灶部位（正常无菌部位），通过无菌操作位获取标本，示透明或着色的霉菌。

3. 血：同时存在感染的过程中，血培养示霉菌（注：血培养发现曲霉，多提示污染，此处霉菌不代表曲霉）。

4. 组织核酸诊断：福尔马林固定石蜡包埋组织中发现霉菌时，PCR和DNA 测序检测到真菌DNA。

此外，曲霉菌抗原检测的正常值通常在1到之间。

抗原在气道中的持续存在会诱发局部炎症并形成黏液栓塞，从而导致中心性支气管扩张、嗜酸性粒细胞浸润等。

以上信息仅供参考，如需获取更多详细信息，建议查阅相关文献或咨询专业医生。

一株产酸黑曲霉的分离鉴定及其在盐碱土改良中的应用产酸黑曲霉（Aspergillus niger）是一种常见的真菌，广泛分布于自然界中，生长在温暖潮湿的环境中，如土壤、水体、食物等。

该真菌具有很高的适应性和生物活性，在农业生产中具有重要的应用价值。

本文将介绍一种分离鉴定产酸黑曲霉的方法，并探讨其在盐碱土改良方面的应用。

一、分离鉴定产酸黑曲霉的方法1. 样品采集：选择土壤、水体、食物等环境中的样品作为分离产酸黑曲霉的原料。

在采集样品时应注意避免污染和气候条件。

样品应当尽快送到实验室进行处理。

2. 样品处理：将样品进行湿热处理，即将样品置于70℃的恒温水浴中加热30分钟，杀灭潜在的竞争菌。

3. 分离培养：将处理后的样品取少量接种于含有培养基的培养皿中，使其在恒温条件下孵育。

常用的培养基包括片状琼脂和液体培养基。

4. 筛选菌株：经过一段时间的培养后，将培养皿中生长出的真菌进行筛选。

产酸黑曲霉的特征为菌落呈黑色，有明显的酸性反应，可用酸碘溶液进行初步检测。

5. 培养条件优化：筛选出的产酸黑曲霉菌株进行后续培养、鉴定和分离，同时优化培养条件，如温度、湿度、pH值的控制，以获得最佳的生长效果。

6. 分离纯菌株：通过菌落摘取法分离得到纯菌株，并进行鉴定。

鉴定方法可通过形态学特征、生理生化特性和分子生物学等方法进行。

盐碱土壤是指土壤中盐分和碱分含量较高，pH值偏碱性的土壤。

盐碱土壤的存在会严重制约农作物的生长和发展，降低土壤肥力，影响农业生产。

而产酸黑曲霉具有分解有机物的能力和耐盐碱的特性，因此可以在盐碱土改良中发挥重要作用。

1. 有机物分解：产酸黑曲霉具有分解有机物的能力，可以促进盐碱土壤有机物的分解，提高土壤肥力和透气性。

通过将产酸黑曲霉添加到盐碱土中，分解土壤中的有机物，释放大量的二氧化碳和其他生物活性物质，改善土壤结构，提高土壤肥力。

2. 产酸黑曲霉促进矿质释放：产酸黑曲霉具有分解矿质的能力，能够分解土壤中的矿物质，释放出有益元素。

肺部真菌感染的生物标志物综述目的肺部真菌感染（即侵袭性肺曲霉病和毛曲霉病）在中性粒细胞减少或非中性粒细胞减少的患者中的发生率正在增加，是导致患者死亡的主要原因。

因此早期诊断并治疗至关重要。

生物标志物在此中的作用，是本综述的目的。

最新进展支气管肺泡灌洗的半乳甘露聚糖在诊断IPA中有最好的识别能力。

其基础水平有助于预测预后，其动态变化有助于评估抗真菌治疗的效果。

最近PCR技术的标准化为IPA和毛霉菌病的诊断带来的一些改进。

目前正在研究的几种新的生物标志物和目前现有的比起来并没有更好的价值。

为了提高诊断的准确性，提出了包括半乳甘露聚糖在内的生物标志物进行联合检测。

摘要生物标志物在肺真菌感染的早期诊断，评估预后和治疗反应性中起重要作用，但需要更多的研究来确定最佳的临床使用方案。

简介本篇综述探讨生物标志物以曲霉的呼吸道感染为重点，并介绍最新进展。

真菌感染在没有接受传统免疫抑制治疗人群中的发生率逐渐上升，其诊断困难且具有挑战性，并且预后不良。

影像学仅仅能够提示真菌性肺部感染，而传统的微生物培养作用有限，因此利用其他手段进行临床诊断乃至致病菌的判断至关重要。

生物标志物在诊断中的作用侵袭性肺曲霉病在非中性粒细胞减少的特别是没有明显危险因素的患者中，由于体征和症状的不典型，常常与细菌性肺炎难以鉴别。

早期诊断及治疗对最大限度提高疗效至关重要。

对于免疫功能正常的患者也要保持高度的警惕。

IPA诊断金标准是真菌入侵的组织病理证据。

但在ICU 中，存在肺活检的各种禁忌症（例如凝血功能障碍和/或急性呼吸窘迫综合征），活检的可能性很低。

ICU医生必须鉴别呼吸道中培养出的曲霉菌是定植还是IPA。

此外，影像学检查只能提示是否真菌感染。

因此，目前认为利用非传统培养的方法，例如生物标志物和分子诊断，PCR等能够提高IPA早期特异性诊断的水平。

半乳甘露聚糖半乳甘露聚糖是在真菌侵入组织过程中释放出来的位于细胞壁上的一种多糖，是最常用的IPA生物标志物，可以通过针对半乳甘露聚糖的大鼠单克隆抗体EBA-2双夹心ELISA检测。